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    急性力竭運(yùn)動(dòng)對(duì)青少年田徑運(yùn)動(dòng)員血漿游離DNA的影響

    2011-01-02 08:58:54王勇傅博朱榮39
    體育學(xué)刊 2011年5期
    關(guān)鍵詞:力竭時(shí)程機(jī)能

    王勇,傅博,朱榮39

    (1.濰坊學(xué)院 體育學(xué)院,山東 濰坊 261061;2.遼寧省足球運(yùn)動(dòng)管理中心,遼寧 沈陽(yáng) 110081;3.溫州醫(yī)學(xué)院 體育科學(xué)學(xué)院,浙江 溫州 325035)

    急性力竭運(yùn)動(dòng)對(duì)青少年田徑運(yùn)動(dòng)員血漿游離DNA的影響

    王勇1,傅博2,朱榮329

    (1.濰坊學(xué)院 體育學(xué)院,山東 濰坊 261061;2.遼寧省足球運(yùn)動(dòng)管理中心,遼寧 沈陽(yáng) 110081;3.溫州醫(yī)學(xué)院 體育科學(xué)學(xué)院,浙江 溫州 325035)

    為探討急性力竭運(yùn)動(dòng)對(duì)青少年田徑運(yùn)動(dòng)員血漿游離DNA(cf-DNA)的影響,尋找運(yùn)動(dòng)員機(jī)能監(jiān)控的新標(biāo)記物。安排16名青少年田徑運(yùn)動(dòng)員在電動(dòng)跑臺(tái)上進(jìn)行一次急性遞增負(fù)荷力竭運(yùn)動(dòng),于運(yùn)動(dòng)前、運(yùn)動(dòng)后即刻、運(yùn)動(dòng)后15 min、30 min、1 h、2 h、3 h、4 h、12 h和24 h分別測(cè)定紅細(xì)胞壓積(HCT)、cf-DNA、血漿丙二醛(MDA)、肌酸激酶(CK)和肌紅蛋白(Mb)。用心率表監(jiān)控運(yùn)動(dòng)過(guò)程并記錄運(yùn)動(dòng)時(shí)間和心率,推算訓(xùn)練沖量(TRIMPS)。結(jié)果顯示:HCT在所有監(jiān)測(cè)時(shí)間點(diǎn)均無(wú)顯著性變化(P>0.05);cf-DNA在運(yùn)動(dòng)后即刻顯著性升高(P<0.01),30 min達(dá)峰值(P<0.01),4 h后降至安靜水平(P>0.05);血漿MDA、CK和Mb在運(yùn)動(dòng)后即刻均顯著性升高(P<0.05、P<0.01、P<0.01),并一直持續(xù)到運(yùn)動(dòng)后24 h(P<0.01、P<0.05、P<0.01)。TRIMPS與運(yùn)動(dòng)后15 min和30 min時(shí)cf-DNA水平呈顯著正相關(guān)(分別為r=0.55,P<0.01;r=0.64,P<0.05)。結(jié)果說(shuō)明:cf-DNA是組織損傷早期標(biāo)志物,可作為運(yùn)動(dòng)員機(jī)能監(jiān)控的新指標(biāo)。

