Ｐｌｋ１在胃癌中的表達(dá)及與臨床病理因素關(guān)系

【摘要】目的:觀察Plkl在胃癌發(fā)展不同階段中的表達(dá)，探討分析它與胃癌臨床病理指標(biāo)之間的關(guān)系。方法:采用SP免疫組化方法，對(duì)49 例胃癌及其相應(yīng)的癌旁非癌胃粘膜中Plkl表達(dá)進(jìn)行檢測。結(jié)果:Plkl 在非癌粘膜和胃癌組織中的陽性表達(dá)率分別為0和83.67%;兩組比較差別十分顯著( P<0. 01) 。Plkl表達(dá)與侵潤深度、胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和臨床分期相關(guān)( P <0. 05) 。結(jié)論:Plkl可能參與胃癌的侵襲和轉(zhuǎn)移過程。

【關(guān)鍵詞】胃癌;Plkl基因;表達(dá)

【中圖分類號(hào)】R735.2【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】1007-8517(2009)10-0040-01

Relationship Between the expression of Plkl Gene and Pathobiological Behaviors of Gastric Carcinoma

ZOU Chonggao XIA Heshun

(1.Hospital of workers，HU bei，WU Han，430021;2.Cancer Hospital，HU bei，WU Han，430021）

【Abstract】 Objective :To detect the expression of Plkl gene in gastric carcinoma ， and to investigate the significance of Plkl gene expression in progression of gastric carcinoma. Methods : The expressions of Plkl were evaluated by immunohistochemistry in 49 cases of gastric carcinoma and the adjacent normal mucosa. Results : The positive rates of Plkl gene expression were 0 and 83.67% in adjacent normal mucosa and gastric carcinoma ， respectively. And significant difference in expression of Plkl was found between gastric carcinomas and the adjacent normal mucosa ( P<0. 01) . The expression of Plkl was significantly correlated with tumor clinicopathological stage and lymph node metastasis gastric carcinoma ( P<0. 05) . Conclusion : Decreased expressions of Plkl gene were significantly correlated with progression and pathobiological behaviors of the stomach carcinoma.

【Keywords】gastric carcinoma ;Plkl gene ; expression

胃癌為我國常見的惡性腫瘤，根治性手術(shù)后有5%的早期胃癌和50%的進(jìn)展期胃癌患者在5年內(nèi)死亡，死因多為原癌復(fù)發(fā)^[1]。因此，早期發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞播散，有效估計(jì)腫瘤的復(fù)發(fā)及預(yù)后，在胃癌的治療上意義重大，我們應(yīng)用免疫組化SP法檢技術(shù)，探討Plkl在胃癌組織中的表達(dá)特點(diǎn)及其與臨床病理分期、組織學(xué)分型和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系。

1臨床材料

1.1研究對(duì)象選取我院1993年1月至2005年1月胃癌術(shù)后或活檢標(biāo)本49例。入選條件為:第一次手術(shù)、術(shù)前未接受化療和放療及免疫治療的胃癌患者;均具有完整的臨床資料和病理資料。其中男性29例，女性20例:中位年齡63歲(26~84)歲; 組織學(xué)分期早期胃癌11 例，進(jìn)展期胃癌38 例。另取15例同期正常胃組織標(biāo)本作為對(duì)照組，取自胃癌切除標(biāo)本的遠(yuǎn)端組織，距腫瘤邊緣>5cm經(jīng)病理檢查確認(rèn)為正常胃粘膜上皮為對(duì)照組。

1.2免疫組化SP法檢第一抗體Plkl為鼠抗人單克隆抗體;購自美國SnataCurze生物技術(shù)公司，SP免疫組化超敏染色試劑盒、DAB顯色試劑盒購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)公司。采用免疫組化SP法檢測胃癌及癌旁正常胃粘膜的Plkl的表達(dá)，免疫組化染色步驟按試劑盒說明書進(jìn)行，用己知的Plkl陽性切片作為陽性對(duì)照，以PBS代替一抗作為陰性對(duì)照。由兩位資深病理科醫(yī)生獨(dú)立觀察每張切片后一起做出判斷。每張切片隨機(jī)觀察10個(gè)具有代表性的高倍視野，Plkl以在細(xì)胞膜和/或細(xì)胞質(zhì)著棕色顆粒為陽性染色。依照各自染色程度及染色細(xì)胞數(shù)進(jìn)行綜合分析評(píng)分量化。不著色為0分，著色淡為1分，著色適中為2分，著色深為3分。著色細(xì)胞占計(jì)數(shù)細(xì)胞百分率<5%為0分，5%～25%為1分，26%～75%為2分，>75%為3分。每張切片染色程度得分與陽性細(xì)胞百分率得分各自相乘為最后得分。0～1為(－)，2～3分為(+)，4～6為(++)，>6分為(+++)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用χ 檢驗(yàn)比較各組間率及配對(duì)資料的差異。所有數(shù)據(jù)均利用SPSS 12.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析處理。

