超聲波輔助提取楓香葉總黃酮工藝研究

晏 麗，高中松

（吉首大學(xué)城鄉(xiāng)資源與規(guī)劃學(xué)院，湖南張家界427000）

楓香（Liquidambar formosana Hance）為金縷梅科楓香亞科楓香屬的高大落葉喬木，別名為楓木、黑飯木、香楓等，是我國重要的鄉(xiāng)土樹種，也是亞熱帶地區(qū)的優(yōu)良速生落葉闊葉樹種[1]，主要分布于我國黃河流域及其以南地帶，主產(chǎn)于江蘇、浙江、安徽、湖南、湖北、江西、福建、臺(tái)灣、廣西等?。▍^(qū)）[2]。楓香全株均可入藥[3]，但近年，許多學(xué)者對(duì)其栽培技術(shù)及園林應(yīng)用進(jìn)行了研究，對(duì)其藥用價(jià)值的開發(fā)利用較少，尤其是對(duì)其黃酮類化合物藥用價(jià)值的研究目前尚處于空白。黃酮類化合物廣泛存在于植物界，在花類藥材中種類及含量尤其豐富，生理活性多樣，引起國內(nèi)外的廣泛重視[4]。近年來，超聲技術(shù)廣泛應(yīng)用于黃酮類化合物的提取研究，如對(duì)大蒜黃酮、茉莉花黃酮、洋蔥黃酮、石榴黃酮等的提取[5-10]。超聲技術(shù)應(yīng)用于提取楓香葉中黃酮類物質(zhì)的研究尚未見報(bào)道。

本研究利用超聲技術(shù)，以楓香葉為原料，乙醇水溶液為溶劑，考察乙醇濃度、提取時(shí)間和料液比對(duì)總黃酮提取率的影響，通過正交試驗(yàn)對(duì)提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，用紫外分光光度法測(cè)定提取物中總黃酮的含量。楓香葉總黃酮的提取，可為楓香資源的高效開發(fā)和綜合利用提供參考依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料

楓香葉采自吉首大學(xué)張家界校園，采集時(shí)間：為2009年7月7日。主要試劑：乙醇（分析純）、總黃酮對(duì)照品蘆?。ㄖ袊幤飞镏破窓z定所）。主要儀器：SB5200DT型超聲波清洗機(jī)（寧波新芝生物科技股份有限公司）、SHZ-D循環(huán)水式真空泵（河南省鞏義市英峪予華儀器廠）、UV757CRT紫外可見分光光度計(jì)（上海精密科學(xué)儀器有限公司）、HH-6數(shù)顯恒溫水浴鍋（江蘇省金壇市富華儀器有限公司）、DHG-9240A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱。

1.2 方法

1.2.1 繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線 用十萬分之一天平精密稱取烘干2 h的蘆丁對(duì)照品13.4 mg，用60%乙醇溶解，定容于50 mL容量瓶中，搖勻，得到0.268 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)母液。精密吸取該標(biāo)準(zhǔn)溶液0，1，2，4，6，8 mL，分別置于 25 mL容量瓶中，加5%亞硝酸鈉0.7 mL，混勻，放置5 min，加10%硝酸鋁0.7 mL，混勻，放置6 min，加5%氫氧化鈉5 mL，用30%乙醇定容至刻度，搖勻，放置10 min后比色，用紫外分光光度計(jì)在200～800 nm范圍進(jìn)行光譜掃描，得到標(biāo)樣的光譜圖。由光譜圖可知，在507 nm處有最大吸收峰，得到質(zhì)量濃度X與吸光度Y的標(biāo)準(zhǔn)曲線為Y=0.011 3X+0.007 4，R2=0.999 5（圖 1）。

1.2.2 提取楓香葉總黃酮的正交試驗(yàn) 采用超聲波提取法，以乙醇濃度（A）、提取時(shí)間（B）、料液比（C）3個(gè)提取因素為考察對(duì)象（表1），按L9（34）正交表設(shè)計(jì)試驗(yàn)方案進(jìn)行正交試驗(yàn)，按標(biāo)準(zhǔn)曲線的測(cè)定方法測(cè)定提取液的吸光度，并根據(jù)線性回歸方程計(jì)算總黃酮提取率，以總黃酮得率為考察指標(biāo)，確定提取楓香葉總黃酮的最佳工藝。

表1 正交試驗(yàn)因素與水平

2 結(jié)果與討論

每次稱取0.1 g楓香葉干燥粉，選取乙醇濃度、料液比和提取時(shí)間3個(gè)因素進(jìn)行正交試驗(yàn)，結(jié)果如表2所示。對(duì)結(jié)果進(jìn)行方差分析（表3）。試驗(yàn)結(jié)果表明，乙醇濃度和提取時(shí)間對(duì)楓香葉總黃酮的提取效果有顯著影響，料液比對(duì)總黃酮提取的影響較小，3個(gè)因素對(duì)總黃酮提取率的影響大小依次為：乙醇濃度＞提取時(shí)間＞料液比，提取楓香葉總黃酮的最佳工藝條件為A3B2C1，即乙醇濃度80%，提取時(shí)間60 min，料液比1∶10。

表2 正交試驗(yàn)結(jié)果

表3 方差分析

3 結(jié)論

以乙醇溶液為提取劑，用超聲波法進(jìn)行楓香葉總黃酮的提取，試驗(yàn)結(jié)果表明，影響超聲波法提取楓香葉總黃酮的主次因素為：乙醇濃度＞提取時(shí)間＞料液比。最佳提取工藝為A3B2C1，即乙醇濃度80%，提取時(shí)間60 min，料液比1∶10。與傳統(tǒng)浸提法相比，超聲波法的提取時(shí)間較短，從節(jié)約能源和技術(shù)經(jīng)濟(jì)性的角度來看，超聲波提取法優(yōu)于傳統(tǒng)浸提法。因此，超聲波提取楓香葉總黃酮具有提取速度快、節(jié)約能源等優(yōu)勢(shì)，是一種比較理想的方法。

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