鹽酸羅沙替丁醋酸酯脈沖控釋微丸的研制

廖 鵬，陳燕忠，呂竹芬，鐘 龍（廣東藥學(xué)院，廣東省藥物新劑型重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣州市 510006）

鹽酸羅沙替丁醋酸酯脈沖控釋微丸的研制

廖 鵬＊，陳燕忠#，呂竹芬，鐘 龍（廣東藥學(xué)院，廣東省藥物新劑型重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣州市 510006）

目的：制備鹽酸羅沙替丁脈沖控釋微丸（ROXPCP）。方法：取空白丸芯分別以含藥層、溶脹層（含交聯(lián)羧甲基纖維素鈉）和控釋層（含乙基纖維素水分散體）順序包衣制備ROXPCP，通過考察不同類型空白丸芯、溶脹層材料及溶脹層與控釋層的不同包衣增重對(duì)藥物釋放的影響來優(yōu)選工藝，并進(jìn)行處方驗(yàn)證試驗(yàn)。結(jié)果：各考察因素均對(duì)藥物的釋放影響顯著。優(yōu)選工藝結(jié)果為：空白丸芯采用蔗糖型，溶脹層材料采用交聯(lián)羧甲基纖維素鈉，溶脹層和控釋層包衣增重分別為15%、24%。以此制備的微丸時(shí)滯時(shí)間為4h左右，時(shí)滯后4h內(nèi)累積釋藥百分率達(dá)到80%。結(jié)論：所制備的ROXPCP具有體外脈沖控釋作用。

鹽酸羅沙替丁醋酸酯；脈沖控釋微丸；制備；包衣；藥物釋放

有關(guān)時(shí)辰生物學(xué)的研究[1]表明，人體內(nèi)部幾乎所有的機(jī)能，都具有以24h為周期的節(jié)律性變化，人體機(jī)能的時(shí)辰節(jié)律性，使許多疾病的發(fā)作也存在著明顯的周期節(jié)律變化，消化性潰瘍就是發(fā)病規(guī)律呈現(xiàn)明顯時(shí)辰性的一種多發(fā)病。研究[2]表明，人體胃酸分泌從中午開始緩慢升高，至晚上20點(diǎn)左右急劇升高，22點(diǎn)左右形成高峰，抑制此時(shí)胃酸分泌能顯著提高臨床治療胃及十二指腸潰瘍的效果。鹽酸羅沙替丁醋酸酯（Roxatidine aidcetate hydrochlore，ROX）是繼雷尼替丁、法莫替丁等之后開發(fā)的又一種H2受體的選擇性拮抗藥，它能阻滯胃黏膜壁細(xì)胞組胺H2受體而顯示持續(xù)的胃酸分泌抑制作用，同時(shí)ROX還具有黏膜保護(hù)作用，是目前治療消化性胃潰瘍病較為理想的藥物[3，4]。ROX在國(guó)內(nèi)使用的劑型較少，目前上市的只有普通片和緩釋膠囊，其脈沖制劑的研究國(guó)內(nèi)尚未見文獻(xiàn)報(bào)道。本試驗(yàn)設(shè)計(jì)制備了鹽酸羅沙替丁醋酸酯脈沖控釋微丸（ROXPCP），其可在早上服用，并在晚上胃潰瘍高發(fā)期起效，以達(dá)到時(shí)辰治療的目的，為ROX新劑型的開發(fā)奠定試驗(yàn)基礎(chǔ)。

1 儀器與試藥

Aeromatic流化床包衣機(jī)（德國(guó)NIRO公司）；BS224S精密分析天平（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司）；Ultimate 3000高效液相色譜儀（美國(guó)戴安公司）；KQ-300VDE雙頻數(shù)控超聲波清洗器（昆山市舒美超聲儀器有限公司）；ZRS-8G智能溶出儀（天大天發(fā)科技有限公司）。

