液基薄層找線索細胞與BV blue檢測細菌性陰道病結(jié)果比較

曾風華，辛 華

(1、吉安市青原區(qū)婦幼保健院檢驗科，江西吉安 343009；2、南昌大學第二附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科實驗室，江西南昌 330006)

細菌性陰道病(Bacterial vaginosis,BV)是由于陰道內(nèi)加德納菌和厭氧菌增多，而乳酸桿菌減少，陰道內(nèi)生態(tài)系統(tǒng)改變而引起的一種疾病。健康婦女陰道菌群中乳酸桿菌占絕大多數(shù)，是維持正常陰道微生態(tài)的優(yōu)勢菌種，如果因某種原因這種平衡受到破壞，優(yōu)勢菌屬轉(zhuǎn)換，BV便得以發(fā)生。近年有研究表明，陰道分泌物中唾液酸酶活性與BV之間存在一定的量的關系。BV婦女陰道分泌物中的唾液酸酶活性明顯高于正常婦女，正常婦女的陰道分泌物中含很少量的唾液酸酶或不含唾液酸酶[1]。線索細胞(Clue cell)是診斷細菌性陰道病的確定指標，本文探討液基薄層找線索細胞與快速唾液酸酶法(BV blue)檢測細菌性陰道病的結(jié)果比較?，F(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 對象 我院婦科2010年9月至2011年4月的門診病人，年齡，20～55歲，共計102例。

1.2 方法

1.2.1 唾液酸酶檢測 BV blue快速診斷試劑盒 (北京明悟德生物技術有限公司)，美國Gryphus進口配裝。批號：BVRB113014837×H用棉簽收集病人陰道壁(下三分之一段)分泌物樣品(盡可能多)，將棉簽置于無菌試管中送檢。將取樣拭子浸入測試管溶液中，輕輕攪動混勻，將帶有棉拭子端的測試管，置于37℃恒溫器中，溫育10min，加2～3滴顯示劑至含有棉拭子的試管中輕搖混勻，立即觀察測試管內(nèi)溶液及棉拭子的顏色變化結(jié)果。陽性結(jié)果：測試管中溶液顯藍色或綠色及棉拭子顯藍色或綠色，均表明BV blue檢測陽性，指示陰道致病厭氧菌感染異常，分泌物唾液酸酶活性顯著增高。陰性結(jié)果：測試管中溶液及棉拭子均為黃色，指示陰道中無顯著致病厭氧菌感染，分泌物唾液酸酶活性正常。

1.2.2 方法的局限性 不適用于72h內(nèi)使用過灌注療法、栓劑或膏劑的婦女。

1.2.3 新柏氏TCT片檢查，將巴氏染色的TCT片，在高倍鏡下觀察，鱗狀上皮細胞被革蘭陰性球桿菌覆蓋，尤其沿細胞膜邊緣排列，外觀似線索狀，即為線索細胞。片中線索細胞占全部上皮20%以上，即線索細胞陽性,才能判定為陽性結(jié)果[2]。TCT片中線索細胞＞20%為陽性,線索細胞>60%～70%為強陽性，同時患者白帶稀薄，并有腥臭味，pH值＞4.5時即可診斷為細菌性陰道病。

