以魯米諾/過(guò)氧化氫作為報(bào)告體系的微通道電化學(xué)發(fā)光傳感器用于四環(huán)素的檢測(cè)

摘要 采用魯米諾/H2O2 作為微通道電化學(xué)發(fā)光（ECL）報(bào)告體系，構(gòu)建了一種微通道ECL 傳感器用于四環(huán)素（TC）的檢測(cè)。魯米諾/H2O2 ECL 體系較低的激發(fā)電位可以降低體系鉗位電壓的影響，從而提高微通道ECL 傳感器的檢測(cè)性能。修飾了四環(huán)素適配體（TC-aptamer）的微通道可特異性識(shí)別并捕獲TC， TC 帶有的正電荷導(dǎo)致微通道內(nèi)界面負(fù)電荷密度降低，使微通道的離子電流增加，導(dǎo)致體系ECL 信號(hào)增強(qiáng)。對(duì)電解質(zhì)濃度、TC-aptamer 修飾液濃度、TC 與TC-aptamer 的反應(yīng)時(shí)間等條件進(jìn)行了優(yōu)化。在最優(yōu)條件下，體系ECL信號(hào)變化值與TC 濃度在1.00～200 ng/mL 范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，檢出限為0.69 ng/mL。此傳感器具有良好的選擇性，并成功用于牛奶樣本中TC 的檢測(cè)。

關(guān)鍵詞 電化學(xué)發(fā)光；魯米諾；微通道；四環(huán)素；適配體

微通道電化學(xué)傳感技術(shù)具有操作簡(jiǎn)便、靈敏度高以及無(wú)需標(biāo)記等特點(diǎn)，近年來(lái)受到廣泛關(guān)注。Zhang 等[1]采用三磷酸腺苷（ATP）調(diào)控修飾了ATP 適配體的聚咪唑陽(yáng)離子功能化微米管的正電荷密度，使離子電流發(fā)生變化，實(shí)現(xiàn)了ATP 的高靈敏檢測(cè)。Chen 研究組[2]構(gòu)建了一種基于聚（乙二醇）二丙烯酸酯水凝膠填充的微孔傳感平臺(tái)，利用目標(biāo)物調(diào)控微孔的電荷密度，改變離子電流，實(shí)現(xiàn)了對(duì)不同目標(biāo)物的分析傳感。Zhang 等[3]利用pH 值調(diào)控聚咪唑刷修飾的微米管的正電荷密度，使微米管離子電流發(fā)生變化，從而實(shí)現(xiàn)了pH 值的測(cè)定。這些研究表明，可以通過(guò)改變微通道的孔徑、電荷密度等因素調(diào)控通過(guò)微通道的離子電流[1，4-5]。電化學(xué)發(fā)光（Electrochemluminescence， ECL）傳感技術(shù)具有靈敏度高、使用范圍廣和成本低等特點(diǎn)[6-8]。在本研究組前期的工作中，將ECL 檢測(cè)技術(shù)與微通道結(jié)合，通過(guò)調(diào)控微米管內(nèi)的電荷密度實(shí)現(xiàn)回路中離子電流強(qiáng)度的調(diào)控，構(gòu)建了一種基于微通道的ECL 傳感技術(shù)。該體系可以實(shí)現(xiàn)離子電流對(duì)ECL 信號(hào)的直接調(diào)控[9]；并且將ECL 傳感界面與目標(biāo)物反應(yīng)界面分離，降低了目標(biāo)物識(shí)別反應(yīng)對(duì)ECL 傳感界面的干擾，提高了傳感技術(shù)應(yīng)用的簡(jiǎn)便性和抗干擾能力[10-12]。但是，由于微通道ECL 傳感界面存在鉗位電壓（約0.8 V（vs Ag/AgCl）），而采用的Ru（phen）32+/TPrA ECL 發(fā)光體系的激發(fā)電位（約1.1 V（vs Ag/AgCl））偏高[9]，導(dǎo)致ECL 報(bào)告體系不是在其最佳電位下激發(fā)，降低了ECL 體系的發(fā)光效率和傳感器的靈敏度。因此，需要采用激發(fā)電位低于鉗位電壓的ECL 發(fā)光體系，以降低鉗位電壓對(duì)微通道ECL 檢測(cè)性能的影響[10-12]。魯米諾/H2O2 是一種常見(jiàn)的ECL 發(fā)光體系，其最佳激發(fā)電位約為0.50 V（vs Ag/AgCl）[13]，低于微通道的鉗位電壓。因此，可選擇魯米諾/H2O2 作為微通道ECL 的報(bào)告體系，降低鉗位電壓的影響，提高微通道ECL的檢測(cè)性能。

