均勻設(shè)計優(yōu)選藏藥如達(dá)胃寧的組方Δ

賴先榮，吳秦西，向永臣，王蘭，李勝容，楊仕軍

（1.成都中醫(yī)藥大學(xué)，成都市 610075；2.成都市第五人民醫(yī)院，成都市 611130；3.重慶市中藥研究院制藥廠，重慶市 400065；4.四川省江源天然產(chǎn)物有限公司，洪雅市 620360）

消化性潰瘍（簡稱潰瘍?。?，臨床表現(xiàn)以腹痛為主，疼痛限于上腹部，有慢性、周期性和節(jié)律性3個特點，嚴(yán)重影響人們的工作及生活質(zhì)量[1]。藏藥如達(dá)胃寧根據(jù)藏醫(yī)傳統(tǒng)醫(yī)藥理論組方，以沙棘、川木香作為組方藥味，用于治療潰瘍病。

沙棘為胡頹子科植物沙棘Hippophae rhamnoides L.的干燥成熟果實，功能消食化滯、活血散瘀，用于治療消化不良、食積腹痛、瘀血等證[2]，藏醫(yī)用于培根病、消化不良、胃潰瘍等病癥的治療[3]；沙棘果肉油具有抑制胃總酸排出量及增加胃黏液分泌量的作用[4]。

川木香為菊科川木香屬植物川木香Vladimiria souliei（Franch.）Ling 及灰毛川木香 Vladimiria souliei（Franch.）Ling var.cinerea Ling的干燥根，功能行氣止痛，用于治療脘腹脹痛、肝膽疼痛等癥[3，5]；在藏醫(yī)經(jīng)典名著《月王藥診》、《四部醫(yī)典》、《晶珠本草》中也有記載，功能清培根熱、化瘀止痛、健脾消積，治培根熱癥、氣血量不和所致的胃腹脹痛、脅痛等癥[6]。川木香中分離得到的乙酸乙酯部位，具有抑制實驗性胃潰瘍形成的作用[7]。

筆者以潰瘍指數(shù)及潰瘍抑制率為指標(biāo)，采用均勻設(shè)計方法對藏藥如達(dá)胃寧的組方比例進(jìn)行篩選和優(yōu)化，為進(jìn)一步探索其防治潰瘍病的作用機(jī)制提供理論基礎(chǔ)。

1 材料

1.1 儀器

BS110型電子天平（北京賽多利斯天平有限公司）；游標(biāo)卡尺（無錫錫工量具有限公司）。

1.2 試藥

沙棘（壓榨離心法制成沙棘果油提取物，提取物收率為10%，批號：20070401）、川木香（乙醇回流提取-醋酸乙酯萃取法制成川木香提取物，提取物收率為6%，批號：20070401）均由成都中醫(yī)藥大學(xué)民族醫(yī)藥研究所提供；鹽酸雷尼替丁膠囊（西南合成制藥股份有限公司，批號：061003）；利血平注射液（廣東邦民制藥廠有限公司，批號：060308）；甲醛溶液（37%～40%，成都市科龍化工試劑廠，批號：20060124）；聚乙二醇400（成都市科龍化工試劑廠，批號：20060306）。

1.3 動物

普通級昆明種小鼠170只，♀♂兼半，體質(zhì)量18～22 g，由四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實驗動物研究所提供（動物合格證號：SCXK（川）2004-15）。

2 方法與結(jié)果

2.1 篩選實驗方法與結(jié)果

采用均勻設(shè)計試驗設(shè)計篩選實驗，選用混合水平的試驗表U6（6×3）[8]進(jìn)行試驗，同時采用單因素試驗方法考察組方各藥味抑制潰瘍形成的作用。

取小鼠130只，隨機(jī)分13組，每組10只，分別為正常（給予同體積生理鹽水）、模型（給予同體積含水聚乙二醇-400溶液）、雷尼替丁（給予50 mg·kg-1雷尼替丁的含水聚乙二醇-400溶液）、組方設(shè)計各劑量（按表1設(shè)計劑量給予藥物的含水聚乙二醇-400溶液）、各給藥劑量（按表2設(shè)計劑量給予藥物的含水聚乙二醇-400溶液）組。ig給藥（0.2 mL·20 g-1），連續(xù)7 d，實驗前禁食不禁水24 h，各組再給藥1次，1 h后sc利血平10 mg·kg-（1正常組sc等量生理鹽水），6 h后頸椎脫臼處死動物，解剖取胃，結(jié)扎胃的賁門部和幽門部并經(jīng)胃壁向胃腔內(nèi)注入1%甲醛2 mL，將胃取出浸入1%甲醛溶液中，30 min后沿胃大彎剪開，洗凈胃內(nèi)容物，將胃黏膜展開，游標(biāo)卡尺測定胃黏膜損傷的程度（計分方法：無損傷為0分，瘀血點為1分，線狀瘀血長度＜1 mm為2分，1～2 mm為3分，2～3 mm為4分，＞3 mm為5分），計算潰瘍指數(shù)、潰瘍抑制率。數(shù)據(jù)以±s 表示。各組潰瘍指數(shù)數(shù)據(jù)處理采用SPSS 10.00統(tǒng)計軟件，各組實驗數(shù)據(jù)方差齊性，采用單因素方差分析的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計分析。因素水平見表1；均勻設(shè)計試驗結(jié)果見表2。潰瘍抑制率（%）＝（模型組平均潰瘍指數(shù)－各給藥劑量組平均潰瘍指數(shù)）/模型組平均潰瘍指數(shù)×100%。

