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    抗蟲轉(zhuǎn)基因玉米對(duì)草地貪夜蛾的室內(nèi)抗性水平鑒定

    2025-06-08 00:00:00熊梅宋君魏超李輝楊強(qiáng)代曉航劉文娟
    湖南農(nóng)業(yè)科學(xué) 2025年3期
    關(guān)鍵詞:抗蟲心葉花絲

    中圖分類號(hào):S435.132 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1006-060X(2025)03-0061-0

    引用格式:,等.抗蟲轉(zhuǎn)基因玉米對(duì)草地貪夜蛾的室內(nèi)抗性水平鑒定[J].湖南農(nóng)業(yè)科學(xué),2025(3):61-66

    DOI:10.16498/j.cnki.hnnykx.2025.003.011

    Evaluation ofResistance ofInsect-Resistant Transgenic Maize to Spodoptera frugiperda inLaboratory

    XIONG Mei, SONG Jun,WEI Chao,LI Hui, YANG Qiang,DAI Xiao-hang,LIU Wen-juan (InstituteofQualittandardndTestingTechnologyResearch,ichuanAcademyofAgricuturalSciences,Chengdu06

    Abstract:With the transgenic maize carrying C r y I A b and thatcarrying Vip3Aa20 asdonors, Cry1Ab and Vip3Aa20 were introduced intothemaizecutivarXianda90l'byrossbreeding.Theesistanceofinsect-resistantransgenicmaizetoSodopterafrgiperdwas evaluatedbyinvitrotisseboassayandthecontentofexogenousproteiswasdeteredbyee-linkedimmunosobntaay Theresultsofbioassayandproteidetectionconfirmedeachother.Theresultsshowedthattransgenic'Xianda90l'stablyexpreed exogenousproteinsCryAbandVip3Aa2OathighlevelsinalltssuesatallstagesandhadstronglethaleffectonS.frugiperda, demonstratingapromising commercial application prospect.

    Keywords:insect-resistanttrasgenicmaize;Spodopterafrugiperda;evaluationofresistanceinlaboratory;CryAb;ViAa

    隨著生物育種技術(shù)的迭代升級(jí),轉(zhuǎn)基因作物已在全球范圍內(nèi)迅速推廣并投入應(yīng)用。1996年轉(zhuǎn)基因作物商業(yè)化種植,2023年全球轉(zhuǎn)基因作物種植面積達(dá)2.063億 。從種植面積來看,轉(zhuǎn)基因玉米和大豆憑借抗蟲、耐除草劑及其復(fù)合性狀的技術(shù)優(yōu)勢(shì),持續(xù)占據(jù)主導(dǎo)地位[1]。我國(guó)于2021年正式啟動(dòng)轉(zhuǎn)基因玉米大豆產(chǎn)業(yè)化試點(diǎn);2023年將試點(diǎn)范圍擴(kuò)展至河北、內(nèi)蒙古、吉林、四川和云南5個(gè)省區(qū)的20個(gè)縣,同步在甘肅安排制種;至2024年,在原有試點(diǎn)省區(qū)基礎(chǔ)上,新增甘肅、廣西和遼寧3省區(qū),形成覆蓋8省區(qū)的示范種植網(wǎng)絡(luò)。2023年12月7日,我國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部發(fā)布第732號(hào)公告,發(fā)布首批37個(gè)轉(zhuǎn)基因玉米品種和14個(gè)轉(zhuǎn)基因大豆品種,經(jīng)第五屆國(guó)家農(nóng)作物品種審定委員會(huì)第四次會(huì)議審定通過。為落實(shí)2024年中央一號(hào)文件“推動(dòng)生物育種產(chǎn)業(yè)化擴(kuò)面提速”的要求,2024年10月8日農(nóng)業(yè)農(nóng)村部第830號(hào)公告,再度批準(zhǔn)27個(gè)轉(zhuǎn)基因玉米品種和3個(gè)轉(zhuǎn)基因大豆品種(第五屆審定委員會(huì)第六次會(huì)議通過),轉(zhuǎn)基因作物在我國(guó)的發(fā)展勢(shì)不可擋。當(dāng)前我國(guó)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)業(yè)仍處于示范階段,在審慎推進(jìn)示范種植的同時(shí)有序擴(kuò)大產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用范圍。

