副豬嗜血桿菌病的診治

馬偉 夏輝 （山東省臨朐縣畜牧局 262600）

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副豬嗜血桿菌病的診治

馬偉 夏輝 （山東省臨朐縣畜牧局 262600）

副豬嗜血桿菌(Haemophlius parasusi，HPS)病，又稱格拉澤氏病(Glasser’disease)。該病主要發(fā)生于斷奶前后和保育舍階段的豬只，通常見于5~8周齡，發(fā)病率可達(dá)40%，嚴(yán)重時死亡率可達(dá)50%。通?？蓮慕】地i的鼻腔分泌液中分離出病菌，還可以從患肺炎豬的肺臟中分離出來。副豬嗜血桿菌近年來，隨著藍(lán)耳病、圓環(huán)病毒病等免疫抑制疾病的流行，使豬群的免疫力大幅下降，由副豬嗜血桿菌引起的豬多發(fā)性漿膜炎、關(guān)節(jié)炎、呼吸困難、高熱等為特征的傳染性疾病頻繁出現(xiàn)，給養(yǎng)豬業(yè)帶來極大的經(jīng)濟損失。

1 病原學(xué)

副豬嗜血桿菌隸屬于巴氏桿菌科嗜血桿菌屬，是一種多形態(tài)、非溶血性、不運動的革蘭氏陰性細(xì)小桿菌。從病灶中新分離的菌株多成球桿狀或雙球狀，有時可成短鏈。在陳舊培養(yǎng)物中成多形態(tài)，有長桿狀和絲狀。

該菌生長時嚴(yán)格需要NAD，不需要血紅素和其他卟啉類物質(zhì)(X因子)。在加有NAD的鮮血培養(yǎng)基上，37℃培養(yǎng)24~48h，生長為邊緣整齊、小而透明的不溶血菌落，在巧克力培養(yǎng)基上培養(yǎng)24h~48h生長很差，菌落為光滑型，灰白色透明，直徑大約0.5mm。將HPS水平劃線于鮮血瓊脂平板上，再挑取金黃色葡萄球菌垂直于水平線劃線，37℃培養(yǎng)24h~48h，呈現(xiàn)出典型的“衛(wèi)星生長”現(xiàn)象，并且不出現(xiàn)溶血。該菌脲酶和氧化酶試驗陰性，接觸酶試驗陽性，可發(fā)酵葡萄糖、蔗糖、果糖、半乳糖、D2核糖和麥芽糖等。

HPS血清型眾多，目前至少可分為15個血清型，不同血清型的毒株，毒力和致病力都存在差異，其中血清型1、5、10、12、13、14毒力最強，感染豬多趨于死亡或瀕死狀態(tài)；血清型2、4、15為中等毒力，可導(dǎo)致較嚴(yán)重的多發(fā)性漿膜炎和關(guān)節(jié)炎，出現(xiàn)敗血癥；血清型3、6、7、8、9、11毒株感染癥狀較緩和或無臨床表現(xiàn)。

2 流行病學(xué)

副豬嗜血桿菌通常定居于健康豬的上呼吸道，常?？蓮钠浔乔?、鼻分泌物、氣管和扁桃體中分離到，而不見任何臨床癥狀。HPS只感染豬，且有很強的宿主特異性，可以影響2周齡到4月齡豬，主要在斷奶前后和保育舍階段發(fā)病，通常見于5~8周齡，感染高峰通常見于保育期的4~6周齡，有些可早在保育舍內(nèi)最初2周時就開始出現(xiàn)，并一直持續(xù)到肥育期早期，發(fā)病率可達(dá)40%，嚴(yán)重時死亡率可達(dá)50%。

本病的主要傳播途徑是通過空氣、豬與豬之間的接觸或通過污染排泄物。病豬和帶菌豬是本病的主要傳染源。未免疫的豬場或特別健康的豬群(如SPF豬)最容易受到侵襲。該病常與豬繁殖與呼吸綜合征病毒、圓環(huán)病毒、豬流感病毒和豬呼吸道冠狀病毒引起的病毒病及支原體病并發(fā)。研究表明在豬群中存在PRRS 感染時，HPS的分離率會增加，由HPS導(dǎo)致的死亡率也大幅增加，HPS的防制取決于豬群中PRRSV 的穩(wěn)定化程度，其它一些呼吸道性疾病如支原體肺炎、豬流感、豬偽狂犬病和圓環(huán)病毒Ⅱ型感染及豬呼吸道冠狀病毒感染時，HPS的存在可加劇病情的臨床表現(xiàn)。

