斑蝥素及其衍生物的抗腫瘤研究進(jìn)展

安中原　王　正　趙　越

(廣東藥學(xué)院 中藥學(xué)院，廣東 廣州 510006)お

摘 要：斑蝥素是從斑蝥體內(nèi)提取的抗癌有效成分，由于其毒性強(qiáng)烈，臨床應(yīng)用受到限制，因此人們合成了斑蝥素一系列衍生物，如斑蝥酸鈉、去甲斑蝥素、甲基斑蝥胺及羥基斑蝥胺等，其毒性較斑蝥素低，療效更加明確。就斑蝥素及其衍生物在實(shí)驗(yàn)研究和臨床運(yùn)用方面的研究做一綜述。

關(guān)鍵詞： 斑蝥素；斑蝥素衍生物；抗腫瘤

中圖分類號(hào)：R285文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1673-2197（2009）01-0128-03オ

斑蝥屬昆蟲綱，鞘翅目，為芫青科昆蟲南方大斑蝥或黃黑小斑蝥的干燥全蟲。斑蝥性味辛寒，有毒,具有攻毒蝕瘡、破血散結(jié)等功效。斑蝥素是斑蝥體內(nèi)提取的一種倍半萜類衍生物,它通過(guò)減少癌細(xì)胞對(duì)氨基酸的攝取,抑制蛋白質(zhì)合成,刺激巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、多形核細(xì)胞產(chǎn)生白細(xì)胞介素,從而提高機(jī)體免疫力,增強(qiáng)機(jī)體對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用達(dá)到治療目的；對(duì)一些疑難雜癥有特殊療效，但是由于斑蝥素的劇烈毒性以及對(duì)泌尿系統(tǒng)嚴(yán)重刺激性，限制了其在臨床的應(yīng)用。近年來(lái)己陸續(xù)合成了毒副作用小的同類藥物，如斑蝥酸鈉、去甲斑蝥素，甲基斑蝥胺及羥基斑蝥胺等。隨著中藥抗腫瘤優(yōu)勢(shì)的凸顯，人們對(duì)斑蝥素及其衍生物的研究更加重視，其中關(guān)于斑蝥素，去甲斑蝥素，斑蝥酸鈉的研究最多，甲基斑蝥胺,羥基斑蝥胺研究報(bào)道較少,現(xiàn)綜述如下。

1 斑蝥素(cantharidin，CA)

1.1 實(shí)驗(yàn)研究

研究表明斑蝥素是斑蝥抗癌的有效成分，也是毒性的主要成分。斑蝥素為無(wú)色無(wú)味發(fā)亮結(jié)晶，是斑蝥酸的內(nèi)酐，斑蝥素毒性極強(qiáng)（斑蝥素小鼠腹腔注射的LD50為1.25~1.7mg/kg；斑蝥酸鈉小鼠腹腔注射LD50為3.4±0.26mg/kg；去甲斑蝥素腹腔注射 LD50為 25.4±1.9mg/kg）。斑蝥素能引起小鼠腹腔積液肝癌細(xì)胞明顯萎縮、退化，胞質(zhì)多空泡等形態(tài)學(xué)改變；抑制腫瘤細(xì)胞的蛋白質(zhì)合成,繼而影響RNA和DNA的合成及細(xì)胞周期的進(jìn)程,促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡,抑制腫瘤細(xì)胞增殖。 據(jù)王曉華^[1]報(bào)道斑蝥素對(duì)人宮頸癌Hela細(xì)胞的增殖有明顯抑制作用，這種抑制作用呈明顯的時(shí)間依賴性，流式細(xì)胞儀顯示細(xì)胞周期出現(xiàn)明顯的G2/M期阻滯。另外張衛(wèi)東等^[2]研究，斑蝥素對(duì)人肺癌A549細(xì)胞的增殖有抑制作用，發(fā)現(xiàn)MAPK信號(hào)傳導(dǎo)途徑參與了斑蝥素對(duì)人肺癌A549細(xì)胞的增殖抑制作用。

