不同物候期藏綿羊肉品質(zhì)、營養(yǎng)成分及肉質(zhì)相關(guān)基因表達(dá)特征分析

中圖分類號： S826.8+3 ;Q786 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號：1008-0864（2025）07-0161-11

Analysis of Gene Expression Characteristics Associated with Quality， Nutrient Composition，and Meat Quality of Tibetan Sheep Meat During Different Phenological Stages

CHEN Xiaowei， SHA Yuzhu，LIU Xiu*， SHAO Pengyang，WANG Fanxiong，XIE Zhuanhui， YANGWenxin，CHENQianling，GAOMin，HUANGWei （KeyLaboratory of Gansu Herbivore Biotechnology，College of Animal Scienceand Technology， Gansu Agricultural University，Lanzhou 73oo7O，China）

Abstract： To examine the impact of forage nutrients during diferent phenological stages （regreen stage and grassy stage）on thequality，nutrient compositionand gene expression characteristicsrelated to meat qualityin pastured Tibetan sheep meat，the nutrient composition of herbage during the regreen stage（May）and grasy stage（August）， as well as the meat quality，nutrient compositionand expresson of genes relatedto meat quality inthe longissimus dorsi muscle，foreleg muscle，and hind leg muscle of Tibetan sheep were analyzed.The results indicated that there were significant increases in crude protein and crude fat contents during the grasy stage compared to theregreen stage，whileacid detergentfiber content was significantly higher in theregreen stage than thatinthegrassy stage. Compared to the regreen stage，the shear force and pH_1h （pH after slaughter 1h） of the longissimus dorsi muscle of Tibetan sheep were significantly higherin the grassystage.Aditionally，thecooked meatrate was significantly higher inthegrasy stage than thatinregreen stage，whereas the water loss ratewas significantly lower than that in the regreen stage.Thecrude fat content of muscle in grassystage was significantly higher than that inregreen stage， while the water content was significantly lower in grassy stage.Additionally，the expression levels of LPL andFABP3 genes of Tibetan sheep were significantly higherin grass stage than those inregreen stage，whereas the expression levels of SCD ， ADSL ，CAST，and MSTN genes were also significantly higher in regreen stage than those in grassy stage.Correlation analysis revealed that ADSL was significantly negative correlation with protein content （ r=-0.995 ， Plt;0.01 ），as well as significantly positive correlation with crude fat content （ r=0.865 ， Plt;0.01 ）.Above results provided valuable insights for optimizing forageutilizationand enhancing meat qualityof Tibetan sheep during different phenological stages.

Key words：phenological stage；meat quality； nutrient composition；gene expression； Tibetan sheep

藏綿羊是繁育在青藏高原海拔 2000m 以上的原始綿羊品種，是青藏高原主要的畜種和生物遺傳資源，也是當(dāng)?shù)啬撩袢罕娰囈陨?jì)的支柱產(chǎn)業(yè)，在青藏高原生態(tài)系統(tǒng)中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。藏綿羊耐粗飼，產(chǎn)肉性能優(yōu)良，能較好地適應(yīng)青藏高原的高寒、缺氧、營養(yǎng)匱乏等惡劣的高原生態(tài)環(huán)境2。藏綿羊肉具有高蛋白、低脂肪、富含氨基酸和脂肪酸特性3]。羊肉品質(zhì)受品種、性別、年齡、環(huán)境、飼料營養(yǎng)及添加劑等多種因素影響，其品質(zhì)隨影響因素變化而表現(xiàn)不同。青藏高原氣候惡劣，牧草生長期短，處在不同生長期的牧草，其營養(yǎng)成分存在季節(jié)動態(tài)變化5。青草期牧草種類多樣、營養(yǎng)豐富，具有較高的蛋白質(zhì)和碳水化合物含量，但在返青期，牧草沒有得到充分生長，營養(yǎng)價(jià)值和質(zhì)量較低。而牧草的產(chǎn)量、品質(zhì)和性能直接影響動物產(chǎn)品品質(zhì)8]。研究表明，不同物候期牧草飼喂對肉的顏色和營養(yǎng)特性有積極影響。劉秀等研究發(fā)現(xiàn)，放牧藏綿羊不同時(shí)期肉品質(zhì)存在一定差異，8月為藏綿羊肉品質(zhì)一年中最好的時(shí)期。王莉梅等[]對自然放牧條件下不同月齡烏珠穆沁羊的肉品質(zhì)分析發(fā)現(xiàn)，不同物候期藏綿羊的營養(yǎng)狀況對肉的系水力影響較大，而年齡和部位對肌肉系水力影響較小。因此，通過對不同物候期藏綿羊肉品質(zhì)進(jìn)行測定及相關(guān)基因表達(dá)特征進(jìn)行分析，可以更全面地了解藏綿羊肉的特性及其適應(yīng)環(huán)境的生物學(xué)機(jī)制，為進(jìn)一步提高藏綿羊肉品質(zhì)和營養(yǎng)價(jià)值，以及保護(hù)和利用其種質(zhì)資源提供依據(jù)。