3 臨床癥狀和病理變化

3.1 臨床癥狀 副豬嗜血桿菌病的臨床癥狀可分為兩種，即急性感染和慢性感染，但一般豬場是以慢性感染為主。2~8周齡仔豬感染發(fā)病后呈現(xiàn)典型癥狀，育肥豬感染多呈慢性經(jīng)過，哺乳母豬也可感染發(fā)病。急性的病豬體溫高達(dá)40~41℃，精神沉郁，食欲減退，氣喘咳嗽，呼吸困難，鼻孔有薪液性及漿液性分泌物，關(guān)節(jié)腫脹，跋行，步態(tài)僵硬，同時出現(xiàn)身體顫抖，共濟失調(diào)，3d左右死亡。（1）急性感染：急性病例往往首先發(fā)生于膘情良好的豬，表現(xiàn)為發(fā)熱(40.5~42.0℃)、病初貧血、呼吸困難、耳稍發(fā)紫、眼瞼皮下水腫，不喜運動，精神沉郁、食欲下降或不食，體表皮膚發(fā)紅或蒼白，行走緩慢或不愿站立，腕關(guān)節(jié)、跗關(guān)節(jié)腫大，共濟失調(diào)，臨死前側(cè)臥或四肢呈劃水樣。有時也會無明顯癥狀而突然死亡，急性死亡者，通常由于膿毒血癥引起。急性感染病例存活后可留下后遺癥，即母豬流產(chǎn)，公豬慢性跋行，仔豬和育肥豬可遺留呼吸道癥狀和神經(jīng)癥狀。慢性病豬消瘦虛弱，被毛粗亂，皮膚發(fā)白，咳嗽，呈腹式呼吸，生長不良，關(guān)節(jié)腫大，嚴(yán)重時皮膚發(fā)紅，少數(shù)病豬耳根發(fā)涼隨即死亡。（2）慢生感染：慢性病例多見于保育豬，主要表現(xiàn)為食欲下降、咳嗽、呼吸困難、被毛粗亂，四肢無力或跋行，生長不良，甚至衰竭而死亡。耐過的豬只常發(fā)展成慢性型。慢性病例最特殊的病理變化是纖維性化膿性支氣管肺炎，兼有纖維性胸膜炎。病灶往往出現(xiàn)在肺臟背部，呈圓形，有明顯的界限。通常在肺的橫隔膜葉較易出現(xiàn)病灶。早期組織學(xué)病變包括壞死、出血，嗜中性白細(xì)胞浸潤，巨嗜細(xì)胞和血小板激活，血管內(nèi)血栓形成；后期則主要以巨嗜細(xì)胞浸潤為特征。（3）剖檢：副豬嗜血桿菌病病豬尸體剖檢可見胸腔內(nèi)有大量的淡紅色液體及纖維素性滲出物凝塊，肺表面覆蓋有大量的纖維索性滲出物并與胸壁粘連，多數(shù)為間質(zhì)性肺炎，部分有對稱性肉樣變化，肺水腫；腹膜炎，常表現(xiàn)為化膿性或纖維性腹膜炎，腹腔積液或內(nèi)臟器官粘連；心包炎，心包積液，心包內(nèi)常有干酪樣甚至豆腐渣樣滲出物，使外膜與心臟粘連在一起，形成“絨毛心”，心肌有出血點；全身淋巴結(jié)腫大，呈暗紅色，切面呈大理石樣花紋；脾臟腫大，有出血性梗死；關(guān)節(jié)腫大，關(guān)節(jié)腔有漿液性滲出性炎癥。胸腔內(nèi)有多量的淡紅色液體及纖維性滲出物凝塊，心包膜與心臟粘連，病變明顯。肺表面覆蓋有大量纖維素性滲出物并與胸腔粘連，且有大量小化膿灶，外包有結(jié)締組織；肺臟出血，全身淋巴結(jié)腫大，暗紅色，切面呈大理石花紋；腎、十二指腸均有出血點，回盲口附近有輪層扣狀潰瘍；脾出血性梗死。副豬嗜血桿菌經(jīng)常引起急性敗血癥，并且其內(nèi)毒素可導(dǎo)致彌漫性血管內(nèi)凝血，導(dǎo)致多個器官內(nèi)形成微血栓。SPF豬實驗性感染后的血液學(xué)變化和微觀病變表現(xiàn)為在攻擊后24h開始出現(xiàn)白細(xì)胞減少和血糖降低。所有接種豬都表現(xiàn)血小板減少、凝血酶原時間延長、纖維蛋白原—纖維蛋白降解產(chǎn)物增加。從攻擊后16h開始，血漿中檢測出內(nèi)毒素，并且在臨死前內(nèi)毒素的濃度急驟上升。在腎臟、肝臟和肺臟中發(fā)現(xiàn)微血栓，研究人員推測彌漫性血管內(nèi)凝血和內(nèi)毒素性體克加重了敗血癥仔豬的臨床癥狀并加速其死亡。