2 結(jié)果

2.1 結(jié)果顯示兩種檢測方法結(jié)果相一致，經(jīng)χ2檢驗，兩者無顯著差別(P＞0.05)，結(jié)果基本一致。

表1 TCT片找線索細胞和BV blue兩種檢測細菌性陰道病方法結(jié)果比較

3 討論

細菌性陰道病是陰道菌叢微生態(tài)相關常見傳染性非炎癥綜合癥，可引發(fā)妊娠期、產(chǎn)褥期并發(fā)癥及新生兒感染性疾病。該病多發(fā)生于15～44歲的育齡期女性，是育齡期婦女最常見的一種陰道感染性疾病[3]。它是由于陰道正常菌群(含乳酸桿菌)被陰道加特納菌、厭氧菌、人型支原體構(gòu)成的混合菌群所取代，造成菌群失調(diào)而引起的疾病，而且常易復發(fā)，遠遠高于陰道滴蟲與霉菌感染發(fā)病率之和[4]；占外陰、陰道感染的40%～50%[5]。過去臨床診斷BV的標準為傳統(tǒng)的Amsel法(又稱金標準法)，具備下列4項指標中至少3項者為細菌性陰道?。篈陰道分泌物增多，呈勻質(zhì)稀薄的陰道分泌物；B pH＞4.5(pH多為5.0～5.5)；C胺臭味試驗陽性；D線索細胞(clue cell)。陰道分泌物pH測定就是利用BV陰道PH值升高的原理進行檢測，臨床實驗表示，92%～97%BV患者陰道pH值大于4.5，故以pH值＞4.5為診斷BV的輔助指標之一；根據(jù)有些專家研究的結(jié)果，陰道菌群正常的婦女在性交后或在月經(jīng)期、滴蟲感染時pH值也可增高，陰道分泌物中混有宮頸黏液也將產(chǎn)生較高的pH值，所以說pH值的測定受多種因素的影響，敏感性較高，但特異性較低。細菌性陰道病存在時，正常菌群中乳酸桿菌大量減少或消失，而陰道加特納菌、厭氧菌或支原體等微生物過度生長，所以在分泌物中滴加10%KOH溶液可導致游離胺釋放，產(chǎn)生典型的魚腥樣氣味。但常規(guī)的胺試驗客觀性差，靈敏度低，受實驗人員嗅覺功能影響大，某些BV婦女在性交后陰道惡臭味更加強烈，這可能是因為精液的pH值較高，發(fā)揮與KOH相同的作用產(chǎn)生了氨味。腐氨也存在精液中，對氣味敏感而無BV的婦女會注意到這種氣味，所以胺試驗的假陽性可發(fā)生在近期有性行為的婦女，該方法屬于輔細菌性陰道病。線索細胞檢查，取陰道分泌物革蘭染色后鏡下見散在的上皮細胞及其間的細菌。上皮細胞表面粘附很多革蘭陰性短小球桿菌，使其邊緣呈鋸齒狀而不清晰，形成所謂線索細胞(Clue cell)。革蘭染色制片需要干燥、固定、染色，操作相對復雜，費時費力。尤其是革蘭染色過程中反復沖洗，使標本脫落，線索細胞丟失而造成漏診，影響陽性結(jié)果[6]。而線索細胞檢測是單項BV臨床化驗的最有特異性的。濕片中線索細胞的檢查雖操作簡便，但缺少規(guī)范的檢查方法和統(tǒng)一的陽性標準，還受到炎癥細胞的干擾，直接影響了細菌性陰道病的臨床診斷。TCT片背景干凈，在高倍鏡下觀察，鱗狀上皮細胞被球桿菌覆蓋，細菌像細沙樣覆蓋在上皮細胞的表面，尤其沿細胞膜邊緣排列，外觀似線索狀，即為線索細胞，線索細胞占上皮細胞20%以上，即可提示為細菌性陰道病。BV blue唾液酸酶快速診斷法結(jié)果易觀察，操作簡便快速，特異性強，試劑有效期長不需要特殊儀器，結(jié)果穩(wěn)定性好，是臨床診斷細菌性陰道病的可靠檢測方法，但價格昂貴，不能解決看病貴問題，液基薄層TCT片作為一種新型的科學技術，在婦女宮頸防癌普查中，已逐漸代替了傳統(tǒng)的宮頸刮片，為廣大基層醫(yī)院所采用，并將成為一種趨勢，取代傳統(tǒng)的宮頸刮片，國家每年也投入大量的資金為婦女宮頸防癌普查，本研究認為在做液基薄層宮頸防癌普查工作，同時進行線索細胞檢查，對臨床細菌性陰道病提供有價值的診斷，有效解決群眾看病貴問題，非常值得臨床廣泛開展。

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