    運(yùn)動(dòng)生物化學(xué);力竭運(yùn)動(dòng);血漿游離DNA;機(jī)能監(jiān)控;運(yùn)動(dòng)員

    機(jī)能監(jiān)控是運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練的關(guān)鍵組成部分,是運(yùn)動(dòng)員取得良好訓(xùn)練效果和優(yōu)異比賽成績(jī)的重要保障??蒲腥藛T和教練員不斷探索新的方法和標(biāo)記物,以便更科學(xué)地監(jiān)控運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練[1-2]。近年來(lái),由于PCR及其相關(guān)分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展,可在體液中定量并分析含量極少的游離DNA,稱為循環(huán)DNA(circulation DNA),即存在于血漿或血清、腦脊液及滑膜液等體液中的細(xì)胞外DNA,其中存在于血漿中的游離 DNA稱為血漿游離DNA(cell-free plasma DNA,cf-DNA)[3-4]。凋亡以及壞死細(xì)胞的DNA釋放入血即形成cf-DNA,它已成為臨床醫(yī)學(xué)中多種疾病(包括腫瘤、創(chuàng)傷、妊娠相關(guān)疾病、感染性疾病、心肌梗死等)早期診斷、病情監(jiān)測(cè)、療效及預(yù)后評(píng)估的一種重要的分子標(biāo)志物[3-4]。由于cf-DNA是一項(xiàng)無(wú)創(chuàng)性檢測(cè)指標(biāo),因此有望在運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)中得到應(yīng)用。本研究旨在探討一次急性力竭運(yùn)動(dòng)對(duì)青少年田徑運(yùn)動(dòng)員cf-DNA的影響,同時(shí)將其與傳統(tǒng)機(jī)能監(jiān)控指標(biāo)丙二醛(malondialdehyde,MDA)、肌酸激酶(creatine kinase,CK)和肌紅蛋白(myoglobin,Mb)進(jìn)行比較,以期尋找運(yùn)動(dòng)員機(jī)能監(jiān)控的新的敏感標(biāo)記物。

    1 研究對(duì)象與方法

    1.1 研究對(duì)象

    16名溫州體育運(yùn)動(dòng)學(xué)校的男子田徑運(yùn)動(dòng)員自愿參加本實(shí)驗(yàn),年齡(11.6±2.6)歲,身高(1.74±0.14) cm,體重(68.6±5.4) kg,訓(xùn)練年限(4.1±0.8)年。所有運(yùn)動(dòng)員身體健康,無(wú)心血管疾病、急慢性感染、骨關(guān)節(jié)疾病及其他疾病史,無(wú)吸煙、飲酒等不良嗜好。

    1.2 運(yùn)動(dòng)方案

    實(shí)驗(yàn)前72 h內(nèi)受試者均未進(jìn)行過(guò)劇烈運(yùn)動(dòng),實(shí)驗(yàn)前一晚至少睡眠8 h。清晨空腹采靜脈血5 mL后休息15 min,然后在電動(dòng)跑臺(tái)上進(jìn)行遞增負(fù)荷實(shí)驗(yàn),起始負(fù)荷為5 km/h,持續(xù)3 min,之后每3 min遞增1 km/h,直至力竭。整個(gè)過(guò)程用遙測(cè)心率表(Polar,S810,芬蘭)記錄心率和運(yùn)動(dòng)時(shí)間。運(yùn)動(dòng)后即刻以及運(yùn)動(dòng)后(休息) 15 min、30 min、1 h、2 h、3 h、4 h、12 h和24 h靜脈采血5 mL,EDTA抗凝。

    1.3 運(yùn)動(dòng)負(fù)荷的量化——訓(xùn)練沖量(TRIMPS training impulses)

    采用 Banister等[5-6]提出的計(jì)算運(yùn)動(dòng)沖量的方法,公式為:運(yùn)動(dòng)沖量=D×X×K。其中,D=運(yùn)動(dòng)時(shí)間(min),X=訓(xùn)練強(qiáng)度=(運(yùn)動(dòng)時(shí)平均心率-安靜心率)/(最高心率-安靜心率),K=訓(xùn)練強(qiáng)度加權(quán)指數(shù)=eαx(e為歐拉常數(shù),是自然對(duì)數(shù)的底≈2.718 28;α=1.92)。

    運(yùn)動(dòng)時(shí)間、安靜心率、運(yùn)動(dòng)時(shí)平均心率和最高心率均可通過(guò)心率表獲得。

    1.4 MDA、CK和Mb的測(cè)定

    取300 μL全血,測(cè)定HCT(紅細(xì)胞壓積)(全血分析儀,MICROS60,美國(guó));其余全血在低溫下(4 ℃)離心 15 min(3 000 r/min),取血漿測(cè)試各生化指標(biāo)。MDA、CK和Mb使用試劑盒(南京建成生物工程研究所)并嚴(yán)格按照操作說(shuō)明進(jìn)行,測(cè)試儀器:MD-100半自動(dòng)生化分析儀(日本)。