    草地貪夜蛾(Spodopterafrugiperda)屬于鱗翅目夜蛾科灰翅夜蛾屬,又稱秋粘蟲,是一種雜食性昆蟲,取食范圍廣,可取食46科202種作物,包括玉米、水稻、小麥、高梁、大豆、棉花、花生、煙草、甘蔗和甜菜等[-4]。2019 年1月,草地貪夜蛾從緬甸經(jīng)云南入侵我國(guó),并在國(guó)內(nèi)迅速傳播擴(kuò)散[2-3]。截至2023年,僅黑龍江、吉林、遼寧、新疆和青海5省區(qū)未監(jiān)測(cè)到草地貪夜蛾蹤跡[5]。草地貪夜蛾具有極強(qiáng)的遷飛能力和適應(yīng)性,持續(xù)威脅玉米等主糧作物,造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失,甚至威脅糧食安全[3]。我國(guó)現(xiàn)存草地貪夜蛾以危害玉米的“玉米型”為主,但基因組測(cè)序顯示其攜帶水稻適應(yīng)性基因標(biāo)記,存在向“水稻型”演變的潛在風(fēng)險(xiǎn)[5-6]。

    利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育抗蟲新品種是一種防治草地貪夜蛾的重要方法。目前全球主要通過種植轉(zhuǎn) C r y 基因和Vp基因的玉米來防治草地貪夜蛾,但在大規(guī)模持續(xù)種植的選擇壓力下,草地貪夜蛾很快演化出對(duì)Bt基因的抗性[]。在美國(guó)發(fā)現(xiàn)了抗CrylA.105、CrylF的草地貪夜蛾品系;在波多黎各發(fā)現(xiàn)了抗CrylAb、Cry1Ac和CrylF的草地貪夜蛾品系;在巴西發(fā)現(xiàn)了抗CrylAa、CrylA.105、CrylAb、CrylAc、Cry2Ab2和Cry1F的草地貪夜蛾品系;在阿根廷發(fā)現(xiàn)了抗CrylA.105、Cry2Ab2和CrylF的草地貪夜蛾品系[8-17]。Bermardi等[18]在巴西草地貪夜蛾種群中,檢測(cè)到了Vip3Aa20的抗性等位基因,雖然這個(gè)等位基因在巴西草地貪夜蛾種群中的發(fā)生頻率非常低,但依然有演化出抗性的風(fēng)險(xiǎn)。入侵我國(guó)的草地貪夜蛾對(duì)Cry蛋白不敏感,對(duì)Vip蛋白敏感。在我國(guó)通過品種審定的64個(gè)轉(zhuǎn)基因玉米品種中,有33個(gè)品種的轉(zhuǎn)化體為DBN9936,12個(gè)品種的轉(zhuǎn)化體為瑞豐125,12個(gè)品種的轉(zhuǎn)化體為ND207,3個(gè)品種的轉(zhuǎn)化體為DBN3601T,2個(gè)品種的轉(zhuǎn)化體為 B t l1 × GA21,1個(gè)品種的轉(zhuǎn)化體為DBN9858,1個(gè)品種的轉(zhuǎn)化體為 B t 1 1 × M I R 1 6 2 × G A2 1 。這些轉(zhuǎn)化體轉(zhuǎn)入的均是抗鱗翅目昆蟲/耐除草劑基因,大多只轉(zhuǎn)入了 C r y 基因,只有2個(gè)轉(zhuǎn)化體轉(zhuǎn)入了 基因。轉(zhuǎn)基因玉米能否穩(wěn)定高劑量的表達(dá)外源蛋白是防治靶標(biāo)害蟲的關(guān)鍵,同時(shí)高劑量/庇護(hù)所策略也是應(yīng)對(duì)和延緩靶標(biāo)害蟲抗性演化的重要措施[14]。當(dāng)前,隨著草地貪夜蛾對(duì)多種抗蟲蛋白抗性的擴(kuò)散,迫切需要科學(xué)、準(zhǔn)確、合理地評(píng)價(jià)抗蟲轉(zhuǎn)基因玉米對(duì)草地貪夜蛾的抗性水平,以期為抗蟲品種的選育提供參考。

    1材料與方法

    1.1 試驗(yàn)材料

    試驗(yàn)材料包括轉(zhuǎn) C r y I A b 和Vip3Aa20基因玉米先達(dá)901(簡(jiǎn)稱轉(zhuǎn)基因玉米先達(dá)901),對(duì)應(yīng)的非轉(zhuǎn)基因?qū)φ沼衩?,均由先正達(dá)生物科技(中國(guó))有限公司提供;感蟲對(duì)照(中玉335),由仲衍種業(yè)股份有限公司提供。

