急性腦梗死患者血清脂聯(lián)素、瘦素與白細胞介素的動態(tài)變化

徐廣印　陳永生　吳　青

【摘要】目的研究血清脂聯(lián)素(adiponeefin)、瘦素(leptin)與白細胞介素(IL-1、6、8)水平變化在急性腦梗死的臨床診斷、治療、病情轉(zhuǎn)歸和判斷預后的應用價值。方法以ELISA法分別檢測急性腦梗死患者治療前后以及正常對照組血清瘦素、脂聯(lián)素及IL-1、IL-6、IL-8含量，并探討各指標與神經(jīng)功能缺損的關系。結(jié)果急性腦梗死患者治療前后血清瘦素及IL-1、IL-6、IL-8含量較對照組明顯升高(P＜0.01)，腦梗死治療后以上各指標明顯下降；而血清脂聯(lián)素結(jié)果在治療前較對照組明顯降低(P＜0.01)，治療后升高程度與治療前及對照組差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。腦梗死組神經(jīng)功能缺損程度與各指標變化均呈顯著相關(P＜0.01)。結(jié)論血清脂聯(lián)素、瘦素及IL-1、IL-6、IL-8含量的變化與腦梗死的臨床變化有較密切的關系，可以作為腦梗死病情變化的監(jiān)測指標和預后判斷指標，同時也為在腦梗死發(fā)病早期藥物治療開發(fā)提供臨床實驗依據(jù)。

【關鍵詞】脂聯(lián)素；腦梗死；瘦素；白細胞介素

脂肪組織可合成與分泌多種生物活性物質(zhì)，如瘦素(1eptin，LP)、脂聯(lián)素(adiponectin，ADPN)等。脂聯(lián)素在抑制急性腦梗死的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用。同時觀察脂聯(lián)素、瘦素等與腦梗死的關系未見文獻報道。為進一步探討脂聯(lián)素、瘦素、白細胞介素(IL－1、IL－6、IL－8)在腦梗死過程中的作用，筆者進行了初步研究，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1資料與方法

1．1一般資料

所有患者均為山東省臨沂市人民醫(yī)院2005年1月至2006年5月的住院患者?；颊呷诉x標準：第一次發(fā)病的急性腦梗死患者，發(fā)病7 d以內(nèi)，無心、肺、肝、腎等器官嚴重的并發(fā)癥，排除高血壓、糖尿病、冠心病、肥胖癥、各種炎癥等。診斷標準依據(jù)第四次全國腦血管病會議修訂的標準。本組急性腦梗死60例，男35例，女25例，年齡50～77(62.2±9.0)歲。

隨機選擇健康查體者40例，經(jīng)臨床體檢及實驗室檢查，排除心、肝、腎、腦等器質(zhì)性病變以及高血壓、糖尿病、冠心病、肥胖癥、各種炎癥等，其中男24例，女16例，年齡44～73(58.5±7.9)歲，其年齡、性別方面均與病例組具有可比性(P＞0.05)。

1．2實驗指標與檢測方法

患者入院未接受治療前及常規(guī)治療14 d后，分別抽取晨間空腹靜脈血4 ml，分離血清一20 ℃保存待測。正常對照組抽空腹靜脈血，標本作同樣處理，待標本收集完畢后進行同步檢測。以ELISA法分別檢測急性腦梗死患者治療前后以及正常對照組血清脂聯(lián)素、瘦素與白細胞介素含量。試劑盒均為美國IND公司提供，酶標儀為美國BEP2000型全自動酶標儀，由專人嚴格按試劑說明進行操作。

1．3治療方案及療效評定

所有患者均按常規(guī)治療，即給予阿司匹林、甘露醇、胞二磷膽堿等一般藥物，不用溶栓、降纖、擴血管藥物。療效評定按“九五”國家科技攻關小組制訂的臨床神經(jīng)功能缺損程度評定表，于治療前、治療后2周各評定一次。

1．4統(tǒng)計學方法

用SPSS 10.0 for Windows統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學處理，所有數(shù)據(jù)均用均數(shù)±標準差(χ±s)表示，采用方差分析、Post Hoc檢驗及pearson相關分析。以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2結(jié)果

