妥布霉素滴眼液中抑菌劑含量分析

(重慶市藥品檢驗所，重慶 401121)

滴眼液中的抑菌劑有細胞毒性，長期使用可造成眼表組織損傷，并降低眼睛對滴眼液的耐受性。但為了保持藥效的穩(wěn)定性和控制反復使用時微生物的污染，大多數(shù)滴眼液中都含有抑菌劑，其中最常見的是羥苯乙酯和苯扎氯銨。為考察市場上妥布霉素滴眼液中抑菌劑的添加情況，我所于2009年收集到國內(nèi)生產(chǎn)的妥布霉素滴眼液54批、復方妥布霉素滴眼液1批，并用高效液相色譜法測定其抑菌劑含量。現(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

Agilent1100型高效液相色譜儀。妥布霉素滴眼液54批、復方妥布霉素滴眼液1批(分別來源于信誼藥廠等18家生產(chǎn)企業(yè));羥苯乙酯、羥苯丙酯、苯扎氯銨對照品(中國藥品生物制品檢定所);苯扎溴銨對照品(用重慶渝生藥廠提供的原料代替，含量為98.5%);乙腈(色譜純)，其他試劑(分析純)。

2 方法與結(jié)果

根據(jù)各廠家提供的處方資料，所含抑菌劑主要有羥苯乙酯、羥苯丙酯、苯扎氯銨和苯扎溴銨。依據(jù)有關參考資料，采用高效液相色譜法，色譜柱為C18柱，流動相為70∶30的乙腈－5 mmol/L醋酸銨[含1%三乙胺，用冰醋酸調(diào)pH至(5.0±0.5)]，檢測波長262 nm，考察了上述4種抑菌劑的出峰分離情況。結(jié)果羥苯乙酯、羥苯丙酯、苯扎氯銨和苯扎溴銨均能完全分離(圖1)。

由圖1可見，苯扎氯銨和苯扎溴銨峰形不是很好。查閱有關標準得知，妥布霉素滴眼液(JX20010404)、布林佐胺滴眼液(JX20010359)、鹽酸多佐胺滴眼液(JX20000532)及酮咯酸氨丁三醇滴眼液(JX20010382)等進口注冊標準中苯扎氯銨的檢測均采用氰基柱，故將色譜柱由C18柱換成氰基柱。結(jié)果苯扎氯銨和苯扎溴銨的峰形得到較大改善，但羥苯乙酯和羥苯丙酯出峰時間基本相同(圖2)。

圖1 色譜柱為C18柱時的高效液相色譜圖

圖2 色譜柱為氰基柱時的高效液相色譜圖

通過考察，最終確定用C18柱進行抑菌劑的初篩以及羥苯乙酯、羥苯丙酯的定量檢測，用氰基柱對苯扎氯銨和苯扎溴銨進行定量檢測。55批樣品的定性和定量考察結(jié)果見表1。

表1 妥布霉素滴眼液抑菌劑考察結(jié)果表

3 討論

各生產(chǎn)企業(yè)產(chǎn)品的抑菌劑用量均在常規(guī)用量范圍內(nèi)。從抑菌劑實際檢測量與標示量的偏差來看，按照美國藥典，藥品生產(chǎn)過程中的抑菌劑含量上限應不超過標簽中標示量的20%，生產(chǎn)和分析的允許偏差為±20%。按此要求判斷，18家生產(chǎn)企業(yè)的絕大部分產(chǎn)品的抑菌劑用量控制得較好，但個別廠家抑菌劑用量波動較大，小部分企業(yè)在抑菌劑的加入與否以及加入量的控制上隨意性較大，生產(chǎn)過程中的控制管理還是存在一定問題。

過去，我國在藥品研發(fā)、生產(chǎn)和質(zhì)量檢查全過程中一般很少對滴眼劑的抑菌劑進行研究、評價和控制，2005年版《中國藥典(二部)》對部分劑型如注射劑使用抑菌劑作了規(guī)定[1]，而英國藥典(2007年版)、美國藥典30版對滴眼劑中抑菌劑的使用、效力及含量測定均作出了具體規(guī)定。滴眼液中抑菌劑對眼表的損害日益引起眼科臨床工作者的重視，抑菌劑可破壞淚膜外側(cè)的脂質(zhì)層，還可損害角結(jié)膜細胞。防腐劑的這種負面影響可能會一定程度地抵消藥物的治療作用。因此，有必要通過選擇抑菌劑品種和控制用量來減少抑菌劑的不良反應;同時檢測滴眼劑中防腐劑，也是判斷其生產(chǎn)是否按規(guī)范進行的一個有效的補充控制手段。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(二部)[M].北京:化學工業(yè)出版社，2005:2.