    1.2 試驗(yàn)方法

    1.2.1樣 種植采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì),3次重復(fù),小區(qū)面積為 ),行距 6 0 c m ,株距2 5 c m 。土壤水肥雜草管理與常規(guī)栽培管理相同,全生育期不噴施殺蟲劑。

    1.2.2室內(nèi)生物測(cè)定(1)試驗(yàn)蟲源。草地貪夜蛾卵由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院油料作物研究所(武漢)提供。草地貪夜蛾卵放置在 、光周期 相對(duì)濕度 70 %~8 0 % 的培養(yǎng)箱內(nèi)孵化,卵孵化出的初孵幼蟲(孵化后不超過 2 4 h 的幼蟲)用于生物測(cè)定試驗(yàn)。

    (2)樣品采集。心葉期(小喇叭口期),即玉米植株發(fā)育至8\~10葉,采集幼嫩心葉帶回室內(nèi);吐絲期,采集新抽絲未授粉的整顆雌穗帶回室內(nèi),取花絲試驗(yàn);灌漿期,采集整顆雌穗帶回室內(nèi),取籽粒試驗(yàn)。采用5點(diǎn)取樣法,每點(diǎn)選取4株長(zhǎng)勢(shì)相同的玉米植株,在不同時(shí)期采集相應(yīng)的玉米樣品

    (3)生物測(cè)定。心葉抗性測(cè)定時(shí),用濕毛巾輕輕擦拭幼嫩心葉表面的污濁物,然后將其放人養(yǎng)蟲盒內(nèi)。每個(gè)養(yǎng)蟲盒放入1片心葉,接入5頭草地貪夜蛾初孵幼蟲,1盒為1個(gè)重復(fù),每個(gè)生物學(xué)平行重復(fù)20次。每天觀察葉片情況,如有發(fā)霉或者干枯的則需更換相同來源的新鮮葉片組織?;ńz抗性測(cè)定時(shí),剝開玉米雌穗,輕取花絲(花絲不宜過多)放入養(yǎng)蟲盒內(nèi),每盒接入5頭草地貪夜蛾初孵幼蟲,1盒為1個(gè)重復(fù),每個(gè)平行重復(fù)20次。籽??剐詼y(cè)定時(shí),用12孔板養(yǎng)蟲盒,每孔放入1粒籽粒(籽粒不能有損傷,否則易發(fā)霉),接入1頭草地貪夜蛾初孵幼蟲,1孔為1個(gè)重復(fù),每個(gè)平行重復(fù)100次。每天觀察籽粒情況,如有發(fā)霉或者干癟的則需更換相同來源的新鮮組織。草地貪夜蛾均放置在溫度 、光周期 C L: D )、相對(duì)濕度 70 %~8 0 % 的人工氣候環(huán)境中培養(yǎng)。

    (4)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)。心葉、花絲和籽粒均在第6天記錄幼蟲存活數(shù),并按照公式(1)計(jì)算幼蟲死亡率或者校正死亡率。用SPSS20.0對(duì)死亡率進(jìn)行方差分析和LSD多重比較。

    式中, x 為死亡率; n 為存活數(shù),頭; N 為接蟲數(shù),頭。

    草地貪夜蛾對(duì)轉(zhuǎn)基因玉米的抗性評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)參照轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品環(huán)境安全檢測(cè)(農(nóng)業(yè)部1943號(hào)公告-3-2013),結(jié)合實(shí)驗(yàn)室多年對(duì)草地貪夜蛾生物測(cè)定數(shù)據(jù),制定了草地貪夜蛾對(duì)轉(zhuǎn)基因玉米的抗性評(píng)定標(biāo)準(zhǔn),按幼蟲死亡率分5級(jí),分別為高抗( y ≥ 9 0 % )抗( 9 0 % gt; y ? 8 0 % )、中抗( 8 0 % gt; y ≥ 5 5 % )感( 5 5 % gt; y ? 4 0 % )和高感( 4 0 % gt; y )。1.2.3 外源蛋白表達(dá)量檢測(cè)小喇叭口期(8\~10葉期)采集心葉,吐絲期采集花絲,灌漿期采集籽粒,方法同室內(nèi)生測(cè)。新鮮玉米葉片、花絲和籽粒樣品用液氮冷凍研磨儀(SPEX6875)研磨成粉末,稱取

    0 . 1 g (精確到 )試樣粉末于 的離心管中,按質(zhì)量體積比 1 : 1 0 加入提取緩沖液,震蕩混勻后置于搖床中提取 1 0~1 5 m i n 。從搖床中取出樣品, 離心 5 m i n ,取上清液備用。