四環(huán)素（Tetracycline， TC）是疾病感染治療和動(dòng)物養(yǎng)殖中常用的抗生素。我國(guó)國(guó)標(biāo)規(guī)定牛奶等食品中TC 的殘留量不得超過(guò)100 ng/mL[14]。但是，由于TC 的濫用，日常生活中的動(dòng)物衍生食品和水源會(huì)存在TC 殘留，對(duì)人體健康和自然環(huán)境產(chǎn)生危害。因此，靈敏且準(zhǔn)確地檢測(cè)TC 對(duì)于保護(hù)人體健康和環(huán)境安全至關(guān)重要[14-16]。目前，已開(kāi)發(fā)了多種方法用于TC 的檢測(cè)，包括液相色譜-質(zhì)譜法（LC-MS）[17]、高效液相色譜法（HPLC）[18]、薄層色譜法（TLC）[19]、毛細(xì)管電泳法（CE）[20]和酶聯(lián)免疫吸附分析法（ELISA）[21]等，這些方法具有較高的靈敏度和準(zhǔn)確性，但也存在不足之處，如需要昂貴的實(shí)驗(yàn)儀器、樣品前處理過(guò)程復(fù)雜等。因此，設(shè)計(jì)一種低成本、簡(jiǎn)單、靈敏且高選擇性的傳感方法對(duì)TC 的測(cè)定具有重要意義[22-24]。

本研究以魯米諾/H2O2 為ECL 發(fā)光體系，構(gòu)建了一種基于微通道的ECL 傳感體系用于TC 的檢測(cè)。在微通道內(nèi)壁修飾TC 的適配體（TC-aptamer）， pH=8 時(shí)， TC 帶正電荷（pKa=9.1）[25]，適配體與TC 結(jié)合，帶正電荷的TC 會(huì)降低微通道內(nèi)壁的負(fù)電荷密度，使得微通道內(nèi)從尖端到底部的電滲流（EOF）降低，尖端離子濃度富集，微通道的電流增大，體系ECL 信號(hào)增大。魯米諾/H2O2 的ECL 激發(fā)電位較低[26]，可以降低鉗位電壓的影響，提高傳感器的檢測(cè)性能?；谏鲜霾呗裕緜鞲衅鲗?shí)現(xiàn)了對(duì)TC 的靈敏定量檢測(cè)。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

P-2000 CO2 激光拉制儀和B150-86-10 石英玻璃毛細(xì)管（美國(guó)Sutter 公司）；MF-900 光學(xué)顯微鏡（日本Narishige 公司）；CHI660D 電化學(xué)工作站（上海辰華儀器有限公司）；BPCL 超微弱發(fā)光分析儀（廣州微光科技有限公司）。

磷酸鹽緩沖液（PBS， pH 7.2）、三（羥甲基）氨基甲烷（Tris）、3-氨基丙基三乙氧基硅烷（APTES）、HCl、濃H2SO4（98%）、MgCl2·6H2O 和KCl 購(gòu)自上海麥克林生化科技有限公司；TC、土霉素（OTC）、金霉素（CTC）、卡那霉素（KAN）、谷胱甘肽（GSH）、魯米諾（Luminol）和H2O2（30%）購(gòu)自上海阿拉丁生化科技股份有限公司。TC-aptamer（堿基序列為5′-OHC-GTACGGAATTCGCTAGCCCCCCGGCAGGCCACGGCTTGGGTTGGTCCCACTGCGCGTGGATCCGAGCT-3′[23]）由上海生工生物工程股份有限公司合成并純化。其它試劑至少為分析純?cè)噭?；?shí)驗(yàn)用水為超純水（18.2 MΩ·cm）。

1.2 微通道的制備

將配備好的食人魚(yú)溶液（98% H2SO4/30% H2O2， 7∶3， V/V）倒入玻璃器皿中，將石英玻璃管完全浸泡在食人魚(yú)溶液中5 h，再用大量超純水清洗，得到潔凈的石英玻璃管。利用P-2000 CO2 激光拉制儀制備孔徑為3 μm 的錐形微通道。拉制完成后，使用光學(xué)顯微鏡檢查微通道孔徑，確?？讖降拇笮∫恢隆?/p>