急性腦梗死患者治療前后與正常對照組血清脂聯(lián)素、瘦素等水平測定結(jié)果。將治療前、治療后、對照組三組之間做方差分析，再做Post Hoc檢驗(因脂聯(lián)素各組間具有方差齊性，所以采用LSD法檢驗，其余指標各組間不具有方差齊性，所以采用Tamhane's T₂法檢驗)。結(jié)果急性腦梗死患者治療前脂聯(lián)素水平明顯低于對照組(P＜0.01)，亦明顯低于治療后(P＜0.01)；血清瘦素、IL-1、IL-6、IL-8水平治療前均高于對照組(P＜0.01)，治療后則明顯下降，治療前后各指標比較差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。

脂聯(lián)素、瘦素、IL-1、IL-6、IL-8與神經(jīng)功能缺損評分之間的關系，治療前后神經(jīng)功能缺損評分分別為(20.85±6.17)、(9.89±7.26)(n=60)，神經(jīng)功能缺損評分代表了病情嚴重程度，脂聯(lián)素與神經(jīng)功能缺損評分呈負相關(r=-0.336，P＜0.01)，說明脂聯(lián)素水平越低，病情越重；瘦素、IL-1、IL-6、IL-8與神經(jīng)功能缺損評分均呈正相關(r分別為0.233、0.318、0.251、0.340，P＜0.01)，說明瘦素、IL-1、IL-6、IL-8等水平越高，病情越重。將急性腦梗死患者的血清脂聯(lián)素、瘦素、IL-1、IL-6、IL-8的結(jié)果作相關分析，脂聯(lián)素與瘦素無明顯相關(相關系數(shù)為-0.136，P＞0.05)，脂聯(lián)素與IL-1、IL-6、IL-8成負相關(相關系數(shù)分別為-0.306、-0.343、-0.258，P＜0.01)，瘦素與IL-1、IL-6、IL-8成正相關(相關系數(shù)分別為0.450、0.187、0.323，P＜0.05)。

3討論

脂聯(lián)素亦稱脂肪細胞補體調(diào)節(jié)蛋白，是脂肪細胞特異性分泌蛋白，參與葡萄糖和脂質(zhì)的代謝調(diào)節(jié)，近期的研究表明脂聯(lián)素與微血管病變的發(fā)生以及抗炎等密切相關。腦梗死及冠脈疾患患者血清脂聯(lián)素濃度減低。Hotta等的研究表明低脂聯(lián)素血癥與心血管疾病危險因素(如高血壓、肥胖、2型糖尿病、胰島素抵抗等)相關，脂聯(lián)素水平隨動脈粥樣硬化程度的加重呈進行性下降。本研究表明腦梗死患者發(fā)病急性期存在低脂聯(lián)素血癥，病情越重，脂聯(lián)素水平越低，治療后脂聯(lián)素水平升高，說明低脂聯(lián)素血癥是腦梗死的危險因素，是病情嚴重程度及預后的判斷指標。

Shibata等對缺血組織中脂聯(lián)素是否具有調(diào)節(jié)血管發(fā)生的作用進行了實驗研究，選取脂聯(lián)素基因敲除小鼠和野生型小鼠作為研究對象，經(jīng)手術(shù)導致單側(cè)后肢局部缺血。結(jié)果表明，脂聯(lián)素基因敲除小鼠的血管再生和修復遭到破壞，而野生型小鼠不存在該問題；兩種小鼠同時給予腺病毒介導脂聯(lián)素補充物后，血管修復過程均加快，表明脂聯(lián)素能有效促進缺血狀態(tài)下的血管再生。在動脈粥樣硬化早期，內(nèi)皮細胞被炎性因子激活，進而表達大量黏附分子，增加單核細胞與血管內(nèi)皮細胞的黏附，然后遷移進入內(nèi)皮，攝取脂質(zhì)轉(zhuǎn)化為泡沫細胞。脂聯(lián)素抑制動脈粥樣硬化的機制目前尚不完全清楚。細胞培養(yǎng)證實，脂聯(lián)素具有抑制血細胞分化的功能，可抑制巨噬細胞的吞噬活性以及向泡沫細胞的轉(zhuǎn)化，抑制動脈血管內(nèi)皮細胞的增殖、分化以及向內(nèi)皮下?lián)p傷區(qū)的遷移。內(nèi)皮細胞、巨噬細胞和平滑肌細胞正是構(gòu)成動脈粥樣硬化的三大要素。脂聯(lián)素可能參與了炎癥反應的終止，即抑制巨噬細胞前體細胞的

