熱板法觀察度冷丁與羅通定的鎮(zhèn)痛作用

王衛(wèi)華,董曉輝,劉衛(wèi)東,袁莉

（菏澤醫(yī)學(xué)?？茖W(xué)校,山東 菏澤 274000）

度冷丁為作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的阿片受體而發(fā)揮作用的人工合成品，是嗎啡的代用品，具有良好的鎮(zhèn)痛作用，是臨床常用的人工合成鎮(zhèn)痛藥。延胡素乙素是從延胡索中提取的一種天然植物藥，又名四氫巴馬汀，經(jīng)化學(xué)分析后，證明它的左旋體（即羅通定）是有效的旋光異構(gòu)體，具有良好的鎮(zhèn)痛作用，并對中樞神經(jīng)系統(tǒng)有一定程度的抑制作用；右旋體無明顯鎮(zhèn)痛作用［1］。臨床羅通定主要適用于消化系統(tǒng)疾病引起的內(nèi)臟痛（如胃潰瘍及十二指腸潰瘍的疼痛）、一般性頭痛、月經(jīng)痛、分娩止痛等。本實驗使用小鼠熱板法，觀察二者用藥后的鎮(zhèn)痛效果，比較鎮(zhèn)痛的強(qiáng)弱?，F(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 材料與方法

1.1 動物 20～25 g左右健康雌性小鼠，由菏澤醫(yī)專實驗動物中心提供。

1.2 藥物與器材 鹽酸哌替啶注射液（湖北宜藥集團(tuán)有限公司），硫酸羅通定注射液（廣西河豐藥業(yè)有限責(zé)任公司），YLS-6B智能熱板儀（濟(jì)南益延科技發(fā)展有限公司）。

1.3 實驗方法

1.3.1 原理 熱板法鎮(zhèn)痛實驗是一個經(jīng)典的篩選鎮(zhèn)痛藥的實驗，其原理是將小白鼠放入55±0.1℃恒溫水浴鍋內(nèi)，小白鼠受熱刺激后可出現(xiàn)舔后足的反應(yīng)，測定熱痛反應(yīng)時間（痛閾）；鎮(zhèn)痛藥可提高痛閾，延長熱痛反應(yīng)時間［2］。

1.3.2 熱板溫度 參照藥理實驗方法學(xué)熱板法，調(diào)節(jié)溫度水浴恒定于55±0.1℃

1.3.3 動物篩選 將小鼠放入燒杯內(nèi)立即用秒表記錄時間，密切觀察小鼠反應(yīng)，以舔后足為痛覺指標(biāo)。凡在30 s內(nèi)不舔后足或痛閾小于10 s者及喜跳躍的小鼠均應(yīng)棄用。篩選合格小鼠30只。

1.3.4 測正常痛閾值 將小鼠隨即分為三組，每組10只。各測2次痛閾（間隔10 min），取平均值作為小鼠基礎(chǔ)痛閾即給藥前的正常痛閾。

1.3.5 給藥 甲組腹腔注射0.25%度冷丁0.1 ml/10g，乙組腹腔注射0.25%羅通定0.1 ml/10g，丙組腹腔注射生理鹽水0.1 ml/10g。

1.3.6 測痛閾值 分別在注射藥后15、30、60 min各測痛閾值一次，并記錄痛閾值。對60 s內(nèi)不舔足的小鼠應(yīng)立即取出來，痛閾按60 s計算。以免造成小鼠損傷。

1.3.7 統(tǒng)計學(xué)處理 所有統(tǒng)計數(shù)據(jù)均以x-±s表示，原始數(shù)據(jù)先做方差齊性檢驗，組內(nèi)比較采用自身配對檢驗，組間比較采用團(tuán)體比較t檢驗，。

2 結(jié)果

5 min之前，兩者鎮(zhèn)痛效果沒有顯著性差異，兩藥還沒有充分發(fā)揮作用；在15 min左右，度冷丁的鎮(zhèn)痛效果比較理想；15～30 min左右，羅通定的鎮(zhèn)痛作用比度冷丁有效。見表1。

表1 度冷丁、羅通定對小鼠痛閾的影響(s，x-±s)