    1.5 cf-DNA的測(cè)定[7-8]

    1)血漿DNA提取和純化。

    取離心后的血漿400 μL,嚴(yán)格按照QIAamp DNA Blood Mini Kit(Qiagen,德國(guó))的操作步驟進(jìn)行cf-DNA的提取,然后用50 μL雙蒸水(不含RNA酶和DNA酶)進(jìn)行洗脫。

    2)cf-DNA定量分析。

    取10 μL cf-DNA置于透明載板,與1︰3 000熒光染料SYBR green I等比例稀釋并充分混勻后置于紫外及可見(jiàn)光成像分析系統(tǒng)(Bio-Rad,美國(guó))中,在激發(fā)光波長(zhǎng)為345 nm、吸收波長(zhǎng)500 nm條件下,讀取其發(fā)光強(qiáng)度。將檢測(cè)所得不同樣本DNA的發(fā)光強(qiáng)度代入根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)含量DNA的發(fā)光強(qiáng)度所作的回歸方程中,分別計(jì)算相應(yīng)的DNA質(zhì)量濃度。如果樣本發(fā)光強(qiáng)度超過(guò)標(biāo)準(zhǔn)DNA發(fā)光強(qiáng)度范圍,則將樣本稀釋后再進(jìn)行定量檢測(cè),直到所測(cè)值在標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量濃度范圍內(nèi)。每次對(duì)同一血漿樣本檢測(cè)3次,取其平均值,單位為pg/μL。

    1.6 統(tǒng)計(jì)方法

    所有數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,指標(biāo)各時(shí)間點(diǎn)的比較采用重復(fù)測(cè)量的方差分析,兩兩比較采用Bonfferoni檢驗(yàn)。對(duì)TRIMPS和cf-DNA進(jìn)行簡(jiǎn)單相關(guān)分析并計(jì)算 Pearson相關(guān)系數(shù)?。P<0.05為顯著性水平,P<0.01為非常顯著水平。用SPSS 14.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。

    2 結(jié)果及分析

    2.1 各指標(biāo)的時(shí)程變化

    HCT在所有監(jiān)測(cè)時(shí)間點(diǎn)均無(wú)顯著性變化(P>0.05)(圖 1),因此,運(yùn)動(dòng)干預(yù)與取血測(cè)試并沒(méi)有造成機(jī)體的明顯血漿丟失和血液濃縮,所有濃度指標(biāo)均可較為準(zhǔn)確反映其實(shí)際變化。

    cf-DNA在運(yùn)動(dòng)后即刻顯著性升高(P<0.01),30 min達(dá)峰值(P<0.01),隨后逐漸下降,運(yùn)動(dòng)后3 h仍高于基礎(chǔ)水平(P<0.01),運(yùn)動(dòng)后4 h降至基礎(chǔ)值(P>0.05),并一直維持到24 h(P>0.05)(圖2)。

    MDA在運(yùn)動(dòng)后即刻明顯升高(P<0.05),隨后繼續(xù)升高,并在運(yùn)動(dòng)后24 h出現(xiàn)峰值(P<0.01)(圖3)。

    CK的變化與 MDA相似,即運(yùn)動(dòng)后即刻升高(P<0.01),運(yùn)動(dòng)后24 h出現(xiàn)峰值(P<0.05)(圖4)。

    Mb在運(yùn)動(dòng)后即刻升高(P<0.01),運(yùn)動(dòng)后4 h出現(xiàn)峰值(P<0.05),隨后逐漸下降,但在運(yùn)動(dòng)后24 h仍高于基礎(chǔ)水平(P<0.01)(圖5)。

