HPLC法測(cè)定小兒氨酚黃那敏顆粒中馬來酸氯苯那敏

盧 俊，黃余國(guó)，溫彩蓮

（1．廣西工業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院石油與化學(xué)工程系，廣西 南寧530001；2．廣西大力神制藥股份有限公司，廣西 欽州535400；3．廣西南寧百會(huì)藥業(yè)集團(tuán)有限公司，廣西 南寧530003）

HPLC法測(cè)定小兒氨酚黃那敏顆粒中馬來酸氯苯那敏

盧 俊1，黃余國(guó)2，溫彩蓮3

（1．廣西工業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院石油與化學(xué)工程系，廣西 南寧530001；2．廣西大力神制藥股份有限公司，廣西 欽州535400；3．廣西南寧百會(huì)藥業(yè)集團(tuán)有限公司，廣西 南寧530003）

HPLC法應(yīng)用于小兒氨酚黃那敏顆粒中馬來酸氯苯那敏含量及含量均勻度的測(cè)定，采用Kromasil C18柱（250 mm×4．6 mm，5μm），以甲醇-0．05mol·L-1磷酸二氫鉀溶液-三乙胺（140∶860∶0．25）（用磷酸調(diào)節(jié)pH值至2．3）為流動(dòng)相，流速為1 mL·min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)為220nm，以外標(biāo)法測(cè)定含量。結(jié)果顯示，馬來酸氯苯那敏在0．04064～0．4064 μg的范圍內(nèi)峰面積與測(cè)定濃度呈良好的線性關(guān)系，r＝0．9999，平均回收率為96．7%，RSD為1．2%（n＝7）。該法專屬性好，簡(jiǎn)便，快速，準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好，完全適合于小兒氨酚黃那敏顆粒的質(zhì)量控制。

HPLC；小兒氨酚黃那敏顆粒；馬來酸氯苯那敏；測(cè)定；含量均勻度

小兒氨酚黃那敏顆粒（曾用名：小兒速效感冒顆粒、小兒速效感冒靈）是由對(duì)乙酰氨基酚、人工牛黃等組成的復(fù)方制劑，現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)中只有對(duì)乙酰氨基酚的含量測(cè)定，無馬來酸氯苯那敏的含量測(cè)定及其含量均勻度測(cè)定等項(xiàng)目，這對(duì)藥品內(nèi)在質(zhì)量的全面監(jiān)控是一個(gè)欠缺。為了保證藥品的質(zhì)量，控制馬來酸氯苯那敏的含量差異程度，根據(jù)現(xiàn) 行 藥 品 質(zhì) 量 標(biāo) 準(zhǔn)WS-10001-（HD-0214）-2002及參考有關(guān)文獻(xiàn)，本文在大量試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，以HPLC法對(duì)小兒氨酚黃那敏顆粒中含量測(cè)定方法進(jìn)行了研究，并進(jìn)行了含量均勻度的檢驗(yàn)。

1 材料及儀器

1．1 儀器

高效液相色譜儀。

1．2 材料

馬來酸氯苯那敏，小兒氨酚黃那敏顆粒，甲醇（色譜純，），水為重蒸餾水，磷酸二氫鉀（分析純），三乙胺（分析純），磷酸（分析純）。

2 方法與結(jié)果

2．1 色譜條件

色譜柱選用“Kromasil”C18柱（250mm×4．6 mm，5 μm）；流動(dòng)相為甲醇-0．05 mol·L-1磷酸二氫鉀溶液-三乙胺（140∶860∶0．25）（用磷酸調(diào)節(jié)pH值至2．3）［1～4］；流速為1 mL·min-1；檢測(cè)波長(zhǎng)為220 nm［5］。在此波長(zhǎng)下主成分峰的出峰位置無雜峰干擾；進(jìn)樣量10 mL。在該色譜條件下，馬來酸氯苯那敏峰峰形好，與前一峰的分離度為1．607，與后一峰的分離度為3．016，理論板數(shù)為18707。見圖1。

