復(fù)方丹參片與丹參片對(duì)冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者血小板活化抑制作用的比較

姬曉鵬，蔣 斌，潘 琳，黃 河，宋其貴，馮中培

（四川大竹縣人民醫(yī)院，大竹縣 635100）

血小板活化在冠心病、心肌缺血、動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生、進(jìn)展、轉(zhuǎn)歸中具有重要作用。冠狀動(dòng)脈內(nèi)血栓主要由血小板組成，其不僅可以減少冠狀動(dòng)脈內(nèi)血流或造成缺血，而且對(duì)缺血后梗死范圍的擴(kuò)展及預(yù)后有著不可忽視的作用。血小板活性的增加是引起動(dòng)脈粥樣硬化和造成斑塊不穩(wěn)定的重要危險(xiǎn)因素[1，2]。環(huán)磷酸腺苷（cAMP）、血栓素A2（TXA2）、前列腺環(huán)素（PGI2）與血小板功能密切相關(guān)，丹參可提高cAMP、PGI2含量，降低TXA2含量[3]，抑制血小板聚集。目前，臨床上廣泛使用的丹參制劑主要有復(fù)方丹參片、復(fù)方丹參滴丸和丹參片等。本試驗(yàn)擬觀察復(fù)方丹參片和丹參片對(duì)冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者血小板活化的作用并進(jìn)行比較，為臨床合理用藥提供試驗(yàn)依據(jù)。

1 臨床資料

1.1 病例選擇

90例入選病例來(lái)自本院心血管內(nèi)科2007年1月～2009年7月住院患者，有明確癥狀、體征，并經(jīng)冠狀動(dòng)脈CT血管造影確診為冠狀動(dòng)脈粥樣硬化。分為復(fù)方丹參片組、丹參片組和對(duì)照組。3組年齡、性別、病情程度、伴發(fā)疾病及既往史的評(píng)分差異無(wú)顯著性（P＞0.05），具有可比性。剔除了腫瘤、病危和藥物不能耐受者。另設(shè)正常組30例，系本院健康體檢者，未發(fā)現(xiàn)心、肺、肝、腎及內(nèi)分泌或新陳代謝疾病。本試驗(yàn)經(jīng)過(guò)本院學(xué)術(shù)委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 治療方法

復(fù)方丹參片組：口服復(fù)方丹參片（四川省某制藥有限公司，規(guī)格：每片600 g，國(guó)藥準(zhǔn)字Z20020119）3 片，tid；丹參片組：口服丹參片（河南省某制藥股份有限公司，規(guī)格：每片0.48 g，國(guó)藥準(zhǔn)字Z20073141）3 片，tid；對(duì)照組：給予安慰劑。療程為2個(gè)月。

1.3 檢測(cè)儀器與方法

低溫離心機(jī)（美國(guó)Sigma公司）；Light CyclerⅡ型實(shí)時(shí)熒光定量基因擴(kuò)增系統(tǒng)（德國(guó)Roche公司）；放射免疫計(jì)數(shù)器（成都中宇儀器有限公司）。試劑Trizol（德國(guó)Roche公司）；Rnasin（寶生物工程（大連）有限公司）；逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、熒光定量Realtime PCR試劑盒（上海東洋坊科技有限公司）；cAMP、TXA2、PGI2放免試劑盒（南京凱基生物技術(shù)有限公司）。

方法采用realtime RT-PCR法檢測(cè)全血中前列腺環(huán)素I2合酶（PTGIS）信使核糖核酸（mRNA）的表達(dá)及放射免疫法檢測(cè)血清中cAMP、TXA2、PGI2的表達(dá)[4]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 復(fù)方丹參片與丹參片對(duì)冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者血漿中cAMP、TXA2、PGI2表達(dá)的影響

本試驗(yàn)采用放射免疫法測(cè)定血漿中cAMP、TXA2、PGI2的表達(dá)。結(jié)果如表1所示，與正常組比較，對(duì)照組冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者血漿中cAMP、PGI2表達(dá)明顯降低，TXA2明顯升高；復(fù)方丹參片和丹參片能明顯升高冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者血漿中cAMP、PGI2表達(dá)，明顯降低血漿中TXA2中的表達(dá)（P＜0.01）；復(fù)方丹參片組的升高和降低幅度均明顯大于丹參片組（P＜0.01）。

表1 復(fù)方丹參片與丹參片對(duì)冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者血漿中cAMP、TXA2、PGI2表達(dá)的影響（±s，n＝30）Tab 1 Effect of Compound danshen tablets and Danshen tablets on the expression of cAMP，TXA2，PGI2in patients with coronary atherosclerosis（±s，n＝30）

表1 復(fù)方丹參片與丹參片對(duì)冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者血漿中cAMP、TXA2、PGI2表達(dá)的影響（±s，n＝30）Tab 1 Effect of Compound danshen tablets and Danshen tablets on the expression of cAMP，TXA2，PGI2in patients with coronary atherosclerosis（±s，n＝30）

與正常組比較：＊P＜0.01；與丹參片組比較：#P＜0.01；與對(duì)照組比較：ΔP＜0.01vs.normal group：＊P＜0.01；vs.danshen tablets group：#P＜0.01；vs.control group：ΔP＜0.01