    圖1 HCT在運(yùn)動(dòng)前后的時(shí)程變化

    圖2 cf-DNA在運(yùn)動(dòng)前后的時(shí)程變化

    圖3 MDA在運(yùn)動(dòng)前后的時(shí)程變化

    圖4 CK在運(yùn)動(dòng)前后的時(shí)程變化

    圖5 Mb在運(yùn)動(dòng)前后的時(shí)程變化

    2.2 相關(guān)分析

    相關(guān)分析顯示,TRIMPS與運(yùn)動(dòng)后15 min和30 min時(shí)cf-DNA水平呈顯著正相關(guān)(分別為r=0.55,P<0.01;r=0.64,P<0.05)。運(yùn)動(dòng)之前與其他的時(shí)間點(diǎn)相關(guān)均無(wú)顯著性。

    3 討論

    劇烈運(yùn)動(dòng)時(shí)肌肉暫時(shí)性缺血,運(yùn)動(dòng)后恢復(fù)期血流再灌注(缺血-再灌注),可出現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)鈣超載、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)以及自由基產(chǎn)生增多,繼而發(fā)生DNA的氧化損傷和降解[9-10]。同時(shí),運(yùn)動(dòng)還通過(guò)機(jī)械作用造成肌纖維的損傷,表現(xiàn)為肌痛、無(wú)力、血清肌肉蛋白升高等。上述代謝機(jī)制和機(jī)械機(jī)制可導(dǎo)致肌細(xì)胞的凋亡甚至壞死[11]。本研究中MDA在運(yùn)動(dòng)后顯著性升高,證實(shí)機(jī)體產(chǎn)生自由基增多;運(yùn)動(dòng)后CK、Mb升高,表明肌細(xì)胞受到運(yùn)動(dòng)誘導(dǎo)的缺血再灌注損傷使其破壞增加[12],其原因可能是自由基攻擊DNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)(特別是膜的脂質(zhì)雙層),從而產(chǎn)生氧化損傷所致[13]。DNA損傷(核苷酸氧化、雙鏈斷裂或DNA交聯(lián))后“事件”為DNA缺陷修復(fù)、凋亡和壞死[14-15]。DNA缺陷修復(fù)會(huì)造成DNA序列發(fā)生改變,引起代謝紊亂甚至癌癥[16]。非特異性DNA修復(fù)酶切除損傷部位并釋放DNA片段[17],堿基特異性的修復(fù)酶切除相應(yīng)的堿基[18],這些產(chǎn)物釋放入血形成cf-DNA。

    cf-DNA最早發(fā)現(xiàn)于癌癥患者的血循環(huán)中[19],隨后證實(shí)與多種臨床疾患相關(guān)聯(lián)。因此,cf-DNA已成為預(yù)測(cè)和診斷多種疾病的分子標(biāo)志物。例如,創(chuàng)傷后發(fā)生多器官功能紊亂綜合征的患者往往在創(chuàng)傷發(fā)生 15~30 min后cf-DNA即顯著升高,并持續(xù)數(shù)天;而無(wú)創(chuàng)傷并發(fā)癥的患者cf-DNA往往出現(xiàn)較晚、升高幅度較低、持續(xù)時(shí)間較短[20]。癌癥患者基因發(fā)生突變,血液中出現(xiàn)相應(yīng)的突變DNA、癌基因擴(kuò)增產(chǎn)物以及腫瘤相關(guān)的病毒DNA[21]。盡管cf-DNA與疾病關(guān)系的具體機(jī)制尚不明確,但諸多研究已證實(shí),cf-DNA來(lái)自于凋亡或壞死的組織細(xì)胞[4]。在本研究中,力竭運(yùn)動(dòng)后cf-DNA急劇增加同時(shí)伴隨血清CK與Mb升高,提示骨骼肌細(xì)胞凋亡、DNA片段的釋放可能是cf-DNA的主要來(lái)源,但不是唯一來(lái)源。一些研究表明,運(yùn)動(dòng)后發(fā)生凋亡的腎小管細(xì)胞[22]和白細(xì)胞[23]均是cf-DNA的來(lái)源。因此,運(yùn)動(dòng)后cf-DNA的升高是多種類型細(xì)胞凋亡的結(jié)果。

