中國漢族人群GSTM1、GSTT1基因多態(tài)性與結(jié)直腸癌遺傳易感性的Meta分析

閆書山，王 平，徐棟花，孫倍成※

(1.南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院肝移植中心，南京210000;2.南京江北人民醫(yī)院感染科，南京210048)

谷胱甘肽 S-轉(zhuǎn)移酶(glutathione S-transferase，GST)是人體內(nèi)重要的Ⅱ相代謝酶系，能夠通過結(jié)合各種親電子的化合物(包括環(huán)境致癌物質(zhì)及其中間代謝產(chǎn)物)，使其水溶性增加并排出體外，從而起到解毒作用［1，2］。已知人類 GST 有 α(GSTA)、 μ(GSTM)、 θ(GSTT)、π(GSTP)和 σ(GSTS)五種［3，4］，目前研究較多的是 GSTM1、GSTT1基因。GSTM1、GSTT1具有基因多態(tài)性，其中 GSTM1、GSTT1基因缺失的純合子，缺乏GST的活性，導(dǎo)致機(jī)體對(duì)外來毒物的解毒能力降低。近年來，越來越多的研究發(fā)現(xiàn)，GSTM1、GSTT1 基因多態(tài)性與腫瘤的發(fā)生關(guān)系密切［5］，但與結(jié)直腸癌發(fā)生的關(guān)聯(lián)，報(bào)道并不一致。因此，該研究應(yīng)用Meta分析方法對(duì)GSTM1、GSTT1基因多態(tài)性與結(jié)直腸癌遺傳易感性的相關(guān)研究進(jìn)行綜合再分析，以探討中國漢族人群中GSTM1及GSTT1的基因多態(tài)性與結(jié)直腸癌遺傳易感性的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 資料來源 通過計(jì)算機(jī)文獻(xiàn)檢索(PubMed、Em-Base、中國學(xué)術(shù)期刊全文數(shù)據(jù)庫、萬方全文數(shù)據(jù)庫)和文獻(xiàn)追溯等途徑，收集1994年1月至2011年5月國內(nèi)外公開發(fā)表的關(guān)于中國漢族人種GST基因多態(tài)性與結(jié)直腸癌易患性的病例對(duì)照研究。采用主題詞、關(guān)鍵詞(包括 ccolorectal carcinoma，colorectal cancer，CRC，glutathione S-transferase，GST，GSTT，GSTM，GSTT1，GSTM1，polymorphism，polymorphisms和 genetic polymorphism)及著者相結(jié)合的方法進(jìn)行檢索，檢索語種包括中文和英文。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn) ①1994年1月至2011年5月國內(nèi)外公開發(fā)表的谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶基因多態(tài)與結(jié)直腸癌易感性的病例對(duì)照研究;②各文獻(xiàn)提供病例組和對(duì)照組的觀察人數(shù);③暴露的定義相同;④各文獻(xiàn)直接或間接地提供綜合的統(tǒng)計(jì)指標(biāo)比值比(OR);⑤各文獻(xiàn)研究假設(shè)和方法相似。

1.3 排除標(biāo)準(zhǔn) 對(duì)每篇文獻(xiàn)進(jìn)行質(zhì)量評(píng)估，剔除重復(fù)報(bào)告、數(shù)據(jù)不充分、報(bào)道信息太少及無法利用的文獻(xiàn)。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析 用Meta分析進(jìn)行合并OR值，得出合并OR值及其95%的可信區(qū)間(P＜0.05時(shí)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義)［6］。采用基于χ2檢驗(yàn)的Q檢驗(yàn)法分析各研究組間的異質(zhì)性［7］，當(dāng)P＞0.05時(shí)即認(rèn)為異質(zhì)性不明顯，選用固定效應(yīng)模型［8］;P ＜0.05時(shí)，各研究間存在異質(zhì)性，選用隨機(jī)效應(yīng)模型［9］;發(fā)表偏倚用funnel plot法進(jìn)行分析，當(dāng)funnel倒漏斗圖左右對(duì)稱時(shí)代表無發(fā)表偏倚;并且用Egger's回歸法［10］進(jìn)一步對(duì)funnel倒漏斗圖的對(duì)稱性進(jìn)行定量評(píng)價(jià)，P＞0.05時(shí)不存在發(fā)表偏倚。以上統(tǒng)計(jì)分析主要在STATA10.1上完成。