生長與抑制成熟巨噬細胞的功能。同時，脂聯(lián)素使脂多糖誘導的TNF2A mRNA表達減少，巨噬細胞內(nèi)脂質(zhì)過量沉積使巨噬細胞轉(zhuǎn)化為泡沫細胞是動脈粥樣硬化形成的關鍵步驟。Quchi等發(fā)現(xiàn)，脂聯(lián)素能抑制脂類的聚集以及巨噬細胞表面A類清道夫受體的表達從而抑制巨噬細胞向泡沫細胞轉(zhuǎn)化。平滑肌細胞增殖也是動脈粥樣硬化形成的重要環(huán)節(jié)，體外細胞培養(yǎng)證實如果脂聯(lián)素水平下降，血管平滑肌則增生、肥大。

Clark研究表明，脂聯(lián)素與c反應蛋白(cRP)水平存在顯著負相關性，更進一步支持脂聯(lián)素的抗血管炎癥和抗動脈粥樣硬化作用。CRP趨向于反映急性期損傷，而脂聯(lián)素更能代表潛在的慢性炎性狀態(tài)，脂聯(lián)素水平較低者抗炎能力較弱，因而更易發(fā)生腦梗死。

瘦素是包含146個氨基酸、分子量為16000的單鏈蛋白質(zhì)，是一種內(nèi)分泌代謝激素，影響著諸多神經(jīng)內(nèi)分泌過程。瘦素介入了腦血管功能的調(diào)節(jié)和疾病的發(fā)生發(fā)展。本文研究表明急性腦梗死患者瘦素水平明顯增高，且與各種炎性細胞因子表達成負相關。Soderberg等研究了113例腦血管病患者，發(fā)現(xiàn)瘦素是獨立于其他危險因素之外的腦血管病的危險標志物。Nakata等發(fā)現(xiàn)瘦素與受體結(jié)合后，增強二磷酸腺苷(ADP)誘導的血小板聚集，且呈濃度依賴性，而當瘦素質(zhì)量濃度小于10.0 ng／ml時，則喪失其作用，高瘦素血癥是急性腦梗死患者發(fā)病的原因之一。本研究支持此觀點。瘦素是炎癥過程中的急性期反應物，炎性細胞因子能影響瘦素合成，細胞系與動物實驗已經(jīng)證明瘦素具有抑制炎癥的作用。瘦素可激活核因子-kB(NF-kB)，使IL-6、IL-8產(chǎn)生與釋放增多。IL-1、IL-6與瘦素具有相同的信號轉(zhuǎn)導途徑，可與瘦素競爭結(jié)合位點，從而導致瘦素不能發(fā)揮作用，形成瘦素抵抗。

本研究還表明，血清脂聯(lián)素水平與瘦素水平無明顯相關，可能與觀察病例數(shù)較少有關，但低脂聯(lián)素血癥確實同時伴有高瘦素血癥，經(jīng)過治療后脂聯(lián)素水平升高，瘦素水平下降，說明脂聯(lián)素與瘦素存在某種互相制動關系，這有待進一步深入研究。Namse等認為脂聯(lián)素與瘦素之問的相互作用失衡可能是決定血管炎癥和早期動脈粥樣硬化的重要因素之一。生理濃度的脂聯(lián)素能抑制IL-6、TNF-a的分泌，而低脂聯(lián)素血癥伴有IL-6、高敏c-反應蛋白等炎癥介質(zhì)的升高。Fasshauer等研究體外3T3-L1脂肪細胞，用IL-6處理3T3-L1細胞，能使脂聯(lián)素的表達下降75％，表明IL-6能抑制脂肪細胞表達分泌脂聯(lián)素。本研究結(jié)果提示脂聯(lián)素水平與IL-6水平呈負相關，支持此觀點。