不同廠家香丹注射液中丹參素鈉和原兒茶醛含量的比較

尹 萌，孟月蘭，聞琍毓，徐 力(江蘇省揚州藥品檢驗所，揚州 225009)

香丹注射液為臨床常用的中藥制劑，由丹參水提取液和降香經水蒸氣蒸餾后的飽和溶液制備而成，具有擴張血管、增進冠狀動脈血流量的功效。衛(wèi)生部藥品標準十七冊質量標準中采用HPLC法測定丹參中原兒茶醛的含量，本文建立一種用HPLC法同時測定丹參中丹參素和原兒茶醛兩種水溶性成分含量的方法，簡便、準確、無干擾，可更好的控制香丹注射液的質量;同時采用該方法測定了共12個生產廠家16批樣品中兩成分的含量。結果表明，不同廠家的香丹注射液中，丹參素和原兒茶醛的含量差異很大，質量標準急待提高以進一步控制產品質量，保證人民用藥安全。

1 儀器與試藥

Waters 2695 HPLC色譜儀，包括2996檢測器、Empower色譜工作站;AG-135型電子分析天平(梅特勒-托利多上海有限公司);原兒茶醛對照品(批號:110855-200508)、丹參素鈉對照品(批號:110810-200506)均由中國藥品生物制品檢定所提供;甲醇為色譜純，水為重蒸餾水，其余試劑均為分析純;香丹注射液為本所抽檢樣品，測定時均在樣品標注有效期內，見表1。

表1 樣品情況一覽表Tab 1 Data of samples

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱:Alltima C18(150 mm ×4.6 mm，5 μm);流動相:甲醇 -0.5%冰醋酸(90∶10);流速:1.0 mL·min-1;檢測波長:280 nm;柱溫:25℃ ;進樣量:10 μL。

2.2 對照品溶液的制備

分別精密稱取置五氧化二磷干燥器中干燥12 h的丹參素鈉對照品26.38 mg和原兒茶醛對照品12.10 mg，置同一50 mL量瓶中，加流動相適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品貯備液。精密吸取該貯備液5 mL，置25 mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.3 供試品溶液的制備

精密吸取樣品2 mL，置50 mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.4 陰性對照溶液的制備

取降香藥材按香丹注射液制備工藝制成不含丹參的陰性對照溶液，按“2.3”項下方法制得陰性對照溶液。

2.5 系統適用性試驗

取陰性對照溶液、對照品溶液和供試品溶液，按“2.1”項下色譜條件進樣測定。結果，丹參素鈉和原兒茶醛的保留時間分別為7.02 min和14.40 min，理論板數按丹參素鈉峰計算，達到7 000以上，與其他雜質峰的分離度大于1.5，色譜圖見圖1。

圖1 高效液相色譜圖Fig 1 HPLC

2.6 線性關系考察

精密吸取對照品貯備液 0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 mL，置10 mL量瓶中，分別用流動相稀釋至刻度，搖勻，按“2.1”色譜條件分別吸取10 μL進樣測定，以所得的峰面積(A)對進樣量(C)進行線性回歸，得回歸方程:A丹參素鈉=6 433.7C+18 540(r=0.999 5);A原兒茶醛=42 039C+52 708(r=0.999 6)。結果表明，丹參素鈉、原兒茶醛進樣量分別在0.26 ～1.58 μg和 0.121 ～0.726 μg范圍內與峰面積呈良好的線性關系。

2.7 精密度試驗

取對照品溶液10 μL，按“2.1”項下色譜條件連續(xù)進樣6次。結果丹參素鈉、原兒茶醛峰面積的 RSD分別為0.4%和0.3%，表明儀器精密度良好。

2.8 重現性試驗

取同一批樣品，按“2.2”項下方法制備樣品溶液，共取6份，按“2.1”項下色譜條件測定。結果，丹參素鈉、原兒茶醛峰面積的RSD分別為1.2%和0.9%，表明方法重現性良好。

2.9 加樣回收率試驗

取已知含量的同一批樣品1 mL，置50 mL量瓶中，分別加入對照品適量，加流動相稀釋至刻度，搖勻。按“2.1”項下色譜條件測定，計算加樣回收率，結果見表2。

表2 加樣回收試驗結果(n=6)Tab 2 Results of recovery test of samples(n=6)

2.10 樣品含量測定

取供試品溶液和對照品溶液，按“2.1”項下色譜條件進樣10 μL，用外標法計算含量，結果見表3。

表3 樣品含量測定結果Tab 3 Results of content determination of samples

3 討論

實驗時，選用的冰醋酸的濃度分別為0.2%、0.5%和1.0%，結果冰醋酸的濃度為0.5%時，峰形對稱性好，且流動相甲醇-0.5%冰醋酸的比例為90∶10時，丹參素鈉、原兒茶醛兩峰與相鄰雜質峰均能達到很好的分離效果。

丹參(salvia miltiorrhiza beg)為唇形科鼠尾草屬植物的干燥根，具有祛痰止痛、活血通經、清心除煩之功效。近來對丹參化學成分的研究很多，一致認為丹參的化學成分主要分為兩類，即水溶性成分和脂溶性成分。水溶性成分主要有原兒茶醛、丹參素、丹酚酸 A、丹酚酸 B等，脂溶性成分有丹參酮ⅡA、隱丹參酮等。而香丹注射液由降香經水蒸氣蒸餾后與丹參水提取液制備而成。由此可以認為香丹注射液中丹參的主要成分為水溶性成分，所以選擇丹參中兩類最主要的水溶性成分丹參素和原兒茶醛，作為定量指標，從而達到控制質量的目的。

在測定樣品時發(fā)現，大多數樣品的色譜圖基本一致，但有兩批樣品色譜圖中在與原兒茶醛色譜峰相對保留時間約為0.43處，有一較大的色譜峰，而其他樣品的色譜圖在相應的位置上只有一很小的色譜峰。目前仍不能確定該色譜峰的來源，此項工作有待進一步研究。鑒于香丹注射液組成簡單，只有兩味藥，建議可以在質量標準中增加以標準指紋圖譜作為對照圖譜的鑒別試驗，保證藥品質量。

共測定了12個廠家生產的16批樣品中丹參素鈉和原兒茶醛的含量，樣品中兩成分的含量差異很大。丹參藥材由于產地、生長環(huán)境、采收時間、貯藏條件、炮制以及制備工藝的不同，對其中有效成分均會造成影響。因此建議廠家重視藥材質量，改善制備工藝，提高產品質量，保證人民用藥安全。

［1］ 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)［S］.2005年版.北京:化學工業(yè)出版社，2005:52-53.

［2］ 國家藥典委員會.藥品標準中成藥成方制劑(17冊)［S］.1998:200.

［3］ 蔡 梅，季一兵，駱雪芳，等.高效液相色譜法測定香丹注射液中丹參素和原兒茶醛的含量［J］.海峽藥學，2004，16(3):54.

［4］ 徐 曼，劉愛華，崔亞君，等.不同廠家生產的香丹注射液中丹參色譜指紋圖譜的比對研究［J］.中國天然藥物，2007，5(2):120.