2 結(jié)果

2.1 研究資料基本情況 依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)共選入文獻(xiàn)13篇，其中英文2篇，中文11篇;累計(jì)病例1480例，對(duì)照3057例。暴露定義分別為GSTM1空白基因型、GSTT1空白基因型、GSTM1和GSTT1同時(shí)存在空白基因型(表1)。

2.2 Meta分析結(jié)果 根據(jù)異質(zhì)性檢驗(yàn)結(jié)果，GSTM1和GSTT1分別按隨機(jī)效應(yīng)模型和固定效應(yīng)模型計(jì)算合并的OR值，GSTM1-GSTT1研究按固定效應(yīng)模型計(jì)算合并的OR值和95%的可信限。合并的結(jié)果顯示(表2及圖1～3):GSTM1的空白基因型與結(jié)直腸癌的發(fā)生有關(guān)(ORGSTM1=1.38，95%CI 1.09 ～1.74，POR=0.007);GSTT1的空白基因型與結(jié)直腸癌的發(fā)生不存在關(guān)聯(lián)關(guān)系(ORGSTT1=1.15，95%CI 1.00 ～1.32，POR=0.058);GSTT1和GSTM1的共同空白基因型與結(jié)直腸癌的發(fā)生存在關(guān)聯(lián)，合并的OR值為1.40(95%CI 1.14 ～1.74;POR=0.002)。

表1 本Meta分析納入研究的基本特征及提取的相關(guān)數(shù)據(jù)

表2 Meta分析結(jié)果匯總

圖1 GSTM1多態(tài)性與CRC易感性關(guān)聯(lián)關(guān)系Meta分析的森林圖(隨機(jī)效應(yīng)模型)

圖2 GSTT1多態(tài)性與CRC易感性關(guān)聯(lián)關(guān)系Meta分析的森林圖(固定效應(yīng)模型)

圖3 GSTM1/GSTT1多態(tài)性與CRC易感性關(guān)聯(lián)關(guān)系Meta分析的森林圖(固定效應(yīng)模型)

2.3 發(fā)表偏倚分析 Funnel plot法進(jìn)行分析所采納研究有無發(fā)表偏倚，如圖4及圖5所示，funnel倒漏斗圖左右對(duì)稱，代表不存在發(fā)表偏倚。采用Egger's Regression Test法進(jìn)一步對(duì)funnel倒漏斗圖的對(duì)稱性進(jìn)行定量評(píng)價(jià)，P＞0.05，所以本研究所納入的研究均不存在發(fā)表偏倚(表2)。

圖4 檢測GSTM1多態(tài)性與CRC易感性關(guān)聯(lián)關(guān)系研究的發(fā)表偏倚的倒漏斗圖分析

圖5 檢測GSTT1多態(tài)性與CRC易感性關(guān)聯(lián)關(guān)系研究的發(fā)表偏倚的倒漏斗圖分析

3 討論

結(jié)直腸癌的發(fā)生既與環(huán)境因素相關(guān)，又具有遺傳易感性。多環(huán)芳烴類、雜環(huán)芳香胺類等致癌物在肝內(nèi)經(jīng)細(xì)胞色素P4501A2氧化作用后，形成前致癌物，隨血液循環(huán)進(jìn)入腸黏膜，在腸上皮細(xì)胞內(nèi)經(jīng)N-乙?；D(zhuǎn)移酶O的乙酰化作用活化。GST是谷胱甘肽結(jié)合反應(yīng)的關(guān)鍵酶，可通過催化谷胱甘肽結(jié)合反應(yīng)的起始步驟，使上述致癌物質(zhì)轉(zhuǎn)化為無毒性、高水溶性的代謝產(chǎn)物，促進(jìn)其排出體外，減少致?。?4］。GST基因位點(diǎn)上不同等位基因的個(gè)體，對(duì)結(jié)直腸癌的易感性不同，在GST家族成員中，GSTM1、GSTT1基因的多態(tài)性與結(jié)直腸癌的發(fā)生關(guān)系密切。