1.3 TC-apatmer 的活化及微通道傳感界面的構(gòu)建

1.3.1 TC-apatmer 的活化

將TC-aptamer 粉末加入離心管中，以4000 r/min 離心3 min，加入PBS 緩沖溶液溶解得到1 μmol/L 的TC-aptamer 溶液，在95 ℃下活化5 min 后，自然降溫，備用。

1.3.2 傳感界面的構(gòu)建

在微通道中注入10% APTES，常溫下反應(yīng)3 h 后，用乙醇潤(rùn)洗微通道3 次，再用PBS 潤(rùn)洗3 次。在微通道內(nèi)注入1 μmol/L TC-aptamer 溶液反應(yīng)8 h 后，用PBS 潤(rùn)洗3 次，得到TC-aptamer 功能化的微通道。將不同濃度的TC 溶液注入TC-aptamer 功能化的微通道中，反應(yīng)60 min 后，清洗，即可用于電化學(xué)檢測(cè)。

1.4 電化學(xué)測(cè)試

采用循環(huán)伏安（CV）技術(shù)對(duì)微通道進(jìn)行I-V 曲線測(cè)試，對(duì)電極和參比電極均為自制的Ag/AgCl 電極，另一根Ag/AgCl 電極插入微通道中作為工作電極。通過(guò)觀察I-V 曲線變化，判斷微通道內(nèi)功能基團(tuán)的修飾情況。掃描速度為0.05 V/s，電位區(qū)間為?1.0～+1.0 V。采用三電極系統(tǒng)構(gòu)建基于微通道的ECL 檢測(cè)系統(tǒng)。在三電極系統(tǒng)中，玻碳電極（GCE）為工作電極，鉑絲（Pt）插入微通道中作為對(duì)電極，參比電極為Ag/AgCl 電極。將三電極置于5 mL 含100 mmol/L KCl 的10 mmol/L Tris-HCl 緩沖液（pH 8.0）中，加入2.5 μL 0.1%的H2O2 和2.5 μL 0.70 mg/mL 魯米諾試劑。使用方波伏安法（SWV）測(cè)量體系的ECL 信號(hào)。ECL 檢測(cè)參數(shù)：掃描速度為0.05 V/s，電位區(qū)間為0～0.8 V，光電倍增管電壓為?950 V。

1.5 實(shí)際樣品處理

牛奶購(gòu)于本地超市，用甲醇-乙腈混合液（1∶1， V/V）進(jìn)行預(yù)處理。將樣品和混合溶液加入離心管中進(jìn)行充分混合后， 10000 r/min 下離心5 min，收集上清液，過(guò)0.22 μm 濾膜以去除顆粒[27]。取3 份處理后的牛奶樣品各500 μL，分別加入5 μL 濃度為5.00、10.0 和15.0 mg/mL 的TC 標(biāo)準(zhǔn)溶液，使牛奶樣品中最終的TC 含量分別為50.0、100 和150 ng/mL。將加標(biāo)后的牛奶樣品注入TC-aptamer 功能化的微通道中反應(yīng)60 min 后，清洗微通道用于檢測(cè)。檢測(cè)步驟與1.4 節(jié)中電化學(xué)測(cè)試的步驟相同。

2 結(jié)果與討論

2.1 實(shí)驗(yàn)原理

圖1A 為所構(gòu)建的基于微通道的ECL 傳感器用于檢測(cè)TC 的原理示意圖。在TC-aptamer 功能化的微通道內(nèi)， TC-aptamer 上有帶大量負(fù)電荷的磷酸骨架，因此TC-aptamer 功能化微通道的內(nèi)表面帶負(fù)電荷。負(fù)電荷會(huì)吸引溶液中的陽(yáng)離子形成雙電層，在外電場(chǎng)下形成從尖端到底部的EOF，使得尖端處的離子虧空[9，12]，導(dǎo)致通過(guò)微通道的離子電流較小， ECL 信號(hào)低。TC-aptamer 可特異性識(shí)別并捕獲TC（圖1B），當(dāng)存在帶正電荷的目標(biāo)物TC 時(shí)， TC 與TC-aptamer 結(jié)合，微通道內(nèi)表面負(fù)電荷密度降低， EOF 降低，離子在尖端積累，使得離子電流增大， ECL 信號(hào)增大（圖1C）。微通道內(nèi)表面的負(fù)電荷密度隨著TC 濃度增大而降低。微通道尖端處的離子濃度越高，離子電流越大， ECL 信號(hào)也越強(qiáng)?；诖嗽恚瑯?gòu)建了基于TC-aptamer 功能化的微通道ECL 傳感器，用于TC 的檢測(cè)。

