雷公藤根化學(xué)成分研究

嚴(yán)振，田洋，馬躍平，傅曉春，張振學(xué)，王金輝*

(1.廣東食品藥品職業(yè)學(xué)院，廣東 廣州 510520；2.沈陽化工學(xué)院化學(xué)工程學(xué)院，遼寧 沈陽 110142；3.沈陽藥科大學(xué)中藥學(xué)院，遼寧 沈陽 110016)

*王金輝，E-mail：wangjh1972@vip.sina.com

雷公藤根化學(xué)成分研究

嚴(yán)振1，田洋2，馬躍平3，傅曉春1，張振學(xué)2，王金輝3*

(1.廣東食品藥品職業(yè)學(xué)院，廣東 廣州510520；2.沈陽化工學(xué)院化學(xué)工程學(xué)院，遼寧 沈陽110142；3.沈陽藥科大學(xué)中藥學(xué)院，遼寧 沈陽110016)

目的研究雷公藤TripterygiumwilfordiiHook. f .根的化學(xué)成分。方法利用各種色譜方法進(jìn)行分離純化，根據(jù)理化性質(zhì)和譜學(xué)數(shù)據(jù)對分離得到的化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)研究。結(jié)果從雷公藤根乙醇提取物中分離得到6個化合物，分別鑒定為5α-豆甾烷-3,6-二酮(5α-stigmast-3,6-dione,1)，6β-羥基-豆甾-4-烯-3-酮(6β-hydroxystigmast-4-en-3-one,2)，鄰苯二甲酸二丁酯(phthalic acid dibutyl ester,3)，秦皮素(fraxetin,4)，β-谷甾醇(β-sitosterol,5)，胡蘿卜苷(daucosterol,6)。結(jié)論化合物1、3、4為首次從衛(wèi)矛科植物中分離得到，化合物2為首次從本屬植物中分離得到。

雷公藤；化學(xué)成分；結(jié)構(gòu)鑒定

雷公藤TripterygiumwilfordiiHook. f.系衛(wèi)矛科雷公藤屬植物，廣泛分布于浙江、江西、安徽、湖南、廣東、福建、臺灣等地。其性苦、寒，有大毒，具有殺蟲、消炎、活血通絡(luò)、解毒的功效?，F(xiàn)代臨床廣泛用于多種免疫系統(tǒng)異常而致的疾病，獲得了良好的療效。大量藥理及臨床已證明其提取物和某些成分具有免疫調(diào)節(jié)、抗炎、抗腫瘤和男性抗生育作用[1]。通過對雷公藤根的化學(xué)成分的研究，得到6個化合物并分別鑒定，為其藥用資源的開發(fā)利用提供有益參考。

1 材料與儀器

BrukerARX-300和BrukerAV-600型核磁共振波譜儀(TMS內(nèi)標(biāo)，瑞士Bruker公司)；N2000型日立高效液相色譜儀；制備型色譜柱為YWCC18反相柱(5μm,10mm×250mm)；MP-S3型顯微熔點(diǎn)測定儀(溫度計(jì)未校正，日本Yanaco公司)；SephadexLH-20(美國Pharmacia公司)，柱色譜和薄層色譜硅膠(青島海洋化工廠有限公司)；所用試劑為色譜純和分析純。

