Smad7和TGF-β1在宮頸癌中的表達及意義

孟茜 孟娟

Smad7和TGF-β1在宮頸癌中的表達及意義

孟茜 孟娟

目的 探討Smad7和TGF-β1在宮頸癌中的表達，研究其在不同臨床病理特征中的意義。方法 以88例宮頸癌標本作為實驗組，以40例慢性宮頸炎組織作為對照組，應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)，分別檢測Smad7和TGF-β1在二組中的表達及在腫瘤不同臨床病理特征之間的關(guān)系。結(jié)果 宮頸癌中Smad7和TGF-β1表達的陽性率明顯高于對照組(P＜0.05)，Smad7和TGF-β1的表達與宮頸癌臨床分期、浸潤宮頸管長度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)(P＜0.05)，Smad7和TGF-β1在宮頸癌中的表達具有正相關(guān)關(guān)系(P＜0.05)。結(jié)論 宮頸癌在發(fā)生發(fā)展過程中，Smad7和TGF-β1起重要的協(xié)同作用，聯(lián)合檢測Smad7和TGF-β1在宮頸癌中的表達可能對判斷預(yù)后有重要價值。

宮頸癌；Smad7；TGF-β1；免疫組化

宮頸癌是最常見的女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤之一，其發(fā)生與發(fā)展是多因素綜合作用的結(jié)果。近來相關(guān)研究表明信號轉(zhuǎn)導(dǎo)在腫瘤的發(fā)病中具有重要作用[1]。Smad7是抑制性Smads重要成員之一，它可以與TβR-I結(jié)合，通過競爭抑制方式使途徑限制型Smads無法與TβR-I結(jié)合并磷酸化，對TGF-β1信號傳遞起重要作用[2]。本實驗將應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測88例宮頸癌中Smad7和TGF-β1的表達，探討二者在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用。

1 材料和方法

1.1 臨床材料

收集宮頸癌手術(shù)后的存檔的蠟塊作為實驗組，共88例，年齡26～65歲，平均43.2歲?；颊咝g(shù)前均未進行任何治療。同時選取因子宮肌瘤行全子宮切除術(shù)后的慢性宮頸炎的標本40例作為對照組。二組患者在年齡、病史等相關(guān)因素的比較中，差別無明顯意義，具有可比性。

1.2 免疫組化方法檢測Smad7和TGF-β1的檢測應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)的S-P法。具體步聚：脫蠟，水化組織切片，3%H2O2去離子水孵育10分鐘，以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶；抗原修復(fù)后分別滴加一抗，室溫37度孵育1～2小時或過夜，PBS沖洗，5分鐘×3次；滴加生物素標記的二抗，室溫37度孵育20分鐘，PBS沖洗，5分鐘×3次；滴加辣根酶標記鏈霉卵白素，室溫37度孵育20～30分鐘，PBS沖洗，5分鐘×3次；應(yīng)用DAB顯色劑顯色；自來水充分沖洗、復(fù)染、脫水、透明、封片。補給中的檢測均由同一病理技師完成，并在顯微鏡下顯色觀察，嚴格質(zhì)控。

1.3 結(jié)果判定方法

結(jié)果的判斷均由二位病理主治醫(yī)師共同閱片得出。Smad7和TGF-β1的陽性信號均為細胞質(zhì)內(nèi)棕黃色顆?；蜃攸S色片狀分布。合并計算高倍鏡下(×400)隨機選擇的5個視野中陽性細胞占全部計數(shù)腫瘤細胞的百分率，平均每個視野細胞質(zhì)呈陽性反應(yīng)的細胞數(shù)≥10%為陽性，無明顯陽性反應(yīng)或陽性反應(yīng)的細胞數(shù)＜10%為陰性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析采用卡方檢驗，所有統(tǒng)計數(shù)據(jù)均用SAS6.12軟件分析完成，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 Smad7和TGF-β1在二組中的表達

Smad7和TGF-β1在實驗組中表達的陽性率明顯高于對照組。見表1。

2.2 Smad7和TGF-β1的表達與宮頸癌臨床病理特征的關(guān)系由表2可見，Smad7和TGF-β1表達的陽性率與宮頸癌的臨床分期、宮頸管浸潤長度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。

2.3 宮頸癌中Smad7和TGF-β1表達的關(guān)系Smad7和TGF-β1在宮頸癌組織中的表達呈正相關(guān)(r=0.42, P＜0.05)。而在正常宮頸中Smad7和TGF-β1的表達未見相關(guān)性(P＞0.05)。