3.2 病理組織學(xué)變化 感染副豬嗜血桿菌的仔豬主要病理組織學(xué)變化為:氣管的豁膜上皮脫落，勃膜下水腫，薪膜下有出血，有炎癥反應(yīng)(嗜中性炎性細(xì)胞)。支氣管內(nèi)、肺泡內(nèi)充滿大量的炎性細(xì)胞(以嗜中性粒細(xì)胞為主，巨細(xì)胞主要在肺泡內(nèi))，支氣管上皮缺損；心肌細(xì)胞斷裂、少量變性(顆粒變性和水泡變性)壞死，肌纖維間有炎性細(xì)胞，心外膜內(nèi)外有漿液性滲出(大量的中性細(xì)胞浸潤及巨噬細(xì)胞)；脾炎(脾內(nèi)嗜中性細(xì)胞很多)，脾小梁周圍水腫，脾小體的生發(fā)中心變小甚至看不到生發(fā)中心；肝臟有壞死灶，肝細(xì)胞腫大；大腦出現(xiàn)腦膜炎，軟腦膜下水腫、充血(血管內(nèi)白細(xì)胞多)、出血、有炎癥(單核細(xì)胞和中性細(xì)胞)。有壞死灶，壞死灶內(nèi)有很多空泡，壞死灶周圍神經(jīng)元細(xì)胞嚴(yán)重腫脹，有衛(wèi)星現(xiàn)象(非化膿性腦炎，角質(zhì)細(xì)胞增生)，有嗜神經(jīng)元現(xiàn)象；小腸呈現(xiàn)輕微腸炎，薪膜絨毛間和固有層有嗜酸性細(xì)胞，固有層有嗜中性細(xì)胞，充血，絨毛內(nèi)杯狀細(xì)胞增多、擴張(說明薪液分泌亢進(jìn))。大腸呈明顯炎癥，即出血性纖維素性腸炎，薪膜上皮脫落，表面纖維素性滲出物，薪膜下出血、水腫、有嗜中性炎性細(xì)胞、纖維蛋白性滲出物增多，勃膜上同豁膜下。小腦和腎臟變化不明顯。

4 診斷

通過病史調(diào)查、流行病學(xué)、臨床癥狀及剖檢變化等可做出初步診斷。

4.1 細(xì)菌分離鑒定 由于此菌對生長環(huán)境的要求極為苛刻，而且病料超過24h之后就很難分離到該菌，因此，要在培養(yǎng)基中加入血清和NAD等營養(yǎng)物質(zhì)。該菌的分離一般將撲殺豬的肺、心血、肝、腎、淋巴結(jié)分別劃線接種于含有血清和NAD的TSA培養(yǎng)基上，在37℃培養(yǎng)48h后挑取單個菌落進(jìn)行純培養(yǎng)。將可疑菌的單菌落與金黃色葡萄球菌垂直劃線于無NAD的血平板上，在37℃培養(yǎng)24~48h，如果看到“衛(wèi)星生長現(xiàn)象”，且無溶血現(xiàn)象，即可確定為該菌。另外，副豬嗜血桿菌不易培養(yǎng)的特性經(jīng)常影響這種細(xì)菌從臨床樣品的分離。使用平板稀釋技術(shù)和在培養(yǎng)基中加入抗生素可以提高從污染病料中的細(xì)菌分離率。