遺傳是影響畜產(chǎn)品的主要因素之一。目前已發(fā)現(xiàn)了大量影響肉品質(zhì)的相關(guān)基因。鈣蛋白酶抑制蛋白（calpastatin，CAST）被認(rèn)為是標(biāo)記輔助選擇生長性狀的候選基因，能控制肌原纖維中蛋白質(zhì)降解，影響肌細(xì)胞的生長速度及肌肉嫩度。脂蛋白脂酶（lipoproteinlipase，LPL）、脂肪酸結(jié)合蛋白（fattyacidbindingproteins， FABPs ）和硬脂酰輔酶A去飽和酶（stearoyl-CoAdesaturase， SCD 基因參與脂肪酸運(yùn)輸和脂肪滴沉積[12-13]，進(jìn)而影響肉品質(zhì)。研究表明， SCDI 基因?qū)?nèi)脂肪含量、剪切力、大理石花紋等級和脂肪顏色有一定的影響[4]。然而，對于藏綿羊肉質(zhì)相關(guān)基因的研究仍然不足，尤其是在牧草資源季節(jié)變化對其肉質(zhì)、營養(yǎng)成分和基因表達(dá)特征的影響鮮見報(bào)道。因此，本研究探究不同物候期牧草對藏綿羊肉品質(zhì)、營養(yǎng)成分及肉質(zhì)相關(guān)基因表達(dá)特征的影響，旨在為藏綿羊肉的生產(chǎn)加工和品質(zhì)改良提供理論支持和技術(shù)指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)于2023年5—9月在青海省祁連縣野牛溝鄉(xiāng)牧民牧場進(jìn)行。該地區(qū)屬高原大陸性氣候，平均海拔 3169m ，年均降水量 4038mm ，年均氣溫 2.3^°C 。牧草生長期120d左右，一般5月開始發(fā)芽，9月開始枯黃，草地類型為高寒草甸。試驗(yàn)期間，選取12只體質(zhì)量 （30.23±4.04 ）） k_-^α 的3歲（ ±1 月齡）放牧藏綿羊，用帶有數(shù)字的耳標(biāo)進(jìn)行標(biāo)記，在祁連縣野牛溝鄉(xiāng)牧民牧場進(jìn)行全年放牧。試驗(yàn)期間動物體況良好、無補(bǔ)飼、自由飲水。分別于返青期（5月）青草期（8月）隨機(jī)選擇6只進(jìn)行屠宰采樣。屠宰后取樣現(xiàn)場測定 pH. 失水率、剪切力等指標(biāo);采集背最長肌、前腿肌、后腿肌各 500g 分裝帶回試驗(yàn)室 -20^°C 冰箱保存，用于測定熟肉率、營養(yǎng)成分；同時(shí)，采集背最長肌、前腿肌和后腿肌的組織樣品，剝離上方的脂肪和筋膜，置于液氮中保存，用于后續(xù)RNA提取。

1.2 測定指標(biāo)及方法

1.2.1牧草營養(yǎng)成分測定分別將試驗(yàn)樣地劃分為 0.5m×0.5m 的6個(gè)樣方，采集樣方中混合牧草的地上部，將不可食牧草去除，只保留可食牧草，于烘箱中 烘至質(zhì)量恒等，粉碎過篩進(jìn)行牧草營養(yǎng)成分檢測。在風(fēng)干物質(zhì)基礎(chǔ)上參照《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測技術(shù)》5中的方法測定牧草營養(yǎng)成分，包括粗蛋白質(zhì)（crudeprotein，CP）粗脂肪（etherextracts，EE）、酸性洗滌纖維（aciddetergentfiber，ADF）和中性洗滌纖維（neutraldetergentfiber，NDF）含量。

