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    TP-TRUST與TP-ELISA法檢測梅毒結(jié)果回顧分析

    2011-06-07 02:21:36王曉萍涂彩霞漆巍慶
    實驗與檢驗醫(yī)學 2011年5期
    關鍵詞:螺旋體梅毒敏感性

    王曉萍,涂彩霞,漆巍慶

    (江西省宜豐縣人民醫(yī)院檢驗科,江西宜豐 336300)

    梅毒是由梅毒螺旋體感染引起的性傳播疾病,也可通過血液及母嬰等方式傳播,具有高度傳染性。梅毒螺旋體可侵犯中樞神經(jīng)系統(tǒng),危害心血管系統(tǒng),損害骨骼系統(tǒng),晚期可累及全身各個臟器造成多器官病變,直至死亡。近年來梅毒感染人數(shù)在全國呈較快的上升趨勢,而梅毒患者是唯一傳染源,早期梅毒傳染性較強,因此加強臨床梅毒患者的早期檢查診斷對防止梅毒擴散及梅毒患者的早期治療具有重要意義。目前檢測梅毒的方法主要有病原學及血清學檢測,目前血清學檢測有多種不同的方法。本實驗室應用甲苯胺紅不加熱血清反應素試驗(TRUST)、梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(TPPA)、梅毒螺旋體抗體酶聯(lián)免疫吸附試驗 (TP-ELISA)3種血清學試驗,對3926份門診和住院病人的血清標本進行檢測和結(jié)果評價,報告如下。

    1 材料與方法

    1.1 檢測對象 為本院自2010年1月至2011年6月術前檢查、輸血前檢查、皮膚性病門診病人的3926份血清標本。

    1.2 試劑與儀器 TRUST試劑盒 (上海榮盛生物技術有限公司產(chǎn)品);TP-ELISA試劑盒(上??迫A生物技術公司產(chǎn)品);TPPA試劑盒(日本富士瑞必歐株式會社產(chǎn)品);酶標儀、洗板機(北京普朗);加樣器(上海求精生化試劑儀器有限公司)。

    1.3 方法 對3926例標本同時用TRUST與ELISA進行檢測,并對陽性標本用TPPA進行確證試驗。試驗操作步驟及結(jié)果判斷均嚴格按照試劑盒說明書。

    1.4 統(tǒng)計學方法 計數(shù)資料比較用χ2檢驗

    2 結(jié)果

    2.1 3 926例患者梅毒螺旋體抗體檢測結(jié)果比較,TRUST與TPPA比較,差異具有統(tǒng)計學意義 (χ2=58.86,P<0.01),ELISA 法與 TPPA 比較相關性好,差異無統(tǒng)計學意義(χ2=3.06,P>0.05),見表1。

    2.2 兩種檢測方法用TRUST法檢測74例陽性,敏感性 51.39%(74/144),特異性 99.84%(3776/3782),陽性預測值92.50%(74/80),假陽性率為0.16%(6/3776);用ELISA法檢測陽性140例,敏感性97.22%(140/144),特異性 99.68%(3770/3782),陽性預測值92.11%(140/152), 假 陽 性 率 為 0.32%(12/3782);ELISA、TRUST兩種方法均為陽性73例,敏感性50.69%(73/144),特異性 99.97%(3781/3782),陽性預測值98.65%(73/74),假陽性率為0.03%(1/3782)。見表2。

    表1 3926例患者梅毒螺旋體抗體檢測結(jié)果比較

    3 討論

    表2 兩種檢測方法的敏感性、特異性及陽性預測值與陰性預測值

    梅毒的實驗室診斷主要依靠血清學檢測,梅毒螺旋體進入人體2~4周后即可檢測出梅毒螺旋體特異性抗體,可用 TPPA、TP-ELISA等方法;約6周才能檢測出非梅毒螺旋體特異性抗體[1],可用RPR、TURST、VDRL、USR 等方法。

