黃柏炮制品的考證、化學(xué)成分和藥理作用研究進(jìn)展

代 琪，胡 宇，雷 蕾，羅 霄*

(1.成都市食品藥品檢驗(yàn)研究院 國家藥監(jiān)局中藥材質(zhì)量監(jiān)測評(píng)價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，四川 成都610045；2.成都中醫(yī)藥大學(xué) 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，四川 成都 611137)

黃柏，習(xí)稱川黃柏，植物來源為蕓香科植物黃皮樹的干燥樹皮。黃柏味苦性寒，具有清熱燥濕、瀉火解毒及除骨蒸之功用。經(jīng)辨證論治可用于濕熱諸證、骨蒸勞熱、盜汗遺精、瘡瘍腫痛等證的治療[1]。以《中國藥典》2015年版一部中黃柏三種炮制品(黃柏絲、鹽黃柏、黃柏炭)為標(biāo)準(zhǔn)，在不同炮制方法影響下，黃柏所含化學(xué)成分及含量、藥理作用也會(huì)產(chǎn)生變化和差異。本文通過對(duì)黃柏不同炮制品化學(xué)成分與藥理作用差異的相關(guān)研究進(jìn)行文獻(xiàn)考證，以期為黃柏的現(xiàn)代運(yùn)用及炮制方法選取、改進(jìn)提供參考。

1 黃柏的炮制考證

1.1 傳統(tǒng)炮制方法

黃柏最早見于《神農(nóng)本草經(jīng)》，名為“檗木”，但并未有完整炮制方法的記載。黃柏詳細(xì)的炮制方法最早見于《雷公炮炙論》：“用生蜜水浸半日，漉出，曬干，用蜜涂，文武火炙，令蜜盡為度。”在隨后的藥學(xué)著作中，還出現(xiàn)“苦酒制”“微炒”“竹瀝浸”“蜜炒”等炮制方法。但在明清以前，多以炒制和蜜制為主。明清以后，炮制方法逐漸豐富，出現(xiàn)酒制、鹽制、姜制等方法，還有利用人乳、豬膽汁、童尿等輔料炮制的方法記載[2]。

綜上可見，古代對(duì)于黃柏的炮制方法豐富且多樣，醫(yī)家以臨床使用為需求，十分重視黃柏炮制后的使用，共有蜜制、酒制、鹽制、炭制、乳汁制、童便制等多達(dá)14種炮制方法[3]。

1.2 現(xiàn)代炮制方法

根據(jù)《中國藥典》2015版一部，黃柏飲片炮制方法為“除去雜質(zhì)，噴淋清水，潤透，切絲，干燥”。除了黃柏絲，《中國藥典》還記載鹽黃柏及黃柏炭兩種炮制品[4]。而目前對(duì)黃柏炮制方法的研究多集中在鹽黃柏、酒黃柏、蜜黃柏等炮制品上。祁東利[5]以小檗堿與小檗紅堿為標(biāo)準(zhǔn)指標(biāo)，通過正交設(shè)計(jì)選出鹽黃柏最佳炮制方法為“每100 g黃柏加入鹽2 g，悶潤1 hr，在150℃～160 ℃下炒8 min”。雷雪霏[6]認(rèn)為蜜黃柏最佳炮制工藝為“每100 kg黃柏加蜜30 kg潤透，在120 ℃～130 ℃下炒4 min”。羅婷等[7]認(rèn)為黃柏炭的最佳炮制方法是“200 ℃下炮制12～17 min”。相比傳統(tǒng)的黃柏炮制方法，目前黃柏標(biāo)準(zhǔn)炮制方法較為單一，酒制、清炒制、蜜制等方法并未進(jìn)入藥典記載，也缺乏炮制工藝與測定標(biāo)準(zhǔn)。因此，在黃柏的具體炮制方法選取與標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范方面仍需進(jìn)一步研究。