2.2 可行性分析

利用功能化微通道中離子傳輸?shù)奶匦员碚鞴δ芑鶊F(tuán)在微通道內(nèi)表面的修飾過(guò)程。如圖2A 所示，在裸露的微通道可觀察到線性I-V 曲線（曲線a），而氨基修飾的微通道的I-V 曲線偏離歐姆行為，并且整流比（RR，定義為?1 V 與+1 V 時(shí)對(duì)應(yīng)的電流絕對(duì)值的比值）非常?。≧R=0.02）。這是由于氨基帶有正電荷，導(dǎo)致微通道內(nèi)表面帶正電荷（曲線b）。利用氨基修飾的微通道與5′端修飾醛基的TC-aptamer 反應(yīng)可得到TC-aptamer 修飾的微通道。在TC-aptamer 修飾的微通道中同樣觀察到非線性的I-V 曲線，但其具有較高的RR 值。這是因?yàn)門(mén)C-aptamer 包含帶負(fù)電荷的磷酸骨架，使得微通道內(nèi)表面的荷電狀態(tài)由正電荷轉(zhuǎn)變?yōu)樨?fù)電荷（曲線c）。將TC-aptamer 修飾的微通道浸入TC 溶液中，對(duì)應(yīng)的RR 值降低（曲線d），這表明帶正電荷的TC 被TC-aptamer 修飾的微通道選擇性捕獲，導(dǎo)致微通道內(nèi)表面電荷密度下降。功能基團(tuán)修飾后微通道離子電流的變化說(shuō)明這些帶電的功能基團(tuán)被依次修飾在微通道的內(nèi)表面。

為了進(jìn)一步證明目標(biāo)物TC 可以調(diào)控微通道內(nèi)表面電荷密度的變化，采用功能化基團(tuán)修飾的二氧化硅微球（SMs）進(jìn)行Zeta 電勢(shì)（Zeta potential）測(cè)量（圖2B）。由于SMs 本身帶有的—OH 官能團(tuán)會(huì)電離，因而電勢(shì)為負(fù)值。由于氨基質(zhì)子化后帶有正電荷，氨基修飾的SMs（SMs/NH2）的Zeta 電勢(shì)為正值。修飾TC-aptamer 的SMs（SMs/TC-aptamer）電勢(shì)變?yōu)樨?fù)值且高于SMs 本身的電勢(shì)，表明TC-aptamer 成功修飾到SMs 上，導(dǎo)致SMs 由正電性變?yōu)樨?fù)電性。加入TC 孵育后， SMs/TC-aptamer/TC 的電勢(shì)仍為負(fù)值，但數(shù)值變小。這是因?yàn)門(mén)C 帶有正電，被SMs 上的TC-aptamer 捕獲后， SMs 的負(fù)電性減弱。上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)一步證明在功能基團(tuán)修飾過(guò)程中電荷密度會(huì)發(fā)生變化，并且可利用目標(biāo)物TC 調(diào)控微通道內(nèi)表面的電荷密度。

為了探究以魯米諾/H2O2 為報(bào)告體系的TC-aptamer 功能化微通道的ECL 特性，對(duì)TC 濃度和ECL 強(qiáng)度之間的關(guān)系進(jìn)行了考察。由圖2C 可見(jiàn)，魯米諾/H2O2 體系的氧化峰電位為0.46 V（vs Ag/AgCl），低于微通道的鉗位電壓（0.8 V（vs Ag/AgCl））[7]。這說(shuō)明在魯米諾/H2O2 的ECL 體系中，魯米諾可以在其最佳電位下激發(fā)， ECL 信號(hào)不受鉗位電壓的限制，不會(huì)影響傳感器的檢測(cè)性能。如圖2D 所示，當(dāng)適配體功能化的微通道未與TC 反應(yīng)時(shí)，體系ECL 信號(hào)較??；當(dāng)微通道中加入100 ng/mL TC 反應(yīng)后， ECL 信號(hào)強(qiáng)度明顯增大。TC 濃度變化可以引發(fā)ECL 信號(hào)的變化，說(shuō)明所構(gòu)建的傳感器可用于TC 的定量檢測(cè)。

