牙膏中三氯生的高效液相色譜法檢測

田富饒，王旭強(qiáng)，孫文閃

（義烏出入境檢驗(yàn)檢疫局綜合技術(shù)服務(wù)中心，浙江 義烏322000）

牙膏中三氯生的高效液相色譜法檢測

田富饒，王旭強(qiáng)，孫文閃

（義烏出入境檢驗(yàn)檢疫局綜合技術(shù)服務(wù)中心，浙江 義烏322000）

利用甲醇超聲提取牙膏樣品中的三氯生，采用高效液相色譜法（紫外檢測器）測定了其含量；探討了最佳提取和色譜檢測條件.結(jié)果表明，該方法對(duì)牙膏中三氯生的檢出限為1.0μg/g，在三氯生濃度10.5～210mg/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)R＝0.999 98；樣品加標(biāo)回收率為99.81%～103.33%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.03%.該方法具有簡便、快速、準(zhǔn)確、靈敏的優(yōu)點(diǎn)，適用于牙膏中三氯生的測定.

牙膏；三氯生；高效液相色譜；檢測

近些年，牙膏行業(yè)發(fā)展非常迅猛，多功能牙膏層出不窮.牙膏種類的發(fā)展及功效性的增強(qiáng)，意味著牙膏中輔助原材料越來越多，各種殺菌劑、抑菌劑等廣泛地應(yīng)用，近日刮起的“三氯生致癌”風(fēng)波，讓廣大消費(fèi)者無所適從.

三氯生（2，4，4－三氯－2′－羥基－二苯醚）是一種廣譜抗菌劑，具有高效殺菌作用，可殺死金黃色葡萄球菌大腸桿菌和白色念球菌，對(duì)化膿性球菌、腸道致病菌和真菌具有消毒作用，同時(shí)對(duì)乙型肝炎病毒也有抑制作用.以往認(rèn)為三氯生對(duì)環(huán)境和人體高度安全[1]，因此得到了廣泛應(yīng)用[2－3].1974年美國FDA提出報(bào)告，建立了有關(guān)殺菌劑的使用法規(guī)，規(guī)定最大允許濃度，對(duì)其使用的安全性進(jìn)行了評(píng)價(jià).歐共體（EEC）和GB7917 87標(biāo)準(zhǔn)均規(guī)定化妝品中三氯生的最大允許質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.3%.

目前三氯生的檢測集中在日化產(chǎn)品、環(huán)境樣品、紡織品等領(lǐng)域，主要采用高效液相色譜法（LC－UV、LC DAD、LC－MS）[4－7]、超高效液相色譜法[8]、GC－MS法[9]、分光光度法[10]等.作者采用高效液相色譜紫外檢測器法（HPLC－VWD）建立了牙膏中三氯生的檢測方法，該方法操作簡單，快速、所用試劑毒性小，測定結(jié)果準(zhǔn)確可靠，能滿足對(duì)進(jìn)出口牙膏中三氯生含量的監(jiān)管需要.

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器和試劑

高效液相色譜儀 （帶紫外檢測器）：Agilent 1200型，美國Agilent公司；超聲波清洗器：D－78224，德國Elma公司；高速離心機(jī)：3－30K，德國Sigma公司；分析天平：AL204，梅特勒－托利多儀器上海有限公司；超純水儀：Milli－Q，美國 Milli－Q公司；0.45μm 樣品濾膜；甲醇：色譜純；三氯生標(biāo)準(zhǔn)物 （99.5%），德國 Dr.Eh renstorfer公司.

1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

精密稱取三氯生標(biāo)準(zhǔn)品0.052 5g，用甲醇溶解后定容至50mL容量瓶中，得到1.05g/L的三氯生標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液.分別精密量取一定體積的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液用甲醇稀釋成濃度依次為10.5、21.0、42.0、84.0、210.0mg L標(biāo)準(zhǔn)工作溶液.

1.3 樣品前處理

準(zhǔn)確稱取樣品1.000g于50.0mL具塞比色管中，加流動(dòng)相至25.0mL，振搖，使試樣與提取溶劑充分混勻，超聲波提取20min，冷卻至室溫，轉(zhuǎn)移至50mL刻度離心管中，以5 000r/min離心10min，上清液經(jīng)0.45μm濾膜過濾，濾液作為試樣溶液備用，同時(shí)作試劑空白.

1.4 色譜條件

色譜柱：Agilent Eclipse XDB－C18（4.6×250mm，5μm），柱溫：30℃，流動(dòng)相：甲醇－水（體積比為90∶10），流速：1.0mL/min，紫外檢測波長280nm，進(jìn)樣量10μL.

