全血細(xì)胞計(jì)數(shù)標(biāo)本保存時(shí)間對檢測結(jié)果的影響

婁堅(jiān)江

(紹興市中醫(yī)院,浙江 紹興 312000)

與檢驗(yàn)有關(guān)的醫(yī)療糾紛日趨增多,檢驗(yàn)標(biāo)本的留存時(shí)間在查找差錯(cuò)原因、分清責(zé)任方面顯得日益重要。探討全血細(xì)胞計(jì)數(shù)標(biāo)本保存時(shí)效性問題,有利于檢驗(yàn)科檢驗(yàn)質(zhì)量改進(jìn)和對有爭議標(biāo)本的復(fù)查。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 選擇2009年11月7日本院體檢健康人員140例,EDTA-2K抗凝,采血標(biāo)本2ml,采血順利。

1.2 儀器和試劑 德國西門子公司 Bayer ADVIA2120型全自動(dòng)血球分析儀,采用儀器配套試劑。質(zhì)控品采用Bayer配套進(jìn)口質(zhì)控,批號:(TP92091,TP91091,TP93091)每天質(zhì)控在控。

1.3 方法 140例全血標(biāo)本在Bayer ADVIA2120血球儀上用自動(dòng)進(jìn)樣方式在2小時(shí)內(nèi)測定完畢,立即分組保存于4℃冰箱內(nèi),并作好1～7組編號,每一組20例標(biāo)本,以備復(fù)查。當(dāng)天檢測各項(xiàng)指標(biāo),并分別于第 2、3、4、5、6 、7、8 天后 ,每天按順序用自動(dòng)進(jìn)樣方式檢測1組標(biāo)本,取均值后與原新鮮血標(biāo)本的檢測結(jié)果對照,以觀察標(biāo)本檢測值的變化。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 數(shù)據(jù)采用SPSS12.0軟件分析包處理,測定結(jié)果用(±s)表示,組間比較采用兩樣本均數(shù)t檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

各組血常規(guī)14項(xiàng)主要指標(biāo)檢測結(jié)果見表1,表1顯示血常規(guī)主要分析指標(biāo):包括WBC、RBC、Hb、PLT、MCH 、RDW,經(jīng) 1周(7 天)4℃冰箱保存后 ,仍可保持穩(wěn)定,測定數(shù)據(jù)與新鮮標(biāo)本檢測結(jié)果無顯著性差異(P＞0.05)。白細(xì)胞分類指標(biāo):N%、L%、M%及E%經(jīng)1周(7天)4℃冰箱保存后,亦仍可保持穩(wěn)定,測定數(shù)據(jù)與新鮮標(biāo)本檢測結(jié)果無顯著性差異(P＞0.05)。MCV及由此MCV與RBC及Hb計(jì)算所得的MCHC在標(biāo)本保存3天后結(jié)果出現(xiàn)不穩(wěn)定,所測結(jié)果與新鮮標(biāo)本結(jié)果有顯著性差異(P＜0.05),MPV在保存2天后,所測數(shù)據(jù)即與新鮮標(biāo)本檢測結(jié)果有顯著性差異(P＜0.05)。