2 黃柏的化學(xué)成分及不同炮制品成分差異

2.1 生物堿類

生物堿被認(rèn)為是黃柏的主要有效化學(xué)成分，包括原小檗堿型生物堿如小檗堿、黃柏堿、巴馬汀、藥根堿等；阿樸菲型生物堿如木蘭花堿、氧化木蘭花堿、蝙蝠葛任堿等；苯代異喹啉生物堿如異蓮心堿等[8-9]。而經(jīng)過炮制后，黃柏中的小檗堿受熱分解產(chǎn)生小檗紅堿[10]。小檗堿與黃柏堿是黃柏藥材質(zhì)量測定的指標(biāo)成分，劉英波等[11]使用HPLC方法對(duì)黃柏不同炮制品小檗堿與黃柏堿含量進(jìn)行測定發(fā)現(xiàn)，三種炮制品種小檗堿含量分別為鹽黃柏>黃柏絲>黃柏炭；黃柏堿含量分別為鹽黃柏=黃柏絲>黃柏炭。史黎萍等[12]通過HPLC法測定在160 ℃炮制下不同黃柏炮制品主要生物堿含量，發(fā)現(xiàn)與黃柏絲相比，鹽黃柏各生物堿及總生物堿含量皆增加，黃柏炭則明顯減少。這說明黃柏在經(jīng)鹽炮制后有利于其生物堿成分溶出。

2.2 檸檬苦素類

黃柏內(nèi)酯、黃柏酮是常見的黃柏檸檬苦素類化合物，此外還發(fā)現(xiàn)石虎檸檬素A等成分[13]。劉蓬蓬等[14]使用高效液相色譜法測定黃柏絲與鹽黃柏中檸檬苦素類化合物含量，發(fā)現(xiàn)在160 ℃炮制下鹽黃柏與黃柏絲相比，其黃柏內(nèi)酯、黃柏桐含量均減少。蘇慧等[10]通過HPLC方法對(duì)黃柏絲與黃柏炭特征圖譜比較發(fā)現(xiàn)：黃柏絲與黃柏炭黃柏內(nèi)酯峰面積比值為1∶1，而黃柏酮未檢出。這說明炮制會(huì)對(duì)黃柏檸檬苦素類成分含量造成明顯影響。

2.3 酚酸類

通過對(duì)黃柏醇化物非生物堿部分進(jìn)行分離鑒定，發(fā)現(xiàn)黃柏中含有綠原酸、(-)-3-O阿魏?？鼘幩峒柞?、(-)-4-O-阿魏?？鼘幩峒柞ァ?-)-綠原酸甲酯、(-)-5-O-阿魏酰奎寧酸甲酯、阿魏酸甲酯[15]等酚酸類化合物。吳琦等[16]通過HPLC指紋圖譜對(duì)比黃柏絲與鹽黃柏的化學(xué)成分發(fā)現(xiàn)，鹽黃柏中綠原酸含量較黃柏絲低。李利新等[17]利用RPLC/Q-TOF-MS 技術(shù)對(duì)黃柏絲及黃柏炭進(jìn)行含量測定分析，發(fā)現(xiàn)黃柏炭中綠原酸、5(或4)-O-阿魏?？鼘幩峒柞ズ枯^黃柏絲明顯降低。這說明經(jīng)鹽炮制及炭化后黃柏中主要酚酸類化合物含量降低。

2.4 其他成分

黃柏還含有黃柏苷、異黃柏苷、槲皮素[18]、雙氫山柰酚、黃柏新苷A等黃酮類化合物[19]；β-豆甾醇、-脫氫豆甾醇和β-谷甾醇等甾醇類化合物；β-欖香烯、香芹酮、檸檬烯等揮發(fā)油類[18]；反亞油酸、亞油酸、油酸、棕櫚酸等脂肪酸類[20]；多糖類[21]；(6S)-去氫催吐蘿芙木醇、(6R，7aR)-地芰普內(nèi)酯[15]等。對(duì)于黃柏絲、鹽黃柏及黃柏炭關(guān)于上述成分的含量差異，目前仍然缺乏相關(guān)研究。黃柏不同炮制品的主要化學(xué)成分變化見表1。