1.2 臨床運(yùn)用

斑蝥素毒性強(qiáng)烈,內(nèi)服斑蝥可引起胃腸炎癥，黏膜壞死，可使腎小球上皮細(xì)胞產(chǎn)生嚴(yán)重濁腫,出現(xiàn)蛋白尿、管型尿、血尿及血清非蛋白氮升高。中毒的動(dòng)物還可發(fā)生肝細(xì)胞腫脹，肝淋巴細(xì)胞纖維性損傷和肝細(xì)胞壞死，心肌腫脹、出血，肺淤血，并可引起毛細(xì)血管和神經(jīng)系統(tǒng)的損害。有鑒于此，限制了斑蝥素在臨床上的應(yīng)用，目前臨床上僅限于外用治療各種疑難雜癥。

臨床上用斑蝥復(fù)方及斑蝥素發(fā)泡治療神經(jīng)性皮炎、顏面神經(jīng)麻痹、斑禿、頑癬、過(guò)敏性鼻炎等癥,具有良好的功效。方劍喬等^[3]采用與人類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA) 特征相似的小鼠膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎(CIA) 作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型,并觀察斑蝥膏穴位貼敷(發(fā)泡) 治療,初步證明了斑蝥穴貼對(duì)治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎也有功效；另外如在抗皮膚真菌性和病毒性疣、瘤等方面有較突出的作用^[4]，臨床報(bào)道,其對(duì)由人乳頭狀病毒(HPV) 感染所致的性傳播性疾病尖銳濕疣,有很好的療效,總有效率可達(dá)100%^[5]，同時(shí),斑蝥素對(duì)兒童軟疣也有很好的療效, 治愈率可達(dá)90%，無(wú)副作用, 無(wú)二次感染,是一種安全、有效的治療方法^[6]。

2 斑蝥酸鈉

2.1 實(shí)驗(yàn)研究

斑蝥酸鈉 (sodium cantharidate, SCA)是斑蝥素與氫氧化鈉共熱時(shí)水解生成, 與斑蝥素相比，其毒性、刺激性較小，尤其明顯降低了泌尿系統(tǒng)的毒副作用。它是通過(guò)降低腫瘤細(xì)胞cAMP磷酸二酯酶活性,提高過(guò)氧化氫酶活力,改善細(xì)胞能量代謝,同時(shí)降低癌毒素水平,直接抑制癌細(xì)胞內(nèi)DNA和RNA合成及前體的滲入,殺死腫瘤細(xì)胞。桂尤勝等^[7]用斑蝥酸鈉體外作用于人肝癌細(xì)胞系Bel-7402，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，斑蝥酸鈉作用48 h致使肝癌細(xì)胞出現(xiàn)明顯的生長(zhǎng)抑制現(xiàn)象；可見(jiàn)凋亡峰，凋亡百分率明顯增加(40.02%±2.O5% ),且細(xì)胞生長(zhǎng)阻斷在G0+M 期；透射電鏡下有癌細(xì)胞染色質(zhì)的凝集和邊集現(xiàn)象；瓊脂糖凝膠電泳呈現(xiàn)出凋亡特有的“梯子”狀條帶。梁楓等^[8]報(bào)道用斑蝥酸鈉對(duì)人外對(duì)人胃癌BGC823，發(fā)現(xiàn)斑蝥酸鈉作用24 h致胃癌細(xì)胞出現(xiàn)明顯生長(zhǎng)抑制現(xiàn)象，可見(jiàn)凋亡峰，凋亡率明顯增加，與細(xì)胞對(duì)照組相比有顯著差異性，細(xì)胞生長(zhǎng)阻斷在G1 期。據(jù)連幕蘭等^[9]報(bào)導(dǎo)，斑蝥酸鈉可刺激機(jī)體內(nèi)巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和多核細(xì)胞產(chǎn)生白細(xì)胞介素，從而提高機(jī)體免疫力，增強(qiáng)機(jī)體對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用。