2 結(jié)果與討論

2.1 檢測波長的選擇

在190～400nm波長范圍內(nèi)進(jìn)行全波長掃描，三氯生標(biāo)準(zhǔn)液在230、280nm處都有較大的紫外吸收.但考慮到在280nm處其溶劑干擾較小，故選擇280nm作為檢測波長.標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的色譜圖分別見圖1和圖2.

圖1 三氯生標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜圖Fig.1 Chromatogram of triclosan standard solution

圖2 牙膏樣品的色譜圖Fig.2 Chromatogram of a tooth paste sample

2.2 提取溶劑的選擇

先后用流動(dòng)相（甲醇－水）、甲醇、無水乙醇作提取溶劑測定三氯生的紫外最大吸收，結(jié)果顯示，它們均可作為溶劑使用，綜合考慮，使用流動(dòng)相作溶劑可以降低噪聲、提高檢測靈敏度、保護(hù)色譜柱，故選用流動(dòng)相為提取溶劑.

2.3 流動(dòng)相的選擇

在文獻(xiàn)報(bào)道的方法中[4－6]，流動(dòng)相均采用pH值較低的磷酸鹽緩沖液和醋酸溶液，該體系對(duì)色譜柱損害較大，對(duì)此我們進(jìn)行了改進(jìn).采用甲醇－水的流動(dòng)相體系可使三氯生達(dá)到有效分離.在此流動(dòng)相中，甲醇含量增加，保留時(shí)間縮短，峰形更加對(duì)稱，靈敏度高；甲醇含量減少，保留時(shí)間延長，靈敏度降低，峰形出現(xiàn)脫尾故選擇甲醇－水的體積比為90∶10進(jìn)行實(shí)驗(yàn).

2.4 線性方程和方法檢出限

將配制好的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液（10.5～210.0mg/L）按照1.4條件進(jìn)行高效液相色譜分析，以濃度－峰面積計(jì)算其線性方程和相關(guān)系數(shù)，得到線性方程：y＝10.300x＋4.000，相關(guān)系數(shù)R為0.999 98.以3倍信噪比（S/N＝3）計(jì)算其方法檢出限為1.0μg/g.

2.5 精密度和加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)

為檢驗(yàn)本測定方法的準(zhǔn)確性，本實(shí)驗(yàn)對(duì)濃度為84.0mg/L的三氯生標(biāo)準(zhǔn)溶液連續(xù)測定6次，得其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.03%；同時(shí)對(duì)牙膏樣品進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn).由表1可以看出，平均回收率為100.47%～102.94%，說明本方法的測定數(shù)據(jù)準(zhǔn)確、可靠.

2.6 樣品測定

按照所述實(shí)驗(yàn)步驟，對(duì)送檢的牙膏樣品進(jìn)行測定.在測定10余批次的產(chǎn)品中，均檢出含有三氯生，濃度范圍為0.006%～0.036%，雖然都沒有超出標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的化妝品中最大允許濃度質(zhì)量分?jǐn)?shù)（0.3%），但作者在此仍溫馨提醒相關(guān)企業(yè)慎重使用該抗菌劑，并建議有關(guān)執(zhí)法部門加強(qiáng)監(jiān)督管理，以保障廣大消費(fèi)者的身體健康.

結(jié)語：建立了牙膏中三氯生含量的高效液相色譜測定方法，該方法簡便、快速、準(zhǔn)確、靈敏度高，為牙膏產(chǎn)品的質(zhì)量監(jiān)督提供了參考依據(jù).

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Determination of triclosan in tooth paste by highperformance liquid chromatography

TIAN Fu－rao，WANG Xu－qiang，SUN Wen－shan

（Center of Integrated Technical Service，Yiwu Entry－exit Inspection ＆Quarantine Bureau，Yiwu322000，Zhejiang，China）

Triclosan in tooth paste was extracted with methanolvia20min of ultrasound irradiation.Then the content of triclosan was determined by high－performance liquid chromatography（HPLC；ultraviolet detector），and the optimal conditions for extraction and HPLC analysis were discussed.Results show that the present method can be adopted to determine triclosan in tooth paste with a detection limit of 1.0μg/g；and good linear relationship is obtained in triclosan concentration range of 10.5－210mg/L.Corresponding correlation coefficient is 0.999 98，recoveries at addition levels of 31.5－94.5mg/L are 99.81%－103.33%，and relative standard deviation is 0.03%.The method is simple，rapid，accurate and sensitive，and is suitable for the determination of triclosan in tooth paste.

tooth paste；triclosan；HPLC；determination

O 657.7

A

1008－1011（2012）04－0042－03

2012－01－13.

田富饒（1981－），女，中級(jí)工程師，主要從事進(jìn)出口化妝品、食品方面的理化檢測工作，E－mail：tianfr－5430＠126.com.