貯藏溫度和芽孢桿菌添加對高丹草青貯發(fā)酵品質(zhì)和硝酸鹽含量的影響

中圖分類號：S153 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1007-0435（2025）05-1669-08

Abstract：The aim of this study was to investigate the effects of storage temperature and Bacillus aditives on the fermentation quality，nutritive value and nitrate contents of sorghum-sudangrass （Sorghum bicolorX sudanense）silage，and to provide atheoretical basis forthe improvementof the fermentation characteristics and nutritional value of sorghum-sudangrass silage at low-temperature. The experiment included two storage temperatures （ 15^°C and 25^°C ） and four types of additives （control group，Bacillus coagulans，B. licheniformis，and B subtilis at 1.0×10⁵ cfu·g^-1 FM）.The results showed that compared with 25^°C ，the contents of neutral deter gent fiber， lactic acid and acetic acid were significantly decreased，and the pH and water-soluble carbohydrate were significantly increased at 15^°C storage temperature （Plt;0.05） .When the storage temperature was 15^°C the nitrate content of the thre Bacillus treatments was significantly decreased compared with the control group 0 ?lt;0.05 ）．Theaddition of B .subtilis significantly increased the content of lactic acid and decreased the pH and soluble carbohydrate content of silage （ ?Plt;0.05 ）；inoculation with B . licheniformis significantly decreased the content of nitrite and soluble carbohydrate ?Plt;0.05） . In conclusion，compared with 15^°C ， 25^°C storage conditions significantly improved the fermentation quality of sorghum-sudangrass silage，and B .subtilis signifi cantly improved the fermentation quality of silage at 15^°C storage temperature and promoted the degradation of nitrate.

Key words：Sorghum-sudangrass; Silage ;Bacillus; Temperature ;Nitrate ;Fermentation quality

高丹草（SorghumbicolorXsudanense）為禾本科一年生優(yōu)質(zhì)飼草，是以高梁［Sorghumbicolor（L.）Moench]和蘇丹草[Sorghumsudanense（Piper）Stapf]雜交培育而成，聚集了高梁與蘇丹草生物產(chǎn)量高、再生性強(qiáng)、含糖量高、抗旱、耐鹽性強(qiáng)，適應(yīng)性廣等優(yōu)良特點，在北方農(nóng)區(qū)逐漸受到廣大種養(yǎng)戶的青睞[1]。高丹草含水量高，且生長季在雨季，不易加工成干草，適宜進(jìn)行青貯，調(diào)制成功的青貯飼料能較好地保持高丹草的營養(yǎng)特性，具有柔嫩多汁、氣味芬芳、適口性好、消化率高等優(yōu)點[2]。

由于禾本科牧草自身不具備固氮能力，其生長發(fā)育所需的氮素主要依靠根系從土壤中吸收，但土壤中可利用的氮素往往難以滿足禾本科牧草高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的需要[2]。因此，氮肥是飼草產(chǎn)量和養(yǎng)分積累的重要保障。研究發(fā)現(xiàn)，高丹草硝酸鹽含量隨著施氮量的增加而增加，導(dǎo)致高丹草青貯原料中的硝酸鹽大幅增加[4]。硝酸鹽是植物吸收氮素的一種形態(tài)，它能被植物機(jī)體同化為氨基酸或氨，作為植物自身合成蛋白質(zhì)的氮源，但當(dāng)植物吸收硝酸鹽的量超過還原與同化的量時，則就造成硝酸鹽的累積[5]。飼喂了含有高濃度硝酸鹽的青貯飼料時，硝酸鹽會在瘤胃中被還原為亞硝酸鹽，導(dǎo)致動物中毒[。

高丹草可一年多次刈割利用，北方地區(qū)在高丹草后期劉割時環(huán)境溫度較低，日平均氣溫在 15^°C 左右，導(dǎo)致青貯時的溫度低于最適溫度[。貯藏溫度在青貯飼料生產(chǎn)中起著重要作用，不同的貯藏溫度顯著影響青貯發(fā)酵品質(zhì)。研究表明，低溫會導(dǎo)致青貯飼料的pH值升高，十物質(zhì)損失增加，且在青貯期間pH值下降速度緩慢，抑制微生物的活性，減緩青貯發(fā)酵的效率，降低青貯品質(zhì)[8。目前，有關(guān)高丹草低溫青貯的研究較少，且尚缺乏有效提高高丹草青貯飼料品質(zhì)的手段。