    選用上海佑隆生物科技有限公司的Cry1Ab/Ac酶聯(lián)免疫定量檢測(cè)試劑盒和Vip3A酶聯(lián)免疫定量檢測(cè)試劑盒,分別測(cè)定Cry1Ab蛋白和Vip3Aa20蛋白含量。按照試劑盒說明書檢測(cè)外源蛋白含量并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,用酶標(biāo)儀(TECANSPARK)在 波長(zhǎng)下讀取吸光度值。根據(jù)公式(2)計(jì)算試樣中的外源蛋白含量。

    ω = ( a + b × X ) × N

    式中, ω 為蛋白濃度( n g / g 鮮重); a 為截距;b 為斜率; X 為光密度值; N 為稀釋倍數(shù)。

    用SPSS20.0對(duì)蛋白含量進(jìn)行T-test檢驗(yàn),取顯著水平 P lt; 0 . 0 5 判斷差異是否顯著。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 室內(nèi)生物測(cè)定結(jié)果

    室內(nèi)生物測(cè)定結(jié)果顯示(表1),取食轉(zhuǎn)基因玉來先達(dá)901心葉的草地貪夜蛾幼蟲全部死亡,取食轉(zhuǎn)基因玉米先達(dá)901花絲和籽粒的幼蟲有個(gè)別存活,但死亡率均大于 9 5 % ,取食非轉(zhuǎn)基因?qū)φ蘸透邢x對(duì)照相應(yīng)部位的幼蟲死亡率均小于 40 % 。轉(zhuǎn)基因玉米先達(dá)901的心葉、花絲和籽粒對(duì)草地貪夜蛾的抗性等級(jí)均為高抗。轉(zhuǎn)因玉米先達(dá)901的幼蟲平均死亡率為 9 9 . 2 6 % ,非轉(zhuǎn)基因?qū)φ盏挠紫x平均死亡率為1 0 . 1 2 % ,感蟲對(duì)照的幼蟲平均死亡率為 1 3 . 0 9 % ,轉(zhuǎn)基因玉米先達(dá)901的幼蟲死亡率與非轉(zhuǎn)基因?qū)φ蘸透邢x對(duì)照的幼蟲死亡率均差異顯著。綜合心葉、花絲和籽粒的抗性表現(xiàn),轉(zhuǎn)基因玉米先達(dá)901對(duì)草地貪夜蛾的抗性等級(jí)評(píng)定為高抗。草地貪夜蛾取食對(duì)照玉米和轉(zhuǎn)基因玉米先達(dá)901不同部位后的抗性特征見圖1。

    2.2 Bt蛋白檢測(cè)結(jié)果

    試驗(yàn)研究了心葉期(8\~10葉)吐絲期(新抽絲未授粉)和灌漿期轉(zhuǎn)基因玉米先達(dá)901中外源抗蟲蛋白CrylAb和Vip3Aa20在心葉、花絲和籽粒中的表達(dá)量。由表2可知,研究結(jié)果表明心葉中CrylAb蛋白的表達(dá)量為( 1 5 7 6 5 . 6 5 ± 1 0 0 9 . 4 3 ) n g / g 鮮重,與非轉(zhuǎn)基因?qū)φ詹町愶@著;花絲中CrylAb蛋白的表達(dá)量為( 6 4 7 . 2 3 ± 2 4 . 9 5 ) n g / g 鮮重,與非轉(zhuǎn)基因?qū)φ詹町愶@著;期籽粒中Cry1Ab蛋白的表達(dá)量為( ) n g / g 鮮重,與非轉(zhuǎn)基因?qū)φ詹町愶@著。玉米外源抗蟲蛋白Cry1Ab在心葉中的表達(dá)量最高,在籽粒中的表達(dá)量其次,在花絲中的表達(dá)量最低。心葉中 V i p 3 A a 2 0 蛋白的表達(dá)量為( 1 3 3 2 4 . 1 7 ± 3809.89) 鮮重,與非轉(zhuǎn)基因?qū)φ詹町愶@著;花絲中 V i p3 A a2 0 蛋白的表達(dá)量為( 1 0 1 0 8 . 9 8 ± 1 9 4 2 . 4 5 ) n g / g 鮮重,與非轉(zhuǎn)基因?qū)φ詹町愶@著;籽粒中 V i p3 A a2 0 蛋白的表達(dá)量為( 2 7 4 4 5 . 9 0 ± 2 0 0 2 . 8 1 ) n g / g 鮮重,與非轉(zhuǎn)基因?qū)φ詹町愶@著。玉米外源抗蟲蛋白 V i p3 A a2 0 在籽粒中的表達(dá)量最高、在心葉中的表達(dá)量其次,在花絲中的表達(dá)量最低。

