絞股藍(lán)多糖對熱應(yīng)激小鼠卵巢氧化損傷的保護(hù)作用

摘要：為探究不同劑量絞股藍(lán)多糖（Gynostemma pentaphyllum polysaccharides，GPP）對熱應(yīng)激小鼠卵巢氧化損傷的保護(hù)作用，采用酶聯(lián)免疫吸附、免疫組化等研究方法，分別對空白對照組（Control）、熱應(yīng)激對照組（HS）、高劑量絞股藍(lán)多糖組（GPP-H）、中劑量絞股藍(lán)多糖組（GPP-M）、低劑量絞股藍(lán)多糖組（GPP-L）中小鼠的體重和卵巢指數(shù)，卵巢中各級卵泡數(shù)量、最大直徑及卵巢皮質(zhì)厚度，卵巢中各類生殖激素和雌激素β型受體（Estrogen receptor β，ERβ）的表達(dá)水平，血清中抗氧化能力以及卵巢顆粒細(xì)胞凋亡率測定分析。結(jié)果表明，與HS組相比，GPP各劑量組小鼠體重顯著升高（Plt;0.05）；GPP-H組原始卵泡數(shù)顯著升高（Plt;0.05），GPP-L、GPP-H組閉鎖卵泡數(shù)顯著減少（Plt;0.05），GPP各劑量組卵巢皮質(zhì)厚度、原始卵泡、次級卵泡和黃體最大直徑顯著升高（Plt;0.05）；GPP各劑量組GnRH、E2和P4含量均顯著升高（Plt;0.05），GPP-H組FSH含量顯著升高（Plt;0.05）；GPP各劑量組GSH-Px酶活力顯著升高（Plt;0.05），GPP-M組T-SOD酶活力顯著升高（Plt;0.05），GPP各劑量組MDA含量顯著降低（Plt;0.05）。GPP可能通過發(fā)揮ER激動劑的類固醇樣作用，改善垂體和卵巢內(nèi)分泌功能，恢復(fù)、保護(hù)卵巢儲備能力，增強(qiáng)酶類抗氧化系統(tǒng)的活力，緩解由熱應(yīng)激造成卵巢的氧化損傷， GPP-H組劑量效果較佳。

關(guān)鍵詞：卵巢；氧化損傷；熱應(yīng)激；絞股藍(lán)多糖；小鼠

中圖分類號：S852" " " " "文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A" " " " " " "文章編號：0439-8114（2025）02-0144-06

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2025.02.022 開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識碼（OSID）：

Abstract： In order to explore the protective effect of different doses of Gynostemmapentaphyllum polysaccharides （GPP） on oxidative damage of ovary in mice caused by heat stress， enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）， immunohistochemical techniques and other research methods were used to observe and analyze the body weight and ovarian index， the number of follicles at all levels， the maximum diameter and the thickness of ovarian cortex， various reproductive hormones in ovary， the level of estrogen receptor β expression， antioxidant capacity in blood serum and the apoptosis rate of ovarian granulosa cells. The results showed that compared with group HS， the weight of mice in different doses of GPP was significantly higher （Plt;0.05）；the number of primordial follicles in group GPP-H was significantly higher （Plt;0.05）； the number of atretic follicles in groups GPP-L and GPP-H was significantly lower （Plt;0.05）；the thickness of ovarian cortex， the maximum diameters of primordial follicle， primary follicle and corpus luteum in different doses of GPP were significantly larger （Plt;0.05）； the secretion of GnRH， E2 and P4 in different doses of GPP was significantly higher， the secretion of FSH in group GPP-H was significantly higher （Plt;0.05）； GSH-Px activity indifferent doses of GPP was significantly higher （Plt;0.05）， T-SOD activity in group GPP-M was significantly higher （Plt;0.05）， the content of MDA in different doses of GPP was significantly lower （Plt;0.05）. In conclusion， GPP could improve the endocrine function of pituitary and ovary， restore and protect the ovarian reserve capacity， enhance the activity of enzyme antioxidant system， and alleviate the oxidative damage of ovary caused by heat stress by exerting the steroid-like effect of ER agonist， in which GPP-H worked most efficiently.

