抗口腔潰瘍炎膜劑的制備及質(zhì)量控制Δ

何心，王帆，楊大偉，孫照英，張闖（1.黑龍江省醫(yī)院藥學(xué)部，哈爾濱市150036；.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，哈爾濱市 150040）

抗口腔潰瘍炎膜劑的制備及質(zhì)量控制Δ

何心1＊，王帆2，楊大偉2，孫照英2，張闖2（1.黑龍江省醫(yī)院藥學(xué)部，哈爾濱市150036；2.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，哈爾濱市 150040）

目的：制備抗口腔潰瘍炎膜劑并建立其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法：先制備含藥膠漿和空白膠漿再制備成復(fù)合膜劑；應(yīng)用高效液相色譜法對制劑中靛玉紅進(jìn)行定量分析。結(jié)果：制備的膜劑外觀均一性良好，各項檢測指標(biāo)符合《中國藥典》相關(guān)規(guī)定；靛玉紅檢測濃度線性范圍為0.8～6.4μg·mL－1（r＝0.9998）；平均回收率為100.65%（RSD＝1.07%，n＝6）。結(jié)論：所制膜劑處方合理、制備方法簡單可行，含量測定方法準(zhǔn)確可靠。

抗口腔潰瘍炎膜劑；靛玉紅；制備；質(zhì)量控制；高效液相色譜法

黑龍江省醫(yī)院臨床應(yīng)用多年的“抗口炎甘油”糊劑（主要成分：新霉素、鞣酸、氫化可的松、維生素B1、維生素B2）是治療口腔潰瘍十分有效的藥物，但屬于甘油糊劑，涂于潰瘍局部無法固定，療效受限。因此，筆者將原制劑進(jìn)行優(yōu)化，改進(jìn)原處方，即在原處方的基礎(chǔ)上添加冰片、青黛、珍珠粉，以增加清熱解毒、活血化瘀、生肌止痛功效；并將其制成復(fù)合膜劑，以掩蓋不良口感，使藥物濃集于患處及時發(fā)揮藥效，延長藥物作用時間。為了更好地控制該制劑的質(zhì)量，筆者對新膜劑——抗口腔潰瘍炎膜劑的微生物限度進(jìn)行了檢查，對該產(chǎn)品中靛玉紅（青黛的主要成分）、新霉素、氫化可的松等成分的含量測定方法進(jìn)行了研究，并建立了質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。由于新霉素、氫化可的松等成分的含量測定原制劑中已建立起相應(yīng)方法，本文在此只選取靛玉紅的含量測定方法進(jìn)行介紹。

1 儀器與試藥

LC-6A高效液相色譜儀、UV-265型紫外-可見分光光度計（日本島津公司）；HHS型電熱恒溫水浴鍋（上海醫(yī)療器械總廠）。

氫化可的松原料藥（天津市津津藥業(yè)有限公司，批號：T2256，純度：98.6%）；新霉素原料藥（陜西中林醫(yī)藥有限公司，批號：200808010，純度：672IU·mg－1干品）；鞣酸（上海山浦化工有限公司）；維生素B1（中國惠世生化試劑有限公司，批號：0809001，純度：＞98.9%）；維生素B2（上海伯奧生物科技公司，批號：0808004，純度：＞99.2%）；珍珠粉、冰片、青黛（哈爾濱世一堂藥店）；靛玉紅對照品（中國華東師范大學(xué)化工廠，批號：200807005，純度：＞98.8%）；抗口腔潰瘍炎膜（黑龍江省醫(yī)院自制，規(guī)格：1cm×1cm，其中靛玉紅含量：0.425μg·cm－2）；聚乙烯醇（PVA）17-88、PVA17-99（福建紡織化纖集團(tuán)有限公司）；羧甲基纖維素鈉（CMC-Na，天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所）；甘油、吐溫-80（上海展云化工有限公司）；乙酸乙酯（天津市化學(xué)試劑廠）；甲醇為色譜純。

2 制備工藝

2.1 含藥膠漿的制備

稱取PVA17-883.06g加入蒸餾水92mL浸泡過夜，于水浴上加溫使之溶化成膠漿[1]，放置，保溫30min后待用；將冰片0.03g研細(xì)，加入青黛0.67g配研，然后依次加入珍珠粉0.33g、維生素B20.04g、維生素B10.04g、新霉素0.17g、鞣酸0.21g、氫化可的松0.05g和CMC-Na 1.53g，研勻；然后，邊研邊分別加入PVA17-88膠漿、吐溫-804g和甘油2.3g，保溫30min除去氣泡。