3 討 論

標(biāo)本保存問題近來越來越受到國內(nèi)實(shí)驗(yàn)室的重視,標(biāo)本保存在實(shí)驗(yàn)室工作人員保護(hù)自身、查找差錯(cuò)原因、分清責(zé)任方面有重大意義。一般實(shí)驗(yàn)室對生化、免疫等標(biāo)本均保存1周以上,而血常規(guī)標(biāo)本由于細(xì)胞穩(wěn)定方面的特殊性,各實(shí)驗(yàn)室保存時(shí)間長短不一,有的實(shí)驗(yàn)室甚至當(dāng)天就將標(biāo)本處理了,易埋下糾紛的隱患。本次檢測將140例標(biāo)本分成7個(gè)組,2小時(shí)內(nèi)[1-2]測試完畢后立即放4℃冰箱保存,每天測試1組20例標(biāo)本,使檢測結(jié)果更接近于標(biāo)本實(shí)際情況。本次檢測結(jié)果顯示:血常規(guī)主要分析指標(biāo) ,包括 WBC 、RBC、Hb 、PLT、MCH 、RDW,經(jīng) 1周(7天)4℃冰箱保存后,仍可保持穩(wěn)定,測定數(shù)據(jù)與新鮮標(biāo)本檢測結(jié)果無顯著性差異(P＞0.05)。白細(xì)胞分類指標(biāo):嗜中性粒細(xì)胞比率(N%)、淋巴細(xì)胞比率(L%)、單核細(xì)胞比率(M%)及嗜酸性粒細(xì)胞比率(E%)經(jīng)1周(7天)4℃冰箱保存后,亦仍可保持穩(wěn)定,測定數(shù)據(jù)與新鮮標(biāo)本檢測結(jié)果無顯著性差異(P＞0.05)。而紅細(xì)胞平均體積(MCV)及由此MCV與RBC及Hb計(jì)算所得的紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度(MCHC)在標(biāo)本保存3天后結(jié)果出現(xiàn)不穩(wěn)定,所測結(jié)果與新鮮標(biāo)本結(jié)果有顯著性差異(P＜0.05),血小板平均體積(MPV)在保存2天后,所測數(shù)據(jù)即與新鮮標(biāo)本檢測結(jié)果有顯著性差異(P＜0.05)。這與周云仙等[5]報(bào)道基本一致,但時(shí)間稍延長了一些。從本次檢測結(jié)果來看:全血細(xì)胞標(biāo)本只要在采集后及時(shí)保存于4℃冰箱,血常規(guī)主要分析指標(biāo)經(jīng)7天保存仍可保持穩(wěn)定,國內(nèi)同類研究[3-5]中白細(xì)胞系統(tǒng)穩(wěn)定期都較長,而紅細(xì)胞及血小板穩(wěn)定期較短,可能和白細(xì)胞在加入溶血素后白細(xì)胞膜溶解,胞質(zhì)大部分溢出,整個(gè)細(xì)胞體積縮小,僅留下核和部分顆粒,只要在保存期內(nèi)細(xì)胞核和顆粒不發(fā)生明顯變性,則對縮小后的細(xì)胞體積影響不大。而紅細(xì)胞和血小板包括白細(xì)胞分類不穩(wěn)定則和標(biāo)本反復(fù)從冰

箱拿出復(fù)溫再冷藏所導(dǎo)致的標(biāo)本滲透壓、溫度、抗凝劑的變化,試管壁的細(xì)胞殘留所導(dǎo)致的PLT聚集及RBC的少量溶解有一定關(guān)系。本次分組測試正是為了避免這種影響,使測試結(jié)果更加符合標(biāo)本保存的實(shí)際情況。標(biāo)本穩(wěn)定性研究除了與標(biāo)本有關(guān),還與血球分析儀的檢測原理、試劑穩(wěn)定性關(guān)系密切。本次檢測是基于Bayer ADVIA2120型血球分析儀上做出,不同血球儀之間全血細(xì)胞標(biāo)本保存時(shí)間是否有區(qū)別有待研究。

表1 4℃條件下保存標(biāo)本不同存放時(shí)間血細(xì)胞參數(shù)的測定結(jié)果(±s)

表1 4℃條件下保存標(biāo)本不同存放時(shí)間血細(xì)胞參數(shù)的測定結(jié)果(±s)