卵巢是雌性動物的生殖器官，主要參與卵泡的產(chǎn)生與釋放，促進(jìn)各類促性腺激素與性激素的合成與分泌，從而維持機(jī)體正常的生殖功能。高溫環(huán)境下產(chǎn)生的熱應(yīng)激會對卵巢造成氧化損傷，導(dǎo)致卵巢發(fā)育和功能障礙，在一定程度上破壞動物繁殖機(jī)能，影響畜牧養(yǎng)殖業(yè)的生產(chǎn)與管理［1］。研究表明，植物多糖可以緩解熱應(yīng)激產(chǎn)生的卵巢損傷。王朝棟等［2］發(fā)現(xiàn)在飼糧中添加適量的苜蓿多糖可以有效緩解蛋雞的熱應(yīng)激，提高蛋雞的生產(chǎn)性能，改善蛋品質(zhì)。鄒慧等［3］發(fā)現(xiàn)富硒女貞子多糖對熱應(yīng)激引起的卵巢細(xì)胞增殖活性降低及細(xì)胞凋亡有明顯的改善作用，并能提高卵巢細(xì)胞的抗氧化功能。絞股藍(lán)（Gynostemma pentaphyllum）為葫蘆科多年生草質(zhì)藤本植物，在中國南方地區(qū)分布廣泛，其有效成分之一的絞股藍(lán)多糖（Gynostemma pentaphyllum polysaccharides，GPP），具有抗衰老、抗氧化、提高免疫力、抗肝損傷、抗疲勞、抗腫瘤等生物活性［4，5］，是一種很有潛力的抗氧化損傷藥物，但有關(guān)GPP對熱應(yīng)激導(dǎo)致卵巢氧化損傷保護(hù)作用的研究尚未見報(bào)道。因此，本研究以成年雌性小鼠為研究對象，通過對小鼠卵巢的組織形態(tài)、分泌的性激素、卵巢組織中抗氧化酶等指標(biāo)進(jìn)行觀察和檢測，探討GPP對熱應(yīng)激小鼠卵巢氧化損傷的保護(hù)作用，為進(jìn)一步開發(fā)GPP在畜牧生產(chǎn)和臨床方面的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

水提醇沉法提取絞股藍(lán)多糖，4 ℃保存?zhèn)溆?。小鼠促性腺激素釋放激素（GnRH）酶聯(lián)免疫分析試劑盒、小鼠促卵泡素（FSH）酶聯(lián)免疫分析試劑盒、小鼠促黃體素（LH）酶聯(lián)免疫分析試劑盒、小鼠雌二醇（E2）酶聯(lián)免疫分析試劑盒和小鼠孕酮（P）酶聯(lián)免疫分析試劑盒均購自武漢酶免生物科技有限公司。丙二醛（MDA）、過氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）和總超氧化物歧化酶（T-SOD）活性試劑盒購自南京建成生物工程研究所。小鼠雌激素β型受體試劑盒購自中杉金橋生物技術(shù)有限公司。Roche tunel試劑盒購自瑞士羅氏公司。

1.2 試驗(yàn)動物分組與熱應(yīng)激處理

SPF級6～8周齡健康昆明雌性小白鼠（許可證編號：SYXK桂2020-0004）50只，體重（32.9±1.7）g，購于廣西醫(yī)科大學(xué)動物試驗(yàn)中心，適應(yīng)性飼養(yǎng)3 d后，隨機(jī)將小鼠分為5組，分別為空白對照組（Control組）、熱應(yīng)激對照組（Heat stress，HS組）、高劑量絞股藍(lán)多糖組（GPP-H）、中劑量絞股藍(lán)多糖組（GPP-M）、低劑量絞股藍(lán)多糖組（GPP-L）。Control組和HS組每天腹腔注射生理鹽水；GPP-L、GPP-M和GPP-H組每天腹腔注射絞股藍(lán)多糖溶液，每次劑量分別為0.05、0.10和0.20 mg/g，以10 mL/（kg·d）連續(xù)給藥2周。第15天開始，將HS組、GPP-L組、GPP-M組和GPP-H組置于38 ℃環(huán)境中應(yīng)激45 min，然后42 ℃環(huán)境中應(yīng)激20 min，連續(xù)應(yīng)激7 d。