用微生物添加劑改善青貯發(fā)酵品質(zhì)是常用的青貯技術(shù)措施，可在青貯初期通過促進(jìn)有益菌快速增殖迅速降低青貯飼料pH值，抑制有害微生物[9]。

芽孢桿菌是一種新型青貯添加劑，研究表明，芽孢桿菌作為添加劑可產(chǎn)生纖維素酶，釋放出可溶性糖，促進(jìn)乳酸菌增殖，同時還能抑制霉菌和酵母菌等不良微生物，改善發(fā)酵品質(zhì)和有氧穩(wěn)定性[10-12]。Zhao等[13研究發(fā)現(xiàn)，在高丹草中添加枯草芽孢桿菌可提升高丹草青貯飼料的發(fā)酵品質(zhì)，降低青貯飼料中的硝酸鹽含量。青貯添加劑中的菌株通常是在相對溫暖的溫度下篩選所得，因此在低溫下的部分功能可能會受損，導(dǎo)致其原有功效喪失[14-15]。芽孢桿菌抗逆性強(qiáng)，能夠在熱處理和低溫貯藏過程中表現(xiàn)出優(yōu)良的穩(wěn)定性[16]。但芽孢桿菌在低溫條件下對高丹草青貯品質(zhì)的改善效果尚未見報道。

因此，本試驗以芽孢桿菌為添加劑調(diào)制高丹草青貯飼料，將其分別置于 15^°C 和 25^°C 的環(huán)境中貯藏，假設(shè)芽孢桿菌在低溫條件下能夠降解硝酸鹽，并且可以改善青貯品質(zhì)。探究不同的貯藏溫度和芽孢桿菌添加劑對高丹草青貯發(fā)酵品質(zhì)與營養(yǎng)成分的影響，以及為高丹草青貯飼料的生產(chǎn)加工提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗種植區(qū)在沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)百草園科研基地 ，位于遼寧省沈陽市沈河區(qū)，屬河流沖積平原，土壤為棕壤。年平均氣溫為 6.7～ 8.4^°C ，無霜期為 150～170d ，年平均降水量 600～ 800mm ，主要集中在7一8月，屬溫帶季風(fēng)氣候。

試驗材料高丹草品種為‘冀草二號’，是二茬再生草，達(dá)到 1.4m 進(jìn)行劉割，留茬高度為 15cm 。青貯添加劑分別為凝結(jié)芽孢桿菌（Bacilluscoagulans），活菌量為 2.0×10¹⁰ cfu·g^-1 ;地衣芽孢桿菌（ B .licheniformis），活菌量為 2.0×10¹⁰ cfu·g^-1 ;枯草芽孢桿菌 （B， subtilis），活菌量為 2.0×10¹⁰ cfu·g^-1 ，選自威凱海思生物工程有限公司。

1.2 試驗設(shè)計

試驗采用雙因素設(shè)計，第一個因素為溫度，采用 15^°C 和 25^°C 。第二個因素為不同的芽孢桿菌，分別為對照組（CK），凝結(jié)芽孢桿菌（BC， 1.0×10⁵ cfu·g^-1） ，地衣芽孢桿菌（ .BL，1.0×10⁵ cfu·g^-1 ），枯草芽孢桿菌 （BS，1.0×10⁵ cfu·g^-1. ，共8個處理，每個處理設(shè)置4次重復(fù)。將劉割后的高丹草后用植物粉碎機(jī)（ZTO.8，東港新農(nóng)機(jī)械有限公司）粉碎至 1～ 2cm ，迅速帶回實驗室將配置好的菌液分別均勻地噴灑于青貯飼料中，菌液用量為 ，對照組使用等量的無菌水。隨機(jī)稱取 250g 高丹草裝入青貯袋，真空密封。用聚乙烯袋 （20cm×30cm ）進(jìn)行青貯，置于 15^°C 和 25^°C 生理生化培養(yǎng)箱中，青貯80d后開袋取樣測定。