    cf-DNA在運(yùn)動(dòng)后的時(shí)程變化規(guī)律罕有報(bào)道。Atamaniuk等[23]觀察了一次力量訓(xùn)練對(duì) cf-DNA的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn)訓(xùn)練后即刻cf-DNA顯著升高,2 h后顯著下降;Fatouros等對(duì)17名普通人進(jìn)行為期12周的力量訓(xùn)練干預(yù),cf-DNA在訓(xùn)練后72 h仍高于安靜水平。這可能與不同的研究對(duì)象、運(yùn)動(dòng)方式、運(yùn)動(dòng)周期和測(cè)試時(shí)間等有關(guān),但上述研究未檢測(cè)運(yùn)動(dòng)后即刻至運(yùn)動(dòng)后2 h這段時(shí)間內(nèi)cf-DNA的變化。

    本研究以田徑運(yùn)動(dòng)員為受試對(duì)象,采用力竭運(yùn)動(dòng)模型,運(yùn)動(dòng)后的測(cè)量時(shí)間點(diǎn)較為密集,從而揭示了cf-DNA在力竭運(yùn)動(dòng)后的變化規(guī)律。cf-DNA在運(yùn)動(dòng)后即刻顯著升高,30 min達(dá)峰值,隨后逐漸下降,運(yùn)動(dòng)后3 h仍高于基礎(chǔ)水平,運(yùn)動(dòng)后4 h降至基礎(chǔ)值,時(shí)間上比Atamaniuk等的研究結(jié)果稍滯后,可能與本研究所采用的力竭模型有關(guān)。cf-DNA在運(yùn)動(dòng)后即迅速消除,這與傳統(tǒng)機(jī)能監(jiān)控指標(biāo)MDA、CK和Mb在運(yùn)動(dòng)后顯著升高并一直持續(xù)到24 h的時(shí)程變化規(guī)律不同,可能與肝臟和腎臟對(duì)cf-DNA的快速代謝有關(guān)[4],也可能是降解的 DNA片段從凋亡或壞死細(xì)胞釋放入血的機(jī)制不同[23],具體原因尚不清楚。上述現(xiàn)象提示cf-DNA可能是監(jiān)測(cè)肌細(xì)胞損傷的早期、敏感、特異的預(yù)測(cè)與監(jiān)控指標(biāo)。

    TRIMPS與cf-DNA正相關(guān),說(shuō)明cf-DNA除了可用于監(jiān)測(cè)身體機(jī)能狀態(tài),還能反映訓(xùn)練負(fù)荷,即負(fù)荷越大,cf-DNA水平越高,可能是不同訓(xùn)練負(fù)荷造成機(jī)體損傷程度不同所致。Lo等[24]和Rainer等[25]分別證實(shí)了創(chuàng)傷與中風(fēng)患者組織損傷的程度與cf-DNA呈正相關(guān)關(guān)系,本研究在一定程度上也驗(yàn)證了上述結(jié)論。TRIMPS與運(yùn)動(dòng)后 30 min cf-DNA的相關(guān)系數(shù)最高(r=0.64),而且cf-DNA在運(yùn)動(dòng)后4 h迅速消退,提示訓(xùn)練后的測(cè)試時(shí)間是一個(gè)關(guān)鍵因素,因此用此指標(biāo)監(jiān)控訓(xùn)練負(fù)荷時(shí),應(yīng)在運(yùn)動(dòng)后30 min左右取血測(cè)定較為合理。

    本研究探討了力竭運(yùn)動(dòng)后cf-DNA的變化規(guī)律以及與訓(xùn)練負(fù)荷的關(guān)系,但仍有諸多問(wèn)題尚未解決。今后的研究需要進(jìn)一步探討運(yùn)動(dòng)誘導(dǎo)的cf-DNA的細(xì)胞來(lái)源和具體機(jī)制,不同運(yùn)動(dòng)方式、不同競(jìng)技項(xiàng)目以及不同機(jī)能狀態(tài)對(duì)cf-DNA的影響,揭示cf-DNA對(duì)運(yùn)動(dòng)反應(yīng)和適應(yīng)的規(guī)律,從而為運(yùn)動(dòng)員機(jī)能監(jiān)控提供敏感、無(wú)創(chuàng)的標(biāo)志物,為運(yùn)動(dòng)員取得良好訓(xùn)練效果和優(yōu)異比賽成績(jī)提供科研保障。

    cf-DNA是組織的損傷早期標(biāo)志物,可作為運(yùn)動(dòng)員機(jī)能監(jiān)控的新指標(biāo),但其時(shí)程變化規(guī)律不同于MDA、CK和Mb等傳統(tǒng)指標(biāo)。

