替米考星溶液的紫外分光光度法測(cè)定

岳永波，李玉霞，魏占勇，劉 毅

（河北遠(yuǎn)征藥業(yè)有限公司河北省獸藥工程技術(shù)研究中心，河北石家莊 050041）

替米考星溶液的紫外分光光度法測(cè)定

岳永波，李玉霞，魏占勇，劉 毅

（河北遠(yuǎn)征藥業(yè)有限公司河北省獸藥工程技術(shù)研究中心，河北石家莊 050041）

建立了紫外分光光度法測(cè)定替米考星溶液含量的方法。以0.01 mol/L的鹽酸為溶劑，測(cè)定波長(zhǎng)為291 nm，通過專屬性試驗(yàn)、準(zhǔn)確度試驗(yàn)、線性關(guān)系考察、精密度試驗(yàn)等方法學(xué)研究，建立了紫外分光光度法測(cè)定替米考星的方法。替米考星測(cè)定的線性方程為A＝0.026 7ρ＋0.005 9，r＝0.999 9，線性范圍為8～48μg/m L。準(zhǔn)確度試驗(yàn)（n＝9）平均回收率為100.6%，RSD值為0.5%。以紫外分光光度法測(cè)定替米考星溶液的含量，方法準(zhǔn)確、簡(jiǎn)單易行，是適合快速測(cè)定替米考星含量的方法。

替米考星；溶液；紫外分光光度法；測(cè)定

替米考星（tilmicosin）為半合成泰樂菌素的大環(huán)內(nèi)酯類獸用專用抗生素，用于治療胸膜肺炎放線桿菌、巴氏桿菌及支原體感染。替米考星溶液為替米考星與適宜的輔料溶解于水而成的制劑?！吨腥A人民共和國(guó)獸藥典》采用HPLC法測(cè)定替米考星原料及其預(yù)混劑、注射液和溶液的含量［1］。目前，有研究人員報(bào)道了應(yīng)用紫外分光光度法測(cè)定替米考星注射液［2－3］，但用紫外分光光度法測(cè)定替米考星溶液未見報(bào)道。筆者應(yīng)用紫外分光光度法對(duì)其含量進(jìn)行了方法學(xué)考察，結(jié)果表明該方法準(zhǔn)確、可靠。

1 儀器與試藥

PE Lambda 20紫外可見分光光度計(jì)，賽多利斯BT224S萬分之一分析天平。

替米考星對(duì)照品，中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所提供，批號(hào)為K0310711，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為91.0%；替米考星原料，湖北龍翔藥業(yè)有限公司提供，批號(hào)為110803，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為88.8%；替米考星溶液，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為25%，批號(hào)為110601，110901，111001，均為自制。

2 方法與結(jié)果

2.1 對(duì)照品儲(chǔ)備液的制備

精密稱取替米考星對(duì)照品既定量，加入0.01 mol/L鹽酸溶液，制成質(zhì)量濃度為0.4 mg/m L的溶液，作為對(duì)照品儲(chǔ)備液。

2.2 測(cè)定波長(zhǎng)的選擇

精密量取5 m L替米考星對(duì)照品儲(chǔ)備液，放入100 m L量瓶中，加入0.01 mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，作為對(duì)照品溶液。以0.01 mol/L鹽酸溶液為空白，按照紫外分光光度法，在波長(zhǎng)200～400 nm處進(jìn)行掃描。結(jié)果得知替米考星對(duì)照品在291 nm處有最大吸收，故選擇291 nm作為測(cè)定波長(zhǎng)。替米考星對(duì)照品紫外吸收譜圖見圖1。

圖1 替米考星對(duì)照品紫外吸收譜圖Fig.1 UV absorption spectra of tilmicosin reference substance

2.3 專屬性試驗(yàn)

替米考星對(duì)照品溶液制備同“2.2”項(xiàng)。精密量取替米考星溶液2 m L，放入500 m L量瓶中，加入0.01 mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻。精密量取稀釋后的溶液2 m L，放入100 m L量瓶中，加入0.01 mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，作為樣品溶液。按處方比例不加替米考星配制干擾，搖勻后，操作同上，作為干擾溶液。按照紫外分光光度法，以0.01 mol/L鹽酸溶液為空白，在波長(zhǎng)200～400 nm處進(jìn)行掃描。結(jié)果得知替米考星對(duì)照品與樣品在200～400 nm處掃描的最大吸收相同，干擾在291 nm處無吸收，結(jié)果見圖2。

圖2 替米考星溶液紫外吸收譜圖Fig.2 UV absorption spectra of tilmicosin solution

2.4 線性關(guān)系考察

分別精密量取對(duì)照品儲(chǔ)備液1，2，3，4，5，6 m L，放入50 m L量瓶中，加0.01 mol/L鹽酸溶液至刻度，搖勻，作為供試品溶液。以0.01 mol/L鹽酸溶液為空白，在波長(zhǎng)291 nm處分別測(cè)定各供試品溶液的吸光度。以樣品吸光度（A）對(duì)質(zhì)量濃度（ρ）進(jìn)行線性回歸，得回歸方程為A＝0.026 7ρ＋0.005 9，r＝0.999 9。結(jié)果表明替米考星在8～48μg/m L線性關(guān)系良好。

2.5 準(zhǔn)確度試驗(yàn)

分別制備替米考星供試品溶液（n＝9）與對(duì)照品溶液，以0.01 mol/L鹽酸溶液為空白，在波長(zhǎng)291 nm處分別測(cè)定吸光度，計(jì)算回收率。結(jié)果測(cè)得替米考星的平均回收率為100.6%，RSD值為0.5%（n＝9），表明以紫外分光光度法測(cè)定替米考星溶液，準(zhǔn)確度良好。結(jié)果見表1。