1.3 指標(biāo)測定及方法

取高丹草青貯飼料 10g ，加入 90mL 蒸餾水，混合均勻在 4^°C 下保存 ^18h ，用 0.22μm 濾膜過濾取浸提液，用于測量發(fā)酵指標(biāo)。使用 pH 計（PB-lO，SartoriusGroup）測定浸提液的pH值；乳酸（Lacticacid，LA），乙酸（Aceticacid，AA）及丁酸（Butyricacid，BA）含量采用高效液相色譜法測定（Watersl525，WatersCorporation），配備色譜柱（H-HP5，蘇州賽分科技股份有限公司）；2.5μmol?L^-1 硫酸流動相，流速 0.6mL?min^-1 ；柱溫 55^°C ；示差檢測器（Waters2414，WatersCorporation），檢測波長 210nm ;進(jìn)樣量 10μL^[4] 。采用苯酚-次氯酸鈉比色法測定高丹草青貯飼料氨態(tài)氮（Ammonianitrogen，AN）含量[17]。采用平板計數(shù)法，分別使用MRS瓊脂培養(yǎng)基（MRSagar）和結(jié)晶紫中性膽鹽瓊脂（Violet-RedBileAgar）培養(yǎng)基測定高丹草青貯飼料的乳酸菌和大腸桿菌的數(shù)量[18]

將高丹草青貯飼料樣品置于 105^°C 烘箱中烘 20min 后取出，置于 65^°C 烘箱中烘 48h 至恒重后，計算干物質(zhì)（Drymatter，DM）含量。采用凱氏定氮法測定粗蛋白（Crudeprotein，CP）含量[19]；依據(jù)范氏法采用纖維儀（A20Oi，ANKOM）測定中性洗滌纖維（Neutraldetergentfiber，NDF）和酸性洗滌纖維（Aciddetergentfiber，ADF）[2o]；蒽酮硫酸比色法測定可溶性碳水化合物（Watersolublecarbohydrate，WSC）含量用葡萄糖制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，加入 80% 乙醇，置于 80^°C 水浴中提取 30min ，冷卻過濾定容，在待測液中加入蒽酮硫酸，在 640nm 波長下測定吸光度，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算其所含WSC含量[20]。稱取 5g 干燥樣品，然后在 180r?min^-1 下振蕩 20min 并通過0.22μm 濾膜過濾，采用高效液相色譜法測定硝酸鹽與亞硝酸鹽的含量（Watersl525，WatersCorpora-tion）。配備色譜柱（NH2P-504E，ShimadzuCorporation）;流動相，磷酸鹽緩沖液;流速為 0.8mL?min^-1 柱溫 40^°C ；檢測器，紫外線檢測器（Waters2489，WatersCorporation）;波長 210nm ;進(jìn)樣體積為 10μL^[21] 車

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

數(shù)據(jù)通過Excel2019初步整理后，采用SPSS26.0軟件進(jìn)行雙因素方差分析，兩個因素互作時，用Duncan氏對各組進(jìn)行多重比較和獨立樣本T檢驗進(jìn)行比較， 為差異顯著。利用Origin2022軟件進(jìn)行繪圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 高丹草原料特性

高丹草青貯原料屬性如表1所示。原料高丹草的pH值為5.65，高丹草青貯前的含水量較高，達(dá)到82% 左右；WSC的含量為 11.78%DM ;CP含量為11. 95%DM ；NDF和ADF的含量分別為52.42%DM 和 19.24%DM 。硝酸鹽含量為2570.22mg?kg^-1DM ；乳酸菌數(shù)量低于5lgcfu g^-1 FM，且檢測到大腸桿菌數(shù)量為 M。

2.2貯藏溫度和添加劑對高丹草青貯飼料發(fā)酵品 質(zhì)的影響

由表2可知，貯藏溫度顯著影響 pH 、有機(jī)酸和AN的含量 （Plt;0.05） 。在 15^°C 條件下， pH 值顯著高于 25^°C ，LA和AA含量顯著低于 25^°C（Plt;0.05） 。芽孢桿菌添加劑顯著影響有機(jī)酸和AN的含量（ Plt; 0.05），貯藏溫度和添加劑對AA以及AN含量存在交互作用 （Plt;0.05） 。在 15^°C 條件下，BS處理的 pH 值顯著低于CK（ Plt;0.05） ，LA的含量顯著高于CK P lt;0.05） ；在 25^°C 條件下，BS處理LA含量高于CK，但無顯著性差異。在兩個貯藏溫度下，BC處理的AA含量均顯著高于（ ;貯藏溫度 25^°C 時，BL和BS處理的AA含量顯著高于 。在 25^°C 條件下，BS處理的AN含量顯著高于 。在高丹草青貯飼料中未檢測到丁酸的存在。貯藏溫度和添加劑并未對乳酸菌數(shù)量產(chǎn)生顯著性影響，但在15^°C 條件下，芽孢桿菌處理組與CK相比有一定的上升趨勢。在青貯飼料中未檢測到大腸桿菌。