表1 黃柏不同炮制品的主要化學(xué)成分變化情況

3 黃柏不同炮制品的藥理作用

3.1 抗炎作用

小檗堿作為黃柏的主要生物堿成分，被研究證明具有抑菌、抗炎等藥理活性。通過不同成分的黃柏提取物對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹及雞蛋清致大鼠足趾腫脹的影響試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，川黃柏各成分提取物均具有抗炎作用，但其中生物堿部位抗炎作用最為明顯[22]。而黃柏不同炮制品中均含有生物堿成分，且小檗堿與炮制后產(chǎn)生的小檗紅堿皆可通過降低磷化ERK/JNK蛋白表達(dá)水平而產(chǎn)生抗炎作用[6]，故黃柏絲、鹽黃柏及黃柏炭皆具有抗炎的藥理作用。南云生等[23]通過黃柏對(duì)巴豆油致小鼠耳廓腫脹模型抗炎作用發(fā)現(xiàn)，黃柏絲對(duì)腫脹抑制率為48.32%，鹽黃柏為13.33%，黃柏炭為10.06%，說明黃柏不同炮制品抗炎作用差距明顯。

3.2 抑菌作用

體外抑菌評(píng)價(jià)抑制活性試驗(yàn)證明，川黃柏提取物對(duì)金黃色葡萄球菌和銅綠假單胞菌皆具有抑制作用，且其能夠破壞生物膜后滲透入內(nèi)部，從而對(duì)細(xì)菌起到抑制和殺滅作用[24]。高潔等[25]通過體外抑制生長實(shí)驗(yàn)比較發(fā)現(xiàn)，黃柏對(duì)大腸埃希菌、金葡菌及沙門氏菌具有較明顯的抑制作用。郭明星等[26]在黃柏不同炮制品的抑菌作用研究中發(fā)現(xiàn)，鹽黃柏對(duì)金黃色葡萄球菌及白喉?xiàng)U菌的抑制作用均優(yōu)于黃柏絲，符合鹽黃柏與黃柏絲主要生物堿含量差異。

3.3 止血作用

黃柏絲、鹽黃柏不具備止血的藥理作用，而中醫(yī)理論認(rèn)為黃柏炒炭后具有收澀止血之功用，可用于便血、崩漏下血等證的治療。劉曉曼[27]通過小鼠斷尾出血模型測定黃柏炭的止血活性，發(fā)現(xiàn)黃柏絲無止血效果，而黃柏炭則具有明顯的止血作用。將黃柏炭中具有止血活性的新成分命名為黃柏炭碳點(diǎn)(PCC-CDs)，其可能通過促血小板凝聚、提升PAI-1含量抑制纖溶系統(tǒng)而發(fā)揮止血作用。

3.4 代謝抑制作用

黃柏可通過調(diào)節(jié)cAMP-AVP對(duì)改善甲亢模型大鼠甲狀腺及腎上腺皮質(zhì)功能皆有作用，而其中改善程度為鹽黃柏優(yōu)于黃柏絲[28]。黃柏絲與鹽黃柏可降低大鼠糖酵解及糖分解代謝，分解代謝受到抑制，減少了能量的消耗，產(chǎn)熱降低，鹽黃柏作用同樣優(yōu)于黃柏絲。而代謝抑制的活性也被認(rèn)為是黃柏滋陰功用的物質(zhì)基礎(chǔ)，說明經(jīng)鹽炮制后黃柏滋陰功用加強(qiáng)[29]。

3.5 抗氧化作用

研究發(fā)現(xiàn)黃柏多糖還原能力較顯著，黃柏多糖濃度在4 mg/L時(shí)對(duì)ABTS+清除能力最強(qiáng)，證明了黃柏的抗氧化活性[30]。孔令東[31]通過肝勻漿脂質(zhì)過氧化反應(yīng)方法測定黃柏不同炮制品抗氧化作用發(fā)現(xiàn)，鹽黃柏抗氧化作用明顯低于黃柏絲，黃柏炭則不具備抗氧化作用。

3.6 其他作用

黃柏還具有降血糖、降血脂、降血壓[32-33]、抗癌[34-35]、保護(hù)肝腎細(xì)胞[36-37]、降尿酸、抗心衰、改善血管內(nèi)皮損傷[38]、保護(hù)神經(jīng)[39]等藥理作用。據(jù)其藥理活性，在現(xiàn)代運(yùn)用中，黃柏可用于急性腎炎、尿路感染等泌尿系統(tǒng)疾病，糖尿病、甲亢等內(nèi)分泌疾病，以及潰瘍性結(jié)腸炎等消化系統(tǒng)疾病的治療[40]，應(yīng)用范圍廣泛，運(yùn)用前景良好。目前對(duì)于上述藥理作用在黃柏不同炮制品之間的具體差異，仍缺乏相應(yīng)研究。