圖1 供試品色譜圖

根據(jù)馬來酸氯苯那敏易溶于水的性質(zhì)，采用水作為溶劑，而且溶劑水在該色譜條件下無干擾。見圖2。

圖2 溶劑（水）色譜圖

2．2專屬性試驗(yàn)（空白試驗(yàn)）

按處方制成不含馬來酸氯苯那敏的樣品，按擬定方法測(cè)定，結(jié)果表明在馬來酸氯苯那敏出峰處無吸收峰出現(xiàn)。結(jié)果見圖3。

圖3 專屬性試驗(yàn)色譜圖

2．3 線性關(guān)系與范圍考察

稱取馬來酸氯苯那敏對(duì)照品10．16 mg，置100 mL量瓶中加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，得含對(duì)照品0．1016 mg·mL-1的溶液。 精密量取0．2、0．4、0．6、0．8、1．0、1．5、2.0mL，分別置5 mL量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，分別進(jìn)樣10 μL測(cè)定，記錄峰面積。以馬來酸氯苯那敏的峰面積Y對(duì)進(jìn)樣量X（μg）進(jìn)行線性回歸，結(jié)果見表1。得回歸方程為：Y＝1．7871×106X＋907．96，r＝0．9999（n＝7）。

表1 線性關(guān)系數(shù)據(jù)

結(jié)果表明，進(jìn)樣量在0．04064～0．4064 μg范圍內(nèi)峰面積與測(cè)定濃度呈良好的線性關(guān)系。

2．4 重復(fù)性試驗(yàn)

取同一批號(hào)樣品（批號(hào)：080906）6份，按含量測(cè)定項(xiàng)下方法制備供試品溶液，在擬定的色譜條件下進(jìn)樣，測(cè)定馬來酸氯苯那敏的含量，結(jié)果顯示本方法重復(fù)性良好，結(jié)果見表2。

表2 供試品重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果

2．5 精密度試驗(yàn)

取對(duì)照品溶液（濃度為0．01016 mg·mL-1）10 μL，連續(xù)進(jìn)樣5次，測(cè)定馬來酸氯苯那敏的峰面積，結(jié)果顯示本方法精密度良好，結(jié)果見表3。

表3 對(duì)照液精密度試驗(yàn)結(jié)果

2．6 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取對(duì)照品溶液（0．01016 mg·ml-1），于0，2，4，8，12 h分別進(jìn)樣，依法測(cè)定馬來酸氯苯那敏峰面積值，結(jié)果顯示，溶液至少在12 h內(nèi)是穩(wěn)定的。結(jié)果見表4。

表4 對(duì)照液穩(wěn)定性試驗(yàn)

2．7 加樣回收試驗(yàn)

精密稱取已知含量的同一批供試品 （批號(hào)：080907，含量為59．9%，平均包重6．2236g）9份，置50 mL量瓶中，分別精密加入0．1016 mg·mL-1的馬來酸氯苯那敏對(duì)照液4．0、5．0、6．0 mL，水浴上蒸干，分別加水適量，超聲使馬來酸氯苯那敏溶解，取出，加水稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，進(jìn)樣10 μL，每一份測(cè)定3次，計(jì)算加樣回收率。測(cè)定結(jié)果令人滿意。結(jié)果見表5。

2．8 含量測(cè)定限度的確定

取6批樣品，按含量測(cè)定項(xiàng)下的馬來酸氯苯那敏檢測(cè)方法進(jìn)行試驗(yàn)，測(cè)定的結(jié)果見表6。

6批樣品的檢測(cè)結(jié)果顯示馬來酸氯苯那敏的含量在90．1%～96．6%之間，考慮馬來酸氯苯那敏的含量有下降的趨勢(shì)，及其工藝、檢測(cè)誤差等變動(dòng)因素，建議將含量限度定為80．0%～120．0%。

表5 回收率試驗(yàn)結(jié)果

2．9 含量均勻度

取樣品1袋，置50 mL量瓶中，按擬定的含量測(cè)定項(xiàng)下的方法測(cè)定含量，考察該公司生產(chǎn)的6批市售小兒氨酚黃那敏顆粒中馬來酸氯苯那敏的含量均勻度，結(jié)果見表7。