    [1] 何子紅,胡揚(yáng). 體能訓(xùn)練個(gè)性化新指標(biāo)——基因標(biāo)記[J]. 中國(guó)運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)雜志,2010,29(5):597-606.

    [2] 郭興明,楊勇,肖守中,等. 運(yùn)動(dòng)員心功能評(píng)估新方法和新指標(biāo)的研究[J]. 中國(guó)應(yīng)用生理學(xué)雜志,2010,26(3):380-383.

    [3] 孫群,王德生. 游離DNA與臨床腫瘤的研究進(jìn)展[J]. 醫(yī)學(xué)綜述,2010,16(9):1348-1350.

    [4] Saukkonen K,Lakkisto P,Pettila V,et al. Cell-free plasma DNA as a predictor of outcome in severe sepsis and septic shock[J]. Clin Chem,2008,54(6):1000-1007.

    [5] Banister E W,Calvert T W. Planning for future performance:implications for long term training[J]. Can J Appl Sport Sci,1980,5(3):170-176.

    [6] Manzi V,Castagna C,Padua E,et al. Dose-response relationship of autonomic nervous system responses to individualized training impulse in marathon runners[J]. Am J Physiol Heart Circ Physiol,2009,296(6):H1:733-1740.

    [7] 劉麗榮. 上皮性卵巢癌患者血漿中的 cDNA水平變化及意義[J]. 山東醫(yī)藥,2010,50(34):93-94.

    [8] 今毅,鄭暉,韓冰. 循環(huán)DNA定量分析在乳腺癌診斷中的應(yīng)用[J]. 微循環(huán)學(xué)雜志,2007,17(4):62-63.

    [9] Wohlgemuth S E,Seo A Y,Marzetti E,et al. Skeletal muscle autophagy and apoptosis during aging: effects of calorie restriction and life-long exercise[J]. Exp Gerontol,2010,45(2):138-148.

    [10] 張桂忠,姜寧,張勇. 急性運(yùn)動(dòng)中骨骼肌線粒體氧化應(yīng)激機(jī)制研究[J]. 內(nèi)蒙古師范大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)漢文版,2009,38(3):337-340.

    [11] Brancaccio P,Lippi G,Maffulli N. Biochemical markers of muscular damage[J]. Clin Chem Lab Med,2010,48(6):757-767.

    [12] Goodman C,Henry G,Dawson B,et al. Biochemical and ultrastructural indices of muscle damage after a twenty-one kilometre run[J]. Aust J Sci Med Sport,1997,29(4):95-98.

    [13] Guachalla L M,Rudolph K L. ROS induced DNA damage and checkpoint responses:influences on aging?[J]. Cell Cycle,2010,9(20):4058-4060.

    [14] Chevion S,Moran D S,Heled Y,et al. Plasma antioxidant status and cell injury after severe physical exercise[J]. Proc Natl Acad Sci U S A,2003,100(9):5119-5123.

    [15] Ogonovszky H,Berkes I,Kumagai S,et al. The effects of moderate-strenuous-and over-training on oxidative stress markers,DNA repair,and memory,in rat brain[J]. Neurochem Int,2005,46(8):635-640.

    [16] Fehrenbach E,Northoff H. Free radicals,exercise,apoptosis,and heat shock proteins[J]. Exerc Immunol Rev,2001,7:66-89.

