何首烏多糖降血脂作用的研究

翟 蓉 呂麗爽 金邦荃

（南京師范大學(xué)金陵女子學(xué)院食品科學(xué)系，江蘇 南京 210097）

何首烏多糖降血脂作用的研究

翟 蓉 呂麗爽 金邦荃

（南京師范大學(xué)金陵女子學(xué)院食品科學(xué)系，江蘇 南京 210097）

采用水提何首烏多糖和堿提何首烏多糖對高脂模型小鼠進(jìn)行試驗，研究何首烏多糖對高脂模型小鼠總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL－C）和脂蛋白脂酶（LPL）、肝脂酶（HL）以及總脂酶（LA）的影響。結(jié)果表明，何首烏多糖劑量組小鼠的TC、TG和AI均不同程度低于高脂模型組（P＜0.05），而 HDL－C、LPL、HL和LA顯著高于高脂模型組（P＜0.05），表明何首烏多糖確具有顯著的降血脂作用。

何首烏多糖；降血脂；作用

全球每年約有1 200萬人死于心腦血管疾病和腦中風(fēng)，高脂血癥引起動脈粥樣硬化是造成冠心病、高血壓和血管疾病的主要原因。中國人群血脂異常比例較高，中國18歲及以上成人血脂異常總患病率達(dá)18.6%，即血脂異常患者己達(dá)1.6億；而且血脂異常的發(fā)病率正趨向年輕化，中年人與老年人患病率相近［1－2］。這主要是由于中國人的飲食習(xí)慣造成的，如高脂飲食、高糖飲食及酗酒等，已經(jīng)嚴(yán)重威脅了中國人民的健康。因此研究和開發(fā)有效抑制高脂血癥的藥物和保健食品是目前醫(yī)學(xué)領(lǐng)域所面臨的一項重要課題。

何首烏是中國的傳統(tǒng)中藥。《本草綱目》記載：此物性溫味苦澀，苦補(bǔ)腎，溫補(bǔ)肝，澀能收斂精氣［3］。目前已有近百種植物多糖被分離應(yīng)用，多糖作為一種新型的，無毒副作用的天然活性成分已成為醫(yī)藥界研究開發(fā)的熱點［4］。近年來文獻(xiàn)［5－7］報道了何首烏粗多糖在抗氧化、增強(qiáng)免疫力、抗老年癡呆等方面的生物活性。而何首烏多糖降血脂的作用，尚未有報道。本試驗通過飼喂高脂飲食建立小鼠高血脂癥模型，觀察了何首烏多糖對高脂血癥的調(diào)節(jié)作用，為何首烏多糖進(jìn)一步應(yīng)用提供參考依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料與主要試劑

1.1.1 材料

灌服液的配置：水提何首烏多糖（W－PMP），純度為85.2%，白色粉末；純度為69.7%，淺棕色粉末，均為本實驗室自制。使用時分別將其溶于蒸餾水中，按50mg/（kg·d）和200mg/（kg·d）體重比例配制成溶液。

1.1.2 試驗動物

ICR健康清潔級雄性小鼠：4周齡，體重為18～22g，共60只，南京醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心。

1.1.3 主要試劑

血清總膽固醇（TC）測定試劑盒、血清甘油三酯（TG）測定試劑盒、高密度脂蛋白（HDL－C）測定試劑盒：溫州東歐津瑪聲望科技有限公司；

總脂酶測定試劑盒：南京建成生物工程研究所；

膽固醇：中國惠興生化試劑有限公司；

牛膽鹽：北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司；

豬油、蛋黃：市售。

1.2 試驗儀器

電子天平：YP2001N，上海精密科學(xué)儀器有限公司；

紫外可見分光光度計：Spectrumlab 54，上海棱光技術(shù)有限公司；

臺式高速離心機(jī)：EBA 21，德國赫提馳（Hettich）公司；數(shù)顯恒溫水浴鍋：HH－6，金壇市富華儀器有限公司。

1.3 試驗方法

1.3.1 日糧組成 基礎(chǔ)飼料由南京醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供，符合國家動物飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)，其主要營養(yǎng)成分見表1。高脂飼料由實驗室自行配置，配方見表2。