2.2 臨床運(yùn)用

據(jù)陳武進(jìn)等^[10]報(bào)導(dǎo)，應(yīng)用斑蝥酸鈉靜脈注射與化療藥聯(lián)合經(jīng)肝動(dòng)脈介入治療中晚期肝癌,表明它對(duì)化療栓塞能明顯起到增效作用，同時(shí)可減輕化療藥對(duì)白細(xì)胞抑制作用。邢建華等^[11]用斑蝥酸鈉注射液治療晚期惡性腫瘤56例，結(jié)果證明，斑蝥酸鈉是一種有效的抗癌藥物，在化療的同時(shí)輔助應(yīng)用，對(duì)胃癌、肝癌、結(jié)腸癌、乳腺癌等惡性腫瘤總緩解率較高,尤其對(duì)肝癌、乳腺癌效果顯著，并提高免疫力。

史進(jìn)等^[12]用斑蝥酸鈉注射液治療癌癥患者胸腔積液,顯示斑蝥酸鈉注射液對(duì)癌癥患者胸腔積液有一定的療效,能夠改善生存質(zhì)量,提高機(jī)體免疫功能。陳昱明等^[13]也報(bào)導(dǎo)，斑蝥酸鈉注射液配合放療治療中晚期惡性腫瘤（肺癌、鼻咽癌、乳腺癌、食管癌等），能提高治療效果，降低放療毒副作用，改善患者生活質(zhì)量，具有抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)雙重作用。據(jù)張鳳瑞等^[14]報(bào)道，用奇寧注射液（斑蝥酸鈉注射液）治療晚期原發(fā)性肝癌，結(jié)果患者臨床癥狀明顯改善,生活質(zhì)量明顯提高,血清AFP明顯降低(P<0.05)。表明奇寧注射液是治療晚期肝癌安全有效的藥物。

3 去甲斑蝥素

3.1 實(shí)驗(yàn)研究

去甲斑蝥素(noncantharidin, NCTD)為斑蝥素的衍生物,是我國(guó)首先合成的具有較強(qiáng)抗腫瘤活性和獨(dú)特升高白細(xì)胞作用的新型抗腫瘤藥物。由呋喃與馬來(lái)酸酐按Diels-Alder加成反應(yīng)后催化氫化制得的人工全合成的一種新化合物，比斑蝥素少了兩個(gè)甲基，其毒性比斑蝥素明顯降低。它是通過(guò)抑制癌細(xì)胞DNA及蛋白質(zhì)合成，影響凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)，破壞腫瘤細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)和細(xì)胞周期而發(fā)生抗癌作用。據(jù)Peng F等^[15]研究發(fā)現(xiàn)，NCTD不但可以抑制人腸癌細(xì)胞增殖，而且還能誘導(dǎo)人腸癌細(xì)胞凋亡。NCTD誘導(dǎo)人腸癌細(xì)胞凋亡的過(guò)程主要分為2個(gè)時(shí)期：S期細(xì)胞凋亡迅速，G2／M 期細(xì)胞阻滯，細(xì)胞凋亡延緩，該作用機(jī)制是通過(guò)CD95受體及其配體系統(tǒng)來(lái)完成的。在人肝癌細(xì)胞BEL-7402凋亡的研究中發(fā)現(xiàn)，NCTD誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡與腫瘤細(xì)胞M期密切相關(guān)^[16]。郭建芬等^[17]報(bào)道,去甲斑蝥素對(duì)人早幼粒白血病HL60 細(xì)胞株DNA合成有明顯抑制作用,且抑制作用隨藥物濃度的增加和作用時(shí)間的延長(zhǎng)而增強(qiáng)。安巍巍等^[18]采用MTT法、形態(tài)學(xué)觀察、DNA凝膠電泳、乳酸脫氧酶(LDH)檢測(cè)及免疫印記法，研究去甲斑蝥素通過(guò)半胱氨酸天冬氨酸酶途徑誘導(dǎo)人宮頸癌細(xì)胞(Hela)凋亡的機(jī)制發(fā)現(xiàn)，去甲斑蝥素能顯著誘導(dǎo)Hela細(xì)胞發(fā)生凋亡。劉曉蘭等^[19]用流式細(xì)胞儀測(cè)定去甲斑蝥素對(duì)人早幼粒白血病細(xì)胞株HL6O細(xì)胞體外培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)胞毒性、細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)去甲斑蝥素作用48h對(duì)HL60細(xì)胞有較強(qiáng)的生長(zhǎng)抑制作用，作用24h后達(dá)到凋亡高峰。