ROX原料（常州龍城藥業(yè)有限公司，批號(hào)：20081002，純度：99.7%）；ROX工作對(duì)照品（自制，批號(hào)：090301，純度：99.8%）；空白丸芯（杭州高成生物營(yíng)養(yǎng)技術(shù)有限公司）；ROXPCP（自制，批號(hào)：091108、091110、091112，規(guī)格：每粒0.4g）；低取代羥丙基纖維素（L-HPC，湖州展望化學(xué)藥業(yè)有限公司）；羥丙基甲基纖維素（HPMC-E3）、乙基纖維素水分散體（Surelease）均由上海Colorcon輔料有限公司提供；交聯(lián)羧甲基纖維素鈉（CMC-Na）、交聯(lián)羧甲基淀粉鈉（CCMS-Na）均由日本旭化成工業(yè)株式會(huì)社提供；交聯(lián)聚維酮（PVPP，美國(guó)國(guó)際特品公司）；乙腈為色譜純，其它試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 含量測(cè)定方法的建立

2.1.1 色譜條件。色譜柱：DIONEX-Acclaim C18（250mm×4.6mm，5μm）；流動(dòng)相：0.3%磷酸鹽緩沖液（用三乙胺調(diào)節(jié)pH值至6.2）-乙腈（78∶22）；流速：1.0mL·min－1；檢測(cè)波長(zhǎng)275nm；進(jìn)樣量20μL。取ROX工作對(duì)照品、樣品溶液和輔料溶液進(jìn)樣分析，色譜圖詳見圖1。

2.1.2 線性試驗(yàn)。精密稱取ROX工作對(duì)照品適量，用流動(dòng)相制備成濃度為2.5、10、20、50、100、150μg·mL－1的系列溶液。分別取上述各溶液適量進(jìn)行液相色譜測(cè)定，將ROX峰面積（A）與其濃度C（μg·mL－1）進(jìn)行線性回歸，得回歸方程為：A＝0.0935C－0.0006（r＝0.9999）。結(jié)果表明，ROX檢測(cè)濃度線性范圍為2.5～150μg·mL－1。

2.1.3 回收率及精密度試驗(yàn)。按處方量120%、100%、50%精密稱取ROX，按處方比例加入其它輔料，用流動(dòng)相定容，超聲20min，靜置至室溫，過濾，制備成高、中、低3種濃度的ROX溶液（每種濃度各制備3份），分別取上述濃度的溶液適量進(jìn)行色譜測(cè)定，每個(gè)濃度測(cè)定5次，計(jì)算。結(jié)果，平均回收率分別為（98.97±2.76）%、（99.99±1.05）%、（99.05±1.23）%。將上述測(cè)定回收率的3種濃度的溶液同日內(nèi)重復(fù)測(cè)定5次，求算日內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差；每天測(cè)定1次，連續(xù)測(cè)定5d，求算日間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。結(jié)果，日內(nèi)RSD＜0.12%，日間RSD＜0.92%。

2.2 微丸釋放度試驗(yàn)

按《中國(guó)藥典》2005年版二部附錄ⅩC溶出度測(cè)定法第一法轉(zhuǎn)籃法的裝置，附錄ⅩD釋放度測(cè)定法第二法的操作[5]，量取0.1mol·L－1鹽酸溶液750mL注入每個(gè)溶出杯中，加熱使溶液溫度保持在（37±0.5）℃，轉(zhuǎn)速100r·min－1。稱取適量微丸（含ROX 75mg）放入轉(zhuǎn)籃中，啟動(dòng)儀器并開始計(jì)時(shí)。分別于1、2h時(shí)用注射器吸取釋放液5mL，用0.45μm微孔濾膜過濾，同時(shí)補(bǔ)加同溫鹽酸溶液5mL，第2h取樣完畢并補(bǔ)充完介質(zhì)后，于杯內(nèi)加入0.2mol·L－1磷酸鈉溶液250mL，調(diào)節(jié)pH值為6.8，然后于第3、4、6、8、10、12h各取樣5mL，用0.45μm微孔濾膜過濾，同時(shí)都分別補(bǔ)加相同pH值的同溫磷酸鹽緩沖液5mL。取上述樣品續(xù)濾液于液相色譜儀中進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算累積釋藥百分率。

