電針刺激曲池、足三里穴對自發(fā)性高血壓大鼠血壓和腎功能的影響*

陳志娟 曲 怡 劉 宇 王珊珊 谷麗艷 張立德

（遼寧中醫(yī)藥大學，遼寧 沈陽 110032）

長期的高血壓可以導致心、腦、腎等器官損害，腎臟是高血壓損害的主要靶器官之一。臨床上把高血壓造成的腎臟結構和功能改變稱高血壓腎損害，其發(fā)生和高血壓程度及持續(xù)時間呈正相關［1］。因此，近年來高血壓病的研究方向由單純控制血壓轉變?yōu)樵诮祲和瑫r注重保護腎臟，防止高血壓腎損害的發(fā)生。本實驗以自發(fā)性高血壓大鼠（SHR）為研究對象，觀察電針刺激曲池、足三里穴對SHR血壓和腎功能的影響，從而為針刺曲池、足三里穴降壓護腎提供可靠的理論和實驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 動物 選用雄性24周齡SHR 24只，體質(zhì)量（360±20）g；另選同周齡雄性京都大鼠（Wister-kyoto Rat，WKY）大鼠8只，體質(zhì)量（350±20）g。上海斯萊克實驗動物有限責任公司提供，合格證編號：SCXK（滬）2007000519648。

1.2 試藥與儀器 培哚普利片（天津施維雅藥廠生產(chǎn)），6805-D型電針儀；BP-98A型大鼠智能無創(chuàng)血壓計（北京軟隆生物實驗有限公司）；尿微量白蛋白（mALB）和 β2-微球蛋白（β2-MG）試劑盒（上海藍基生物科技有限公司）；自動生化分析儀（AU5400日本OLYMPUS公司）；光學顯微鏡（BX51日本OLYMPUS公司）。

1.3 干預方法 按照隨機數(shù)字表法把24只SHR分為電針組、模型組、培哚普利組，每組8只；8只WKY大鼠為正常對照組。電針組：捆綁大鼠后參照《實驗針灸學》取雙側曲池、足三里穴，以1寸毫針刺入，接6805-D型電針儀，電針參數(shù)：疏密波，頻率疏波 4 Hz，密波 20 Hz，強度以針柄微顫為度，刺激 20 min，每日1次。培哚普利組：培哚普利片研粉溶入蒸餾水中每日灌胃1次，劑量為 0.4 mg/（kg·d）。 模型組每日捆綁 20 min，不予治療。正常對照組不予任何干預。實驗療程6周。

1.4 標本采集與檢測 （1）血壓檢測。用BP-98A型大鼠智能無創(chuàng)血壓計測量大鼠治療前，治療4 h、2周、4周、6周鼠尾動脈收縮壓。（2）腎組織病理學觀察。大鼠腹腔麻醉后，摘除左腎，腎臟組織常規(guī)固定、脫水、石蠟包埋、切片，HE染色，進行腎臟病理學觀察。 （3）大鼠尿 mALB、β2-MG 和血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）含量的測定。治療6周后，收集24 h尿液用ELISA法按試劑盒說明書操作測尿mALB、尿β2-MG的含量；腹主動脈取血，離心，收集血清，用全自動生化分析儀測血清 Scr、BUN含量。

1.5 統(tǒng)計學處理 應用SPSS16.0統(tǒng)計軟件。數(shù)據(jù)以（±s）表示，各組間比較采用單因素方差分析，繼以LSD檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 各組大鼠尾動脈收縮壓比較 見表1。與正常對照組相比，模型組血壓顯著升高（P＜0.05或0.01）；與模型組比，治療后電針組和培哚普利組血壓明顯降低（P＜0.05），模型組血壓略有升高。說明針刺足三里、曲池穴對SHR有明顯降壓作用。

表1 各組大鼠尾動脈收縮壓比較（mmHg，±s）

表1 各組大鼠尾動脈收縮壓比較（mmHg，±s）

與正常對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與模型組比較，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01；與培哚普利組比較，△P＜0.05。下同。

組 別 n 治療前 治療后4h 治療后2周 治療后4周 治療后6周正常對照組 8模型組 8培哚普利組 8 148.09±9.85 148.09±9.85 130.30±12.70 204.12±14.85** 204.12±14.85** 197.25±21.52**206.62±11.54**193.38±10.73*▲ 170.12±8.10*▲136.40±15.64 133.90±12.42 195.12±21.66** 207.50±16.70*156.50±18.21*▲ 165.75±10.17*▲電針組 8201.88±5.49** 182.50±5.88*▲ 170.88±12.26*▲△169.88±10.83*▲△ 175.12±7.92*▲△

2.2 光鏡觀察HE染色大鼠腎臟形態(tài)結構 模型組腎小球系膜基質(zhì)沉積、血管內(nèi)皮細胞增生，腎小球局灶性硬化，腎小管上皮細胞腫脹、管腔狹窄，腎間質(zhì)可見淋巴細胞、單核細胞等炎細胞呈灶性浸潤。正常對照組和各治療組大鼠腎小球系膜基質(zhì)沉積較少，腎小管上皮細胞輕度腫脹，間質(zhì)輕微纖維結締組織沉著和炎細胞浸潤。

2.3 各組大鼠血清 Scr、BUN和尿mALB、β2-MG含量的比較見表2。與正常對照組比，模型組血清Scr、BUN和尿mALB、β2-MG含量顯著升高（P＜0.05或0.01）；與模型組比，電針組和培哚普利組 Scr、BUN、mALB、β2-MG 含量明顯降低 （P＜0.05）；電針組和培哚普利組尿β2-MG含量相比有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），Scr、BUN、mALB 含量相比無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