1.3 采血、取材及臟器指數(shù)測定

小鼠末次用藥1 d后，眼眶采血，分離血清并保存于-20 ℃?zhèn)溆谩Ｌ幩佬∈蠛笥?5%乙醇溶液棉球腹部消毒，剪開腹腔后取出卵巢（剔除附著在卵巢的脂質(zhì)、筋膜及結(jié)締組織）。稱量卵巢的重量，精確到0.000 1 g。臟器指數(shù)=臟器重量（mg）/體重（g）。

1.4 石蠟切片與染色

每組采集3只小鼠卵巢，10%福爾馬林溶液固定24 h，常規(guī)石蠟切片（切片厚為5 μm），每隔10張取1張，各組取10張，經(jīng)HE染色，光學(xué)顯微鏡（40×）下觀察測量卵泡最大直徑、各級卵泡數(shù)量及卵巢皮質(zhì)厚度，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

1.5 卵巢組織勻漿中GnRH等激素含量測定

卵巢組織按重量∶體積=1∶19加入生理鹽水，制成5%組織勻漿，并在4 ℃下3 000 r/min離心10 min。測定卵巢組織勻漿中促性腺激素釋放激素（Gonadotropin releasing hormone，GnRH）、促卵泡素（Follicle stimulating hormone，F(xiàn)SH）、促黃體素（Luteinizing hormone，LH）、雌二醇（Estradiol，E2）和孕酮（Progesterone，P4）的濃度，操作過程嚴(yán)格按照ELISA酶聯(lián)免疫試劑盒說明書進(jìn)行。

1.6 MDA含量及CAT、GSH-Px和T-SOD活性檢測

檢測血清中丙二醛（MDA）含量及過氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）和總超氧化物歧化酶（T-SOD）活性，操作過程嚴(yán)格按相應(yīng)試劑盒（南京建成生物工程研究所）說明書進(jìn)行。

1.7 雌激素β型受體免疫組化染色

采用SABC法進(jìn)行免疫組化檢測雌激素β型受體（Estrogen receptor β，ERβ），其操作步驟按SABC試劑盒的說明書進(jìn)行。光學(xué)顯微鏡（40×）下觀察，每組隨機(jī)選取10個視野。利用Image pro 6.0軟件測定并計(jì)算所選定視野ERβ的平均光密度（Average optical density，AOD）（ERβ陽性細(xì)胞累計(jì)光密度值/視野下卵巢組織的面積）。

1.8 TUNEL檢測卵巢顆粒細(xì)胞凋亡情況

采用TUNEL法檢測卵巢顆粒細(xì)胞的凋亡情況，其操作步驟按羅氏試劑盒的說明書進(jìn)行。光學(xué)顯微鏡（40×）下觀察，每組隨機(jī)選取10個視野，統(tǒng)計(jì)凋亡細(xì)胞百分率（凋亡細(xì)胞/細(xì)胞總數(shù)）。

1.9 數(shù)據(jù)分析

所有數(shù)據(jù)利用 SPSS 26軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。各指標(biāo)數(shù)據(jù)采用單因素方差分析法（ANOVA）進(jìn)行多組間數(shù)據(jù)分析比較，經(jīng)過正態(tài)性檢驗(yàn)和方差齊性檢驗(yàn)，以Plt;0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，數(shù)據(jù)以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”來表示。使用Image Pro 6.0軟件對圖片進(jìn)行分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 絞股藍(lán)多糖對熱應(yīng)激小鼠體重、卵巢指數(shù)的影響

從表1可以看出，GPP各劑量組小鼠體重、卵巢指數(shù)較HS組均有所增高，其中GPP各劑量組小鼠體重均顯著高于HS組（Plt;0.05）；而各試驗(yàn)組小鼠卵巢指數(shù)差異不顯著，表明GPP能緩解由熱應(yīng)激帶來的生長抑制，但對卵巢器官的初期保護(hù)效果不明顯。