2.2 空白膠漿的制備[2]

稱取PVA17-992g，加甘油1mL、蒸餾水30mL于水浴上加溫使之溶化成膠漿，趁熱用雙層紗布過濾，保溫30min待用。

2.3 制膜

先將含藥膠漿均勻涂布于涂有液狀石蠟潤滑劑的平板玻璃上，控制厚度為0.3～0.4mm，自然干燥約24h后，在膜面上涂以空白膠漿，控制厚度為0.2～0.3mm，同法干燥，脫膜，即得含藥膜和空白膜的復(fù)合膜劑，剪裁成1cm×1cm大小的藥膜，紫外滅菌，避光保存。

3 質(zhì)量控制

3.1 性狀

本品為淡綠色的薄膜，質(zhì)地柔韌，表面光潔平整無氣泡，厚度一致，色澤均勻。

3.2 微生物限度檢查

取面積大約為100cm2膜劑，根據(jù)《中國藥典》（2005年版）附錄[3]“微生物限度檢查”項下的規(guī)定進(jìn)行微生物限度檢查，結(jié)果：細(xì)菌個數(shù)＜90個（10cm2），霉菌和酵母菌個數(shù)＜100個（10cm2），未檢出金黃色葡萄球菌和銅綠假單胞菌，符合規(guī)定。

3.3 含量測定[4]

3.3.1 色譜條件。色譜柱：C18（150nm×4.6nm，5μm）；流動相：甲醇-1%醋酸（80∶20）；流速：1.0mL·min－1；檢測波長：286nm；進(jìn)樣量：20μL；柱溫：29℃。

3.3.2 對照品溶液的制備。精密稱量靛玉紅對照品0.8mg置于50mL容量瓶中，加適量乙酸乙酯超聲溶解，再稀釋至刻度，得到濃度為16μg·mL－1的對照品溶液。

3.3.3 供試品溶液的制備。取本品11片，剪碎，加乙酸乙酯60mL超聲提取10min，取提取液2mL至25mL容量瓶中，再用乙酸乙酯稀釋至刻度，以0.5μm微孔濾膜濾過，作為供試品溶液。

3.3.4 干擾試驗(yàn)。取除去青黛的復(fù)合膜劑樣品，按供試品溶液制備方法制備成陰性對照品溶液，按上述色譜條件進(jìn)樣10μL，將測得的色譜與供試品溶液和對照品溶液色譜相比較，結(jié)果見圖1。

圖1 高效液相色譜圖A.對照品；B.供試品；C.陰性對照品；1.靛玉紅Fig 1HPLC chromatogramsA.reference substance；B.sample；C.negative control；1.indirubin

由圖1可見，制劑中其余組分對靛玉紅的測定無干擾。

3.3.5 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備。精密吸取上述對照品溶液0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4mL分別置于10mL棕色容量瓶中，加乙酸乙酯稀釋至刻度，搖勻后重復(fù)進(jìn)樣2次進(jìn)行測定，以對照品濃度（Y，μg·mL－1）對峰面積平均值（X）進(jìn)行回歸，得回歸方程：Y＝5×106X－1917.7（r＝0.9998），表明靛玉紅檢測濃度線性范圍為0.8～6.4μg·mL－1。

3.3.6 方法精密度考察。分別取1.6、3.2、6.4μg·mL－1的靛玉紅對照品溶液進(jìn)樣5次，結(jié)果靛玉紅峰面積積分值的RSD分別為0.5%、0.5%、0.6%，平均日內(nèi)RSD＝0.53%（n＝3）。取16μg·mL－1的對照品溶液低溫避光保存，并分別于制備后的5d內(nèi)每天進(jìn)樣測定，得到方法的日間RSD為1.1%，表明樣品溶液在低溫避光條件下非常穩(wěn)定。

3.3.7 加樣回收率試驗(yàn)。精密量取高、中、低3種濃度的靛玉紅對照品溶液，分別加入已知濃度的供試品溶液中，按“3.3.5”項下方法進(jìn)樣分析，測定峰面積，并代入回歸方程計算回收率，結(jié)果見表1。

表1 回收率試驗(yàn)結(jié)果（n＝6）Tab 1Results of recovery test（n＝6）

3.3.8 樣品的含量測定。精密吸取“3.3.3”項下供試品溶液10μL，按上述色譜條件測定，記錄色譜，以外標(biāo)法計算樣品中靛玉紅的含量，共測3批樣品，靛玉紅的平均含量為0.407μg·cm－2，標(biāo)示量為95.76%。