2.3貯藏溫度和添加劑對高丹草青貯飼料營養(yǎng)成分的影響

由表3可知，貯藏溫度對WSC和NDF的含量有顯著影響（ Plt;0.05） 。在貯藏溫度為 15^°C 時，WSC含量顯著高于2 ，NDF的含量顯著低于 。芽孢桿菌添加劑顯著影響高丹草飼料中的WSC含量（ Plt; 0.05）。BL和BS處理的WSC含量顯著低于CK（ ，BC處理的WSC含量與CK差異不顯著。

2.4貯藏溫度和添加劑對高丹草青貯飼料硝酸鹽 含量的影響

如圖1（A）所示，貯藏溫度對硝酸鹽含量存在顯著影響，CK的硝酸鹽含量在貯藏溫度 15^°C 時顯著高于 25^°C（Plt;0.05） 。芽孢桿菌添加劑顯著影響硝酸鹽和亞硝酸鹽的含量 （Plt;0.05） 。在貯藏溫度15^°C 時，三種芽孢桿菌處理組的硝酸鹽含量均顯著低于 ，但在貯藏溫度 25^°C 時，硝酸鹽含量顯著高于CF ∴（Plt;0.05） 。圖1（B）所示，貯藏溫度 15^°C 時，BL處理的亞硝酸鹽含量顯著低于CK（Plt;0.05）

3 討論

3.1貯藏溫度和添加劑對高丹草青貯飼料發(fā)酵品 質(zhì)的影響

貯藏溫度是影響青貯發(fā)酵品質(zhì)的重要因素之一。研究表明，貯藏溫度通過影響乳酸菌的活性而改變pH值，在適宜溫度范圍內(nèi)，pH值隨溫度的升高呈現(xiàn)出明顯的下降趨勢，提高了青貯飼料發(fā)酵品質(zhì)[22-23]。本試驗也得出類似結(jié)論，這可能與 15^°C 低于乳酸菌發(fā)酵的適宜溫度，部分乳酸菌的生長受到限制有關(guān)。秦麗萍等[24]研究垂穗披堿草（ElymusnutansGriseb.）青貯發(fā)現(xiàn)，與 15^°C 處理相比， 25^°C 處理明顯增加了乳酸含量，本試驗得出的結(jié)論與其研究結(jié)果一致。由于溫度升高有利于乳酸菌活動，快速產(chǎn)酸，而在低溫條件下貯藏的高丹草乳酸含量降低。在 15^°C 下的乙酸含量低于 25^°C ，這可能是由于溫度對微生物菌群活動的影響。在一定溫度范圍內(nèi)AA含量隨溫度的上升而升高，這與張丙云等[25]研究結(jié)果一致。在 15^°C 的貯藏溫度下，AN含量顯著低于 25^°C ，Liu等[2也報道了相似的結(jié)果。青貯飼料中AN的積累受到植物蛋白酶的活性影響，植物蛋白酶在較高溫度時的水解活性更高，導(dǎo)致了青貯飼料里AN含量更高[27]。

本試驗中在 15^°C 條件下，BS處理的pH顯著低于CK，LA的含量顯著高于CK，Bai等1研究表明枯草芽孢桿菌能產(chǎn)生抗菌肽物質(zhì)，加速乳酸菌的活動，增加乳酸含量，改善青貯發(fā)酵，抑制不良細(xì)菌的生長。說明在高丹草青貯飼料添加枯草芽孢桿菌可促進(jìn)青貯過程中乳酸的產(chǎn)生從而降低 pH^[28] 。適量的AA，可以抑制酵母菌生長，提高有氧穩(wěn)定性[29]。在本試驗中乙酸含量增加，這一發(fā)現(xiàn)與Bai等[10]和Xu等[30]的研究結(jié)果一致，即芽孢桿菌作為添加劑有利于提高青貯飼料中AA含量。蛋白被多種厭氧微生物消耗代謝轉(zhuǎn)化成AN和胺類物質(zhì)，因此AN的含量間接反映出青貯飼料中蛋白質(zhì)的營養(yǎng)消耗[31]。朱佳文等[32]研究發(fā)現(xiàn)芽孢桿菌能降低AN的含量，在本試驗中，貯藏溫度 25^°C 的條件下，BS處理組的AN含量高于對照，但仍不足 5%TN ，分析可能與原料屬性的差異有關(guān)，此研究結(jié)果有待進(jìn)一步驗證。