1.2.2肉品質(zhì)測定失水率：參照《畜禽肉質(zhì)的測定》（NY/T1333—2007）[使用失水率測試儀（北京天翔飛域儀器設(shè)備有限公司，Meat-1型）測定。

pH：使用便攜式pH計(jì)（德圖儀表有限公司，TEST0205型）測定 pH ，將用標(biāo)準(zhǔn)液校準(zhǔn)后的 pH 計(jì)分別測定屠宰后1和 24h 肉樣的 pH ，分別記錄為 pH_1h 和 pH_24h ，取3次平行測定的均值作為該肉樣的pH。

熟肉率：取約 200g 的肉塊，精確稱重記作 W₁ 將樣品置于鋁蒸鍋的蒸屜上用沸水在 2000‰ 的電爐上蒸煮 45min ，取出后冷卻 30～45min 或掛于室內(nèi)無風(fēng)陰涼處， 30min 后再次稱重，記作 W₂ ，計(jì)算熟肉率，公式如下。

熟肉率 =W₂/W₁×100%

剪切力：參照《肉嫩度的測定剪切力測定法》（NY/T1180—2006）[7]，使用恒溫水浴鍋（江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司，HH-2型）測定。

1.2.3肌肉營養(yǎng)成分測定參照《肉與肉制品 水分含量測定》（GB/T9695.15—2008）8測定水分含量；參照《食品中蛋白質(zhì)的測定》（GB/T5009.5—2016使用凱氏定氮儀（上海瑞玢國際貿(mào)易有限公司，KJELTEC8200型）測定粗蛋白質(zhì)含量；參照《肉與肉制品總脂肪含量測定》（GB/T9695.7—2008）[20]使用全自動索氏脂肪浸提儀（上海瑞玢國際貿(mào)易有限公司，SOXTEC2050型）測定粗脂肪含量；參照《肉與肉制品總灰分測定》（GB/T9695.18—2008）21使用精密鼓風(fēng)干燥箱（上海一恒科學(xué)儀器有限公司，BPG-9240A型）測定粗灰分含量。

1.2.4RNA提取和熒光定量按照Trizol試劑盒（賽默飛世爾科技公司）說明書提取肌肉組織總RNA，通過NanoDropOne超微量紫外分光光度計(jì)（賽默飛世爾科技公司）檢測總RNA含量和純度后，用EvoM-MLV反轉(zhuǎn)錄試劑盒（湖南艾科瑞生物，中國工程有限公司）將RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA。反轉(zhuǎn)錄的cDNA置于 -20°C 保存，用于檢測相關(guān)基因的表達(dá)量。

參考NCBI上羊的 CAST，MSTN，F(xiàn)ABP，ADSL， （20號LPL和SCD基因序列信息，以 β -actin為內(nèi)參基因，用Primer5.0軟件設(shè)計(jì)引物（表1），由北京奧科鼎盛生物科技有限公司（北京）合成。

根據(jù) ChamQ Universal SYBRGreenPCR試劑盒（Q711002/03，諾唯贊生物科技股份有限公司）說明書采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測肉質(zhì)相關(guān)基因在3個(gè)部位肌肉組織中的相對表達(dá)量。PCR體系的總體積為 20μL ，PCR程序?yàn)椋?95^°C 預(yù)變性30s;95^°C 變性 5s，60^°C 退火 延伸 30s ，40個(gè)循環(huán)。

1.3數(shù)據(jù)分析

采用 Excel2010 軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行整理，并用SPSS26.0軟件進(jìn)行獨(dú)立性樣本t檢驗(yàn)，對不同物候期同一部位的測定進(jìn)行顯著性分析。以 Plt;0.05 作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果用“平均值 ?± 標(biāo)準(zhǔn)差”表示。使用 2^-ΔΔct 法[22]計(jì)算基因的相對表達(dá)量，用GraphPadPrism5軟件制圖。

2 結(jié)果與分析

2.1不同物候期牧草營養(yǎng)成分

對不同物候期牧草的營養(yǎng)成分進(jìn)行測定，結(jié)果（表2）表明，青草期牧草的CP和EE含量極顯著高于返青期，DM和ADF含量極顯著低于返青期，NDF含量隨物候期呈增加趨勢，其中返青期極顯著低于青草期。