2.3 脈沖控釋微丸的制備

2.3.1 包衣液的制備。（1）含藥層包衣液的制備：將黏合劑HPMC-E3溶于適量水中，磁力攪拌至完全溶解，加入適量乙醇，制備成濃度為12g·L－1的乙醇水溶液，再依次加入藥物和適量微粉硅膠，攪拌至均勻，即得。（2）溶脹層包衣液的制備：將黏合劑HPMC-E3溶于水中，制備成濃度為18g·L－1的溶液，加入CMC-Na或其它溶脹材料，使其質(zhì)量濃度為30g·L－1，攪拌至均勻，靜置過夜，使其充分溶脹，使用前加入適量檸檬酸三乙酯。（3）控釋層包衣液的制備：取Surelease用水稀釋成濃度為80g·L－1的溶液，攪拌至均勻即得。

2.3.2 包衣微丸的制備。將空白丸芯置于流化床中，從含藥層到控釋層依次包衣，出風(fēng)溫度為（37.0±2.0）℃，噴液速率為1.0～1.5mL·min－1，噴霧壓力為0.12～0.16MPa，以底噴方式進(jìn)行包衣。每次包衣后流化干燥10min，包衣完成后置于烘箱中40℃固化12h即得。包衣增重計(jì)算公式：包衣增重（%）＝（包衣后重－包衣前重）/包衣前重×100%。

2.4 處方與工藝因素對(duì)微丸釋藥的影響

2.4.1 丸芯類型對(duì)藥物釋放的影響。選用蔗糖型和微晶纖維素型2種不同丸芯進(jìn)行包衣，溶脹層材料為CMC-Na，包衣增重15%，控釋層包衣增重24%，制備包衣微丸，并分別進(jìn)行釋放度測(cè)定。2種丸芯對(duì)藥物釋放的影響結(jié)果見圖2。

圖1 高效液相色譜圖A.ROX工作對(duì)照品；B.樣品；C.輔料；1.ROXFig 1HPLC chromatogramsA.ROX control；B.sample；C.excipients；1.ROX

圖2 丸芯類型對(duì)藥物釋放的影響Fig 2 Effects of types of core on the drug release

圖2 結(jié)果表明，空白丸芯的類型對(duì)微丸釋藥行為有明顯的影響。當(dāng)用蔗糖型丸芯進(jìn)行包衣，微丸在時(shí)滯4h之后藥物快速釋放，達(dá)到脈沖釋藥的效果。當(dāng)用微晶纖維素型丸芯進(jìn)行包衣時(shí)，微丸體外釋放僅呈緩釋效果，而且藥物釋放不完全。故選擇蔗糖型丸芯進(jìn)行包衣。

2.4.2 溶脹層材料類型對(duì)藥物釋放的影響。選用蔗糖型丸芯上藥，保持控釋層包衣增重24%，分別以CMC-Na、CCMSNa、L-HPC、PVPP和混合材料L-HPC∶PVPP（4∶1）作為溶脹層材料，包衣增重均為15%，制備包衣微丸，并分別進(jìn)行釋放度測(cè)定。5種溶脹層材料對(duì)藥物的釋放影響結(jié)果見圖3。

圖3 溶脹層材料對(duì)藥物釋放的影響Fig 3 Effects of the material of the swelling layer on the drug release

圖3 結(jié)果表明，5種材料的膨脹效果CMC-Na≥CCMS-Na＞L-HPC＞L-HPC ∶PVPP＞PVPP。CMC-Na和CCMS-Na膨脹效果相當(dāng)，且明顯高于其它幾種，使用CMC-Na和CCMS-Na作為溶脹層材料微丸可以達(dá)到預(yù)期的脈沖釋藥效果，其它幾種均無法達(dá)到預(yù)期效果。但用CCMS-Na進(jìn)行包衣時(shí)易發(fā)生粘連，故從包衣工藝上來說，CMC-Na優(yōu)于CCMS-Na。