表1 因素水平Tab 1 Factors and levels

表2 均勻設(shè)計試驗結(jié)果Tab 2 Results of uniform design

各均勻設(shè)計組數(shù)據(jù)處理采用DPS統(tǒng)計軟件，進(jìn)行二次多項式逐步回歸分析，進(jìn)行數(shù)學(xué)模型最優(yōu)化的尋優(yōu)處理。

顯著水平P＝0.06（P＜0.1）；相關(guān)系數(shù)R＝0.95

顯著水平P＝0.06（P＜0.1）；相關(guān)系數(shù)R＝0.95

由表2可知，與模型組比較，均勻設(shè)計組、各單味藥組均能顯著降低潰瘍指數(shù)（P＜0.01），具有顯著抑制潰瘍形成的作用?；貧w方程（1）、（2）的尋優(yōu)結(jié)果表明，藏藥如達(dá)胃寧組方的優(yōu)化比例為沙棘（X1）1.5份、川木香（X2）9份。

2.2 驗證實驗方法與結(jié)果

取小鼠40只，隨機(jī)分4組，每組10只，分別為正常（給予同體積生理鹽水）、模型（給予同體積含水聚乙二醇-400）、雷尼替?。?0 mg·kg-1雷尼替丁的含水聚乙二醇-400溶液）、優(yōu)化比例（按藏藥如達(dá)胃寧組方的優(yōu)化比例給予藥物的含水聚乙二醇-400溶液）組。按“2.1”項下方法，依法計算潰瘍指數(shù)、潰瘍抑制率。驗證實驗結(jié)果見表3。

表3 驗證實驗結(jié)果Tab 3 Results of verifying test

由表3可知，與模型組比較，雷尼替丁及優(yōu)化比例組（沙棘1.5份、川木香9份）均能顯著降低潰瘍指數(shù)（P＜0.01或P＜0.05），具有顯著抑制潰瘍形成的作用。

3 討論

本研究表明，藏藥如達(dá)胃寧組方的優(yōu)化比例為沙棘1.5份、川木香9份，能顯著降低潰瘍指數(shù)（P＜0.01），為進(jìn)一步深入探索藏藥如達(dá)胃寧防治潰瘍病的作用機(jī)制建立了良好基礎(chǔ)。

潰瘍病防治的關(guān)鍵在于改善潰瘍愈合質(zhì)量，降低潰瘍復(fù)發(fā)率。沙棘和川木香均可用于潰瘍病的治療。沙棘消食化滯、活血散瘀，可以抑制胃蛋白酶的活性和降低游離酸，針對潰瘍病發(fā)病的愈合期和疤痕期（如脾胃虛弱、血瘀等證），緩則治其本；川木香行氣止痛，保護(hù)胃黏膜，兼有止痛作用，急則治其標(biāo)，針對潰瘍病發(fā)病的活動期（如胃脘疼痛等癥）。通過均勻設(shè)計試驗探索藥物組方優(yōu)化比例，表明沙棘油提取物與川木香提取物以一定比例配伍配比后，能提高抗?jié)冏饔?，具有協(xié)同增效作用，二者合用，急則治其標(biāo)、緩則治其本，治療作用互補、標(biāo)本兼治，共同用于潰瘍病的治療。

均勻設(shè)計試驗結(jié)果表明，復(fù)方抑制潰瘍形成作用中川木香的貢獻(xiàn)較大，發(fā)揮了行氣止痛作用，為傳統(tǒng)藏醫(yī)藥理論中應(yīng)用川木香“生肌脂”、“愈潰瘍”提供了理論證據(jù)，有利于拓展藏藥在潰瘍病治療上的用途。

[1]陸星華，于中麟，江鴻志，等.潰瘍病的流行病學(xué)研究——北京地區(qū)358644例胃鏡分析[J].中華消化雜志，1996，16（3）：152.

[2]國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典（一部）[S].2005年版.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：25、127.

[3]羅達(dá)尚主編.中華藏本草[M].北京：民族出版社，1997：162、265.

[4]邢建峰，董亞琳，王秉文，等.沙棘果肉油對大鼠胃液分泌的影響及抗胃潰瘍作用[J].中國藥房，2003，14（8）：461.

[5]王戰(zhàn)國，賴先榮，肖瑩瑩，等.川木香的研究進(jìn)展[J].中國藥房，2006，17（4）：303.

[6]賴先榮，孟保華，江志堯，等.川木香對實驗性胃潰瘍形成的抑制作用研究[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2008，8（1）：34.

[7]賴先榮.川木香有效組分抗消化性潰瘍的研究進(jìn)展[J].第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報，2006，27（增刊）：45.

[8]方開泰.均勻設(shè)計與均勻設(shè)計表[M].北京：科學(xué)出版社，1994：98.