保存時(shí)間 組別 WBC(×109/L) RBC(×1012/L) Hb(g/L) PLT(×109/L) MCV(fl) MCH(pg)1天2天3天4天5天6天7天對照 6.24±1.34 4.07±0.72 118.11±25.77 185.44±38.64 83.80±4.63 28.98±2.80復(fù)測 5.82±1.47 4.05±0.79 104.33±42.97 183.89±50.10 86.56±5.02 28.44±2.62對照 6.17±0.90 4.65±0.66 137.50±19.68 244.50±99.16 86.59±3.97 29.61±1.63復(fù)測 6.20±0.96 4.55±0.66 134.70±19.58 250.70±110.06 88.46±3.86 29.60±1.45對照 8.10±1.65 4.45±0.48 134.33±13.15 217.78±63.28 86.39±2.69 30.22±0.98復(fù)測 7.83±1.38 4.32±0.52 129.89±13.72 209.56±63.29 89.24±2.83* 30.10±1.13對照 7.13±1.42 4.73±0.30 145.89±12.51 239.11±42.95 88.57±3.13 30.86±1.38復(fù)測 7.22±1.42 4.68±0.29 142.89±11.07 237.11±32.27 91.47±3.06* 30.53±1.43對照 7.93±0.76 4.10±0.37 121.75±12.26 198.63±30.83 87.88±3.12 29.66±1.49復(fù)測 7.86±0.86 4.08±0.40 121.13±12.33 191.00±26.68 91.48±3.24* 29.78±1.25對照 6.48±1.17 4.58±0.18 137.13±6.42 212.38±56.37 88.53±2.54 29.95±1.02復(fù)測 6.33±0.82 4.41±0.19 131.63±5.42 204.25±45.43 91.83±1.87* 29.88±0.98對照 6.39±0.82 4.45±0.33 129.29±9.25 210.71±31.05 87.89±3.66 28.37±2.43復(fù)測 5.91±1.17 4.31±0.26 128.14±8.17 186.57±31.33 91.96±3.11* 29.76±1.05

續(xù)表1 4℃條件下保存標(biāo)本不同存放時(shí)間血細(xì)胞參數(shù)的測定結(jié)果(±s)

續(xù)表1 4℃條件下保存標(biāo)本不同存放時(shí)間血細(xì)胞參數(shù)的測定結(jié)果(±s)

與對照組比較*P＜0.05

保存時(shí)間 組別 MCHC(g/L) MPV(fl) RDW N(%) L(%) M(%) E(%)1天2天3天4天5天6天7天對照 345.22±19.59 11.21±1.65 13.48±0.80 64.81±4.44 22.47±4.11 6.54±1.59 4.18±1.38復(fù)測 328.11±16.14 12.72±1.75 13.57±0.85 62.79±9.42 24.31±7.48 6.52±2.26 3.22±1.31對照 341.80±8.69 9.63±0.95 13.49±0.77 62.08±11.79 26.62±8.94 6.09±1.42 3.37±3.12復(fù)測 334.60±7.55 11.07±0.89* 13.28±0.85 61.89±11.97 25.44±8.32 5.46±1.49 4.36±3.07對照 349.89±5.84 10.18±1.41 12.83±0.36 68.72±8.55 20.43±8.12 6.61±1.43 2.50±1.29復(fù)測 337.11±6.31* 11.84±1.36* 12.73±0.37 69.30±9.73 19.88±9.04 6.16±1.45 2.50±1.23對照 348.44±12.56 9.16±0.52 13.31±0.45 67.27±9.56 22.62±8.38 6.91±3.43 1.46±0.66復(fù)測 333.89±10.58* 11.07±0.76* 13.32±0.41 67.97±8.21 21.29±7.41 6.32±2.57 1.73±0.68對照 338.13±6.40 10.54±1.06 13.35±0.73 72.09±6.78 19.33±5.43 5.70±1.01 1.39±1.01復(fù)測 325.38±6.23* 12.59±1.10* 13.58±0.63 73.03±5.54 17.13±4.27 5.28±0.97 2.20±0.97對照 338.50±4.31 10.61±1.20 13.04±0.32 66.51±9.02 22.74±7.29 6.38±1.98 2.53±1.75復(fù)測 325.25±6.92* 13.01±1.04* 13.31±0.26 68.30±8.79 20.30±7.32 6.09±1.65 3.26±1.43對照 331.14±8.13 9.29±0.83 12.76±1.05 67.73±10.40 20.84±7.45 6.51±1.72 3.04±2.15復(fù)測 323.71±6.65* 11.77±0.62* 13.30±0.40 66.37±13.28 19.54±9.06 6.13±1.66 4.99±3.58

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