2.3 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化

對(duì)微通道ECL 傳感器檢測(cè)時(shí)的實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行了優(yōu)化。KCl 濃度會(huì)影響魯米諾/H2O2 發(fā)光系統(tǒng)的發(fā)光效率。當(dāng)KCl 濃度較低時(shí)，隨著KCl 濃度增大，溶液的離子強(qiáng)度增大，將加速魯米諾和H2O2 在電極表面的電子轉(zhuǎn)移過(guò)程，促進(jìn)激發(fā)態(tài)魯米諾的生成，使得ECL 信號(hào)增強(qiáng)。隨著KCl 濃度升高， Cl?與活性氧物種反應(yīng)生成非發(fā)光副產(chǎn)物，從而使ECL 信號(hào)降低[28-29]。此外，隨著KCl 濃度增大， EOF 降低。如圖3A 所示，隨KCl 濃度增大， ECL 信號(hào)強(qiáng)度呈現(xiàn)先增大后減小的趨勢(shì)，并在100 mmol/L 時(shí)達(dá)到最大值。因此，選擇100 mmol/L 作為電解質(zhì)KCl 的最佳濃度。

TC-aptamer 磷酸骨架帶有大量負(fù)電荷，決定了微通道內(nèi)表面的電荷密度，并且影響離子電流和ECL信號(hào)。如圖3B 所示，隨著適配體濃度增大， ECL 信號(hào)呈現(xiàn)先逐漸減小后保持穩(wěn)定的趨勢(shì)，這是因?yàn)楫?dāng)修飾的TC-aptamer 濃度比較低時(shí)，修飾到微通道內(nèi)表面的TC-aptamer 數(shù)量較少，微通道內(nèi)表面電荷密度較低， EOF 較小，離子在尖端積累，離子電流大， ECL 信號(hào)高；隨著修飾的TC-aptamer 濃度增大，修飾到微通道內(nèi)表面的TC-aptamer 數(shù)量增多，微通道內(nèi)表面電荷密度增大， EOF 增強(qiáng)，微通道尖端的離子耗盡，離子電流變小， ECL 信號(hào)降低。當(dāng)TC-aptamer 濃度達(dá)到1 μmol/L 時(shí)， ECL 信號(hào)降到最小值，之后保持不變。因此，選擇TC-aptamer 的最佳濃度為1 μmol/L。

TC 帶正電荷，與TC-aptamer 特異性結(jié)合后會(huì)降低微通道內(nèi)表面的負(fù)電荷密度，從而對(duì)離子電流和ECL 信號(hào)強(qiáng)度產(chǎn)生影響。在一定時(shí)間范圍內(nèi)，反應(yīng)時(shí)間越長(zhǎng)， TC 和TC-aptamer 的反應(yīng)越完全，微通道內(nèi)表面的負(fù)電荷密度越低， ECL 信號(hào)越強(qiáng)。如圖3C 所示，隨著反應(yīng)時(shí)間延長(zhǎng)，體系的ECL 信號(hào)強(qiáng)度逐漸增大，在60 min 時(shí)達(dá)到最大值，隨后趨于穩(wěn)定。因此， TC 與TC-aptamer 的最佳反應(yīng)時(shí)間為60 min。

2.4 傳感器的分析性能

在TC-aptamer 修飾的微通道中注入不同濃度的TC 進(jìn)行反應(yīng)，考察TC 濃度與體系ECL 信號(hào)變化值（ΔECL， ECL 信號(hào)與背景信號(hào)的差值）的關(guān)系。與不同濃度TC 作用后的體系的ECL 響應(yīng)曲線如圖4A 所示，隨TC 濃度增加，體系ECL 信號(hào)逐漸增大，在1.00～200 ng/mL 濃度范圍內(nèi)，ΔECL 與TC 濃度呈良好的線性關(guān)系（圖4B），線性方程為ΔECL=82.9CTC+215.2（R2=0.9983），檢出限為0.69 ng/mL（S/N=3），可滿足牛奶等食品中TC 殘留量的檢測(cè)要求。與文獻(xiàn)報(bào)道的TC 檢測(cè)方法的性能相比（見(jiàn)表1），本傳感器的檢出限較低；同時(shí)，本傳感器使用微通道作為傳感界面，可以實(shí)現(xiàn)報(bào)告界面與傳感界面的分離，減少干擾。