PGI2/pg·mL-1 474.31±84.08185.63±38.51＊298.31±70.36#Δ 241.38±58.79Δ組別正常組對(duì)照組復(fù)方丹參片組丹參片組cAMP/pg·mL-1 17.23±3.344.26±1.08＊9.87±2.13#Δ 7.16±1.62Δ TXA2/pg·mL-1 11.39±2.9534.95±7.62＊20.72±5.06#Δ 25.74±6.11Δ

2.2 復(fù)方丹參片與丹參片對(duì)冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者全血中PTGIS mRNA表達(dá)的影響

本試驗(yàn)采用realtime RT-PCR法檢測(cè)全血中PTGIS mRNA的表達(dá)。結(jié)果如表2所示，與正常組比較，對(duì)照組冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者全血中PTGIS mRNA表達(dá)明顯降低；復(fù)方丹參片和丹參片能明顯升高冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者全血中PTGIS mRNA表達(dá)，2組分別升高了171.19%、86.44%（P＜0.01）。

表2 復(fù)方丹參片與丹參片對(duì)冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者全血中PTGIS mRNA的影響（±s，n＝30）Tab 2 Effect of Compound danshen tablets and Danshen tablets on the mRNAexpression of PTGIS in patients with coro nary atherosclerosis（±s，n＝30）

表2 復(fù)方丹參片與丹參片對(duì)冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者全血中PTGIS mRNA的影響（±s，n＝30）Tab 2 Effect of Compound danshen tablets and Danshen tablets on the mRNAexpression of PTGIS in patients with coro nary atherosclerosis（±s，n＝30）

與正常組比較：＊P＜0.01；與丹參片組比較：#P＜0.01；與對(duì)照組比較：ΔP＜0.01vs.normal group：＊P＜0.01；vs.danshen tablets group：#P＜0.01；vs.control group：ΔP＜0.01

組別正常組對(duì)照組復(fù)方丹參片組丹參片組PTGIS/-actin 0.28±0.0480.059±0.0092＊0.16±0.033#Δ 0.11±0.029Δ

3 討論

急性冠狀動(dòng)脈綜合征（ACS）是由于冠狀動(dòng)脈內(nèi)粥樣斑塊破裂、血小板聚集和血栓形成導(dǎo)致冠狀動(dòng)脈完全或不完全阻塞引起的一組臨床綜合征，是嚴(yán)重危害人類健康的一大類疾病。大量的研究結(jié)果表明，冠脈缺血后血小板聚集和黏附功能增強(qiáng)，血小板功能變化最明顯的是 TXA2-PGI2系統(tǒng)[5，6]。TXA2、PGI2均為花生四烯酸（AA）的代謝產(chǎn)物，TXA2可使冠脈收縮和血小板聚集；PGI2的作用則可使冠脈擴(kuò)張、血小板解聚；PGI2/TXA2的平衡是維持正常血小板功能和血液凝固的重要機(jī)制，也是保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞免疫損傷的重要環(huán)節(jié)。cAMP作為血小板的第二信使對(duì)血小板功能的調(diào)節(jié)起重要作用。激活血小板的物質(zhì)如凝血酶、TXA2、前列腺素內(nèi)過(guò)氧化物（PGH2、PGG2）等可抑制腺苷環(huán)化酶（AC），降低血小板內(nèi)cAMP水平，而升高cAMP的藥物能抑制誘聚劑誘導(dǎo)的血小板聚集。cAMP主要通過(guò)降低細(xì)胞內(nèi)Ca2+水平、抑制血小板肌球蛋白磷酸化、促進(jìn)PGE2和PGI2的合成、抑制TXA2合成以及抑制凝血酶與其受體結(jié)合等抑制血小板的活化。

丹參（Salvia miltiorrhiza）為唇形科鼠尾草屬多年生草本植物，具有擴(kuò)張微血管，降低血液黏稠度，改善血液黏、濃、聚、滯狀態(tài)，從而改善微循環(huán)的作用。復(fù)方丹參片主要由丹參、三七和冰片組成。丹參活血化瘀、清心安神、通脈止痛，為君藥；三七活血化瘀、通經(jīng)止痛，為臣藥；冰片辛香走竄，能通竅止痛、醒神化濁、引經(jīng)入藥，為佐使藥，三藥共奏活血化瘀、理氣止痛之功。復(fù)方丹參片有抗心肌缺血、改善血流變學(xué)、抗動(dòng)脈硬化、抗心律失常、抗腦缺血損傷等作用。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，相對(duì)于正常組，冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者血漿中cAMP、PGI2、PTGIS mRNA表達(dá)明顯降低，TXA2表達(dá)明顯升高。說(shuō)明冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者血小板的活化程度比正常人高，這與既往研究結(jié)果相符。復(fù)方丹參片組和丹參片組能明顯升高冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者血漿中cAMP、PGI2、PTGIS mRNA表達(dá)，降低血漿中TXA2的表達(dá)，且復(fù)方丹參片組的升高和降低幅度均明顯大于丹參片組。說(shuō)明二者均能抑制血小板的活化，對(duì)ACS的發(fā)病均具有防治作用，但復(fù)方丹參片抑制血小板的活化強(qiáng)于丹參片?？傊?，復(fù)方丹參片能更好地防治冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者ACS的發(fā)生。

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