2.4.3 溶脹層包衣增重對(duì)藥物釋放的影響。選用蔗糖型丸芯上藥，保持控釋層包衣增重24%，以CMC-Na為溶脹層材料，改變?nèi)苊泴影略鲋胤謩e為8%、10%、15%、20%、24%，制備包衣微丸，并分別進(jìn)行釋放度測(cè)定。溶脹層不同包衣增重對(duì)藥物釋放的影響結(jié)果見圖4。

圖4結(jié)果表明，溶脹層包衣增重達(dá)到一定的厚度時(shí)，才能獲得較好的脈沖釋放效果。保持控釋層增重24%，溶脹層增重為8%和10%時(shí)，釋藥類似緩釋曲線，且控釋層衣膜始終沒有破裂，釋藥后的空殼很少。這可能是由于溶脹層薄，所產(chǎn)生的膨脹力不足，無法撐破控釋層衣膜形成裂口，導(dǎo)致藥物層被溶解的藥物只能通過已被脹大但未破裂的控釋層衣膜擴(kuò)散[6]所致，因此藥物釋放量少。當(dāng)溶脹層包衣增重達(dá)15%時(shí)，膨脹層已能產(chǎn)生足夠的膨脹力來?yè)纹瓶蒯寣右履?，?h時(shí)滯后開始釋藥，隨后的4h累積釋藥百分率達(dá)80%以上。當(dāng)溶脹層包衣增重至20%及以上時(shí)，大約于3h時(shí)滯后開始釋藥，隨后的3h累積釋藥百分率達(dá)80%以上。由于本微丸要求較長(zhǎng)的時(shí)滯，當(dāng)溶脹層包衣增重超過15%時(shí)，時(shí)滯已經(jīng)不合適，因此本試驗(yàn)選用溶脹層包衣增重15%。

2.4.4 控釋層包衣增重對(duì)藥物釋放的影響。選用蔗糖型丸芯上藥，以CMC-Na為溶脹層材料，并保持溶脹層包衣增重為15%，改變控釋層包衣增重分別為15%、20%、24%、27%，制備包衣微丸，并分別進(jìn)行釋放度測(cè)定?？蒯寣硬煌略鲋貙?duì)藥物釋放的影響見圖5。

圖4 溶脹層包衣增重對(duì)藥物釋放的影響Fig 4 Effects of coating level of swelling layer on drug release

圖5 控釋層不同包衣增重對(duì)藥物釋放的影響Fig 5 Effect of coating level of controlled-release layer on drug release

圖5 結(jié)果表明，在保持溶脹層包衣增重為15%，控釋層增重15%時(shí)，幾乎沒有釋藥時(shí)滯；控釋層增重20%時(shí)，釋藥時(shí)滯僅為3h；控釋層增重24%時(shí)，釋藥時(shí)滯為4h；控釋層增重為27%時(shí)，6h內(nèi)幾乎沒有釋藥，6h后釋放曲線并沒有呈現(xiàn)出期望的脈沖釋藥效果。表明本試驗(yàn)以CMC-Na為溶脹層材料，溶脹層包衣增重為15%時(shí)，控釋層增重不能超過24%，否則所產(chǎn)生的膨脹力無法撐破控釋層衣膜，藥物釋放無法達(dá)到脈沖效果。

2.4.5 工藝結(jié)果驗(yàn)證。根據(jù)以上工藝制備3批ROXPCP，選用蔗糖型丸芯上藥，以CMC-Na為溶脹層材料，包衣增重為15%，控釋層包衣增重24%，進(jìn)行體外釋放度試驗(yàn)。結(jié)果表明，平均時(shí)滯約為4h，之后4h累積釋藥百分率均大于80%，結(jié)果見圖6。