2.2 絞股藍(lán)多糖對熱應(yīng)激小鼠卵巢組織形態(tài)的影響

小鼠卵巢皮髓質(zhì)結(jié)構(gòu)及各級卵泡的形態(tài)如圖1所示。Control組卵巢組織結(jié)構(gòu)緊密，各級卵泡豐富且發(fā)育良好（圖1A）。HS組（圖1B）卵巢結(jié)構(gòu)髓質(zhì)排列疏松，血管擴(kuò)張充血，卵泡內(nèi)顆粒細(xì)胞松散變性，形成閉鎖卵泡。GPP各劑量組（圖1C至圖1E）內(nèi)卵巢血管充血現(xiàn)象有所緩和，閉鎖卵泡數(shù)量減少，常見多個黃體。其中GPP-M組卵巢組織形態(tài)與Control組最接近，卵巢組織結(jié)構(gòu)較為緊密，各級卵泡結(jié)構(gòu)清晰且形態(tài)正常。

2.3 絞股藍(lán)多糖對熱應(yīng)激小鼠卵巢中各級卵泡數(shù)量、卵泡最大直徑和卵巢皮質(zhì)厚度的影響

各組卵巢分別進(jìn)行石蠟切片后HE染色，光學(xué)顯微鏡下觀察并記錄各級卵泡數(shù)量，結(jié)果如圖2所示。GPP各劑量組小鼠卵巢中原始卵泡、初級卵泡、次級卵泡數(shù)量與GPP濃度呈現(xiàn)一定正比關(guān)系。與HS組相比，GPP-H組的原始卵泡數(shù)顯著升高（Plt;0.05），GPP-L、GPP-H組的閉鎖卵泡數(shù)顯著減少（Plt;0.05） 。其中，GPP-H組的閉鎖卵泡數(shù)與GPP-L、GPP-M組相比顯著減少（Plt;0.05），提示GPP能有效降低閉鎖卵泡數(shù)量。

對卵巢切片HE染色后各級卵泡最大直徑和卵巢皮質(zhì)厚度進(jìn)行測量分析，結(jié)果如圖3所示。與HS組相比，GPP各劑量組原始卵泡、次級卵泡和黃體的最大直徑顯著升高（Plt;0.05）。GPP各劑量組間相比，GPP-M組的原始卵泡和次級卵泡最大直徑顯著高于GPP-L組（Plt;0.05）；GPP-M組的黃體最大直徑顯著高于GPP-L和GPP-H組（Plt;0.05）。卵巢皮質(zhì)厚度結(jié)果如表2所示，GPP各劑量組小鼠卵巢皮質(zhì)厚度與HS組相比均顯著升高（Plt;0.05）；GPP-M組卵巢皮質(zhì)厚度顯著高于GPP-L組（Plt;0.05），其余組間差異不顯著，提示GPP對卵巢的發(fā)育有一定促進(jìn)作用。

2.4 絞股藍(lán)多糖對熱應(yīng)激小鼠卵巢中生殖激素水平的影響

通過ELISA法對各組卵巢中GnRH、FSH、LH、E2和P4含量進(jìn)行測定，結(jié)果如表3所示。GPP各劑量組對GnRH、E2和P4水平作用較顯著。與HS組相比，GPP各劑量組中GnRH、E2和P4含量均有顯著升高（Plt;0.05）；GPP-M、GPP-H組小鼠卵巢中P4含量顯著高于GPP-L組（Plt;0.05），其余組間差異不顯著。GPP-H組中FSH含量與HS組相比有顯著升高（Plt;0.05），說明GPP能正向調(diào)節(jié)下丘腦-垂體-卵巢軸。

2.5 絞股藍(lán)多糖對熱應(yīng)激小鼠抗氧化能力的影響

GPP各劑量組小鼠血清中抗氧化酶活力呈上調(diào)趨勢（表4）。與HS組相比，GPP各劑量組中GSH-Px活力顯著升高（Plt;0.05），其中GPP-M組的GSH-Px活力顯著高于GPP-L組（Plt;0.05），其余組間差異不顯著。與HS組相比，GPP-M組中T-SOD活力顯著升高（Plt;0.05）。與HS組相比，GPP各劑量組中MDA含量顯著降低（Plt;0.05），說明GPP使熱應(yīng)激小鼠抗氧化能力有所恢復(fù)。