4 討論

黃柏炮制方法歷來多種多樣，醫(yī)者多會(huì)根據(jù)臨床使用的需要而選取不同的輔料和方法對(duì)其加以炮制?，F(xiàn)今對(duì)于黃柏的炮制方法研究，多集中與鹽黃柏、酒黃柏、蜜黃柏等不同的炮制品，而《中國藥典》明確記載的黃柏炮制品只有黃柏絲、鹽黃柏與黃柏炭三種，且其中鹽黃柏與黃柏炭仍然缺乏相應(yīng)炮制工藝標(biāo)準(zhǔn)及含量測定標(biāo)準(zhǔn)。

目前對(duì)于黃柏的主要化學(xué)成分研究已較為完善，其含有生物堿類、檸檬苦素類、酚酸類、黃酮類等成分。而在不同炮制方法下，黃柏含有的化學(xué)成分會(huì)出現(xiàn)明顯的成分和含量改變。鹽黃柏與黃柏絲成分?jǐn)?shù)量變化不明顯，黃柏炭中化學(xué)成分則明顯減少。以主要生物堿成分作為標(biāo)準(zhǔn)，目前多認(rèn)為鹽黃柏生物堿含量高于黃柏絲，而黃柏炭則生物堿含量明顯低于黃柏絲，說明經(jīng)鹽炮制有利于黃柏中生物堿的溶出。

除了生物堿部分，目前對(duì)黃柏中其他成分(檸檬苦素類、酚酸類等)在不同炮制品下含量差異的研究極少，且對(duì)于《中國藥典》中明確記載的炮制品黃柏炭的化學(xué)成分的研究也十分缺乏，今后應(yīng)加強(qiáng)該方面的研究。

在藥理作用方面，黃柏具有抗炎、抑菌、代謝抑制、抗氧化等作用。經(jīng)炮制后，黃柏炭還具有明顯的止血作用。在抗炎抑菌作用上，其生物堿部分被認(rèn)為是藥理活性的主要物質(zhì)基礎(chǔ)。而在不同實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)黃柏絲抗炎作用優(yōu)于鹽黃柏，而鹽黃柏抑菌作用優(yōu)于黃柏絲，黃柏炭則作用最差，說明不同炮制品抗炎抑菌作用差距明顯。在代謝抑制作用上，鹽黃柏明顯優(yōu)于黃柏絲，這被認(rèn)為是鹽黃柏經(jīng)炮制后滋陰作用加強(qiáng)的主要依據(jù)。而黃柏炭除了止血作用以外，其他藥理作用的研究仍然十分缺乏。

5 結(jié)語

黃柏作為中藥飲片，不論在祖國醫(yī)學(xué)辨證論治的使用中，還是在通過現(xiàn)代醫(yī)學(xué)手段對(duì)其有效化學(xué)成分提取后的運(yùn)用中，都擁有極大的前景。本文通過對(duì)黃柏的炮制方法、化學(xué)成分、藥理作用，以及炮制方法對(duì)化學(xué)成分及藥理作用的影響研究進(jìn)行文獻(xiàn)綜述，發(fā)現(xiàn)目前對(duì)于黃柏的研究重點(diǎn)在其主要有效化學(xué)成分(生物堿類)及藥理作用的相關(guān)研究方面，而對(duì)其他化學(xué)成分的研究，以及炮制后化學(xué)成分含量和藥理作用變化的相關(guān)研究仍然有所欠缺，特別是對(duì)于黃柏炭的研究更需深入。而目前黃柏炮制方法也較為單一，缺乏相應(yīng)的炮制和檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。因此，今后需加強(qiáng)和完善對(duì)各炮制品的化學(xué)成分與藥理作用的研究，為黃柏的科學(xué)炮制與臨床合理運(yùn)用提供科學(xué)的理論依據(jù)。