雷公藤(市售)經(jīng)沈陽藥科大學(xué)孫啟時教授鑒定為TripterygiumwilfordiiHook. f .的根。

2 提取與分離方法

取雷公藤根20kg，用體積分?jǐn)?shù)為90%乙醇煮沸提取，合并濾液，減壓濃縮后得浸膏900g，將浸膏加適量水稀釋，依次用石油醚、三氯甲烷、醋酸乙酯、正丁醇萃取。石油醚層和三氯甲烷層提取物(71.5g)進(jìn)行硅膠柱色譜分離，以石油醚-丙酮系統(tǒng)(100∶1～1∶1)梯度洗脫。得到的流分(Fr.37～63)經(jīng)重結(jié)晶處理后得化合物5；流分(Fr.88～96)經(jīng)重結(jié)晶處理后得到化合物1；流分(Fr.143～169)經(jīng)重結(jié)晶處理后得到化合物2；流分(Fr.213～256)經(jīng)硅膠吸附柱色譜、SephadexLH-20柱色譜后，所得到的流分用高效液相色譜分離，最后得到化合物3；流分(Fr.506～554)經(jīng)石油醚-丙酮反復(fù)洗脫，SephadexLH-20柱色譜得到化合物6；醋酸乙酯萃取物(27.7g)經(jīng)硅膠吸附柱柱色譜，以三氯甲烷-甲醇系統(tǒng)(200∶1～1∶1)梯度洗脫，得到的流分(Fr.27～35)經(jīng)重結(jié)晶處理后得到化合物4。

3 結(jié)果與討論

3.1化合物1

無色針狀結(jié)晶(甲醇)，與10%硫酸乙醇試劑顯紫色；與Libermann-Burchard反應(yīng)陽性，示為甾體或三萜類化合物。1H-NMR(300MHz，CDCl3)譜中，高場區(qū)給出6個典型的甲基質(zhì)子信號：δ：0.69(3H，s，H-18)，0.96(3H，s，H-19)，0.93(3H，d，J=6.2Hz,H-21)，0.84(3H，d，J=6.6Hz，H-26)，0.81(3H，d，J=6.8Hz，H-27)，0.85(3H,t，J=7.0Hz，H-29)；13C-NMR(75MHz,CDCl3)譜中，給出29個碳信號(數(shù)據(jù)如表1)，提示該化合物有可能是29C甾類化合物；13C-NMR譜中δ209.2、211.7兩個碳信號提示該化合物中有2個酮羰基信號。其數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[2]中譜學(xué)數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定其為5α-豆甾烷-3,6-二酮(5α-stigmast-3,6-dione)，為衛(wèi)矛科植物中首次分離得到。

3.2化合物2

無色針狀結(jié)晶(石油醚-醋酸乙酯)，mp208～210℃；與10%硫酸乙醇試劑顯紫色；與Libermann-Burchard反應(yīng)陽性，示為甾體或三萜類化合物。1H-NMR(300MHz，CDCl3)譜中，高場區(qū)給出6個典型的甲基質(zhì)子信號：δ0.74(3H，s，H-18)，1.37(3H，s，H-19)，0.92(3H，d，J=6.4HZ，H-21)，0.84(3H，d，J=6.6HZ，H-26)，0.82(3H，d，J=6.6HZ，H-27)，0.85(3H，t，J=7.0HZ，H-29)；另外給出一個烯烴質(zhì)子信號δ5.82(1H，s)及一個與連氧碳相連碳的質(zhì)子信號δ4.35(1H，d，J=3Hz)。13C-NMR(75MHz，CDCl3)譜中，給出29個碳信號(數(shù)據(jù)如表1)，因此進(jìn)一步推斷該化合物為豆甾類化合物，δ200.4、168.44、126.35示結(jié)構(gòu)中具有不飽和碳信號；δ73.30為6位連氧碳信號；此外低場區(qū)無其他碳信號，其數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[3]中譜學(xué)數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定其為6β-羥基-豆甾-4-烯-3-酮(6β-hydroxystigmast-4-en-3-one)，為本屬植物中首次分離得到。

表1 化合物1～2的13C-NMR化學(xué)位移

3.3化合物3

棕紅色油狀物(甲醇)，ESI-MS[M+H]+279.1。1H-NMR(300MHz，CDCl3)譜中，δ7.72(1H，m，H-4)，7.54(1H，m，H-3)，4.32(2H，m，H-5)，1.70(2H，m，H-6)，0.97(3H，m，H-7)；13C-NMR(75MHz， CDCl3)譜中，共給出8個碳信號，δ167.6(C-1)，132.4(C-2)，130.8(C-3)，128.8(C-4)，65.5(C-5)，30.5(C-6)，19.1(C-7)，13.7(C-8)；其數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[4]中譜學(xué)數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定其為鄰苯二甲酸二丁酯(phthalic acid dibutyl ester)，為衛(wèi)矛科植物中首次分離得到。