表1 基礎(chǔ)飼料的主要營養(yǎng)成分Table 1 Composition of the basal diet

表2 試驗飼料配方Table 2 Composition of the experimental diet

1.3.2 試驗小鼠分組 將試驗小鼠用普通飼料預(yù)飼養(yǎng)1周后，稱量小鼠體重，按體重隨機(jī)分為6組（空白對照組、高脂模型組、W－PMP低、高劑量組和A－PMP低、高劑量組），每組10只。試驗期間，對照組飼喂基礎(chǔ)飼料，自由飲水，其余5組均飼喂高脂飼料，劑量組同時灌胃何首烏多糖溶液。每天記錄進(jìn)食量，每周稱重1次，連續(xù)28d后禁食16h，斷尾取血，離心（3 000r/min，10min）分離血清，待測。

1.3.3 血清和肝臟樣品制備

（1）血清樣品：小鼠剪尾取血，收集血液于3 000r/min下離心10min分離血清，于－20℃保存待測。

（2）肝臟樣品：宰殺后取出肝臟，生理鹽水清洗并用保鮮袋包裹，于－80℃冰箱保存待測。

1.4 試驗參數(shù)

1.4.1 血清中TG、TC和 HDL－C含量的測定 按試劑盒說明書方法測定。

1.4.2 肝臟中LPL、HL、LA含量的測定 稱取肝臟1g，按1∶9（m∶V）加入生理鹽水冰浴勻漿后，于2 500r/min離心10min，取上清液（即10%勻漿）按試劑盒方法測定。

1.4.3 動脈硬化指數(shù)按式（1）［8］計算，內(nèi)臟體重比按式（2）～（4）計算：

1.4.4 試驗數(shù)據(jù)處理 采用SPSS13.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計分析，結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 多糖對高脂飲食小鼠體重的影響

由表3可知，隨著試驗時間的延長，各組小鼠正常生長，體重均有所增加。高脂模型組的小鼠體重較空白對照組有顯著性差異，平均增長了52.2%，表明試驗造模成功。通過方差分析表明：對照高脂模型組，各何首烏多糖劑量組體重均有所下降，W－PMP低劑量組和 W－PMP高劑量組量效關(guān)系存在顯著性差異，其中W－PMP高劑量組小鼠的體重基本達(dá)到正常水平，量效關(guān)系變化不顯著；A－PMP低劑量組和A－PMP高劑量組量效關(guān)系存在顯著性差異，其中A－PMP高劑量組與W－PMP劑量組相比無顯著差異性。

表3 何首烏多糖對高脂飲食小鼠體重的影響?Table 3 Effects of PMP on body weight of mice with hyperlipemia（，n＝10）

表3 何首烏多糖對高脂飲食小鼠體重的影響?Table 3 Effects of PMP on body weight of mice with hyperlipemia（，n＝10）

? 同一列標(biāo)有不同字母的表示差異顯著（P＜0.05）。

組別 劑量 入試體重/g 結(jié)束體重/g 體增重/g空白對照組高脂模型組0 25.1±1.20 35.8±1.69a15.9±1.96 a水提粗多糖組0 25.4±1.26 44.3±2.63b 24.2±3.74b 50 25.2±1.03 39.1±2.47c 19.1±3.18c 200 25.3±0.95 36.6±1.96a16.4±2.07a堿提粗多糖組低高低高50 25.1±1.20 41.5±2.88c 21.4±3.57bc 200 25.3±1.34 38.3±1.83cd 18.3±2.21 cd

2.2 多糖對高脂飲食小鼠攝食量的影響

通過控制小鼠飲食，觀察每天飼料的剩余量，計算每只小鼠的日攝食量。由圖1可知，與空白對照組相比，高脂飲食組的小鼠攝食量均有下降，其中高脂模型組有顯著下降；水提低、高劑量組無顯著變化；堿提低劑量組有明顯降低，堿提高劑量組無顯著變化。

2.3 多糖對高脂飲食小鼠脂代謝的影響

由表4可知，高脂模型組的TC、TG與空白對照組相比，均有顯著性升高，HDL－C顯著降低，說明經(jīng)過連續(xù)4周的高脂飼料的飼喂可使小鼠的血脂水平明顯升高，高脂飲食小鼠模型建立成功。