2結(jié)果

2.1Plkl在胃癌中的表達(dá)見表1。Plkl陽性表達(dá)定位于胃癌細(xì)胞質(zhì)與細(xì)胞膜中，呈棕色顆粒或團(tuán)塊。在49例胃癌組織中，41例有不同程度的陽性表達(dá)，陽性率為83.67%:15例癌旁正常胃組織中未見陽性表達(dá)，二者差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

2.2Plkl表達(dá)與胃癌病理組織學(xué)類型關(guān)系見表2。Plkl的表達(dá)與胃癌浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及TNM分期密切相關(guān)(P<0.01)，而與腫瘤大小及分化程度無關(guān)(P>0.05)。

3討論

胃癌的發(fā)病率和死亡率居我國惡性腫瘤的前列，多數(shù)病例在確診時(shí)己屬中晚期。目前多采用以手術(shù)為主的綜合治療，但許多病人最終死于局部復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，5年生存率僅為30%~40%，治療效果仍不理想。研究表明，胃癌不良的預(yù)后與胃癌細(xì)胞的無限增殖有關(guān)，而究其原因則可能是諸多與細(xì)胞增殖相關(guān)的基因發(fā)生了改變，找出這些與腫瘤細(xì)胞增殖有關(guān)的基因并闡明其在癌發(fā)生及發(fā)展中的作用對(duì)腫瘤防治具有重要意義。保羅樣激酶1(Poofhkekinaes，Plkl)是一類廣泛存在于真核細(xì)胞中的呈周期依賴性表達(dá)的絲/蘇氨酸激酶，其結(jié)構(gòu)及功能均十分保守。本研究發(fā)現(xiàn)plkl的表達(dá)狀態(tài)與浸潤程度、TNM分期、淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移相關(guān)（均P<0.01）。這說明plkl表達(dá)可能不僅參與了胃粘膜上皮細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化過程，還參與進(jìn)展期胃癌的局部侵襲和轉(zhuǎn)移過程。研究發(fā)現(xiàn)^[2]plkl在啟動(dòng)、維持及完成有絲分裂中扮演重要角色。同時(shí)它還與細(xì)胞增殖密切相關(guān)，而且Plkl活性升高可以加速細(xì)胞增殖速率。資料顯示，Plk1mRNA和蛋白質(zhì)水平在增殖旺盛細(xì)胞中顯著上升^[3，4]。plkl不但與包括腫瘤細(xì)胞在內(nèi)的細(xì)胞增殖相關(guān)，可能還與腫瘤的其他生物學(xué)行為緊密相關(guān)。Plkl還促進(jìn)細(xì)胞中心體的成熟，中心體不受調(diào)控的復(fù)制可造成中心體形態(tài)和數(shù)目的異常，導(dǎo)致染色體的不穩(wěn)定性，誘導(dǎo)腫瘤形成。還有研究提示^[5]，plkl在許多種惡性腫瘤如食管癌與胃癌、大腸癌、胰腺癌、甲狀腺癌、卵巢癌、前列腺癌中均存在過表達(dá)，并與上述腫瘤的某些生物學(xué)行為及不良預(yù)后相關(guān)。plkl有望成為惡性腫瘤的又一新的標(biāo)記物。本研究發(fā)現(xiàn)Plkl在15例癌旁正常胃組織呈陰性表達(dá)，而在大部分胃癌組織中有不同程度plkl表達(dá)，其陽性表達(dá)率為83.67%。pkll在胃癌中存在高表達(dá)現(xiàn)象。結(jié)合本研究及相關(guān)報(bào)道，足見Plkl過表達(dá)的確較為普遍存在于實(shí)體瘤組織中，瘤的某些生物學(xué)行為密切相關(guān)，提示Plkl可能在惡性實(shí)體瘤的發(fā)生及發(fā)展中扮演較為活躍的角色，并有可能成為又一反映腫瘤惡性程度的新指標(biāo)。

參考文獻(xiàn)

[1]張文范，張蔭昌，陳峻青.胃癌[M].上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，2001

[2]Weiehert W，Deknert C，Schmidt M，et al.Polo-like kinase isoform experssion is a prognostic factor in ovarian careinoma[J].BrJCnaeer.2004;90(4):815-821.

[3]HolrtiehU，WolfG，BaruningerA，etal.Induetion and down-reuglation of PLK，a humna serine/threonine kinase expressed in proliefrating cells and tumors[J].Pore Natl Aead SeiU SA.1994;91(5)

(收稿日期：2009.04.23)