青貯飼料中微生物的種類和數(shù)量直接影響青貯發(fā)酵品質(zhì)，其中乳酸菌是青貯發(fā)酵的關(guān)鍵微生物[32]。乳酸菌數(shù)量一般需達(dá) 5lg cfu·g^-1 以上才易保障青貯發(fā)酵質(zhì)量[34]。本研究中高丹草原料附著乳酸菌數(shù)量僅為 3.76lg cfu. g^-1 ，乳酸菌數(shù)量少，且大腸桿菌的數(shù)量較高 （5.37lg cfu·g^-1） ，可能會影響高丹草青貯發(fā)酵品質(zhì)。本試驗中添加芽孢桿菌對乳酸菌的數(shù)量無顯著影響，可能是在青貯后各組的乳酸菌數(shù)量已經(jīng)達(dá)到優(yōu)質(zhì)飼料的特征且整體的pH值較低，已經(jīng)處于一個較酸的環(huán)境，不適宜乳酸菌的增長[35]。青貯發(fā)酵后的pH值迅速下降，而大腸桿菌適宜生存環(huán)境 pH 值在 5.3～9.2 之間[3]，本試驗中未檢測到大腸桿菌。

3.2貯藏溫度和添加劑對高丹草青貯飼料營養(yǎng)成分的影響

青貯飼料在不同溫度下貯藏對DM含量無顯著性影響[3，本研究也得到類似結(jié)論。WSC作為青貯過程中微生物發(fā)酵的主要基質(zhì)，其含量對青貯品質(zhì)有著較大影響[38。高丹草原料的WSC含量較高（11. 78% DM），達(dá)到了制作優(yōu)質(zhì)青貯飼料并良好保存的標(biāo)準(zhǔn)[39]。本試驗中低溫條件抑制了微生物的活動，減少了WSC的消耗，因此 15^°C 條件下的WSC含量高于 25^°C 。呂竑建等4報道不同貯藏溫度對辣木（MoringaoleiferaLam.）發(fā)酵品質(zhì)的影響，可以得出NDF的含量隨溫度升高而增加。與本試驗結(jié)論相同。ADF的主要成分是木質(zhì)素和纖維素，很難在短期內(nèi)被微生物分解[25]。本研究中ADF含量未受到溫度的影響，李茂等[41]對不同溫度下王草[PennisetumpurpureumSchumacher ?×P. glaucum（Linnaeus）R.Brown]的發(fā)酵品質(zhì)的影響研究也得出類似結(jié)論。

玉米（ZeamaysL.）青貯飼料發(fā)酵過程中添加枯草芽孢桿菌能夠提高CP含量[42]，本試驗中添加芽孢桿菌對CP的含量無顯著影響，說明芽孢桿菌并不參與蛋白的降解。BC處理的WSC含量顯著高于其他芽孢桿菌處理，Wang等43對凝結(jié)芽孢桿菌處理下苜蓿（MedicagosatiuaL.）發(fā)酵特性的研究得出，凝結(jié)芽孢桿菌減少WSC的消耗，本試驗得出與其相同的結(jié)論，可能是因為BC起到抑制不良微生物生長的作用并減少了WSC的消耗。BL與BS處理下的WSC含量低于CK，這種現(xiàn)象可能是由于纖維素酶、半纖維素酶和淀粉酶的酶促作用，它們都能水解植物細(xì)胞壁中的碳水化合物，從而釋放出可溶糖用于發(fā)酵[44]。穆勝龍等[45]用枯草芽孢桿菌和布氏乳桿菌青貯甘蔗尾（SaccharumofficinarumL.）發(fā)現(xiàn)，枯草芽孢桿菌可以降低NDF和ADF的含量。朱佳文等[46]用復(fù)合芽孢桿菌對桑葉（MorusalbaL.）發(fā)酵品質(zhì)的研究表明，NDF和ADF含量均呈下降趨勢，說明枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌都具有降解纖維的作用。本研究中添加芽孢桿菌處理的NDF和ADF含量在 15^°C 下有下降趨勢，但無顯著差異，可能與原料和貯藏條件的差異有關(guān)。

