外陰洗劑薄層色譜鑒別方法

李義梅，王 明

(1.延安市藥品檢驗所，陜西 延安 716000;2.吳起縣人民醫(yī)院，陜西 吳起 717600)

外陰洗劑是一種醫(yī)院制劑，由黃連、蛇床子、苦參、黃柏、生百部、枯礬六味藥組成，具有清熱燥濕，除帶止癢的功效。用于各種原因引起的外陰炎、陰道炎、宮頸炎及外陰瘙癢等癥。為有效地控制其質(zhì)量，保證其臨床療效的穩(wěn)定，本實驗采用薄層色譜法(TLC)對制劑中蛇床子、黃連、黃柏、苦參四味藥進行了鑒別，現(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

紫外光燈(365 nm);黃連對照藥材、黃柏對照藥材，蛇床子素對照品、鹽酸小檗堿對照品、苦參堿對照品(中國藥品生物制品檢定所);外陰洗劑(延安市中醫(yī)醫(yī)院制劑室，批號為091013、091103、091225);陰性樣品均依據(jù)處方規(guī)定除去所缺藥材制得(延安市中醫(yī)醫(yī)院制劑室);硅膠G(青島海洋化工廠);其他化學試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 蛇床子的TLC鑒別

取本品50 ml，加乙醚振搖提取2次，每次30 ml，合并乙醚液，揮干，殘渣加1 ml使溶解，作為供試品溶液。另取蛇床子素對照品加乙醇制成每1 ml含1 mg的溶液，作為對照品溶液。再取缺蛇床子的陰性對照樣品同法制成陰性對照溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄ⅥB)試驗[1]，吸取供試品溶液和陰性對照溶液各10 ul，對照品溶液2 ul，分別點于同一硅膠G板上，以苯 －乙酸乙酯 －(30∶1)[2]為展開劑，展開，取出，晾干。置紫外光燈(365 nm)下檢視。供試品溶液色譜中，在與對照品溶液色譜相應的位置上顯相同顏色的熒光斑點，陰性對照品溶液在相應的位置上無此熒光斑點。(見圖1)

圖1

2.2 黃連、黃柏的TLC鑒別

取本品10 ml，蒸干，殘渣加甲醇5 ml使溶解，濾過，濾液濃縮至1 ml，作為供試品溶液。另取黃連對照藥材0.1 g、黃柏對照藥材0.2 g加甲醇10 ml超聲處理20 min，濾過，濾液作為對照藥材溶液。再取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每1 ml含1 mg的溶液，作為對照品溶液。再取缺黃連、黃柏的陰性對照樣品同法制成陰性對照溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄ⅥB)試驗，吸取上述5種溶液各5 ul，分別點于同一硅膠G板上，以苯－乙酸乙酯－異丙醇－甲醇 － 濃氨試液(12∶6∶3∶3∶1)[3]為展開劑，置氨蒸氣預飽和的展開缸內(nèi)，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液色譜及對照品色譜相應位置上，顯相同顏色的熒光斑點，陰性對照溶液在相應的位置上無此熒光斑點。(見圖2)

圖2

2.3 苦參的TLC鑒別

取本品10 ml，加濃氨試液調(diào)PH值至10，振搖10 min，用氯仿提取2次，每次20 ml，合并氯仿液，蒸干，殘渣加氯仿1ml使溶解，作為供試品溶液。另取苦參堿對照品，加氯仿制成每1 ml含1 mg的溶液，作為對照品溶液。再取缺苦參的陰性對照樣品同法制成陰性對照溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄ⅥB)試驗，吸取供試品溶液和陰性對照溶液各10 ul，對照品溶液5 ul，分別點于同一硅膠G板上，以氯仿－甲醇－濃氨試液(5∶1∶0.1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液。供試品溶液色譜中，在與對照品色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點，陰性對照溶液在相應的位置上不顯示斑點。(見圖3)

圖3

3 討論

以對照藥材和對照品作為陽性對照，以缺主藥的樣品作為陰性對照。結(jié)果表明，方法簡便，斑點清晰，重現(xiàn)性好，專屬性強，陰性試驗無干擾，具有可操作性，可定性控制該制劑的質(zhì)量。

筆者曾采用取本品20 ml蒸干，殘渣加乙醇10 ml，置水浴上充分攪拌，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇2 ml使溶解，作為供試品溶液。結(jié)果薄層色譜分離不好，主斑點不明顯。改用本實驗方法獲得了滿意的效果。

處方中黃連、黃柏都含鹽酸小檗堿，所以分別用黃連、黃柏對照藥材作為陽性對照把黃連、黃柏用同一薄層方法鑒別。展開時應注意溫度控制在20～30℃范圍內(nèi)，溫度太高或太低，均使整個色譜的Rf值偏高;相對濕度控制在47%以下為好[3]。氨蒸氣預飽和時最好用新鮮濃氨試液配制展開劑預飽和層析缸，足夠的氨蒸氣是分離質(zhì)量的關(guān)鍵因素之一。

[1]國家藥典委員會中華人民共和國藥典2005年版一部，北京:化學工業(yè)出版社，2005;141，附錄VIB.

[2]國家藥品監(jiān)督管理局.國家中成藥標準匯編(皮膚科分冊).2002:342.

[3]衛(wèi)生部藥典委員會.中華人民共和國中藥薄層色譜彩色圖集.廣東科技出版社，1993:55，149.