2.6 絞股藍(lán)多糖對熱應(yīng)激引起的小鼠卵巢ERβ和顆粒細(xì)胞的影響

經(jīng)免疫組化SABC法染色后，ERβ顯色為棕黃色顆粒，主要位于卵巢卵泡的顆粒細(xì)胞、膜細(xì)胞、卵母細(xì)胞胞質(zhì)以及血管周圍間質(zhì)中。與Control組（圖4A）相比，HS組和GPP各劑量組（圖4B至圖4E）的免疫組化染色程度減弱，面積減小。隨機(jī)選取10個視野，對ERβ陽性細(xì)胞IOD/Area進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果如表5所示。GPP各劑量組的卵巢ERβ表達(dá)水平與HS組相比有所上調(diào)，但是差異不顯著。

經(jīng)TUNEL染色后，正常的卵巢顆粒細(xì)胞核為藍(lán)紫色，凋亡細(xì)胞為深褐色。結(jié)果如圖5所示，HS組（圖5B）的凋亡細(xì)胞明顯增加，且中心的卵母細(xì)胞與顆粒細(xì)胞變性溶解。在GPP各劑量組（圖5C至圖5E）中，凋亡細(xì)胞有所減少。經(jīng)對凋亡細(xì)胞百分率（凋亡細(xì)胞/細(xì)胞總數(shù)）進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果如表5所示，與HS組相比，GPP各劑量組卵巢顆粒細(xì)胞凋亡率有所下調(diào)，但差異不顯著，其中GPP-H組凋亡率的平均值最接近Control組。

3 小結(jié)與討論

研究表明，多糖可有效緩解熱應(yīng)激所導(dǎo)致的雌性動物采食量下降、卵巢重量下降、卵巢組織出現(xiàn)變性和壞死性變化、閉鎖卵泡數(shù)量升高等氧化損傷。張?jiān)撇ǖ龋?］發(fā)現(xiàn)烏賊墨多糖能在一定程度上增加體重與卵巢指數(shù)，對氧化損傷有緩解作用。本試驗(yàn)中GPP各劑量組的體重與卵巢指數(shù)均高于HS組，且GPP-M組和GPP-H組體重顯著升高，表明GPP能緩解由熱應(yīng)激帶來的生長抑制，但對卵巢器官的初期保護(hù)效果不明顯，可能與GPP劑量有關(guān)。孫慧霞等［7］發(fā)現(xiàn)枸杞多糖能減輕由順鉑對大鼠卵巢造成的氧化損傷，結(jié)構(gòu)和功能都得以改善，卵巢內(nèi)原始卵泡數(shù)目增加，卵泡發(fā)生得以恢復(fù)，卵泡儲備量良好。朱辛為等［8］發(fā)現(xiàn)黑木耳多糖在高功率微波輻射時，對卵巢具有保護(hù)修復(fù)作用，表現(xiàn)為GPP各劑量組卵巢皮質(zhì)增厚，卵泡數(shù)量增多，各級卵泡形態(tài)結(jié)構(gòu)基本正常，黃體形態(tài)規(guī)則。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)利用GPP干預(yù)后，GPP-M組卵巢組織結(jié)構(gòu)緊密，血管充血現(xiàn)象減少，在形態(tài)上更接近Control組；與HS組相比，GPP-H組的原始卵泡數(shù)顯著升高，GPP-L組、GPP-H組中閉鎖卵泡數(shù)顯著降低，GPP各劑量組卵巢皮質(zhì)厚度、原始卵泡、次級卵泡和黃體的最大直徑顯著升高，表明GPP能對卵巢的組織形態(tài)有一定的修復(fù)作用。