3.2 臨床運(yùn)用

劉安等^[20]將中成藥肝復(fù)樂(lè)與去甲基斑蝥素片聯(lián)合用于治療不能手術(shù)切除的中晚期原發(fā)性肝癌，結(jié)果表明聯(lián)合用藥后癥狀明顯改善，瘤體穩(wěn)定，減輕肝區(qū)疼痛和腹脹，1年生存率分別比單獨(dú)肝復(fù)樂(lè)組和去甲斑蝥組提高了14%和29%，有效率分別提高17.8% 和31%。

鄭蘭英等^[21]用去甲斑蝥素片治療原發(fā)性肝癌患者，結(jié)果顯示，治療組病人白細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯高于對(duì)照組（P<0.05）,而且實(shí)驗(yàn)組的白細(xì)胞總數(shù)有逐漸增多的趨勢(shì)，符合NCTD 有升高白細(xì)胞作用的這一特點(diǎn)。此外,實(shí)驗(yàn)組腫瘤直徑減小、AFP數(shù)值降低；肝功能受損程度明顯好于對(duì)照組，并且持續(xù)發(fā)熱患者明顯小于對(duì)照組，表明NCTD有獨(dú)特的升高白細(xì)胞和抗癌作用，能提高介入治療的耐受性。

4 其它衍生物

甲基斑蝥胺系斑蝥素亞胺類的衍生物，對(duì)動(dòng)物實(shí)體瘤作用優(yōu)于斑蝥素，毒性則較低，對(duì)肝臟毒性小，但對(duì)腎臟仍有一定毒性。對(duì)肝癌細(xì)胞的核酸和蛋白質(zhì)合成有干擾作用，且能增強(qiáng)機(jī)體巨噬細(xì)胞的吞噬作用，對(duì)腫瘤細(xì)胞有抑制和殺傷作用,目前臨床上主要有片劑和針劑兩種，用來(lái)治療原發(fā)性肝癌。羥基斑蝥胺臨床應(yīng)用上也是以片劑和針劑的形式存在，目前主要試用于原發(fā)性肝癌，能使患者癥狀減輕，體征改善。

5 展望

斑蝥素對(duì)肝癌、胰腺癌、肺癌、卵巢癌、食道癌等具有良好的療效,據(jù)實(shí)驗(yàn)表明,斑蝥素可以通過(guò)改變多種蛋白質(zhì)的表達(dá)或活性, 抗腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移, 并能引起細(xì)胞周期阻滯,抑制腫瘤生長(zhǎng)增殖,從而促進(jìn)其凋亡或死亡。其優(yōu)勢(shì)主要在于斑蝥素在抑制腫瘤細(xì)胞的同時(shí)，不降低周圍血中的白細(xì)胞數(shù)量,而且對(duì)機(jī)體沒(méi)有明顯的免疫抑制作用,這在抗癌藥物中是少見(jiàn)的，因此受到人們的廣泛關(guān)注。由于斑蝥素強(qiáng)烈的毒性，人們對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行修飾改造，相繼合成了去甲斑蝥素等一系列衍生物，他們具有療效顯著、毒性低的的特點(diǎn)，但是當(dāng)劑量增大時(shí)，仍有一定的臟器毒性，影響了抗癌效果，所以，開(kāi)發(fā)更新的高效低毒衍生物和研制增效減毒新劑型是一個(gè)不錯(cuò)的研究方向，如研制成斑蝥素衍生物緩控釋制劑，斑蝥素衍生物白蛋白微球以及微乳等，達(dá)到靶向給藥，其選擇性會(huì)更強(qiáng)，減少了對(duì)其它組織器官的損傷，從而增加了療效，降低了毒性。隨著斑蝥素及其衍生物基礎(chǔ)研究的深入，作用機(jī)制進(jìn)一步闡明，其在腫瘤的治療中將可能發(fā)揮越來(lái)越大的作用。

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（責(zé)任編輯：姜付平）