3.3溫度和添加劑對高丹草青貯飼料硝酸鹽含量 的影響

青貯前原料高丹草的硝酸鹽含量為2570.22mg?kg^-1 DM，在 25^°C 下青貯過后的各個處理硝酸鹽的含量均低于原料值，這說明了在青貯過程中能夠降解部分的硝酸鹽，與韓立英等4在玉米青貯中發(fā)現(xiàn)的結(jié)果類似。研究表明，帕諾桿菌屬、假單胞菌屬和腸桿菌屬與高丹草的硝酸鹽含量呈負(fù)相關(guān)[21]。呂文龍等[48]的研究表明，在青貯發(fā)酵的過程中腸桿菌是降解硝酸鹽的主要微生物。根據(jù)潘港49的報道，在一定的溫度范圍內(nèi)硝酸鹽含量隨溫度的升高而降低，在本試驗中在 15^°C 下硝酸鹽含量高于 25^°C ，與其結(jié)果一致。可能是由于腸桿菌在25^°C 活性更好，促進(jìn)硝酸鹽的降解。Zhao等[13]的研究發(fā)現(xiàn)添加枯草芽孢桿菌能夠促進(jìn)硝酸鹽的降解，本試驗在低溫貯藏條件下，三種芽孢桿菌添加劑顯著降低了硝酸鹽的含量?？赡苁怯捎谘挎邨U菌的抗逆性強(qiáng)，在低溫下也能發(fā)揮效果。本試驗中在25^°C 下添加芽孢桿菌并未起到降解硝酸鹽的作用，可能是在 25^°C 下菌群比較活躍，在發(fā)酵過程中與硝酸鹽降解有關(guān)的細(xì)菌和芽孢桿菌存在競爭關(guān)系，但還有待進(jìn)一步的研究證實。

4結(jié)論

貯藏溫度和芽孢桿菌添加劑顯著影響了高丹草青貯飼料的發(fā)酵品質(zhì)和硝酸鹽降解程度。與15^°C 相比，在貯藏溫度為 25^°C 時，顯著提高了高丹草青貯飼料的發(fā)酵品質(zhì)，促進(jìn)了硝酸鹽的降解。在15^°C 下，3種芽孢桿菌添加劑均顯著降低了高丹草青貯飼料的硝酸鹽含量，BS處理還顯著提高了發(fā)酵品質(zhì)。綜上，在 25^°C 下高丹草青貯飼料具有更好的發(fā)酵品質(zhì)，低溫下不利于高丹草的發(fā)酵；添加枯草芽孢桿菌可以改善高丹草在低溫條件下的青貯發(fā)酵品質(zhì)以及促進(jìn)硝酸鹽的降解。

參考文獻(xiàn)

[1］武瑞鑫，石霞，賈文娟，等．華北平原區(qū)飼用小黑麥與褐色中脈高丹草復(fù)種模式研究[J].草地學(xué)報，2023，31（5）：1571-1577

[2]付薇，陳偉，周麗，等．植物乳桿菌和短乳桿菌復(fù)合添加對高丹草青貯效果的影響[J].草地學(xué)報，2022，30（3）：758-763

[3]渠暉，陳俊峰，程亮，等．施氮水平對甜高粱硝酸鹽含量和氮素利用特性的影響[J].草業(yè)學(xué)報，2016，25（7）：168-176

[4]白春生，佟明昊，趙萌萌，等．施氮量和留茬高度對高丹草青貯發(fā)酵品質(zhì)及飼用價值的影響[J].草地學(xué)報，2020，28（5）：1421-1426

[5］劉家杏.甜高梁中硝酸鹽與亞硝酸鹽含量及降低技術(shù)研究[D].廣州：華南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2018：1-2

[6]KEMPA，GEURINKJH，HAALSTRART，etal.Nitratepoisoning in cattle.2 changes in nitrate in rumen fluid and met-hemoglobin formation in blood after high nitrate intake[J].NetherlandsJournalofAgricultural Science，1977，25：51-62

[7]劉榮，張志剛，黃凱，等．寒旱地區(qū)高丹草種植與利用研究[J]．養(yǎng)殖與飼料，2024，23（3）：32-36

［8］魏曉強(qiáng)，孫雪梅，張海旺，等．高寒地區(qū)菊芋青貯物料耐低溫乳酸菌的篩選與鑒定[J].草業(yè)科學(xué)，2024，41（2）：480-490

[9]孫志強(qiáng)，吳哲，王炳，等，不同品種和乳酸菌添加劑對全株玉米青貯品質(zhì)和有氧穩(wěn)定性的影響研究[J].中國草地學(xué)報，2019，41（1）：83-88