2.2不同物候期藏綿羊不同部位肌肉品質(zhì)分析

對2個(gè)物候期藏綿羊不同部位的肉品質(zhì)分析（表3）發(fā)現(xiàn)，青草期3個(gè)部位的失水率均最低，極顯著低于返青期，背最長肌和后腿肌的剪切力極顯著高于返青期；返青期背最長肌和前腿肌的熟肉率均最低，且后腿肌顯著高于青草期； pH_1h 在不同時(shí)期不同部位的值為6.202＼～7.798，其中，返青期顯著或極顯著高于青草期；而 pH_24h 在不同時(shí)期不同部位的值為6.248＼～7.145，返青期背最長肌和后腿肌的 pH_24h 顯著高于青草期。

2.3不同物候期藏綿羊不同部位肌肉營養(yǎng)成分

由表4可知，返青期不同部位肉的水分含量最高，顯著高于青草期，且水分含量均在 73% 以上；背最長肌在返青期的粗蛋白含量極顯著高于青草期，前腿肌在返青期的粗蛋白含量顯著高于青草期；背最長肌在返青期的粗脂肪含量極顯著高于青草期;背最長肌在返青期的粗灰分含量高于青草期，但差異不顯著，前腿肌和后腿肌在返青期的粗灰分含量極顯著高于青草期。

2.4不同物候期藏綿羊不同部位肉質(zhì)相關(guān)基因表達(dá)量

檢測與肉品質(zhì)相關(guān)基因在背最長肌、前腿肌和后腿肌中的相對表達(dá)量，結(jié)果顯示，在背最長肌中， SCD 基因的表達(dá)量在返青期最高，且極顯著高于青草期， LPL，F(xiàn)ABP3 基因在青草期的表達(dá)量顯著或極顯著高于返青期（圖1）；在前腿肌中，ADSL基因的表達(dá)量在青草期最低，極顯著低于返青期，SCD、ADSL基因在返青期的表達(dá)量極顯著高于青草期（圖2）；在后腿肌中， LPL 和FABP3基因在青草期的表達(dá)量極顯著高于返青期，而SCD、CAST和ADSL基因在返青期的表達(dá)量顯著低于青草期，MSTN基因在青草期的表達(dá)量最低，極顯著低于返青期（圖3）。

2.5相關(guān)基因表達(dá)量與肉質(zhì)指標(biāo)相關(guān)性分析

由表5可知，藏綿羊肉質(zhì)相關(guān)基因的表達(dá)與肌肉中粗蛋白含量均呈極顯著負(fù)相關(guān)，而與粗脂肪含量呈極顯著正相關(guān)；粗蛋白與粗脂肪呈顯著負(fù)相關(guān)；粗脂肪與失水率、剪切力呈極顯著負(fù)相關(guān)；失水率與剪切力呈極顯著負(fù)相關(guān)；肉質(zhì)相關(guān)基因間均呈極顯著正相關(guān)。

3討論

3.1不同物候期對牧草營養(yǎng)成分的影響

牧草的營養(yǎng)包含對干物質(zhì)、粗蛋白、粗脂肪和粗纖維含量等指標(biāo)評定，直接影響放牧綿羊的營養(yǎng)狀況和生長性能。本研究通過分析返青期和青草期主要牧草的營養(yǎng)成分含量發(fā)現(xiàn)，返青期到青草期，牧草的CP和EE含量呈上升趨勢，而DM含量有下降趨勢，CP含量在青草期最高，返青期最低，這可能與高寒牧區(qū)牧草青草期生長旺盛，營養(yǎng)物質(zhì)累積迅速，短時(shí)間內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)快速增加有關(guān)。扎西卓瑪?shù)萚23對高寒草甸草場牧草營養(yǎng)成分測定時(shí)發(fā)現(xiàn)，青草期天然牧草CP含量為 5.80% ，這主要受牧草本身的遺傳特性和生長環(huán)境的影響。牧草生長發(fā)育過程中營養(yǎng)物質(zhì)含量受植物本身遺傳物質(zhì)調(diào)控的影響，同時(shí)也受環(huán)境因素的影響。本研究發(fā)現(xiàn)，青草期牧草的纖維含量顯著低于返青期，說明青草期牧草中可被吸收的營養(yǎng)成分較多。程財(cái)24在對烏拉蓋草原天然牧草研究中發(fā)現(xiàn)，NDF含量在 38.36%～66.97% ，ADF含量在 22.85%～32.79% ，這與本研究結(jié)果基本一致。牧草的NDF和ADF含量隨物候期的變化趨勢明顯，且青草期牧草質(zhì)量優(yōu)于返青期。

