淺談中藥定心膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

曲頌揚 張艷 張彥 劉曉蕾

定心膠囊是我們臨床二十余年治療心律失常的經(jīng)驗方。由生地、人參、黃芪、甘草、酸棗仁等八味中藥組成的復(fù)方制劑，具有益心氣助心陽，滋心陰養(yǎng)心血，通血脈復(fù)心脈之效。為更好地控制其內(nèi)在質(zhì)量和臨床療效，保證中藥的質(zhì)量。我們以定心膠囊中主藥人參的有效成分人參皂苷Rg1為指標(biāo)，采用高效液相色譜法測定人參皂苷Rg1的含量，為確定完整的中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。

1 儀器與試藥

LC-10P液相泵LC-10UV紫外檢測器(大連江申分離科學(xué)技術(shù)有限公司生產(chǎn))。色譜柱:Hypersil(大連依利特有限公司提供)5μ，4.6 mm ×200 mm.Spherigel(大連江申分離科學(xué)有限公司提供)5μ，4.6 mm ×200 mm.所用試劑乙腈為色譜純(山東禹王實業(yè)有限公司禹城化工廠)，水為重蒸餾水，其他試劑為分析純。人參皂苷Rg1對照品(中國藥品生物制品檢定所提供，含量測定用，批號0703-9812);

2 方法與結(jié)果

2.2 含量測定

2.2.1 對照品溶液的制備 精密稱取人參皂苷Rg1對照品10.78 mg，置10 ml容量瓶中，加甲醇適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。精密吸取上述對照品溶液2.5 ml，置5 ml容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對照品稀釋溶液(0.539 mg/ml)。

2.2.2 供試品溶液的制備 取本品裝量差異內(nèi)容物，研細(xì)，取2 g，精密稱定，精密加入水飽和正丁醇50 ml，稱定重量，超聲提取30 min，放置過夜，再超聲提取30 min，稱定重量，用水飽和正丁醇補足減失的重量，濾過，棄去初濾液，收集續(xù)濾液。精密吸取續(xù)濾液25 ml，置分液漏斗中，用0.5%的氫氧化鈉水溶液洗滌2次，每次10 ml，合并正丁醇溶液，用正丁醇飽和的水15 ml洗滌1次，棄去水洗液，正丁醇溶液水浴蒸干。殘渣加甲醇使溶解至25 ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，即得。

2.2.3 空白試驗 取處方量藥材，除去人參，按制備工藝制成陰性對照品，再按“含量測定”項下試驗，制備缺人參藥材的陰性對照品溶液。將陰性對照品溶液、供試品溶液及對照品溶液各5μl，分別注入液相色譜儀中，測定結(jié)果表明，陰性液在人參皂苷Rg1色譜峰保留時間處未見相應(yīng)雜質(zhì)峰干擾。

2.2.4 人參皂苷Rg1對照品線性關(guān)系考察 分別精密吸取人參皂苷 Rg1 對照品稀釋溶液(1.078 mg/ml)2μl、4μl、6μl、8μl和10μl，分別注入液相色譜儀中，測定人參皂苷Rg1色譜峰峰面積，以對照品進樣量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，其標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為Y=9.163×10-8X+1.074×10-2 r=0.9997。結(jié)果表明，人參皂苷 Rg1在 2.156μg～10.078μg范圍內(nèi)線性良好。

2.2.5 精密度試驗 取批號090801樣品20粒，研細(xì)，取2 g，精密稱定，按“含量測定”項下供試液制備方法試驗，精密吸取供試液5 μl，共計5份，分別注入液相色譜儀中，測定人參皂苷 Rg1峰面積分別為20254816，20722368，19968224，20929208，20274486，RSD 為 1.90%。

2.2.7 穩(wěn)定性試驗 取批號090801樣品20粒，研細(xì)，取2 g，精密稱定，按“含量測定”項下供試液制備方法試驗，分別于供試液放置0、4、8和12 h時，吸取供試液和人參皂苷Rg1對照品溶液各5μl，分別注入液相色譜儀中，測定峰面積分別為 20254816，20557692，20527968，20977204，RSD 為 1.45%。從試驗結(jié)果可知，供試液放置12 h，人參皂苷Rg1含量基本穩(wěn)定。從上述結(jié)果可知，本測定方法，供試品溶液精密度良好。

2.2.8 重現(xiàn)性試驗 取批號090801樣品20粒，研細(xì)，取2 g，精密稱定，按“含量測定”項下供試液制備方法試驗，測定樣品中人參皂苷 Rg1含量，結(jié)果為:8.86，8.98，9.08，9.02，8.80 mg/粒，平均含量為8.94 mg/粒，RSD為1.29%。從試驗結(jié)果可知，人參皂苷Rg1含量測定重現(xiàn)性試驗符合規(guī)定。

2.2.9 加樣回收率試驗 取批號090801樣品20粒，研細(xì)，取1 g，精密稱定，按“含量測定”項下供試液制備方法試驗，共計5份，分別精密加入人參皂苷Rg1對照品17 mg，按“含量測定”項下試驗，測定加標(biāo)樣品中人參皂苷Rg1含量，計算，得出本含量測定方法人參皂苷Rg1的回收率。其試驗結(jié)果見表2。結(jié)果平均回收率97.37%，RSD 1.9%(n=5)。

2.2.10 樣品中人參皂苷Rg1含量測定 取不同批號的樣品各20粒，研細(xì)，取2 g，精密稱定，按“含量測定”項下方法試驗，測定人參皂苷Rg1含量，計算，結(jié)果分別9.47 mg/粒5.62 mg/粒 8.32 mg/粒 8.46 mg/粒 7.52 mg/粒 5.97 mg/粒9.84 mg/粒 8.60 mg/粒 8.66 mg/粒 6.07 mg/粒。

3 討論

定心膠囊是由炙甘草湯加減化裁而來的。炙甘草湯來源于張仲景的《傷寒論》，“傷寒，脈結(jié)代，心動悸，炙甘草湯主之?！敝饕π橐鏆庾剃?，通陽復(fù)脈。定心膠囊是由生地、人參、黃芪、甘草、酸棗仁、丹參等八味中藥組成。經(jīng)現(xiàn)代藥理學(xué)的研究定心膠囊有很好的抗心律失常的作用［1］。在臨床上有較好的療效，研究其中藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，為老百姓放心使用提供客觀依據(jù)。

本試驗建立了定心膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，人參為定心膠囊的主藥，含有效成分人參皂苷Rg1，且含量較高，作為該制劑中的主要成分，其含量直接影響到治療效果，故本文采用高效液相色譜法，以其作為含量測定的指標(biāo)成分，能夠反映該制劑的質(zhì)量，因此，本品以人參皂苷Rg1的含量作為質(zhì)量控制的指標(biāo)是合理的。該標(biāo)準(zhǔn)的建立對于縮小制劑批間差異、保證制劑質(zhì)量、確保臨床療效具有重要意義，且方法操作簡單、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，專屬性強，可用于控制定心膠囊的質(zhì)量。

［1］張瑞玉，張艷，王艷霞，等.定心膠囊對房顫大鼠心房電重構(gòu)的影響.中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2008，26(5):981-983.