3 討論

微丸制劑由于具有在胃腸道分布面積大、生物利用度高、大小均勻、易于處理（如包衣、分劑量方面）、適合復(fù)方制劑的配伍等顯著優(yōu)點(diǎn)[7]，正日益受到人們的重視。目前，制備定時(shí)脈沖控釋微丸制劑的方法大致有雙層膜時(shí)控-崩解脈沖微丸[5]和滲透壓調(diào)節(jié)型脈沖微丸[8]等幾種。本文采用雙層膜時(shí)控-崩解的方法制備控釋微丸，該模型核心為載藥微丸，在載藥丸芯上包一層由溶脹材料組成的溶脹層，外面再包一層由惰性高分子材料組成的控釋層。當(dāng)包衣微丸口服后，并不立即釋藥，而是胃腸液不斷通過控釋層向內(nèi)部滲透，溶脹層吸水逐漸溶脹，產(chǎn)生膨脹力，一定時(shí)滯后，溶脹層的膨脹力達(dá)到一定程度，將外面控釋層脹破，藥物通過裂口迅速完全釋放出來[9]。其中，穩(wěn)定、可重現(xiàn)的時(shí)滯和時(shí)滯后藥物的迅速釋放是制備的難點(diǎn)和關(guān)鍵。

空白丸芯的成分對(duì)微丸的釋藥行為有明顯的影響。目前常用的空白丸芯多為蔗糖型和微晶纖維素型2種。蔗糖型丸芯在衣膜內(nèi)可形成高滲溶液，有利于藥物的釋放，能達(dá)到脈沖釋藥的效果，故選用蔗糖型丸芯。

CMC-Na是優(yōu)質(zhì)崩解劑中的一種，其作用機(jī)制為溶脹作用[9]，它自身具有很強(qiáng)的吸水膨脹性，崩解作用良好，在水中能吸收數(shù)倍于本身重量的水膨脹而不溶解，所產(chǎn)生的膨脹力能較快撐破外層衣膜，使里層的藥物可以迅速釋放。以CMCNa為內(nèi)層溶脹材料在一定時(shí)滯之后藥物的釋放速率較快，能產(chǎn)生脈沖釋藥的效果，故以其作為內(nèi)層溶脹層材料。

溶脹層材料、厚度（包衣增重）以及控釋層厚度的選擇是能否實(shí)現(xiàn)脈沖釋藥的關(guān)鍵。當(dāng)控釋層厚度一定，一定范圍內(nèi)隨著溶脹層厚度的增加，釋藥時(shí)滯縮短，釋藥速率加快。當(dāng)溶脹層厚度一定時(shí)，隨著控釋層厚度的增加，釋藥時(shí)滯明顯延長(zhǎng)，且時(shí)滯后釋藥速率也明顯下降，甚至釋藥不完全。

微丸的平均胃排空時(shí)間為2～4h，小腸平均轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)間一般為3h，口服后平均結(jié)腸到達(dá)時(shí)間為5～7h。由于結(jié)腸處物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)速度緩慢，藥物能在此滯留20～30h。ROXPCP早晨服藥，4h后開始釋藥（此時(shí)微丸運(yùn)行到小腸中下部），待其逐漸釋藥，血藥濃度逐漸升高，約10h左右達(dá)峰（大約為晚間21點(diǎn)左右），此時(shí)分泌的大量胃酸可被有效抑制。同時(shí)也可見微丸大部分釋藥行為將在結(jié)腸內(nèi)進(jìn)行，由于結(jié)腸吸收面積遠(yuǎn)小于小腸，且實(shí)際情況時(shí)含有大量?jī)?nèi)容物，水分含量低，故吸收率會(huì)有所下降，這一局限性可通過延長(zhǎng)藥物在結(jié)腸內(nèi)的釋藥時(shí)間加以克服[10]。為使藥物吸收盡量完全，保證制劑的生物利用度，本研究將微丸的時(shí)滯定為4h。

本研究選擇蔗糖型空白丸芯制備含藥丸芯，以CMC-Na為溶脹層材料，Surelease作為控釋層，制備ROXPCP，當(dāng)溶脹層增重15%、控釋層增重24%、微丸體外釋藥時(shí)滯為4h、時(shí)滯后4h累積釋藥百分率80%以上時(shí)，達(dá)到預(yù)期效果。該制劑的體內(nèi)釋藥行為還有待于進(jìn)一步研究。

圖6 3批ROXPCP累積釋藥曲線Fig 6 Drug release curves of 3batches of ROXPCP

[1] 陳國(guó)輝.利用生物節(jié)律探討最佳投藥時(shí)間[J].中國(guó)醫(yī)藥指南，2007，5（11）：269.