3.2不同物候期放牧藏綿羊不同部位肌肉品質(zhì)

失水率和熟肉率對家畜肉品食用品質(zhì)有重要影響，它們主要反映肌肉的系水能力，如肉的質(zhì)地、風(fēng)味和多汁性。失水率和熟肉率呈負(fù)相關(guān)，失水率越低、肉的系水力越強(qiáng)，熟肉率越高，肉質(zhì)越好[25]。本研究表明，青草期藏綿羊肌肉的失水率在不同部位中均最低，顯著低于返青期，而背最長肌和前腿肌的熟肉率在返青期最高，這與劉秀等的研究結(jié)果一致，說明青草期肉品質(zhì)最好。羊肉的嫩度直接影響羊肉的口感和品質(zhì)，是評價(jià)羊肉品質(zhì)的重要指標(biāo)之一。一般通過剪切力值來衡量肉的嫩度，剪切力值越小，肉越嫩，反之，肉越老。本研究中，前腿肌的剪切力值在青草期顯著下降，這說明青草期肉更嫩；但背最長肌和后腿肌的剪切力值在返青期顯著下降，可能與藏綿羊在此時(shí)遭受營養(yǎng)脅迫，導(dǎo)致肌纖維的大小和活性降低有關(guān)。肉質(zhì)評價(jià)中，通常將宰后動物肌肉成熟的 pH 在 45～60min 和 24h 內(nèi)作為指標(biāo)之一。本研究表明，背最長肌、前腿肌、后腿肌的pH在青草期 pH 呈弱酸性，返青期pH 呈中性偏弱堿性。在動物宰殺后，肌糖原在缺氧條件下酵解產(chǎn)生乳酸等物質(zhì)2。隨著成熟時(shí)間的延長，肌肉中乳酸含量逐漸增加，導(dǎo)致 pH 逐漸降低。這與本研究的結(jié)論一致，返青期和青草期不同部位肌肉宰后 24h 的 pH 低于宰后"^1h"。上述結(jié)果表明，青草期肉品質(zhì)較好、嫩度高、系水力強(qiáng)。

3.3不同物候期藏綿羊不同部位肌肉營養(yǎng)成分

羊肉中含有較高水平的蛋白質(zhì)，與人體中的蛋白質(zhì)組成非常接近，與豬肉、牛肉相比，其高蛋白、低脂肪的特性廣受消費(fèi)者青睞。隨著人民生活水平的提高，消費(fèi)者越來越關(guān)注肌肉中的脂肪酸、風(fēng)味物質(zhì)等指標(biāo)，而肌肉中營養(yǎng)成分的變化，尤其是脂肪和粗蛋白含量的變化，直接影響肉的品質(zhì)和營養(yǎng)特性2。肉類營養(yǎng)品質(zhì)指標(biāo)主要有水分、灰分、蛋白質(zhì)和脂肪含量等參數(shù)。本研究中，返青期不同部位肌肉的水分含量顯著高于青草期，且前腿肌高于后腿?。?個(gè)時(shí)期前腿肌和后腿肌的灰分含量也存在顯著差異；青草期后腿肌的粗蛋白含量顯著高于返青期，且3個(gè)部位的粗脂肪含量顯著高于返青期，這與趙麗等2研究結(jié)果一致。卜振鯤等2研究表明，飼草比例對羔羊生產(chǎn)性能、肌肉營養(yǎng)成分和脂肪酸含量有明顯影響，羔羊采食日糧后攝入的能量被用來合成蛋白質(zhì)和脂肪，而肌肉代謝需要分解脂肪來提供能量，因此會出現(xiàn)高蛋白質(zhì)和低脂肪的現(xiàn)象[3。何林芳等研究表明，南江黃羊肉的氨基酸、蛋白質(zhì)等主要營養(yǎng)物質(zhì)含量受飼養(yǎng)方式影響較小，但脂肪含量與飼養(yǎng)方式有關(guān)，特別在冬季，由于天然牧草枯竭，南江黃羊僅靠自然采食難以滿足自身生長需要。本研究結(jié)果表明，2個(gè)物候期后腿肌的粗蛋白和粗脂肪含量差異不顯著，但粗脂肪含量隨月齡的增長而增加，這與何林芳的結(jié)果類似[3]。這可能與高寒牧區(qū)牧草的營養(yǎng)成分有關(guān)。返青期較高的脂肪含量提示藏綿羊春季抓膘育肥的可行性。綜合來看，不同物候期藏綿羊的腿肌更符合人們對羊肉高蛋白、低脂肪的要求，其肉質(zhì)營養(yǎng)成分表現(xiàn)出良好的優(yōu)勢。

