酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)與特異性抗體明膠凝集試驗(yàn)檢測(cè)梅毒抗體效果比較

【摘要】目的：探討酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)和梅毒螺旋體特異性抗體明膠凝集試驗(yàn)(TPPA)兩種血清梅毒抗體檢測(cè)方法的優(yōu)劣。方法：選取我市2006年10月～2008年10月獻(xiàn)血者和梅毒臨床患者共2000份血清標(biāo)本，其中包括1700份健康獻(xiàn)血者血清、300份梅毒患者血清。分別采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)和梅毒螺旋體特異性抗體明膠凝集試驗(yàn)(TPPA)兩種血清梅毒抗體檢測(cè)方法檢測(cè)。結(jié)果：在300份梅毒患者血清中，TPPA共檢出梅毒螺旋體抗體陽性295份，TP-ELISA共檢出陽性298份，兩法的陽性檢出率分別為98.3％和99.3％。TP-ELISA從1700份健康獻(xiàn)血者中檢出6份陽性，TPPA未檢出陽性，后經(jīng)確認(rèn)6例為假陽性，TP-ELISA的假陽性率為0.35％。結(jié)論：ELISA和TPPA都具有較高的敏感性和特異性。ELISA方法成本低，操作簡(jiǎn)便，極大地減少了人為因素的影響，結(jié)果判斷客觀、準(zhǔn)確，最適合血站大規(guī)模的血液篩檢。

【關(guān)鍵詞】酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)；ELISA;梅毒螺旋體特異性抗體明膠凝集試驗(yàn)；TPPA;梅毒抗體

【中圖分類號(hào)】R377⁺¹【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】1007-8517(2009)10-0077-01

梅毒是由梅毒螺旋體感染引起的性傳播疾病.目前梅毒檢測(cè)常用方法^{[1]主要有:快速血漿反應(yīng)素試驗(yàn)(RPR)、甲苯胺紅快速反應(yīng)素試驗(yàn)(TRUST)、梅毒螺旋體EUSA試驗(yàn)(ElSA)、梅毒螺旋體血凝試驗(yàn)(TPHA)和梅毒螺旋體顆粒凝集試驗(yàn)(TPPA)等，有時(shí)也用到免疫印跡法和PCR方法。高敏感性和特異性的檢驗(yàn)方法對(duì)于該病的確診和治療具有重要意義。我們采用梅毒螺旋體特異性抗體明膠凝集試驗(yàn)(TPPA)和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)對(duì)2000份血清標(biāo)本進(jìn)行了檢測(cè)比較，現(xiàn)報(bào)道如下。}

1材料與方法

1.1標(biāo)本來源選取我市2006年10月～2008年10月獻(xiàn)血者和梅毒臨床患者共2000份血清標(biāo)本，男1236例、女764例，其中包括1700份健康獻(xiàn)血者血清、300份梅毒患者血清。

1.2試劑TP-ELISA試劑盒購自北京萬泰生物藥業(yè)有限公司，IPPA試劑盒購自日本富士瑞必歐株式會(huì)社，均批檢合格，在有效期內(nèi)使用。

1.3方法所有標(biāo)本均采用ELISA和TPPA進(jìn)行血清梅毒螺旋體抗體平行檢測(cè)，具體操作和結(jié)果判定均按試劑盒說明書進(jìn)行。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS13.0對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，率的檢驗(yàn)采用卡方檢驗(yàn)，P<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)和梅毒螺旋體特異性抗體明膠凝集試驗(yàn)(TPPA)兩種方法檢測(cè)對(duì)300份梅毒患者血清檢測(cè)結(jié)果比較，見表1。

2.2兩種方法對(duì)1700份獻(xiàn)血者血清檢測(cè)結(jié)果見表2。

3討論

梅毒是一種由蒼白密螺旋俸所致的密螺旋體病，主要通過性接觸、血液、母要垂直傳播。20世紀(jì)60年代初得到較徹底的控制。1973年梅毒死灰復(fù)燃，卷土重來，20世紀(jì)80年代后期，國(guó)內(nèi)各地先后均有早期梅毒的病例報(bào)道，以后呈直線上升，成為僅次于艾滋病的對(duì)人體危害最大的性傳播疾?。疅o償獻(xiàn)血者血液初篩檢測(cè)中，梅毒抗體陽性率也高達(dá)2.0%．其中工人、農(nóng)民、流動(dòng)人口的檢測(cè)陽性率為3．58％^[2]。而且，早期梅毒患者作為供血者，可以通過輸血傳染梅毒^[3]。因此，必須選用高質(zhì)量的梅毒檢測(cè)試劑，加強(qiáng)對(duì)獻(xiàn)血者梅毒的檢測(cè)，以控制其經(jīng)輸血傳播。

人體感染梅毒螺旋體后，可以產(chǎn)生特異性梅毒螺旋體抗體和非特異性抗體即反應(yīng)素，前者比后者出現(xiàn)得早，即使通過抗梅毒治療后，梅毒螺旋體抗體仍可終生存在^[4]。TPPA試驗(yàn)方法是將特異性TP抗原包被在明膠顆粒上，省略了吸收劑，不受生物因素影響，與血清中特異性TP 抗體結(jié)合后出現(xiàn)肉眼可見的凝集反應(yīng)的檢測(cè)方法。TP以是目前公認(rèn)較好的梅毒抗體確認(rèn)方法，敏感性高，特異性強(qiáng)。ELISA法是利用基因重組工程合成抗原，檢測(cè)血清中梅毒特異性抗體，在梅毒各期均有較高敏感性，TP-ELISA是利用重組梅毒螺旋體的特異性抗原包被酶標(biāo)板孔，并采用雙抗原夾心法檢測(cè)血清標(biāo)本中的梅毒特異性IgM和IsG抗體，對(duì)早期和晚期梅毒都有較高的檢出率^[5]，但ELISA法也存在著假陽性問題^[6]。

本文結(jié)果表明，TP-ELISA法的假陽性率為0.35％。通過本文實(shí)驗(yàn)，我們發(fā)現(xiàn)ELISA和TPPA都具有較高的敏感性和特異性，兩法的檢測(cè)結(jié)果無顯著性差異(P>0.05)。因TPPA用肉眼判斷結(jié)果，使結(jié)果可靠性下降，并且試劑昂貴，整個(gè)檢驗(yàn)過程幾乎全部依賴于手工，操作繁瑣，存在操作出錯(cuò)的風(fēng)險(xiǎn)，檢測(cè)時(shí)需將樣本作系列稀釋，不利于大批量樣本篩查，也不便用于療效判斷。而ELISA現(xiàn)已利用全自動(dòng)加樣器和全自動(dòng)酶免分析儀，實(shí)現(xiàn)了從標(biāo)本加樣、溫育、洗板、加試劑到結(jié)果判斷等整個(gè)檢驗(yàn)過程的完全自動(dòng)化，可同時(shí)檢測(cè)大批量標(biāo)本，操作簡(jiǎn)便，極大地減少了人為因素的影響;可實(shí)現(xiàn)室內(nèi)質(zhì)量控制的標(biāo)準(zhǔn)化;結(jié)果判斷客觀、準(zhǔn)確;利用微機(jī)保存并管理原始檢驗(yàn)結(jié)果，便于查詢;適合血站大規(guī)模的血液篩檢^[7]。因此，綜合考慮方法學(xué)和實(shí)際操作等因素，ELlSA目前最適合血站大規(guī)模的血液篩檢。

參考文獻(xiàn)

[1]王培華.輸血技術(shù)學(xué)[M]，第2版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2002:113-116.

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(收稿日期：2009.02.14)