選取4 種常見(jiàn)共存物（GSH、KAN、CTC 和OTC）作為干擾物，考察所構(gòu)建的微通道傳感器的選擇性，體系中干擾物質(zhì)的濃度是TC 濃度的10 倍。由圖5A 可知，干擾物質(zhì)引起的ΔECL 值較?。划?dāng)TC 存在時(shí)，ΔECL 較大，干擾物質(zhì)引起的ΔECL 值與之相比可以忽略。由此可見(jiàn)，所構(gòu)建的微通道ECL 傳感器具備良好的選擇性。此外，重現(xiàn)性也是傳感器的另一個(gè)重要指標(biāo)。分別采用50、100 和200 ng/mL 的TC溶液與TC-aptamer 修飾的微通道進(jìn)行反應(yīng)，每個(gè)濃度均進(jìn)行3 次平行檢測(cè)，結(jié)果見(jiàn)圖5B，各濃度下ΔECL值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）分別為5.90%、4.81%和3.09%，說(shuō)明本傳感器具有良好的重現(xiàn)性。

2.5 實(shí)際樣品分析

采用本方法對(duì)實(shí)際牛奶樣品中TC 的含量進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果見(jiàn)表2，加標(biāo)回收率為95.6%～105%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）lt;6.45%。上述結(jié)果表明， TC-aptamer 功能化的微通道ECL 傳感器可用于復(fù)雜樣品中TC 的檢測(cè)，在實(shí)際檢測(cè)方面具有較大的發(fā)展?jié)摿Α?/p>

3 結(jié)論

本研究以魯米諾/H2O2 為ECL 發(fā)光體系，構(gòu)建了一種基于適配體功能化微通道的ECL 傳感器用于檢測(cè)TC。采用魯米諾/H2O2 作為發(fā)光體系降低了微通道鉗位電壓的影響，提高了ECL 的發(fā)光效率，可實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)物TC 的超靈敏檢測(cè)。本傳感體系引入適配體提高了傳感器的選擇性，通過(guò)更換不同目標(biāo)物的適配體可以檢測(cè)不同的目標(biāo)物，具有良好的通用性和便利性。

References

[1] ZHANG K， HE X， LIU Y， YU P， FEI J， MAO L. Anal. Chem. ， 2017， 89（12）： 6794-6799.

[2] ZHANG S， SONG L， LIU B， ZHAO Y D， CHEN W. Anal. Chim. Acta， 2023， 1251： 341000.

[3] ZHANG K， WEI H， XIONG T， JIANG Y， MA W， WU F， YU P， MAO L. Chem. Sci. ， 2021， 12（21）： 7369-7376.

[4] WEI C， BARD A J， FELDBERG S W. Anal. Chem. ， 1997， 69（22）： 4627-4633.

[5] HE X， ZHANG K， LI T， JIANG Y， YU P， MAO L. J. Am. Chem. Soc. ， 2017， 139（4）： 1396-1399.

[6] GAO Ya-Fang， LU Li-Ping. Chin. J. Anal. Chem. ， 2022， 50（12）： 1852-1859.

高亞芳， 魯理平. 分析化學(xué)， 2022， 50（12）： 1852-1859.

[7] ADAMSON N S， THEAKSTONE A G， SOULSBY L C， DOEVEN E H， KERR E， HOGAN C F， FRANCIS P S， DENNANY L. Chem. Sci. ， 2021， 12（28）： 9770-9777.

[8] JIANG Hui， WANG Xue-Mei. Chin. J. Anal. Chem. ， 2017， 45（12）： 1776-1785.

姜暉， 王雪梅. 分析化學(xué)， 2017， 45（12）： 1776-1785.

[9] HUANG Y， LU Y， HUANG X， WANG J， QIU B， LUO F， LIN Z. Chem. Sci. ， 2021， 12（39）： 13151-13157.