與高脂模型組相比，各何首烏多糖劑量組的TC、TG和AI含量均有不同程度的下降，HDL－C有一定程度的升高。

圖1 何首烏多糖對高脂飲食小鼠攝食量的影響Figure 1 Effects of PMP on RDA of mice with hyperlipemia

W－PMP劑量組與高脂模型組相比，TC含量顯著性降低，其中 W－PMP高劑量組TC含量接近于正常水平；APMP劑量組與高脂模型組相比，TC含量顯著性降低；其中A－PMP高劑量組與W－PMP低、高劑量組相比，顯著性差異不明顯。W－PMP劑量組與高脂模型組相比，TG含量顯著性降低，且兩組均接近于正常水平，量效關(guān)系差異不顯著APMP劑量組與高脂模型相比，高劑量組的TG含量顯著性降低；且A－PMP高劑量組與 W－PMP低、高劑量組相比，顯著性差異不明顯。W－PMP劑量組與高脂模型相比，HDL－C含量顯著性升高，但W－PMP低、高劑量組之間差別不顯著，表明量效關(guān)系差異不明顯；A－PMP劑量組與高脂模型相比，高劑量組的HDL－C含量顯著性升高；且A－PMP低、高劑量組之間差別顯著，表明量效關(guān)系顯著；A－PMP高劑量組與 WPMP高劑量組相比，差異性不顯著。W－PMP劑量組與高脂模型組相比，AI指數(shù)顯著性降低，其中 W－PMP低劑量組的AI接近于正常水平；A－PMP劑量組與高脂模型組相比，AI指數(shù)顯著性降低，其中A－PMP低、高劑量組與W－PMP高劑量組相比，有顯著性差異。

表4 何首烏多糖對高脂飲食小鼠TC、TG、HDL－C、AI的影響?Table 4 Effects of PMP on serum TC 、 TG、HDL－C、AI of mice with hyperlipemia（，n＝10）

表4 何首烏多糖對高脂飲食小鼠TC、TG、HDL－C、AI的影響?Table 4 Effects of PMP on serum TC 、 TG、HDL－C、AI of mice with hyperlipemia（，n＝10）

? 同一列標(biāo)有不同字母的表示差異顯著（P＜0.05）。

水提多糖組 堿提多糖組組別 空白對照組 高脂模型組低高低高0 0 50 200 50 200 TC含量/（mmol·L－1） 3.08±0.28a 5.52±0.60b 3.80±0.48c 3.24±0.49a 4.25±0.55c 3.53±0.37cd TG含量/（mmol·L－1） 1.08±0.31a 1.65±0.53b 1.26±0.25a 1.10±0.14ac 1.33±0.11bc 1.24±0.12acd HDL－C含量/（mmol·L－1） 1.26±0.33a 0.70±0.29b 0.98±0.27c 1.12±0.22ac 0.90±0.19bc 1.05±0.24ade AI 1.55±0.48a 7.84±2.84b 3.18±1.24c 1.97±0.65a 3.98±1.43c 2.54±0.99劑量/（mg·kg－1·d－1）cd

2.4 多糖對高脂飲食小鼠肝臟中LPL、HL和LA的影響

由表5可知，與空白對照組相比，高脂模型組的LPL、HL和LA含量均有顯著性升高。對照高脂模型組，各何首烏多糖給藥組的LPL含量均有不同程度的升高，W－PMP低劑量組與高劑量組之間差別不顯著，表明量效關(guān)系變化不明顯；A－PMP低劑量組與高劑量組之間差別顯著，量效關(guān)系存在顯著性差異。各何首烏多糖給藥組的HL和LA含量較高脂模型組也均有不同程度的升高，其中 W－PMP低、高劑量組之間差別顯著，量效關(guān)系存在顯著性差異；A－PMP低劑量組與高劑量組之間差別變化不顯著，表明量效關(guān)系差異不明顯。W－PMP高劑量組與A－PMP低、高劑量組之間差異顯著。

表5 何首烏多糖對高脂飲食小鼠肝臟中LPL、HL和LA含量的影響?Table 5 Effects of PMP on Liver LPL、HL、LA of mice with hyperlipemia（，n＝10）

表5 何首烏多糖對高脂飲食小鼠肝臟中LPL、HL和LA含量的影響?Table 5 Effects of PMP on Liver LPL、HL、LA of mice with hyperlipemia（，n＝10）