[10]BAI J， XU D M， XIE D M， et al. Efects of antibacterial pep-tide-producing Bacillus subtilis and Lactobacillus buchneri onfermentation，aerobic stability，andmicrobial community ofalfalfa silage[J].Bioresource Technology，202O，315：123881

[11]ZHUYC，XIONGHM，WENZY，etal.EffectofdifferentconcentrationsofLactobacillusplantarumand Bacillus licheni-formis on silage quality，in vitro fermentation and microbialcommunity of hybrid pennisetum[J].Animals，2022，12（14），1752

[12]LIDX，NI K.K，ZHANG YC，et al. Influence of lactic acidbacteria，cellulase，cellulase-producing Bacillus pumilus andtheircombinationsonalfalfa silage quality[J].Journal of Inte-grative Agriculture，2018，17（12）：2768-2782

[13] ZHAO M R，ZHANG H Y，PAN G，et al. Efect of exog-enous microorganisms on the fermentation quality，nitrate deg-radation and bacterial community of sorghum-sudangrass silage[J].Frontiers inMicrobiology，2022，13：1052837

[14］薩初拉，蘇少鋒，吳青海，等．微生物青貯添加劑研究進(jìn)展[J].畜牧與飼料科學(xué)，2020，41（1）：48-55

[15]何榮彥，陳崢，于世浩．生物添加劑在青貯飼料中的應(yīng)用[J].養(yǎng)殖與飼料，2023，22（12）：34-38

[16］余岳，王春維，祝愛俠，等．一株凝結(jié)芽孢桿菌芽孢抗逆性研究及其產(chǎn)孢條件優(yōu)化[J].飼料工業(yè)，2013，34（7）：43-47

[17］黃文明，陳紅躍，殷麗，等．樣品前處理方法對全株玉米青貯pH和氨態(tài)氮測定值的影響[J].中國畜牧雜志，2019，55（2）：90-93

[18]TANGG，XUL，WANG XY，et al. Effects of Leaf Mor-phological and Chemical Properties on the Population Sizes ofEpiphytes[J].Microbial Ecology，2023，85（1）：157-167

[19］韓紫燕，王忠艷，劉亞楠，等．不同添加劑對玉米秸稈青貯料pH及粗蛋白質(zhì)含量的影響[J].飼料博覽，2019，（7）：22-25

[20]孫娟娟，阿拉木斯，白春生．青貯飼料質(zhì)量檢測實用手冊[M].北京：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)技術(shù)出版社2018：16-30，40-43

[21]BAI C，PAN G，LENG R， et al. Effect of ensiling density andstorage temperature on fermentation quality，bacterial commu-nity，and nitrate concentration of sorghum-sudangrass silage[J].Frontiers in Microbiology，2022，13：828320

[22]姜伯玲，王曙陽，陳積紅，等．發(fā)酵溫度對復(fù)合微生物菌劑青貯飼料品質(zhì)的影響[J]：中國草食動物科學(xué)，2016，36（2）：29-32

[23］田瑞霞，安淵，王光文，等．紫花苜蓿青貯過程中pH值和營養(yǎng)物質(zhì)變化規(guī)律[J].草業(yè)學(xué)報，2005，14（3）：82-86

[24]秦麗萍，柯文燦，丁武蓉，等．溫度對垂穗披堿草青貯品質(zhì)的影響[J].草業(yè)科學(xué)，2013，30（9）：1433-1438

[25］張丙云，丁聞浩，孫亞楠，等．不同溫度下添加植物乳桿菌對花椰菜尾菜青貯質(zhì)量的影響[J].應(yīng)用基礎(chǔ)與工程科學(xué)學(xué)報，2023，31（3）：635-649

[26]LIUQ H，SHAO T，BAI YF.The effect of fibrolyticenzyme，Lactobacillus plantarum and two food antioxidants onthefermentation quality，alpha-tocopherol and beta-carotene ofhigh moisture napier grass silage ensiled at diffrent tempera-tures[J].Animal Feed Science and Technology，2O16，219：117-126

[27]HAO JX， WANG H. Volatile fatt acids productions by meso-philicandthermophilicsludgefermentation：Biologicalresponses to fermentation temperature[J].Bioresource Tech-nology，2015，175：367-373

［28］韓雪林，張磊，張娟，等．枯草芽孢桿菌在青貯飼料中的應(yīng)用[J].家畜生態(tài)學(xué)報，2023，44（11）：81-86

[29］李君風(fēng)，孫肖慧，原現(xiàn)軍，等．添加乙酸對西藏燕麥和紫花苜?；旌锨噘A發(fā)酵品質(zhì)和有氧穩(wěn)定性的影響[J].草業(yè)學(xué)報，2014，23（5）：271-278