為明確GSTM1、GSTT1基因多態(tài)性與結(jié)直腸癌易感性的關(guān)聯(lián)情況，已有多個(gè)研究中心利用Meta分析方法對(duì)這一問題進(jìn)行探討［25-28］。GST(GSTM1、GSTT1)的基因多態(tài)性與結(jié)直腸癌易感性在歐洲人群中存在關(guān)聯(lián)關(guān)系。Di Pietro 等［1］發(fā)現(xiàn)，GSTM1、GSTT1基因缺失型不僅與結(jié)直腸癌的發(fā)病危險(xiǎn)性有關(guān)，而且與吸煙、肉類攝入等環(huán)境因素有交互作用。但在亞洲人種中，這種關(guān)聯(lián)關(guān)系并不明顯。由于上述Meta分析只納入了少量中文研究，因此GSTM1、GSTT1基因多態(tài)性與結(jié)直腸癌的關(guān)系是否在中國漢族人群中存在關(guān)聯(lián)關(guān)系仍存在明顯爭議，值得進(jìn)一步研究。

文獻(xiàn)綜述是一種描述性方法，是評(píng)價(jià)既往同類項(xiàng)目的多項(xiàng)研究結(jié)果的良好方法之一，但是主觀評(píng)價(jià)性太強(qiáng)，特別是對(duì)研究結(jié)果不一甚至相反的結(jié)果更缺少客觀評(píng)價(jià)，因而不同的綜述者可能會(huì)得出不同的結(jié)論。另外，單一研究可能由于研究對(duì)象的代表性不強(qiáng)或樣本量的局限，導(dǎo)致統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)效能較低而不能作出明確的結(jié)論。Meta分析是一種觀察性研究，它是對(duì)以往研究結(jié)果進(jìn)行系統(tǒng)合并以得到所研究問題綜合性結(jié)論的定量分析方法，綜合評(píng)價(jià)研究結(jié)果，通過系統(tǒng)合并，增大總樣本量，從而提高統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)的效能，評(píng)價(jià)各研究結(jié)果不一致或矛盾，定量評(píng)估效應(yīng)大?。?9］。由于既往研究的樣本量小，GSTM1或GSTT1基因多態(tài)性單獨(dú)作用的效應(yīng)較弱等原因，研究效能太低，現(xiàn)有許多相關(guān)Meta分析未能得出GSTM1或GSTT1基因缺失型與結(jié)直腸癌的發(fā)生關(guān)系有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的結(jié)果。本Meta分析結(jié)果顯示，GSTM1的空白基因型與結(jié)直腸癌易感性相關(guān)，ORGSTM1=1.38，95%CI 1.09～1.74(POR=0.007);而GSTT1的空白基因型與結(jié)直腸癌的發(fā)生沒有關(guān)聯(lián)(ORGSTT1=1.15，95%CI 1.00～1.32，POR=0.058)，有待于累積更多的臨床資料進(jìn)一步深入探討;除此之外，GSTT1和GSTM1的共同空白基因型與結(jié)直腸癌也存在關(guān)聯(lián)關(guān)系，合并的OR值為1.40，95%CI 1.14～1.74(POR=0.002)。該結(jié)果提示，在中國漢族人群中，攜帶GSTM1或GSTT1的空白基因的個(gè)體較兩種基因都存在的個(gè)體患結(jié)直腸癌的危險(xiǎn)性有所增加，且GSTM1和GSTT1空白基因型在影響結(jié)直腸癌易感性上可能存在協(xié)同作用，為結(jié)直腸癌的預(yù)防、診斷和治療提供了重要的理論基礎(chǔ)。

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