? 同一列標(biāo)有不同字母的表示差異顯著（P＜0.05）。

水提多糖組 堿提多糖組組別 空白對照組 高脂模型組低高低高0 0 50 200 50 200 LPL/（U·mg－1·prot－1） 0.733±0.028a0.843±0.151b 1.105±0.181c 1.244±0.296c 0.985±0.124c 1.061±0.190cde HL/（U·mg－1·prot－1） 0.729±0.028a0.848±0.159b 1.120±0.167c 1.301±0.177d 0.982±0.124e 1.112±0.213ce LA/（U·mg－1·prot－1） 1.463±0.054a1.691±0.301b 2.225±0.182c 2.545±0.323d 1.967±0.247e 2.173±0.207劑量/（mg·kg－1·d－1）ce

2.5 多糖對高脂飲食小鼠臟器指數(shù)的影響

長期的高脂飼料可導(dǎo)致受試小鼠臟器脂質(zhì)累積及病變等變化，可通過臟器指數(shù)反映［9］。由表6可知，與空白對照組相比，高脂模型組的心臟指數(shù)、肝臟指數(shù)和腎臟指數(shù)均有所增加，而肝臟指數(shù)增大，表明有肝損傷。對照高脂模型組，各何首烏多糖給藥組的肝臟指數(shù)均有所下降，且各劑量之間存在顯著性差異，其中A－PMP高劑量組與 W－PMP高劑量組差異變化不顯著。W－PMP低、高劑量組的心臟指數(shù)和腎臟指數(shù)變化差異顯著，且存在量效關(guān)系；W－PMP高劑量組與A－PMP低、高劑量組相比，變化差異不顯著。

表6 何首烏多糖對高脂血癥小鼠臟器指數(shù)的影響Table 6 Effects of PMP on viscera weight of mice with hyperlipemia（，n＝10）

表6 何首烏多糖對高脂血癥小鼠臟器指數(shù)的影響Table 6 Effects of PMP on viscera weight of mice with hyperlipemia（，n＝10）

? 同一列標(biāo)有不同字母的表示差異顯著（P＜0.05）。

水提多糖組 堿提多糖組組別 空白對照組 高脂模型組低高低高劑量/（mg·kg－1·d－1）0 0 50 200 50 200肝臟/體重（×100） 4.35±0.042a6.66±0.886b 5.18±0.7548a 4.63±0.143c 5.55±0.121c 5.06±0.740acde心臟/體重（×100） 0.35±0.003a0.60±0.018b 0.50±0.015c 0.40±0.030d 0.55±0.029e 0.44±0.031d腎臟/體重（×100） 1.23±0.215a1.58±0.178b 1.34±0.168a 1.24±0.185ac 1.43±0.199acd 1.30±0.124acde

3 討論

血清TC、TG含量高是高脂血癥的主要指標(biāo)，HDL－C能夠轉(zhuǎn)運動脈壁膽固醇到肝臟分解為膽酸，是有效的抗動脈硬化（AS）因子。近年來研究［10］表明：HDL－C對動脈血管壁有直接的保護(hù)作用，能使動脈粥樣硬化病變消退，HDL－C的含量越低，冠心病發(fā)病的機(jī)率越高。本試驗結(jié)果表明：高脂模型組小鼠的血清TC和TG均顯著高于正常組，HDL－C顯著低于正常組，說明高血脂癥小鼠模型組造模成功。而在高脂飼喂過程中分別灌胃W－PMP和A－PMP，均可以顯著降低小鼠血清TC和TG水平，顯著升高血清HDL－C水平。其中W－PMP高劑量組與空白對照組相比，各項指標(biāo)相當(dāng)接近，說明高劑量的 W－PMP較A－PMP具有更好的降血脂效果，對高脂血癥的發(fā)生有一定的預(yù)防作用。

AS引起的心血管疾病已嚴(yán)重危害人類的健康，其發(fā)病率和死亡率居各種疾病之首。動脈粥樣硬化是多危險因素所致的慢性疾病，其中血脂水平升高和高膽固醇血癥己經(jīng)被確認(rèn)為動脈粥樣硬化發(fā)生和發(fā)展的重要因素，降低血脂尤其是膽固醇水平可減少動脈粥樣硬化危險性［11］。本試驗結(jié)果表明：灌胃W－PMP和A－PMP均可使高脂飲食小鼠的AI有不同程度的降低，且W－PMP較A－PMP高劑量組的AI指數(shù)已接近正常水平，說明200mg/（kg·d）的 W－PMP對冠心病和動脈粥樣硬化有一定的預(yù)防作用。