3.4不同物候期藏綿羊不同部位肉質(zhì)相關(guān)基因表達(dá)特征

肉質(zhì)性狀的差異與基因表達(dá)量存在關(guān)聯(lián)，導(dǎo)致藏綿羊返青期和青草期肉質(zhì)性狀差異的分子機(jī)制尚不清楚。FHBP3表達(dá)于心肌、骨骼肌和脂肪細(xì)胞，在調(diào)節(jié)肝臟合成甘油三脂中有重要作用，并促進(jìn)細(xì)胞攝取脂肪酸和肌內(nèi)脂肪（intramuscularfat，IMF）沉積[32]。喬永等[33]研究表明， LPL 基因在哈薩克羊生長早期對其肌內(nèi)脂肪的沉積可能有負(fù)調(diào)控作用。本研究中，LPL和FHBP3基因在青草期高表達(dá)，且在后腿肌中的表達(dá)量最高，說明不同

物候期牧草會影響肉質(zhì)相關(guān)基因的表達(dá)。MSTN是一種對肌肉發(fā)育的反調(diào)節(jié)因子，抑制MSTN基因表達(dá)可過度增殖肌細(xì)胞，引起肌纖維肥大。也有研究證實(shí)，MSTN基因?qū)趋兰∪庠錾?、脂肪沉積等產(chǎn)生作用。對于綿羊不同組織中MSTN基因的表達(dá)，馬曉燕等[34研究表明，新疆也木勒白綿羊MSTN基因在肌肉半膜、半鍵、股二、股三部位的表達(dá)量明顯高于其他組織，在背最長肌中的表達(dá)量明顯高于各種內(nèi)臟組織及尾脂。本研究表明，在青草期后腿肌中MSTN基因的表達(dá)量最低，且顯著低于返青期。這說明肉質(zhì)相關(guān)基因的表達(dá)不僅受部位影響，還與不同物候期牧草的營養(yǎng)成分存在一定的關(guān)系。 SCD，ADSL，CAST 基因均為脂肪酸合成和脂質(zhì)代謝相關(guān)基因，參與肌纖維的氧化代謝過程，能反映肌內(nèi)脂肪含量，與肌肉嫩度有關(guān)。李度等35研究發(fā)現(xiàn)， ADSL 基因的表達(dá)量與IMP含量呈正相關(guān)，且不同雞種間差異顯著；方錢海等[3研究表明， SCDI 和 SCD5 基因整體缺失后甘油三酯含量顯著降低，影響脂肪酸合成酶（fattyacidsynthase，F(xiàn)ASN）、與脂肪酸和脂質(zhì)代謝相關(guān)蛋白的表達(dá);鈣蛋白酶（calpain，CAPN）是與肉質(zhì)相關(guān)的最廣泛的蛋白質(zhì)水解酶之一，可導(dǎo)致肌肉蛋白質(zhì)水解，從而影響肉的嫩度，而CAST是

CAPN的特異性內(nèi)生抑制劑。因此，CAST的表達(dá)量對肉嫩度至關(guān)重要。對甘肅肉牛CAST基因的多態(tài)性與肉質(zhì)相關(guān)性狀進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析發(fā)現(xiàn)，該基因顯著影響剪切力及失水率，可作為研究肉質(zhì)性狀的候選基因。從本研究結(jié)果來看，SCD、ADSL、CAST和MSTN基因在返青期和青草期的相對表達(dá)量差異顯著，且不同部位的基因表達(dá)量均表現(xiàn)為返青期高于青草期。這說明不同物候期牧草影響藏綿羊肌肉發(fā)育相關(guān)基因表達(dá)水平。