    [17] Kruger K,F(xiàn)rost S,Most E,et al. Exercise affects tissue lymphocyte apoptosis via redox-sensitive and Fas-dependent signaling pathways[J]. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol,2009,296(5):R1518-1527.

    [18] Lesher D T,Pommier Y,Stewart L,et al. 8-Oxoguanine rearranges the active site of human topoisomerase I[J]. Proc Natl Acad Sci U S A,2002,99(19):12102-12107.

    [19] Leon S A,Shapiro B,Sklaroff D M,et al. Free DNA in the serum of cancer patients and the effect of therapy[J]. Cancer Res,1977,37(3):646-650.

    [20] Lam N Y,Rainer T H,Chan L Y,et al. Time course of early and late changes in plasma DNA in trauma patients[J]. Clin Chem,2003,49(8):1286-1291.

    [21] 楊英俊,陳輝. 循環(huán)DNA的臨床應(yīng)用[J]. 生命的化學(xué),2009,26(6):822-825.

    [22] Podhorska-Okolow M , Dziegiel P ,Murawska-Cialowicz E,et al. Exercise-induced apoptosis in renal tubular cells of the rat[J]. Folia Morphol (Warsz),2004,63(2):213-216.

    [23] Atamaniuk J,Stuhlmeier K M,Vidotto C,et al. Effects of ultra-marathon on circulating DNA and mRNA expression of pro-and anti-apoptotic genes in mononuclear cells[J]. Eur J Appl Physiol,2008,104(4):711-717.

    [24] Lo Y M,Rainer T H,Chan L Y,et al. Plasma DNA as a prognostic marker in trauma patients[J]. Clin Chem,2000,46(3):319-323.

    [25] Rainer T H,Wong L K,Lam W,et al. Prognostic use of circulating plasma nucleic acid concentrations in patients with acute stroke[J]. Clin Chem,2003,49(4):562-569.

    Effects of acute exhaustive exercising on cell-free plasma DNA of teenage track and field athletes

    WANG Yong1,F(xiàn)U Bo2,ZHU Rong3
    (1.School of Physical Education,Weifang University,Weifang 261061,China;2.Liaoning Center of Football Administration,Shenyang 110081,China;3.School of Physical Education,Wenzhou Medical College,Wenzhou 325035,China)

    In order to probe into the effects of acute exhaustive exercising on cell-free plasma DNA of teenage track and field athletes, and to seek for a new marker for athlete performance monitoring, the authors arranged 16 teenage track and field athletes to do an acute exhaustive exercise on a power treadmill, tested their Hematocrit (HCT), Cf-DNA, plasma malondialdehyde (MDA), creatine kinase (CK) and myoglobin (Mb) respectively before exercising, immediately after exercising, at 15 min, 30 min, 1 h, 2 h, 3 h, 4 h, 12 h and 24 h after exercising, monitored the exercising process with a heat rate meter, recorded their exercising times and heart rates, calculated their exercising impulses (TRIMPS), and revealed the following findings: there was no significant change to HCT at all test times (P>0.05); cf-DNA increased significantly immediately after exercising (P<0.01), reached the peak value at 30 min (P<0.01), and lowered to the calm level at 4 h (P>0.05); plasma MDA, CK and Mb increased significantly immediately after exercising (P<0.05, P<0.01, P<0.01), and maintained up to 24 h after exercising (P<0.01, P<0.05, P<0.01); TRIMPS was positively correlative significantly with the cf-DNA level at 15 min and 30 min after exercising (r=0.55, P<0.01 and r=0.64, P<0.05 respectively). The said findings indicated that cf-DNA is an early marker for tissue damage, can be used as a new index for athlete performance monitoring.

    sports biochemistry;exhaustive exercise;cell-free plasma DNA;performance monitoring;athlete

    王勇(1979-),男,講師,碩士,研究方向:體育教育與健康。通訊作者:朱榮副教授。

    G804.7

    A

    1006-7116(2011)05-0127-05

    2011-01-25

    浙江省教育廳科研計(jì)劃項(xiàng)目(Y201017123)。

    ·體育社會(huì)科學(xué)·

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