3 討論

惡性腫瘤在體內(nèi)發(fā)生發(fā)展是一個錯綜復(fù)雜的過程，受多種相關(guān)基因的調(diào)控[3]。TGF-β是一族結(jié)構(gòu)和功能密切相關(guān)的活性多肽，廣泛參與細胞的分化、增殖、形態(tài)改變、黏附、轉(zhuǎn)移、細胞外基質(zhì)產(chǎn)生及凋亡等。有研究認為TGF-β能引起小鼠成纖維細胞產(chǎn)生表型轉(zhuǎn)化，在機體的免疫調(diào)節(jié)、細胞生長和分化、腫瘤免疫等方面起重要作用[4]。而且有觀點認為TGF-β受體共同介導(dǎo)超家族成員的跨膜信號傳導(dǎo)，胞內(nèi)Smads信號則將信號從細胞表面受體傳導(dǎo)到細胞核內(nèi)部，完成轉(zhuǎn)錄過程[5]。當前在已發(fā)現(xiàn)8種Smad蛋白，從結(jié)構(gòu)和功能上分為3個亞型：①受體調(diào)節(jié)型Smad，包括Smad1、2、3、5、8，作為TβRI激酶的底物，活化后入核，調(diào)節(jié)特異基因的表達。②共同介導(dǎo)的Smad，主要指Smad4，能與受體調(diào)節(jié)型相互作用，形成異聚體。③抑制性Smad包括Smad6、7，對前兩種Smad介導(dǎo)的基因表達具有抑制作用[6]。還有學(xué)者認為Smad7是一種侯補癌基因[4]。有研究認為Smad7是TGF-β胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的中心分子[7]，而TGF-β在抑制細胞增殖和腫瘤發(fā)生中起著重要的作用。趙倩等[8]認為Smad7和TGF-β1在子宮內(nèi)膜異位癥中的具有重要作用，具二者的表達具有負相關(guān)。而張勇等[9]認為Smad7和TGF-β1在鼻咽癌中的表達呈正相關(guān)，因此，關(guān)于二者的研究及相關(guān)性存在爭議，尤其在宮頸癌中的作用，尚不明確。

表1 Smad7和TGF-β1在實驗組與對照組中的表達

表2 Smad7和TGF-β1在實驗組中不同臨床病理特征中的表達

本實驗應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測宮頸癌中Smad7和TGF-β1的表達，結(jié)果顯示Smad7和TGF-β1的表達部位均定位于細胞質(zhì)中，且宮頸癌中Smad7和TGF-β1的表達明顯高于慢性宮頸炎組織，提示Smad7和TGF-β1參與了宮頸癌的發(fā)生發(fā)展。Smad7和TGF-β1與宮頸癌的臨床分期、宮頸管浸潤長度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，提示Smad7和TGF-β1參與了宮頸癌的進展及淋巴道播散。由于臨床分期及浸潤轉(zhuǎn)移與患者預(yù)后相關(guān)，因此，提示臨床中對宮頸癌標本進行Smad7和TGF-β1的檢測，可能對判斷預(yù)后有重要價值。實驗結(jié)果顯示宮頸癌中Smad7和TGF-β1的表達具有正相關(guān)，提示Smad7和TGF-β1具有明顯的協(xié)同作用。Smad7在TGF-β1誘導(dǎo)表達后，反過來直接與TGFβR結(jié)合形成穩(wěn)定的復(fù)合物，并且具有與其他信息分子不同的調(diào)節(jié)作用[10]，是一種潛在的與癌發(fā)生相關(guān)的基因。TGF-β1與其相應(yīng)受體、胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad7共同組成了一個影響腫瘤形成和發(fā)展的通路，通路中任何一個組成元件發(fā)生紊亂，均可導(dǎo)致信號轉(zhuǎn)導(dǎo)紊亂，影響其生物學(xué)效應(yīng)。

總之，Smad7和TGF-β1在宮頸癌中高表達，且具有協(xié)同作用。實驗結(jié)果也表明細胞轉(zhuǎn)導(dǎo)的異常對宮頸癌的發(fā)生發(fā)展具有重要作用。

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Objective To detect the expressions of Smad7 and TGF-β1in cervical carcinoma, and investigate their relationship in different clinical characteristic of neoplasm. Methods The study included 88 cases of cervical carcinoma as experimental group and 40 cases of chronic cervicitis tissues as control group. We analyzed their expressions of Smad7 and TGF-β1in different pathological character by using the IHC. Results Comparisons of the primary tumors with cervical carcinoma and chronic cervicitis tissues showed that there were signif i cant high-regulation of Smad7 and TGF-β1(P＜0.05). The expressions of Smad7 and TGF-β1were associated with clinical stage, infiltration degree and lymph node metastasis(P＜0.05).There was positive correlationship between Smad7 and TGF-β1in cervical carcinoma(P＜0.05). Conclusion Smad7 and TGF-β1may promote the development of cervical carcinoma. The combined examination of Smad7 and TGF-β1may be helpful to predict the prognosis in patients with cervical carcinoma.

cervical carcinoma; Smad7; TGF-β1; IHC

10.3969/j.issn.1009-4393.2010.21.055

272013 山東濟寧醫(yī)學(xué)院 (孟茜)274000 山東菏澤醫(yī)學(xué)?？茖W(xué)校 (孟娟)