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    幾種殺菌劑對(duì)南方紅豆杉炭疽病的室內(nèi)毒力測(cè)定

    2010-09-10 09:05:06范曉龍
    山西農(nóng)業(yè)科學(xué) 2010年8期
    關(guān)鍵詞:紅豆杉分生孢子多菌靈

    范曉龍

    (山西林業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院,山西太原030009)

    南方紅豆杉炭疽病是紅豆杉的主要病害之一,由膠孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides(Penz)Sacc)侵染引起。該病主要為害紅豆杉的葉和嫩梢,葉片尤為嚴(yán)重。為了尋求有效的控制措施,本研究在室內(nèi)進(jìn)行了7種不同的殺菌劑對(duì)南方紅豆杉炭疽病分生孢子萌發(fā)和菌絲生長的抑制測(cè)定。

    1 材料和方法

    1.1 供試藥劑

    共選用了7種不同的殺菌劑用于化學(xué)防治試驗(yàn),具體情況如表1所示。

    表1 供試藥劑一覽

    1.2 供試菌株

    菌株來自福建省明溪縣沙溪鎮(zhèn)南方紅豆杉與杉木混交林中紅豆杉炭疽病病葉,對(duì)其進(jìn)行常規(guī)組織分離,經(jīng)單孢純化后獲得菌種。在PDA培養(yǎng)基上,于(25±1)℃中培養(yǎng)備用。

    1.3 測(cè)定方法

    1.3.1 分生孢子萌發(fā)測(cè)定 將7種殺菌劑分別配成 500,1 000,1 500,2 000 倍液,然后將孢子懸浮液(10×10倍顯微鏡下每視野100個(gè)左右孢子)加入7種藥劑的各個(gè)濃度中,用滴管滴少許含有孢子懸浮液的藥劑于凹玻片上(在培養(yǎng)皿中保濕),置于25℃的恒溫箱中培養(yǎng),以無菌水作對(duì)照,重復(fù)3次,48 h后檢查分生孢子的萌發(fā)情況,計(jì)算抑制率[1],并進(jìn)行方差分析和多重比較。

    1.3.2 菌落生長速度測(cè)定 采用含毒介質(zhì)培養(yǎng)法的生長速度法[2-3]。將7種殺菌劑各設(shè)6個(gè)濃度梯度,即 500,800,1 000,1 500,2 000,3 000 倍液,以清水作對(duì)照。農(nóng)藥按外比法稀釋[4],即稀釋100倍或100倍以上的,計(jì)算稀釋量時(shí)不扣除原藥劑所占的1份。分別將各種殺菌劑,用無菌水稀釋成比供試濃度高10倍的母液,將培養(yǎng)基滅菌后,冷卻到50℃左右,在無菌工作臺(tái)上,根據(jù)不同濃度處理所需劑量,用移液管將母液移入培養(yǎng)基中,迅速搖勻后倒入培養(yǎng)皿中,制成薄厚均勻的含藥PDA平板。取直徑為6 mm,培養(yǎng)5 d的炭疽菌落的邊緣菌餅,置于PDA平板中央,于28℃的恒溫箱中培養(yǎng)3 d,用十字交叉法測(cè)量菌落直徑3次,求平均值,計(jì)算相對(duì)抑制率[4],并進(jìn)行方差分析和多重比較。每一藥劑設(shè)3個(gè)重復(fù),并以無菌水作對(duì)照。

    1.3.3 抑制中濃度(E C50)的計(jì)算 為較精確地測(cè)定出膠孢炭疽菌對(duì)不同殺菌劑的敏感程度,用有效中濃度(即抑制50%病菌菌絲生長量所需的有效濃度)作為殺菌劑的毒力比較指標(biāo)[1]。統(tǒng)計(jì)計(jì)算時(shí),將相對(duì)抑制率轉(zhuǎn)化為幾率值作為因變量(Y),以各處理藥劑濃度的對(duì)數(shù)值作為自變量(X),用最小二乘法進(jìn)行直線回歸求出毒力回歸方程[5-9]。由毒力回歸反應(yīng)式,令Y=5(即抑制50%的幾率值),反求X(致死中濃度EC50)。EC50值越小,即濃度越小,說明該藥劑對(duì)病原菌的抑制作用越強(qiáng);反之,抑制作用越差[10]。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 分生孢子萌發(fā)抑制測(cè)定結(jié)果

    從表2,3可以看出,各種藥劑對(duì)孢子的萌發(fā)均有很高的抑制率。對(duì)孢子萌發(fā)抑制最好的是甲基托布津,其次為炭克、多菌靈、退菌特、達(dá)科寧和代森錳鋅,最差的是代森鋅。DMRT方差分析結(jié)果表明,不同藥劑和不同濃度對(duì)紅豆杉炭疽菌的分生孢子萌發(fā)抑制率的影響差異顯著。

    表2 不同殺菌劑對(duì)分生孢子萌發(fā)的影響

    續(xù)表2

    表3 不同藥劑和濃度對(duì)孢子萌發(fā)影響的方差分析

    2.2 菌絲生長速度法的測(cè)定結(jié)果

    生長速度法測(cè)定結(jié)果(表4)表明,7種藥劑對(duì)紅豆杉炭疽菌菌絲的生長均有抑制作用,但各藥劑間的抑制強(qiáng)度不同,從毒力回歸方程及EC50值可以看出,甲基托布津和炭克的抑制作用最強(qiáng),EC50值分別為2.29,2.88 mg/L;其次是多菌靈和退菌特,EC50值分別為3.72,4.07 mg/L;達(dá)科寧、代森錳鋅和代森鋅的抑制作用最差,EC50值分別為6.31,8.13,15.49 mg/L。7種藥劑對(duì)紅豆杉炭疽菌的毒力大小依次為:甲基托布津>炭克>多菌靈>退菌特>達(dá)科寧>代森錳鋅>代森鋅。

    由表5(DMRT方差分析)結(jié)果可知,不同藥劑和不同濃度對(duì)紅豆杉炭疽菌菌絲生長的影響差異顯著。

    表4 不同殺菌劑對(duì)菌絲生長的影響

    續(xù)表4

    表5 不同藥劑和濃度對(duì)菌絲生長影響的方差分析

    3 小結(jié)

    室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果表明,對(duì)孢子萌發(fā)和菌絲生長抑制最好的都是甲基托布津,其次為炭克、多菌靈和退菌特,最差的是代森鋅。根據(jù)此結(jié)果可以篩選出甲基托布津、炭克、多菌靈和退菌特4種殺菌劑用于田間藥效試驗(yàn)。

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