中成藥中非法添加西藥成分含量測定的不確定度分析

劉永利，郭瑞峰，張西如，李冬梅（河北省藥品檢驗(yàn)所，石家莊市 050011）

中成藥中非法添加西藥成分已成為當(dāng)前不法分子制售假藥的新趨勢，主要集中在補(bǔ)腎、降糖、鎮(zhèn)痛等藥品中，此類藥品若長期服用將對(duì)患者的身體健康造成嚴(yán)重危害，因此需盡快制定科學(xué)的檢測方法對(duì)其進(jìn)行檢驗(yàn)，以確保用藥安全。本文根據(jù)《測量不確定度評(píng)定與表示》（JJF1059-1999）中有關(guān)規(guī)定[1]，以鹿茸片為例，對(duì)中成藥中非法添加西藥成分含量測定的不確定度進(jìn)行了分析[2～6]，以為評(píng)價(jià)此類檢品的檢測報(bào)告提供科學(xué)依據(jù)。

1 儀器與試藥

LC-MS 2010型液-質(zhì)（LC-MS）聯(lián)用儀，包括二極管陣列與MS檢測器、手動(dòng)進(jìn)樣器（日本Shimadzu公司）。枸櫞酸西地那非對(duì)照品（中國藥品生物制品檢定所）；鹿茸片抽自某個(gè)體藥店（香港某企業(yè)生產(chǎn)，批號(hào)：061105）。

2 測定方法

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

2.2 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取枸櫞酸西地那非對(duì)照品10.82 mg，置100 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 mL，置100 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.3 樣品溶液的制備

取本品10片，除去糖衣，精密稱定，研細(xì)，取0.3 g，精密稱定，置25 mL量瓶中，加流動(dòng)相適量，超聲處理（功率250 W，頻率40 kHz）15 min，放冷，加流動(dòng)相至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.4 測定結(jié)果

分別精密吸取對(duì)照品溶液與樣品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，測定，利用外標(biāo)法計(jì)算樣品含量，結(jié)果為每片0.65 mg。

3 不確定度分析

3.1 建立數(shù)學(xué)模型

本試驗(yàn)為外標(biāo)法測定樣品中主成分含量，其數(shù)學(xué)模型為：P＝Asam×mref×Vsam/(Aref×msam×Vref)×W×f×1 000。

式中，P為樣品中枸櫞酸西地那非的含量（mg·片-1）；Asam為樣品的峰響應(yīng)值；Vsam為樣品溶液的體積（mL）；msam為樣品的取樣量（g）；Aref為對(duì)照品的峰響應(yīng)值；Vref為對(duì)照品溶液的體積（mL）；mref為對(duì)照品的取樣量（g）；W為平均片重；f為均勻性系數(shù)，值為1；1 000為g與mg的換算。則：

3.2 識(shí)別和分析不確定度來源

影響本試驗(yàn)不確定度的主要分量見圖1。

3.3 不確定度分量的量化

3.3.1 樣品峰面積（Asam）的重復(fù)性：通過測定樣品峰面積10次，計(jì)算u（Asam）＝1 486。

3.3.2對(duì)照品峰面積（Aref）的重復(fù)性：方法同“3.3.1”。u（Aref）＝3 538。

綜上所述，為確保高層建筑物正常施工、安全使用，開展沉降監(jiān)測具有重要的意義?；诔两当O(jiān)測數(shù)據(jù)分析的復(fù)雜性，本文提出結(jié)合現(xiàn)代軟件實(shí)現(xiàn)沉降數(shù)據(jù)分析處理的信息化、自動(dòng)化、智能化，建立高層建筑沉降觀測數(shù)據(jù)管理與分析系統(tǒng)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)數(shù)據(jù)的高效、規(guī)范分析與處理，同時(shí)在查詢、存儲(chǔ)方面也具有顯著優(yōu)勢，為工程施工與運(yùn)營管理等提供可靠依據(jù)。

圖1 不確定度的主要分量Fig 1 Main component of uncertainty

3.3.3 樣品稱量（msam）的不確定度：樣品稱量的不確定度主要有2個(gè)來源：第一，重復(fù)性，也稱稱量變動(dòng)性。據(jù)文獻(xiàn)記載，在50 g以內(nèi)，變動(dòng)性標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.07 mg；第二，天平校準(zhǔn)產(chǎn)生的不確定度，按檢定證書給出的不確定度U95＝0.2 mg（載荷為200 g），按正態(tài)分布換算成標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.2/1.96＝0.10 mg。樣

3.3.8 對(duì)照品純度：對(duì)照品由中國藥品生物制品檢定所提供，由于無相關(guān)數(shù)據(jù)，因此暫忽略不計(jì)。

3.3.9 均勻性（f）：由于此類樣品多是不規(guī)范生產(chǎn)，甚至是手工作坊生產(chǎn)，因此需測定每片含量，計(jì)算S/C（S為標(biāo)準(zhǔn)偏差；C為平均含量），作為均勻性的不確定度。方法如下：取本品10片，除去糖衣，分別置研缽中，研細(xì)，轉(zhuǎn)移至25 mL量瓶中，用少量流動(dòng)相洗滌研缽，洗液并入量瓶中，加流動(dòng)相適量超聲處理15 min，放冷，加甲醇至刻度，搖勻，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件分別測定每片含量。則：u（f）＝S/C＝0.078/1.1＝0.071。

3.4 計(jì)算合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度

3.5 計(jì)算擴(kuò)展不確定度

按95%置信概率，取包含因子k＝2，則：

U95＝0.048×2＝0.096 mg·片-1，修約為每片0.10 mg。

3.6 結(jié)果

本次試驗(yàn)鹿茸片中枸櫞酸西地那非含量為每片（0.65±0.10）mg。

4 討論

本試驗(yàn)不確定度的主要來源為樣品不均勻性，因此在分析此類樣品時(shí)應(yīng)采取合理的取樣方式，盡量多取樣本，研細(xì)混勻。

[1]國家食品藥品監(jiān)督管理局.國家藥品補(bǔ)充檢驗(yàn)方法及補(bǔ)充批件[Z].2006009.

[2]國家質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局.測量不確定度評(píng)定與表示（JJF-1059-1999）[S].北京：中國計(jì)量出版社，1999：4～8.

[3]國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局.中華人民共和國計(jì)量檢定規(guī)程-常用玻璃量器（JJG206-2006）[S].北京：中國計(jì)量出版社，2006：7～9.

[4]中國實(shí)驗(yàn)室國家認(rèn)可委員會(huì).化學(xué)分析中不確定度的評(píng)估指南[M].北京：中國計(jì)量出版社，2002：75～88.

[5]廖廣仁，梁麗梅，李 英，等.RP-HPLC法測定補(bǔ)腎壯陽中藥制劑中違法添加的枸櫞酸西地那非[J].中國藥房，2008，19（15）：1 155.

[6]陳曉虎.HPLC法測定清開靈注射液中黃芩苷含量的不確定度分析[J].中國藥房，2007，18（15）：1 168.