3.5不同基因表達(dá)量與肉質(zhì)性能相關(guān)性分析

營養(yǎng)水平對肉質(zhì)基因表達(dá)水平有顯著影響，因此研究不同時(shí)期肉質(zhì)指標(biāo)與基因表達(dá)水平的關(guān)聯(lián)性具有重要意義。肌肉中的水分含量直接影響肉品質(zhì)，與顏色、嫩度、風(fēng)味、口感、儲藏期和加工品質(zhì)等密切相關(guān)[38。研究表明，低水分含量會導(dǎo)致較高的剪切力[3，而蛋白質(zhì)含量與水分含量也存在密切聯(lián)系[4]。本研究表明，藏綿羊肌肉中的蛋白含量和剪切力與失水率呈顯著負(fù)相關(guān)。這表明失水率越低，保水性越好。此外，CAST的表達(dá)與肉的嫩度和風(fēng)味密切相關(guān)，被國際上認(rèn)定為肉質(zhì)研究的重要候選基因[41]。同時(shí)，本研究還發(fā)現(xiàn)，CAST與剪切力存在相關(guān)性。ADSL是催化IMP合成途徑中第8步反應(yīng)的關(guān)鍵酶，是調(diào)控IMP合成的關(guān)鍵基因[22]。本研究顯示，ADSL表達(dá)量與蛋白含量呈極顯著負(fù)相關(guān)，與粗脂肪含量呈極顯著正相關(guān)。這與張淑靜42研究結(jié)果一致。綜上，CAST和ADSL基因的表達(dá)量與肉品質(zhì)有一定的關(guān)聯(lián)，但其具體機(jī)制仍需進(jìn)一步探索。

藏綿羊的肉品質(zhì)受其生長區(qū)域和品種的影響，不同區(qū)域的藏綿羊品種表現(xiàn)出不同的肉質(zhì)特性。例如，對河谷型藏綿羊與薩?？搜螂s交后代的肉品質(zhì)研究表明，雜交后代的產(chǎn)肉性能高于河谷型藏綿羊，且肉色及口感略優(yōu)于河谷型藏綿羊[43]。此外，對西藏蘇格綿羊的研究顯示，不同部位的肉品質(zhì)特征及主要營養(yǎng)成分存在差異，其中背最長肌的品質(zhì)最佳[44]。不同品種的藏綿羊也顯示出不同的肉質(zhì)特性。例如，崗巴綿羊肉的感官評分最高，總體可接受性也最好，其肉質(zhì)特性為亮度值最大，剪切力小，持水力高，蒸煮損失率低，表明肉質(zhì)鮮嫩柔軟[45]。而多瑪綿羊則表現(xiàn)出對青藏高原惡劣氣候和特殊生態(tài)環(huán)境的極強(qiáng)適應(yīng)性，是高寒牧區(qū)飼養(yǎng)的優(yōu)良綿羊類群[46。一般而言，高海拔地區(qū)的藏綿羊適應(yīng)了嚴(yán)酷的自然條件，肉質(zhì)更為緊實(shí)，肌肉纖維更豐富，風(fēng)味也更濃郁；而低海拔地區(qū)的藏綿羊肉質(zhì)則相對嫩滑4]。研究顯示，優(yōu)質(zhì)藏綿羊肉品種的共同特點(diǎn)是肌肉中脂肪含量適中，肌肉纖維細(xì)膩，肉質(zhì)顏色鮮紅，系水力強(qiáng)，口感鮮嫩。這些特性與生長激素基因、肌肉生長抑制素基因、脂肪酸合成酶基因等特定基因的變異和表達(dá)模式密切相關(guān)。這些基因在不同品種的藏綿羊中差異顯著，影響著肉質(zhì)的顏色、嫩度、水分和脂肪含量[48]。通過比較不同區(qū)域藏綿羊品種的肉品質(zhì)及相關(guān)基因能夠更深入地理解環(huán)境適應(yīng)性和遺傳多樣性如何影響肉質(zhì)，為藏綿羊的品種改良和選育提供了科學(xué)依據(jù)?？傊鼐d羊的肉品質(zhì)是品種和生長環(huán)境共同作用的結(jié)果，基因是決定肉質(zhì)差異的關(guān)鍵因素。深入研究這些基因及其表達(dá)模式，有助于指導(dǎo)藏綿羊的選育工作，從而提升肉品質(zhì)。

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