卵巢內(nèi)分泌由下丘腦-垂體-卵巢軸控制，由下丘腦分泌、釋放的GnRH通過脈沖刺激腺垂體，分泌、釋放促性腺激素FSH與LH。FSH和LH能刺激卵泡的發(fā)育成熟，LH還能促進(jìn)成熟卵細(xì)胞生成黃體。E2從各級卵泡和黃體中分泌而來，P4則從黃體中分泌釋放，E2與P4常具有協(xié)同作用。熱應(yīng)激對動物卵巢內(nèi)分泌的影響主要表現(xiàn)為升高GnRH分泌的閾值，抑制FSH、LH、E2和P4的分泌。研究表明，GPP對下丘腦-垂體分泌激素的功能有較好的增強(qiáng)作用［9］。本試驗(yàn)中GPP各劑量組對GnRH、E2和P4水平作用較顯著。這提示GPP可能發(fā)揮類固醇樣作用：①增強(qiáng)卵巢對促性腺激素的敏感性［10］，從而促進(jìn)E2和P4的分泌；②降低GnRH分泌的閾值［11］，并受高濃度E2正向反饋的調(diào)節(jié)而促進(jìn)GnRH的分泌，正向調(diào)節(jié)下丘腦-垂體-卵巢軸。

ERβ在卵巢顆粒細(xì)胞增殖與分化、類固醇激素的變化中有重要作用［12］，類固醇激素（如E2、P4）對卵巢功能的調(diào)節(jié)是通過與卵巢細(xì)胞內(nèi)的特異性受體結(jié)合而實(shí)現(xiàn)的。熱應(yīng)激可引起ER表達(dá)水平的下降［13］。研究表明，多糖可在一定程度緩解熱應(yīng)激對卵巢ERβ下調(diào)的影響［14］。本研究中GPP各劑量組的卵巢ERβ表達(dá)水平與HS組相比有所上調(diào)，但差異不顯著。GPP對熱應(yīng)激造成的E2和P4下調(diào)有較好的逆轉(zhuǎn)作用，推測GPP可能通過上調(diào)E2的分泌，發(fā)揮ER激動劑的類固醇樣作用，增強(qiáng)ERβ的表達(dá)。

機(jī)體主要的酶類抗氧化系統(tǒng)是CAT、GSH-Px和T-SOD等，CAT、GSH-Px和T-SOD可清除氧化損傷產(chǎn)生的自由基，調(diào)節(jié)體內(nèi)氧化-還原平衡［15］。熱應(yīng)激會產(chǎn)生大量活性氧，破壞氧化-還原平衡。研究表明，多糖能增強(qiáng)抗氧化酶活力，降低脂質(zhì)過氧化物如MDA的含量，緩解氧化損傷。王海元等［16］發(fā)現(xiàn)服用GPP對疲勞運(yùn)動小鼠的部分組織的抗氧化酶活性有增強(qiáng)作用，在一定程度上抑制組織發(fā)生脂質(zhì)過氧化的損害。張潤祥等［17］發(fā)現(xiàn)GPP可以有效恢復(fù)D-gal半乳糖致衰老小鼠肝臟的氧化損傷。本試驗(yàn)結(jié)果中GPP各劑量組GSH-Px和T-SOD的活力相較HS組有顯著提升、MDA含量顯著降低，提示GPP能在一定程度上減弱或抑制由熱應(yīng)激導(dǎo)致的氧化損傷，保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能完整。熱應(yīng)激對卵巢造成的氧化損傷可能與熱休克蛋白有關(guān)［18］，因此GPP可能通過誘導(dǎo)卵巢內(nèi)熱休克蛋白生成，緩解熱應(yīng)激造成的氧化損傷。

熱應(yīng)激可誘導(dǎo)小鼠卵巢顆粒細(xì)胞表達(dá)熱休克蛋白而抵抗凋亡，降低其合成類固醇激素的能力，提高有腔卵泡閉鎖率和顆粒細(xì)胞凋亡率［19］。研究表明，多糖對卵巢細(xì)胞的凋亡有保護(hù)作用。鄒慧等［3］發(fā)現(xiàn)富硒女貞子的多糖部分對卵巢細(xì)胞凋亡有明顯的保護(hù)作用。趙柯杰等［20］發(fā)現(xiàn)淫羊藿多糖可有效抑制小鼠卵巢卵泡細(xì)胞凋亡。本研究發(fā)現(xiàn)，與HS組比較，GPP各劑量組的凋亡率有下調(diào)趨勢，GPP可能通過發(fā)揮ER激動劑的類似作用，調(diào)節(jié)E2分泌，阻斷細(xì)胞凋亡的效應(yīng)，降低細(xì)胞凋亡率。