4 討論

相對于PVA17-88而言，PVA17-99的聚合度更高，藥物在其中的溶出度很低，因此在本制劑中選擇后者作為空白膜（不含藥用成分）的膜材。將復(fù)合膜劑的含藥膜一側(cè)貼向患處，空白膜可以阻擋藥物在口腔中的溶出，因此起到單向釋藥的作用，同時掩蓋主要藥物的不良口感，使藥物濃集于患處，避免藥物浪費(fèi)，提高療效。

PVA17-88成膜性雖好，但是水溶性及柔韌性差，因此加入CMC-Na和甘油以增加膜的可塑性，提高膜劑質(zhì)量。為優(yōu)化處方和制備工藝，筆者在前期試驗(yàn)中根據(jù)以往經(jīng)驗(yàn)和查閱大量文獻(xiàn)設(shè)計了正交試驗(yàn)[5]來進(jìn)行處方篩選，篩選因素包括CMC-Na與PVA17-88的用量比、甘油的用量和加水量，評價指標(biāo)為膜劑的外觀和溶出度，最終確定了載藥膜處方，并經(jīng)驗(yàn)證試驗(yàn)表明優(yōu)化后制劑成膜效果良好，符合《中國藥典》標(biāo)準(zhǔn)。

筆者對靛玉紅對照品溶液在190～700nm波長范圍內(nèi)進(jìn)行了光譜掃描[6]，結(jié)果表明，靛玉紅在252、286、611nm波長處均有吸收峰，以286nm波長處吸收峰最大、靈敏度最高，為了保證分析精度，故選擇靛玉紅的最大吸收波長即286nm為測定波長進(jìn)行測定。

含量測定的方法考察學(xué)結(jié)果表明，采用所擬定的高效液相色譜法測定抗口腔潰瘍炎膜劑中靛玉紅的含量，方法簡便可行，靈敏度高，無干擾，可作為其定量檢測方法。

綜上所述，所制膜劑處方合理，制備方法簡單可行，含量測定方法準(zhǔn)確可靠。

[1] 楊慧云，王亞斌，秦亞麗，等.鹽酸麻黃素植入膜劑的研制與臨床應(yīng)用[J].中國藥房，2000，11（4）：160.

[2] 張兆旺主編.中藥制劑學(xué)[M].第1版.北京：中國中醫(yī)藥出版社，2003：464.

[3] 國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典（二部）[S].2005年版.北京；化學(xué)工業(yè)出版社，2005：附錄28～30、93～98.

[4] 鄒愛東，張 群，趙曉春，等.HPLC法測定青黛中靛玉紅的含量[J].實(shí)用藥物與臨床，2004，7（3）：13.

[5] 梁?；?，楊 宏.復(fù)方甲硝唑口腔膜劑的制備和質(zhì)量控制[J].現(xiàn)代食品與藥品雜志，2006，16（6）：51.

[6] 高文平，李 拜，袁云剛.高效液相色譜法測定復(fù)方青黛丸中靛玉紅含量[J].中國藥業(yè)，2007，16（17）：28.

Preparation and Quality Control of Anti-inflammatory Dental Ulcer Film

HE Xin（Dept.of Pharmacy，Heilongjiang Provincial Hospital，Harbin 150036，China）
WANG Fan，YANG Da-wei，SUN Zhao-ying，ZHANG Chuang（Heilongjiang University of Traditional Chinese Medicine，Harbin 150040，China）

OBJECTIVE：To prepare anti-inflammatory dental ulcer film and establish its quality standard.METHODS：Drug-containing mortar and blank mortar were prepared to prepare compound film agent.HPLC was used to the quantitative analysis of indirubin.RESULTS：The preparation had well appearance and its detection of index was up to the standard stated in Chinese Pharmacopeia.The linear range of indirubin was 0.8～6.4μg·mL－1（r＝0.9998）with an average recovery rate of 100.65%（RSD＝1.07%，n＝6）.CONCLUSION：The formula of preparation is reasonable，the preparation method is simple and applicable and determination method is accurate and reliable.

Anti-inflammatory dental ulcer film；Indirubin；Preparation；Quality Control；HPLC method

R988.2；R943

A

1001-0408（2010）17-1582-02

Δ哈爾濱市科技創(chuàng)新人才研究專項基金資助項目（2008RFXQS035）

＊主任藥師，碩士研究生導(dǎo)師。研究方向：臨床藥學(xué)。電話：0451-88025703。E-mail：hexinharbin@126.com

2010-03-10

2010-03-25）