表 2 各組大鼠血清 Scr、BUN、尿 mALB、β2-MG 含量比較（±s）

表 2 各組大鼠血清 Scr、BUN、尿 mALB、β2-MG 含量比較（±s）

組 別 n Scr（μmol/L） BUN（mmol/L） β2-MG（ng/mL） mALB（mg/L）正常對照組 8模型組 8培哚普利組 8 35.28±3.02 6.16±0.31 567.50±30.12 20.40±6.50 111.50±4.93** 12.46±0.29** 1941.25±256.51*104.15±9.38**65.13±3.56**▲ 7.29±0.16**▲ 728.75±80.88*▲ 67.07±7.61**▲電針組 867.00±1.93**▲ 7.25±0.16**▲ 740.00±63.47*▲△ 68.15±10.19**▲

3 討 論

腎臟是高血壓損害的主要靶器官之一，臨床上把高血壓造成腎臟結構和功能的改變稱高血壓腎損害。長期的高血壓使腎小球內(nèi)高壓力、高灌注、高濾過“三高”狀態(tài)持續(xù)存在，通過血液動力學因素以及細胞因子作用加重原尿中蛋白濾過，加強尿蛋白對腎小管細胞的毒性作用等［2］，腎功能進一步下降。臨床出現(xiàn)夜尿增多、蛋白尿、氮質(zhì)血癥，最終發(fā)展為終末期腎病。mALB屬于中分子蛋白，正常情況下不能通過腎小球濾過膜，尿中含量極微，腎小球濾過膜電荷選擇屏障受損時排出量增加，mALB是腎小球濾過膜電荷選擇性屏障損傷的標志蛋白。β2-MG是一種低分子量蛋白，幾乎完全通過腎小球濾過膜，99%在腎小管吸收，當高血壓導致腎小管損害時重吸收減少尿中含量增加，β2-MG是腎臟近曲小管損傷的標志性蛋白。Scr、BUN主要通過腎小球濾過，腎臟受損后腎小球排泄廢物功能減退，造成Scr、BUN在體內(nèi)堆積含量升高。Scr、BUN、尿 mALB、β2-MG被認為是早期腎損害的標志物［3-4］。因此監(jiān)測早期腎臟損害指標是延緩腎功能損害的關鍵。

中醫(yī)認為高血壓腎病久病入絡，氣血陰陽俱損，脾虛不運，血行不暢，阻滯經(jīng)絡氣血，腎虛不固，氣化失司，封藏失職精微下泄，故治療以調(diào)補氣血為主。本實驗根據(jù)經(jīng)絡與臟腑在生理病理上相互影響的機制，通其經(jīng)脈，調(diào)其氣血。足三里為胃經(jīng)之合穴，五行屬土，土載萬物，調(diào)補氣血，健脾胃培后天之本升清降濁的主穴。曲池是手陽明經(jīng)合穴，可以攝納氣血，使氣血平衡。現(xiàn)代醫(yī)學證明，針刺足三里、曲池主要通過中樞機制和體液調(diào)節(jié)機制調(diào)控血壓［5-6］。本實驗中曲池和足三里二穴協(xié)同調(diào)節(jié)臟腑氣血功能，平衡陰陽，使癥狀得到改善。

本實驗以SHR為動物模型研究了電針刺激曲池和足三里穴對高血壓病腎損害的影響，結果表明，SHR大鼠血壓和血清Scr、BUN和尿β2-MG、mALB含量明顯高于WKY大鼠，經(jīng)治療6周后，針刺組和培哚普利組大鼠血壓較模型組顯著降低；血清Scr、BUN和尿β2-MG、mALB含量下降；腎臟病理形態(tài)結構上亦有很大改善，說明針刺曲池穴和足三里穴具降壓和保護腎功能作用，其治療效果與培哚普利無明顯的差別，但長期服用培哚普利對肝臟腎臟有損害，而針灸卻是一個可長期使用，副作用較小的整體調(diào)節(jié)療法，同時符合中醫(yī)治未病和既病防變的思想，具有廣闊的臨床應用前景。針灸作為一種外源性刺激，如何通過全身的調(diào)節(jié)發(fā)揮作用，作用的靶點及通路機制仍需進一步研究。

［1］倪小玲，劉建社，汪俊漢，等.高血壓早期腎損害相關因素研究及藥物干預的影響［J］.臨床薈萃，2007，22（3）：189-191.

［2］姜益，王翠萍，王億平.慢性腎炎蛋白尿的中醫(yī)藥治療進展［J］.中西醫(yī)結合研究，2010，2（4）：201-203.

［3］郭皓.尿微量蛋白檢測在原發(fā)性高血壓早期腎損害中的應用［J］.中國心血管雜志，2006，11（3）：220.

［4］袁學琴，盧濤.高血壓病患者尿微量白蛋白表達水平變化及臨床意義［J］.中外醫(yī)學研究，2012，10（5）：26.

［5］萬文俊，馬朝陽，熊修安，等.電針曲池穴治療原發(fā)性高血壓病療效觀察及機制探討［J］.中國針灸，2009，29（5）：349-350.

［6］劉婉寧，金侶位，韓東偉，等.電針“曲池”“足三里”“神門”對自發(fā)性高血壓大鼠血壓及血管緊張素Ⅱ、醛固酮及心鈉素的影響［J］.針刺研究，2009，34（6）：393-397.