3 討論

疼痛刺激使感覺神經(jīng)末梢興奮并釋放興奮性遞質(zhì)（可能為P物質(zhì)），該遞質(zhì)與接收神經(jīng)元上的受體結(jié)合，將痛覺沖動傳入腦內(nèi)。感覺神經(jīng)元末梢上存在阿片肽受體，內(nèi)源性鎮(zhèn)痛物質(zhì)阿片肽從相應(yīng)的神經(jīng)元釋放后，激動感覺神經(jīng)末梢的阿片受體，抑制P物質(zhì)釋放而起鎮(zhèn)痛作用[3]。度冷丁的鎮(zhèn)痛機(jī)制即是模擬內(nèi)源性鎮(zhèn)痛機(jī)制，興奮阿片受體，抑制感覺神經(jīng)末梢釋放P物質(zhì)，阻斷痛覺沖動傳導(dǎo)，產(chǎn)生中樞性鎮(zhèn)痛作用[4]。度冷丁是經(jīng)典的麻醉性鎮(zhèn)痛藥,因鎮(zhèn)痛作用大且持久而被臨床常用,但度冷丁反復(fù)使用后易產(chǎn)生成癮性，臨床上一般用于急性劇痛。

羅通定為四氫巴?。ㄗ笮?，具有良好的鎮(zhèn)痛作用，并伴有鎮(zhèn)靜、安定和催眠作用，進(jìn)入中樞后優(yōu)先阻滯腦內(nèi)（多巴胺（DA）受體最豐富的腦區(qū)的D2受體亞型，然后通過這些神經(jīng)核與下丘腦弓狀核發(fā)生神經(jīng)連接，由此與內(nèi)啡肽中央導(dǎo)水管灰質(zhì)內(nèi)源性抗痛系統(tǒng)相聯(lián)系，加強(qiáng)腦干部位的抗痛功能，并抑制脊髓背角水平的致痛信息進(jìn)人腦內(nèi)，增強(qiáng)阿片肽的功能，最終達(dá)到鎮(zhèn)痛目的。羅通定阻斷腦內(nèi)DA受體，抑制痛覺傳入和痛反應(yīng)，增加與痛覺有關(guān)的特定腦區(qū)域腦腓肽原和內(nèi)腓肽原的mRNA的表達(dá)，促進(jìn)腦腓肽、內(nèi)腓肽的釋放。

在整個實驗過程中，度冷丁組和羅通定組的小鼠與對照組的小鼠的痛閾值有顯著性差異（P＜0.05）。在5 min時，度冷丁組小鼠的痛閾值與羅通定組小鼠的痛閾值無顯著性差異（P＞0.05）；15 min時，觀察記錄到度冷丁組小鼠的痛閾值與羅通定組小鼠的痛閾值有顯著性差異（P＜0.05），其中度冷丁組小鼠的痛閾值高；30 min時，觀察記錄到度冷丁組小鼠的痛閾值與羅通定組小鼠的痛閾值有顯著性差異（P＜0.05）,其中羅通定小鼠的痛閾值稍高。在本次試驗中，5 min之前，兩者鎮(zhèn)痛效果沒有顯著性差異，兩藥還沒有充分發(fā)揮作用；在15 min左右，度冷丁的鎮(zhèn)痛效果比較理想；15～30 min，羅通定的鎮(zhèn)痛作用比度冷丁有效。說明度冷丁的作用時間較短，在試驗中，15 min達(dá)到作用高峰。所以，開始時，度冷丁的作用強(qiáng)度比羅通定好；過了一段時間后度冷丁的作用強(qiáng)度比羅通定弱。

［1］王云嬌，李武毅，張永云.羅通定片鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜作用的實驗研究［J］.中藥材，2006，（07）：713-714.

［2］徐叔云，卞如濂，陳修，等.藥理試驗方法學(xué)［M］.第2版，北京：人民衛(wèi)生出版社，1981：506-507.

[3] 李秀芹，楊騰飛，張可璇，等.羅通定協(xié)同哌替啶鎮(zhèn)痛作用的實驗研究[J].徐州醫(yī)學(xué)院學(xué)報.2009，29(5):319-320.

[4] 楊寶峰,蘇定馮.藥理學(xué)[M].第6版，北京:人民衛(wèi)生出版社,2007:178-179.