表6 供試品中馬來酸氯苯那敏含量測(cè)定結(jié)果

表7 小兒氨酚黃那敏顆粒中馬來酸氯苯那敏的含量均勻度

由表7可知，6批小兒氨酚黃那敏顆粒中馬來酸氯苯那敏的A＋1．80S值在9．71～12．6之間，考慮到工藝，我們建議將含量均勻度的限度定為±20%。

3 結(jié)論

小兒氨酚黃那敏顆粒是由對(duì)乙酰氨基酚、馬來酸氯苯那敏等組成的復(fù)方制劑，是臨床常用的小兒感冒藥，現(xiàn)行的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)只建立了用可見紫外分光光度法測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚的含量，而對(duì)馬來酸氯苯那敏的含量并沒有進(jìn)行控制?？紤]到小兒臨床用藥的安全性問題，本文采用HPLC法，色譜條件為：C18柱 （250 mm×4．6 mm，5μm）； 以甲醇-0．05 mol·L-1磷酸二氫鉀溶液-三乙胺 （140∶860∶0．25）（用磷酸調(diào)節(jié)pH值至2．3）為流動(dòng)相；流速為1 mL·min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)為220 nm，以外標(biāo)法測(cè)定小兒氨酚黃那敏中馬來酸氯苯那敏的含量，既有利于工廠在生產(chǎn)投料方面的準(zhǔn)確性控制，又有利于保證產(chǎn)品的質(zhì)量。實(shí)驗(yàn)證明該方法靈敏、專屬性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)便快速、結(jié)果準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好?？赏耆珣?yīng)用于小兒氨酚黃那敏顆粒生產(chǎn)中的質(zhì)量控制。

［1］ 張麗蛾．小兒氨酚黃那敏顆粒中馬來酸氯苯那敏含量及含量均勻度研究［J］．兒科藥學(xué)雜志，2007，13：18-20．

［2］ 王夏炎，毛威．高效液相色譜法測(cè)定小兒氨酚黃那敏顆粒中馬來酸氯苯那敏含量［J］．醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2005，24：330-332．

［3］ 林凌．高效液相色譜法測(cè)定小兒氨酚黃那敏顆粒中馬來酸氯苯那敏含量［J］．海峽藥學(xué)，2006，（2）：71-72．

［4］ 萬民，郭東妹，楊艷，等．HPLC法測(cè)定小兒氨酚黃那敏顆粒中馬來酸氯苯那敏及對(duì)乙酰氨基酚的含量［J］．江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2005，（2）：60．

［5］ 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（2005年版二部）［M］．北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005．

Determination of Chlorphenamine Maleate in Xiao Er An Fen Huang Na Min Granule by HPLC

LU Jun1，HUANG Yu-gou2，WEN Cai-lian3
（1．Department of Petrolchemical Engineerling，Guangxi Vocational＆Technical Institute of Industry，Nanning 530001，China；2．Guangxi DaLiSheng Pharmaceutical Co．，Ltd．，Qinzhou 535400，China；3．Best＆Wide Pharmaceutical Co．，Ltd．，Nanning 530003，China）

An HPLC method for determination of the content and content uniformity of chlorphenamine maleate in Xiao Er An Fen Huang Na Min granule was established．The chromatographic colunul was Kromasil C18（250 mm×4．6 mm，5μm），The mobile phase was made up of Methanol-0．05mol／L anhydrous di-potassium hydrogen phosphate-triethylamine（140∶860∶0．25） （adiust pH to 2．3 using phosphoric acid）．The UV detection wavelength was at 220 nm and the flow rate was 1．0mL／min．External standard method was used to count the peak area，and the results showed that the calibration curves were linear in the range of 0．04064～0．4064μg for chlorphenamine maleate，r＝0．9999．The average recovery was 96．7%with RSD of 1．2%（n＝7）．

HPLC；Xiao Er An Fen Huang Na Min granule；chlorphenamine maleate；determination；content uniformity．

R 969．1 O 657.3

A

1671-9905（2011）05-0034-04

盧?。?973-），男，廣西合浦人，廣西工業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院石油與化學(xué)工程系教師，工程師、實(shí)驗(yàn)師，主要從事天然產(chǎn)物提取及化工方面的教學(xué)與實(shí)踐工作，通訊地址：南寧市秀靈路37號(hào)廣西工業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院石油與化學(xué)工程系，郵編：530001，E-mail：lujun153＠163．com

2011-02-22