[2] Lemmer B.Implications of chronopharmacokinetics for drug delivery：antiasthmatics，H2-blockers and cardiovascular active drugs[J].Adv Drug Deliv Rev，1991，6（1）：83.

[3] 王國(guó)村.乙酰羅沙替丁的藥效學(xué)、藥動(dòng)學(xué)和療效[J].中國(guó)新藥雜志，1994，3（2）：17.

[4] 林志繡，陸 潔，吳萬征.球面對(duì)稱設(shè)計(jì)篩選羅沙替丁緩釋片的處方及其釋放度考察[J].中國(guó)藥房，2006，17（14）：1066.

[5] 國(guó)家藥典委員會(huì)編.中華人民共和國(guó)藥典（二部）[S].2005年版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2005：附錄ⅩC、ⅩD.

[6] Ueda S，Yamaguchi H，Kotani M，et al.Development of a novel drug delivery system，time-controlled explosion system（TES）：Ⅱ，Design of multiparticulate TES and in vitro drug release properties[J].Chem Pharm Bull，1994，42（2）：359.

[7] 錢 方，蔣雪濤，王安文.微丸的進(jìn)展[J].中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志，1996，27（1）：41.

[8] Narisawa S，Nagata M，Ito T，et al.Drug release behavior in gastrointestinal tract of beagle dogs from multiple unit type rate-controlled or time-controlled release preparations coated with insoluble polymer-based film[J].J Controlled Release，1995，33（2）：253.

[9] 鄭春麗.雙氯芬酸鈉脈沖釋藥微丸口服給藥系統(tǒng)的研究[D].沈陽(yáng)藥科大學(xué)，2002：7.

[10] 白慧東，蔣玉鳳，曹麗蒙，等.幾種分散片崩解劑的性能與應(yīng)用現(xiàn)狀[J].新疆醫(yī)藥，2007，37（1）：162.

Preparation of Roxatidine Aidcetic Hydrochloride Pulsatile Controlled-release Pellets

LIAO Peng，CHEN Yan-zhong，LV Zhu-fen，ZHONG Long（Guangdong Pharmaceutical University，Guangdong Provincial Key Laboratory of New Dosage Form of Drugs，Guangzhou 510006，China）

OBJECTIVE：To prepare the roxatidine aidcetic hydrochloride pulsatile controlled-release pellets（ROXPCP）.METHODS：Blank core were coated with Roxatidine aidcetic hydrochloride（ROX）as drug-containing layer，swelling agent containing croscarmellose sodium and controlled-release layer containing ethylcellulose aqueous dispersion respectively to prepare ROXPCP.The effects of the materials of blank core and swelling layer，the weight of swelling layer and controlled-release layer on the release of ROX were investigated to optimize process technology and validate formula.RESULTS：The release behavior was influenced strikingly by the types and weight of coating layer.The optimal formula was as follows：ROXPCP were prepared using croscarmellose sodium as inner layer with 15%（weight）coating level and ethylcellulose aqueous dispersion（surelease）as outer controlled-release layer with 24%（weight）coating level.The lag time of prepared pellets was about 4h and accumulative release rate reached 80%within 4h.CONCLUSIONS：The drug release of ROXPCP was shown in pulsatile way in vitro.

Roxatidine aidcetic hydrochlore；Pulsatile controlled-release pellets；Preparation；Coating；Drug release

R943；R975+.6

A

1001-0408（2010）17-1584-04

＊碩士研究生。研究方向：新藥及藥物新劑型。電話：020-39352511。E-mail：dapeng708@126.com

#通訊作者：教授，碩士研究生導(dǎo)師。研究方向：新藥及藥物新劑型。電話：020-39352501。E-mail：doctor.c@163.com

2010-01-13

2010-03-10）