    研究結(jié)果表明, C r y I A b 和Vip3Aa20在轉(zhuǎn)基因玉米先達(dá)901的心葉中均高劑量表達(dá),Vip3Aa20在花絲和籽粒中也高劑量表達(dá),但 C r y I A b 在花絲和籽粒中的表達(dá)量相對(duì)于其在心葉中的表達(dá)量而言明顯偏低。雖然 C r y I A b 在花絲和籽粒中的表達(dá)量偏低,但是Cry1Ab蛋白和Vip3Aa20蛋白有協(xié)同增效作用,轉(zhuǎn) C r y I A b 和Vip3Aa20基因玉米先達(dá)901依然能殺死幾乎所有的草地貪夜蛾個(gè)體,對(duì)草地貪夜蛾表現(xiàn)出高抗。蛋白檢測(cè)結(jié)果與生測(cè)結(jié)果相互印證。結(jié)合庇護(hù)所策略,轉(zhuǎn) C r y I A b 和Vip3Aa20基因玉米先達(dá)901將能有效應(yīng)對(duì)草地貪夜蛾的為害,具有較好的商業(yè)化應(yīng)用前景。

    在非轉(zhuǎn)基因?qū)φ沼衩椎男娜~期(8\~10葉)葉片、吐絲期花絲(新抽絲未授粉)中的均沒有檢測(cè)到外源抗蟲蛋白CrylAb和 V i p3 A a2 0 ,灌漿期籽粒中小于 的數(shù)值可能是由于基因漂移引起的,含量非常低,對(duì)草地貪夜蛾的存活幾乎沒有影響。

    3 討論與結(jié)論

    當(dāng)前的研究通常采用5級(jí)法、Williams9級(jí)法和Davis9級(jí)法來評(píng)價(jià)草地貪夜蛾對(duì)玉米植株的為害程度[19-21]。例如:Toepfer等[19]提出了葉片5級(jí)法和整體植株5級(jí)法來評(píng)價(jià)草地貪夜蛾對(duì)玉米植株的為害程度;黃建榮等[2分別評(píng)估了5級(jí)法(葉片5級(jí)法和整體植株5級(jí)法)與Williams9級(jí)法和Davis9級(jí)法評(píng)價(jià)草地貪夜蛾對(duì)玉米植株為害程度評(píng)價(jià)結(jié)果的相關(guān)性,結(jié)果表明5級(jí)法的評(píng)價(jià)結(jié)果與Williams9級(jí)法和Davis9級(jí)法的評(píng)價(jià)結(jié)果均存在極顯著的線性關(guān)系,但5級(jí)法操作性最佳;丁蝶等[22]制定了草地貪夜蛾對(duì)玉米為害的六級(jí)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。田間分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)可以為蟲情測(cè)報(bào)和害蟲防治提供依據(jù),但在抗蟲轉(zhuǎn)基因作物抗性水平評(píng)價(jià)方面的應(yīng)用有一定的局限性。因?yàn)榄h(huán)境因素不穩(wěn)定,例如惡劣天氣、天敵、非靶標(biāo)害蟲等均會(huì)干擾田間接蟲效果,從而影響轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米對(duì)靶標(biāo)害蟲的抗性評(píng)級(jí)。

    表1草地貪夜蛾室內(nèi)生測(cè)結(jié)果
    注:表中數(shù)據(jù)為平均值 ± 標(biāo)準(zhǔn)差,*表示各處理間在 5 % 水平上差異顯著,下同。
    圖1草地貪夜蛾取食對(duì)照玉米和轉(zhuǎn) 和Vip3Aa20基因玉米先達(dá)901后的抗性特征(A:心葉期;B:吐絲期;C:籽粒期)
    表2不同發(fā)育階段外源蛋白在轉(zhuǎn)基因玉米和非轉(zhuǎn)基因玉米各器官中的表達(dá)量