LPL在許多組織中產(chǎn)生，主要分布在脂肪和心肌等組織的毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞表面并在肝素作用下釋放進(jìn)入血液，LPL是分解血清乳糜微粒（CM）、極低密度脂蛋白（VLDL）中甘油三脂（TG）的脂解酶，可將CM和VLDL中的TG水解為甘油和游離脂肪酸（FFA）［12］。HL則主要在肝細(xì)胞中合成，具有兩種生物學(xué)功能，血漿中的HL水解各種脂蛋白中的TG和PL，肝細(xì)胞中的HL還能作為配體促進(jìn)肝細(xì)胞攝取高密度脂蛋白（HDL）中的膽固醇或LDL殘粒以及含載脂蛋白β脂蛋白，這種功能可影響血漿中脂蛋白的濃度［13］。LA是LPL與HL酶活性的總和，同時具有甘油三脂脂肪酶、甘油一脂脂肪酶及磷脂酶的活性。通過這些脂解酶類的作用可分解出游離脂肪酸，再進(jìn)一步由β－氧化作用分解［14－16］。本試驗結(jié)果表明：W－PMP和A－PMP均能顯著升高小鼠肝臟脂酶的含量，其中以W－PMP高劑量組的效果尤為顯著。何首烏多糖能顯著降低高脂血癥小鼠肝臟脂肪含量作用可能與提高LA、LPL、HL的含量有關(guān)，提高LA、LPL、HL含量可能加速肝臟脂肪分解成游離脂肪酸，從而限制脂肪在肝臟內(nèi)積累。而高脂模型組和何首烏多糖低、高劑量組肝臟LA、LPL、HL含量均比空白對照組高，可能是由于食物中脂類物質(zhì)增多，肝臟LA、LPL、HL含量隨之增高所致。綜上所述，何首烏多糖可提高肝臟脂酶含量，進(jìn)而增加肝臟脂質(zhì)分解，對脂肪肝有一定的預(yù)防以及改善肝脂肪積累等作用。

4 結(jié)論

（1）何首烏多糖能顯著降低經(jīng)高脂飼料飼喂后小鼠的體重，增幅比分別為：26.7%、47.6%、13.1%、32.2%，其中以200mg/（kg·d）的 W－PMP增幅比最為顯著。且何首烏多糖對高脂飲食小鼠的攝食量無顯著影響。表明小鼠體重的降低與攝食量無明顯關(guān)系。

（2）對照模型組，各何首烏多糖給藥組的TC、TG均有所降低，HDL－C以及LA、LPL和HL均有所提高；其中灌胃200mg/（kg·d）的 W－PMP的試驗小鼠的各項指標(biāo)均接近于正常水平，說明200mg/（kg·d）的水提何首烏多糖有良好的降血脂作用。

（3）何首烏多糖能顯著降低各給藥組小鼠的肝臟體重比、心臟體重比和腎臟體重比，其中以200mg/（kg·d）的W－PMP組的降低程度較為顯著，并且對小鼠的心、肝、腎等器官無明顯的副作用。說明高劑量的水提何首烏多糖作為一種新型的降血脂藥物原料具有良好的優(yōu)越性。

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Hypolipidemic effect of the polysaccharide from polygonum multiflorum

ZHAI Rong LV Li－shuangJIN Bang－quan

（Department of Food Science，Ginling College，Nanjing Normal University，Nanjing，Jiangsu210097，China）

Polygonum multiflorumpolysaccharide was extracted by water and alkaline respectively，and the study of PMP on the serum total cholesterol（TC），triglycerids（TG），high density lipoproteincholesterol（HDL－C）and the weight of body，heart，liver and kidney and lipoprotein lipase（LPL），hepatic lipase（HL），and total lipase（LA）were investigated in artificially－induced hyperlipemial ICR mice.The results showed the mean values of serum TC，TG and AI concentrations decreased significantly （P＜0.05）while HDL－C，LPL，HL and LA concentration increased significantly （P＜0.05）which meant PMP had significant effects of hypolipidemic effect in experimental hyperlipemial mice.

polygonum multiflorumpolysaccharide；hyperlipemia；effect

10.3969 /j.issn.1003－5788.2010.05.025

翟蓉（1986－），女，南京師范大學(xué)在讀研究生。E－mail：lishuanglv＠yahoo.com.cn

呂麗爽

2010－06－01