4.2 血清學(xué)檢測 目前，補體凝集試驗、間接ELISA、瓊脂擴散試驗等已成為HPS診斷的血清型方法，但由于在一個豬群中，出現(xiàn)HPS的幾種菌株或幾種血清型毒株同時感染的現(xiàn)象比較普遍，甚至在個別病例，不同標(biāo)本內(nèi)可發(fā)現(xiàn)不同菌株或血清型感染，各血清型HPS之間存在交叉反應(yīng)，因此診斷意義不大。

4.3 分子生物學(xué)檢測 主要是用PCR的方法檢驗基因序列，該方法不僅可以檢測到100CFU/ml的細(xì)菌，從而從初代分離培養(yǎng)物中對HPS進(jìn)行鑒定和感染確診，而且可以直接對病料進(jìn)行HPS PCR檢測，其敏感性遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于常規(guī)的細(xì)菌分離法，可在臨床診斷和防治中更具實用性。

5 防治

飼養(yǎng)管理不當(dāng)、生物安全措施不得力、通風(fēng)不良、氣候突變、密集養(yǎng)殖、運輸應(yīng)激等因素是造成發(fā)生本病的主要誘因。因此，應(yīng)改善飼養(yǎng)管理條件，定期通風(fēng)換氣。另外，在應(yīng)用疫苗免疫的基礎(chǔ)上，應(yīng)加強對豬群中所有豬的抗生素治療。同時，對HPS繼發(fā)感染性疾病，要加強對原發(fā)病的控制和治療，加大養(yǎng)豬場生物安全管理，減少或消除其它呼吸道病原物。

5.1 加強環(huán)境消毒、減少各種應(yīng)激 搞好衛(wèi)生，嚴(yán)格消毒徹底清掃豬舍，糞便進(jìn)行無害化處理；用2%~4%氫氧化鈉溶液噴灑豬圈地面和墻壁，2h后地面、墻壁用清水沖洗干凈，隨后按1:300的比例，用勁碘百毒殺或菌毒滅噴霧消毒，1次/d，連用4~5d，以后圈舍每周進(jìn)行1次徹底清掃和消毒。

5.2 提高管理水平，改善飼養(yǎng)環(huán)境 將大欄舍改成兩個小欄舍，并合理安排飼養(yǎng)密度。每個小欄飼養(yǎng)肉豬不得超過12頭。豬只剛進(jìn)欄時，要派專人看管，防止打架、相互嘶咬，同時使豬只形成良好的衛(wèi)生習(xí)慣。加強飼養(yǎng)管理，全群豬用電解質(zhì)加維生素C粉飲水5~7d。

5.3 疫苗免疫 可用滅活苗免疫母豬，初免豬產(chǎn)前40d一免，產(chǎn)前20d二免。在經(jīng)免豬產(chǎn)前30d免疫1次即可。受本病嚴(yán)重威脅的豬場，小豬也要進(jìn)行免疫，從10日齡到60日齡的豬都要注射，每次1ml，最好一免后過25d再重復(fù)注射1次。

5.4 治療隔離病豬，用抗菌素治療 豬場一旦得到正確診斷或出現(xiàn)明顯臨床癥狀時，必須應(yīng)用大劑量的抗菌素進(jìn)行治療，并且應(yīng)當(dāng)對整個豬群或同群豬進(jìn)行藥物預(yù)防。常采用肌肉注射氨芐青霉素、阿莫西林、慶大霉素等，并配合地塞米松進(jìn)行治療，也可用艾迪諾(長效恩諾沙星)注射液深部肌肉注射，每次0.2ml/kg，1次/d，連用2~3d；硫酸卡那霉素注射液肌內(nèi)注射，每次20mg/kg，每晚肌注1次，連用5~7d。

（2011–11–23）

S858.28

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1007-1733(2011)04-0028-03