    TRUST方法的檢測原理是用牛心磷脂作為抗原檢測體內(nèi)產(chǎn)生的非特異性抗類脂質(zhì)類物質(zhì)的非特異性檢測,已有相關文獻報道TRUST方法對潛伏期梅毒及Ⅰ期梅毒的敏感性低[2,3],而且晚期梅毒及梅毒患者治療后結(jié)果可呈陰性反應,所以TRUST方法不適宜早期及晚期梅毒的輔助診斷。但該方法操作簡便,試劑價格便宜,檢測時間短,不需要特殊儀器設備,以及能測定抗體滴度,其滴度變化能反應梅毒患者的治療效果,當梅毒患者經(jīng)治療有效后,TRUST的滴度會下降,甚至轉(zhuǎn)陰直至消失[4],因此適合用于療效觀察、和復查。

    TP-ELISA是一種基于基因工程的利用梅毒螺旋體多肽抗原包被于反應板的特異性檢測技術,敏感性和特異性均較高,是檢驗科的常規(guī)操作技術,該法操作簡便,試劑價格便宜,但檢測時間比TRUST長,操作過程中還需要酶標儀、洗板機。由于該法檢測的是梅毒IgM和IgG的混合抗體,因此可用于早期診斷,但梅毒IgG抗體在治愈后仍然在體內(nèi)存在,因此梅毒患者即使治愈后仍終身檢測陽性。

    TPPA比TRUST、ELISA的敏感性和特異性都高,是臨床上常用的梅毒確診試驗,還可測定效價,但操作復雜,時間較長,試劑成本高,臨床收費高,不適合大量標本的篩查,而且與ELISA方法一樣也是檢測梅毒IgM和IgG的混合抗體,不能判定療效,因此只適合用于TRUST或ELISA測定陽性后的確診試驗。

    從本實驗室的檢測結(jié)果可看出,TP-ELISA法靈敏度和特異性高,與TPPA相關性好,但也存在一定的假陽性和假陰性,由于梅毒抗體是由梅毒螺旋體侵入人體后,其表面抗原刺激機體產(chǎn)生梅毒螺旋體特異性抗體,但有些人血清中含有非特異性干擾物質(zhì)(內(nèi)源性物質(zhì)),可影響ELISA的測定結(jié)果,并且抗體與其他抗原之間的交叉反應也可以在ELISA試驗中發(fā)生多種非特異性吸附作用,從而導致假陽性出現(xiàn)[5],另有研究表明少數(shù)孕婦及70歲以上老人中也有1%出現(xiàn)假陽性[6,7]。而抗體效價低及檢驗人員的是否按步驟嚴格操作也是影響結(jié)果的重要因素。TRUST 靈敏度低(51.38%)、特異性高(99.84%),與其他文獻資料有一定差異 (靈敏度88.1%,特異性85.1%)[3],各種疾病如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、病毒性肝炎、類風濕,活動性肺結(jié)核,硬皮病等都能影響TRUST的檢測結(jié)果,致假陽性。所以標本的來源也能一定程度上影響TRUST的敏感性和特異性。而同時開展TRUST和ELISA兩種方法的檢測,降低了結(jié)果的假陽性率,避免給患者造成不必要的精神壓力和負擔,并且兩種試驗各有所長,同時應用可以更好的為臨床診斷及判斷療效提供更快捷準確的依據(jù)。

    [1]王 華,李代渝,雷麗明.梅毒血清學五種檢測方法的比較[J].中國皮膚病學雜志,2007,21(7):435-436.

    [2]姚 曄,萬 瓊,李志紅,等.兩種梅毒血清學檢測方法的比較[J].實驗與檢驗醫(yī)學,2009,27(6):698.

    [3]紀建平,鐘貴才,鐘 嵐.三種梅毒血清學檢測方法比較[J].中國現(xiàn)代醫(yī)生,2009,47(20):126-127.

    [4]陳家堅.三種不同方法對各期梅毒患者血清檢測的結(jié)果分析[J].臨床皮膚科雜志,2001,8(3):152.

    [5]鮑自謙.對獻血者梅毒檢測的安全性探討[J].臨床血液學雜志(輸血與檢驗版),2004,(1):16-17.

    [6]尹躍平.梅毒血清學檢測方法的應用評價[J].實用醫(yī)院臨床雜志,2006,3(2):13.

    [7]武建國.老年人抗梅毒螺旋體抗體測定的假陽性率偏高[J].臨床檢驗雜志,2006,24(4):241-243.

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