[10] HUANG Y， LUO F， WANG J， WANG L， QIU B， LIN C， LIN Z. Anal. Chem. ， 2021， 93（51）： 17127-17133.

[11] HUANG Y， CAI H， LIN Y， LUO F， LIN C， WANG J， QIU B， LIN Z. Anal. Chem. ， 2024， 96（13）： 5251-5257.

[12] HUANG Y， LI W， ZHENG J， LUO F， QIU B， WANG J， LIN C， LIN Z. ACS Appl. Mater. Interfaces， 2022， 14（32）： 37222-37228.

[13] MA H， WANG Q， HUANG L， WANG Y， CHEN F， LIU F， MA Y. Anal. Chem. ， 2025， 97（1）： 594-601.

[14] GB/T 22990—2008. Determination of Oxytetracycline， Tetracycline， Chlortetracycline， Doxycycline Residues in Milk and Milk Powder—HPLC-UV Method. National Standards of the People′s Republic of China.

牛奶和奶粉中土霉素、四環(huán)素、金霉素、強(qiáng)力霉素殘留量的測(cè)定液相色譜-紫外檢測(cè)法. 中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn). GB/T 22990—2008.

[15] LI C， JI Y， SHI Y， XU X， BAO L， CUI M， TIAN Z， ZHAO Z. Appl. Surf. Sci. ， 2023， 640： 158442.

[16] ZHANG Y， CHEN Y， FU Y， YING C， FENG Y， HUANG Q， WANG C， PEI D S， WANG D. Sci. Rep. ， 2016， 6： 27959.

[17] PANG Y H， LV Z Y， SUN J C， YANG C， SHEN X F. Food Chem. ， 2021， 355： 129411.

[18] LI J， CHEN L， WANG X， JIN H， DING L， ZHANG K， ZHANG H. Talanta， 2008， 75（5）： 1245-1252.

[19] NAIDONG W， HUA S， ROETS E， HOOGMARTENS J. J. Pharm. Biomed. Anal. ， 2003， 33（1）： 85-93.

[20] KOWALSKI P. J. Pharm. Biomed. Anal. ， 2008， 47（3）： 487-493.

[21] AGA D S， GOLDFISH R， KULSHRESTHA P. Analyst， 2003， 128（6）： 658-662.

[22] GAO F， ZHAO Y， DAI X， XU W， ZHAN F， LIU Y， WANG Q. Food Chem. ， 2024， 430： 137041.

[23] TANG Y F， LIU P P， XU J， LI L L， YANG L W， LIU X Q， LIU S H， ZHOU Y M. Sens. Actuators， B， 2018， 258： 906-912.

[24] ALAWAD A， ISTAMBOULIé G， CALAS-BLANCHARD C， NOGUER T. Sens. Actuators， B， 2019， 288： 141-146.

[25] GAO C， LIU Z， CHEN J， YAN Z. Luminescence， 2013， 28（3）： 378-383.

[26] YUE L， LIU Y T. J. Phys. Chem. B， 2020， 124（35）： 7682-7693.

[27] WANG J， WANG S， ZHANG K， LIU F， DU Q. J. Mol. Struct. ， 2024， 1309： 138152.

[28] MARQUETTE C A， RAVAUD S， BLUM L J. Anal. Lett. ， 2000， 33（9）： 1779-1796.

[29] COLLAUDIN A B， BLUM L J. Photochem. Photobiol. ， 1997， 65（2）： 303-308.

[30] WANG Y L， SUN Y J， DAI H C， NI P J， JIANG S， LU W D， LI Z， LI Z. Sens. Actuators， B， 2016， 236： 621-626.

[31] LI X Y， LONG Q H， PAN Z J， MA X H， XIA C H， MAI X， LI N. Spectrochim. Acta， Part A， 2024， 320： 124610.

[32] ZHONG Z， WANG C， ZHAO F， ZENG B. Microchim. Acta， 2024， 191（6）： 344.

[33] CUI X P， LEI T T， ZHANG J， CHEN Z F， LUO H， CHEN H， HE Y， SONG G W. Spectrochim. Acta， Part A， 2022， 283：121727.

[34] ELAMIN M B. Polym. Adv. Technol. ， 2024， 35（8）： e6543.

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（No. 22374024）和福州大學(xué)化學(xué)學(xué)院化學(xué)拔尖人才創(chuàng)新訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目（No. HXBJ202404）資助。