    室內(nèi)條件相對(duì)穩(wěn)定,可以為昆蟲創(chuàng)造理想的生存條件,干擾試驗(yàn)結(jié)果的因素相對(duì)少,從而可以建立相對(duì)客觀、全面、穩(wěn)定的評(píng)價(jià)體系。但試驗(yàn)材料的品質(zhì)會(huì)影響生物測(cè)定試驗(yàn)的效果。例如:損傷易引起試驗(yàn)材料發(fā)霉、腐爛,從而影響試驗(yàn)效果;濕度過高也易引起試驗(yàn)材料變質(zhì),濕度過低易引起試驗(yàn)材料干癟。因此,試驗(yàn)材料如何保鮮,也是生物測(cè)定試驗(yàn)需要解決的問題。試驗(yàn)中采用的心葉、花絲和籽粒都在最大程度上保證了試驗(yàn)材料的完整性,溫度和濕度均控制在合適的范圍內(nèi),第6天統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)時(shí),基本能保證試驗(yàn)材料的新鮮度。營(yíng)養(yǎng)期Vip3Aa蛋白對(duì)鱗翅目昆蟲具有高度的殺蟲活性,常和Cry蛋白一起應(yīng)用于轉(zhuǎn)基因作物中,用來治理靶標(biāo)害蟲對(duì)Cry蛋白的抗性或增加殺蟲圖譜數(shù)等[23],但這要求其基因在各時(shí)期各部位穩(wěn)定高劑量的表達(dá),才能達(dá)到治理靶標(biāo)害蟲的目的。外源抗蟲蛋白在不同時(shí)期不同部位的表達(dá)量差異較大[24-25],因此在評(píng)價(jià)玉米材料對(duì)草地貪夜蛾抗性時(shí),需要分時(shí)期分部位進(jìn)行評(píng)價(jià)。

    抗蟲轉(zhuǎn)基因作物中外源殺蟲蛋白的表達(dá)量對(duì)靶標(biāo)害蟲防治至關(guān)重要。研究抗蟲轉(zhuǎn)基因作物不同時(shí)期不同部位的外源蛋白表達(dá)量,一方面可以為抗蟲轉(zhuǎn)基因作物的商業(yè)化推廣應(yīng)用提供數(shù)據(jù)支撐,另一方面也可以與生物測(cè)定結(jié)果相互印證。李國(guó)平等[2]將Bt蛋白添加到飼料表面,生物測(cè)定結(jié)果表明,Vip3A對(duì)草地貪夜蛾的致死作用最強(qiáng),Cry1Ab對(duì)草地貪夜蛾的生長(zhǎng)發(fā)育抑制作用最強(qiáng)。張丹丹等[27]采用室內(nèi)生物測(cè)定方法研究抗蟲玉米對(duì)草地貪夜蛾的毒殺作用,結(jié)果表明Bt-CrylAb玉米和Bt-(CrylAb+Vip3Aa)玉米對(duì)草地貪夜蛾均有毒殺作用,1齡幼蟲的校正死亡率分別為 5 9 . 2 3 %~6 5 . 4 1 % 和 100 % 。目前,我國(guó)的抗蟲轉(zhuǎn)基因玉米大多是轉(zhuǎn) C r y 基因,少數(shù)轉(zhuǎn)入了 基因。只轉(zhuǎn)入了 C r y 基因的抗蟲轉(zhuǎn)基因玉米對(duì)草地貪夜蛾的防治效果不佳,同時(shí)轉(zhuǎn)入了C r y 基因和 基因的抗蟲轉(zhuǎn)基因玉米對(duì)草地貪夜蛾的防治效果也要依賴其在玉米各時(shí)期各部位是否穩(wěn)定高劑量表達(dá)。同時(shí),穩(wěn)定高劑量地表達(dá)外源殺蟲蛋白也有利于延緩靶標(biāo)害蟲抗性的產(chǎn)生。

    試驗(yàn)采用了生物測(cè)定的方法對(duì)轉(zhuǎn)基因玉米先達(dá)901在心葉期、吐絲期和灌漿期對(duì)草地貪夜蛾的抗性表現(xiàn)進(jìn)行了評(píng)價(jià),同時(shí),分析了外源殺蟲蛋白CrylAb和Vip3Aa在各時(shí)期各部位中的表達(dá)量,與生測(cè)結(jié)果互相印證。結(jié)果表明,轉(zhuǎn)基因玉米先達(dá)901對(duì)草地貪夜蛾的抗性高,具有較好的商業(yè)化應(yīng)用前景。同時(shí),本文的評(píng)價(jià)方法也可應(yīng)用于其他抗蟲轉(zhuǎn)基因玉米品種對(duì)抗草地貪夜蛾的抗性評(píng)價(jià)。

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    (責(zé)任編輯:肖彥資)

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