3.4化合物4

黃色針狀結(jié)晶(甲醇)，與三氯化鐵-鐵氰化鉀反應(yīng)陽性，示有酚羥基存在。1H-NMR(300MHz，Pyr-d5)譜中，δ：7.67(1H，dd，J=9.32Hz，H-4)，6.29(1H，dd，J=9.32Hz，H-3)，6.68(1H，s，H-5)、3.78(3H，s，OCH3)；13C-NMR(75MHz，Pyr-d5)譜中，δ：161.6(C-2)，146.6(C-6)，145.0(C-4)，141.6(C-9)，140.8(C-7)，135.9(C-8)，112.2(C-3)，110.9(C-10)，100.49(C-5)，與文獻(xiàn)[5]報道的秦皮素基本一致，故鑒定其為秦皮素(fraxetin)，為衛(wèi)矛科植物中首次分離得到。

3.5化合物5

白色針晶(石油醚)，mp136～137℃，與10%硫酸乙醇試劑顯紫色；與Libermann-Burchard反應(yīng)陽性，與已知標(biāo)準(zhǔn)品β-谷甾醇共薄層，用3種不同溶劑系統(tǒng)展開，Rf值均一致，與β-谷甾醇混合后的熔點(diǎn)不下降，故鑒定其為β-谷甾醇(β-sitosterol)。

3.6化合物6

[1] 李衛(wèi)東，王承華.雷公藤研究概況[J].承德醫(yī)學(xué)院學(xué)報，1988,5(3)：180-183.

[2]Chun-ChaoZhao,Jian-HuaShao,XianLi,etal.AntimicrobialConstituentsfromFruitsofAilanthusaltissimaSwingle[J].Arch Pharm Res,2005,28(10):1147-1151.

[3] Xiao-Bai Sum, Pei-Hua Zao, Yang-Jun Xu,et al. Chemical constituents from the roots ofPolygonumbistorta[J]. Chemistry of Natural Compounds,2007,43(5):563-566.

[4] 張?zhí)N暉.鄰苯二甲酸二丁酷研究進(jìn)展[J].衛(wèi)生研究，2003,32(4)：407-408.

[5] 許旭東，胡曉茹，袁經(jīng)權(quán)，等.草珊瑚中香豆素化學(xué)成分研究[J].中國中藥雜志，2006,8(33)：900-902.

StudyontheChemicalConstituentsoffromtheRootsofTripterygiumWilfordii

Yan Zhen1, Tian Yang2, Ma Yueping3, Fu Xiaochun1, Zhang Zhenxue2, Wang Jinhui3

(1.GuangDongFoodandDrugVocationalCollege,GuangzhouGuangdong510520,China;2.SchoolofChemicalEngineering,ShenyangUniversityofChemicalTechnology,ShenyangLiaoning110142,China;3.SchoolofTriditionalChineseMatericaMedica,ShenyangPharmaceuticalUniversity,ShenyangLiaoning110016,China)

Objective: To study the chemical constituents of theTripterygiumwilfordiiHook. f..MethodsThe constituents were isolated by chromatography methods. Physico-chemical properties and spectroscopic analysis were employed for the structural identification.ResultsSeven compounds were obtained and their structure were identified as5α-stigmast-3,6-dione (1),6β-hydroxystigmast-4-en-3-one(2), phthalic acid dibutyl ester(3), fraxetin (4),β-sitosterol(5), daucosterol(6).ConclusionAmong the compounds, compounds1,3and4were isolated from Celastraceae for the first time, and compound2was isolated from genusTripterygiumfor the first time.

Tripterygiumwilfordii; Chemical constituent; Structural identification

2009-09-29)