[30] XU Z， ZHANG S， ZHANG R，et al. The changes in domi-nant lactic acid bacteria and their metabolites during corn stoverensiling[J]．Journal of Applied Microbiology，2018，125（3）：675-685

[31]SONG C S，LI JW，XING JX，et al. Effects of molassesinteracting with formic acid on the fermentation characteristics，proteolysis and microbial community of seed-used pumpkinleavessilage[J].Journal of cleanerproduction，2O22，380：135186

[32］朱佳文，李峪鵬，許禎瑩，等．添加枯草芽孢桿菌對桑青貯發(fā)酵品質(zhì)的研究[J].中國飼料，2020，（3）：82-86

[33］李寶明，楊織瑞.乳酸菌添加劑對青貯飼料中微生物菌群的影響[J].畜牧獸醫(yī)雜志，2016，35（1）：13-17

[34］許冬梅，張萍，柯文燦，等．青貯微生物及其對青貯飼料發(fā)酵品質(zhì)影響的研究進(jìn)展[J].草地學(xué)報，2017，25（3）：460-465

[35]陳梓琦，汪彩云，李紫寧，等．乳酸菌的生長特性及其功能性質(zhì)與應(yīng)用綜述[J].農(nóng)產(chǎn)品加工，2020，（12）：80-83

[36」閆威明，陳雅坤，楊鵬標(biāo)，等.青貯飼料質(zhì)量評定方法研究進(jìn)展[J].中國畜牧獸醫(yī)，2024，51（1）：135-144

[37]李苗苗，靳思玉，王立超，等.不同溫度下添加乳酸菌對油莎草青貯品質(zhì)及體外干物質(zhì)消失率的影響[J」.動物營養(yǎng)學(xué)報，2020，32（2）：827-835

[38］張潔，顧啟超，鄒承武，等，青貯時間對不同水溶性碳水化合物含量甘蔗尾青貯品質(zhì)的影響[J].動物營養(yǎng)學(xué)報，2022，34（11）：7291-7306

[39］張慶.飼草青貯用乳酸菌的篩選及作用機(jī)理[D].北京：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)，2016：56-57

[40］呂竑建，郭香，陳德奎，等．植物乳酸菌和貯藏溫度對辣木葉青貯品質(zhì)的影響[J].草業(yè)學(xué)報，2021，30（3）：121-128

[41」季茂，字學(xué)娟，白昌軍，等．不同貯藏溫度對王草青貯發(fā)酵品質(zhì)的影響[J].中國畜牧獸醫(yī)，2014，41（10）：91-94

[42]SHIC，ZHANGY，YINY，etal.Amino acid and phosphorusdigestibility of fermented corn-soybean meal mixed feedwithBacillus subtilisand Enterococcus faecium fed to pigs[J].JournalofAnimalScience，2017，95（9）：3996-4004

[43]WANGY，KEW，LUQ，etal.Effects ofBacillus coagulansandLactobacillusplantarumontheFermentation Characteris-tics，Microbial Community，and Functional Shifts duringAlfalfaSilageFermentation[J].Animals，2O23，13（5），932

[44]BONALDIDS，CARVALHOBF，VILACLDS，etal.Effects of Bacillus subtilis and its metabolites on corn silagequality[J].Letters inAppliedMicrobiology，2O2l，73（1）：46-53

[45]穆勝龍，楊冉冉，周波，等．植物乳桿菌和布氏乳桿菌對甘蔗尾青貯品質(zhì)的影響[J].中國畜牧獸醫(yī)，2018，45（5）：1226-1233

[46]朱佳文，邱時秀，李峪鵬，等．復(fù)合芽孢桿菌對桑葉發(fā)酵品質(zhì)的影響[J].中國飼料，2021（3）：122-125

[47］韓立英，玉柱.施氮肥對全株玉米青貯飼料硝酸鹽含量的影響[J].中國飼料，2010（20）：37-39

[48］呂文龍，刁其玉，閆貴龍．硝酸鹽在青貯飼料發(fā)酵過程中的調(diào)控作用[J].中國飼料，2009，（23）：38-41

[49］潘港.溫度和添加劑對青貯硝酸鹽降解及其微生物群落特征的影響[D].沈陽：沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)，2022：58-61

（責(zé)任編輯付宸）