表1 紫外分光光度法測(cè)定替米考星溶液準(zhǔn)確度試驗(yàn)結(jié)果Tab.1 Accuracy test of tilmicosin solution by UV

2.6 精密度試驗(yàn)

分別精密稱取替米考星原料藥20，25，30 mg各3份，分別放入100 m L量瓶中，按處方比例加入輔料，加入0.01 mol/L鹽酸溶液至刻度，搖勻。精密量取20 m L，放入250 m L量瓶中，加入0.01 mol/L鹽酸溶液至刻度，搖勻，作為供試品溶液。精密稱取對(duì)照品適量，加入0.01 mol/L鹽酸溶液，制成質(zhì)量濃度為20μg/m L的溶液，作為對(duì)照品溶液。以0.01 mol/L鹽酸溶液為空白，在波長(zhǎng)291 nm處分別測(cè)定吸光度，計(jì)算含量。結(jié)果測(cè)得替米考星溶液的平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)為100.1%，RSD值為0.4%（n＝9），表明以紫外分光光度法測(cè)定的含量精密度良好。

2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn)

將經(jīng)過精密度試驗(yàn)后的樣品放置2，4，6，12，24，48 h，分別再測(cè)定，測(cè)得平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)（n＝6）為100.2%，99.9%，100.2%，99.1%，100.1%，100.6%；RSD值為0.4%，0.5%，0.6%，0.4%，0.7%，0.6%。結(jié)果表明：2～48 h測(cè)定時(shí)間內(nèi)的數(shù)據(jù)無顯著差異，樣品測(cè)定方法穩(wěn)定可行。

2.8 樣品測(cè)定

分別精密量取替米考星溶液（批號(hào)為110601，110901，111001）適量，加入0.01 mol/L 的鹽酸溶液，制成質(zhì)量濃度為20μg/m L的溶液，作為樣品溶液。再精密稱取對(duì)照品適量，加入0.01 mol/L鹽酸溶液，制成質(zhì)量濃度為20μg/m L的溶液，作為對(duì)照品溶液。在波長(zhǎng)291 nm處分別測(cè)定吸光度，計(jì)算含量。結(jié)果得到3個(gè)批號(hào)樣品的質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為98.7%，100.8%，99.8%。

2.9 紫外分光光度法與高效液相色譜法的比較試驗(yàn)

紫外分光光度法測(cè)定同“2.8”項(xiàng)。高效液相色譜法同《中華人民共和國(guó)獸藥典》［1］中所述。結(jié)果測(cè)得替米考星溶液（批號(hào)為111001）高效液相色譜法測(cè)得的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為99.8%，紫外分光光度法測(cè)得的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為99.9%，表明二者在測(cè)定同一批樣品時(shí)，得到的結(jié)果相差不大。此外，以紫外分光光度法測(cè)定替米考星溶液的準(zhǔn)確度良好，結(jié)果見表2。

表2 高效液相色譜法與紫外分光光度法測(cè)定結(jié)果比較Tab.2 Result comparison by using HPLC and UV

3 討 論

用紫外分光光度法測(cè)替米考星含量時(shí)，宋艷紅等采用蒸餾水為溶劑［2］，白東英等采用p H值為7.4～7.5的磷酸鹽緩沖液為溶劑［3］。筆者用水和0.01 mol/L鹽酸溶液為溶劑，經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)替米考星的紫外吸收光譜相同。替米考星不溶于水，以水作為溶劑時(shí)，對(duì)照品溶解過程中產(chǎn)生大量氣泡，對(duì)照品細(xì)粉附著在氣泡上，即使超聲處理也易導(dǎo)致溶解不完全。替米考星易溶于酸，其對(duì)照品在0.01 mol/L鹽酸溶液中溶解快速、完全，不產(chǎn)生氣泡，無需超聲處理。故本試驗(yàn)選用0.01 mol/L鹽酸溶液為溶劑。

［1］中華人民共和國(guó)獸藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)獸藥典［M］.北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2010.

［2］宋艷紅，白小紅，李 英.紫外分光光度法測(cè)定替米考星的含量［J］.山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2005，36（1）：71－73.

［3］白東英，李引乾，黃勇旗，等.替米考星長(zhǎng)效注射液的質(zhì)量控制［J］.西北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，17（3）：64－66.

UV spectrophotometry determination of tilmicosin solution

YUE Yong－bo，LI Yu－xia，WEI Zhan－yong，LIU Yi

（Hebei Engineering Research Center of Veterinary Drugs，Hebei Yuanzheng Pharmaceutical Company Limited，Shijiazhuang Hebei 050041，China）

A method for the determination of tilmicosin solution by ultraviolet spectrophotometry is established，with 0.01 mol/L HCl as solvent，detecting wave length at 291 nm，and through investigating the specificity accuracy，linearity and precision.The linear equation isA＝0.026 7ρ＋0.005 9，r＝0.999 9，in the range of 8～48μg/m L.The average recovery is 100.6%and RSD is 0.5% （n＝9）.The UV method is an accurate，simple，and rapid way for determination.

tilmicosin；solution；UV spectrophotometry；determination

O657

A

1008－1534（2012）04－206－02

2012－05－08；

2012－05－22

張士瑩

岳永波（1971－），男，河北欒城人，高級(jí)工程師，主要從事獸藥研發(fā)方面的工作。