綜上所述，GPP可能通過發(fā)揮ER激動劑的類固醇樣作用，改善垂體和卵巢內(nèi)分泌功能，恢復(fù)、保護(hù)卵巢儲備能力，增強(qiáng)酶類抗氧化系統(tǒng)的活力，緩解熱應(yīng)激對卵巢造成的氧化損傷。在GPP各劑量組中，GPP-H組劑量效果較佳。有關(guān)GPP對熱應(yīng)激造成卵巢氧化損傷的保護(hù)機(jī)制以及對熱休克蛋白的誘導(dǎo)作用，有待進(jìn)一步研究與證明。

參考文獻(xiàn)：

［1］ ROTH Z，WOLFENSON D. Comparing the effects of heat stress and mastitis on ovarian function in lactating cows： Basic and applied aspects［J］. Domestic animal endocrinology， 2016，56：S218-S227.

［2］ 王朝棟，董曉芳，佟建明.苜蓿多糖對夏季高溫環(huán)境下蛋雞生產(chǎn)性能及蛋品質(zhì)的影響［J］.動物營養(yǎng)學(xué)報(bào)，2017，29（6）：2018-2028.

［3］ 鄒 慧，李丹丹，陳 靜，等. 富硒女貞子對熱應(yīng)激卵巢細(xì)胞的影響［J］. 揚(yáng)州大學(xué)學(xué)報(bào)（農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版），2016，37（4）：27-31

［4］ 張金金， 許哲遠(yuǎn)， 陳 騫. 絞股藍(lán)多糖對抗疾病的藥理學(xué)研究進(jìn)展［J］. 中國婦幼保健， 2019，34（7）：1684-1686.

［5］ WANG Z， LUO D. Antioxidant activities of different fractions of polysaccharide purified from Gynostemma pentaphyllum Makino［J］. Carbohydrate polymers， 2007，68（1）：54-58.

［6］ 張?jiān)撇ǎ瑒⑷A忠，谷毅鵬，等. 烏賊墨多糖對環(huán)磷酰胺介導(dǎo)小鼠卵巢氧化應(yīng)激損傷的干預(yù)效應(yīng)［J］. 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2015，42（14）：90-93.

［7］ 孫慧霞， 郭 哲， 許 靜. 枸杞多糖對順鉑化療誘導(dǎo)的大鼠卵巢早衰模型的卵巢保護(hù)作用［J］. 臨床與病理雜志， 2020， 40（3）：578-584.

［8］ 朱辛為， 田洪艷， 徐 冶， 等. 黑木耳多糖對高功率微波輻射大鼠卵巢和子宮形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響［J］. 中國婦幼保健，2012，27（3）：735-737.

［9］ 白 熙. 絞股藍(lán)多糖對斷乳雌性小鼠卵巢發(fā)育的影響［D］.南寧：廣西大學(xué)， 2020.

［10］ 冉麗華， 熊 勇， 周廉讓， 等. 淺談熱應(yīng)激對母豬繁殖性能的影響［J］. 吉林畜牧獸醫(yī)， 2021， 42（10）：19-21.

［11］ AN G， CHEN X， LI C， et al. Pathophysiological changes in female rats with estrous cycle disorder induced by long-term heat stress［J］. BioMed research international， 2020，2020：1-10.

［12］ 鄭宇新， 張妮娜， 崔亞娟， 等. 雌激素受體在卵泡發(fā)育中作用的研究進(jìn)展［J］. 黑龍江畜牧獸醫(yī)， 2018（1）：60-62.

［13］ 張林超，宮英闌，溫 冉. 5種中藥多糖通過Keap1-Nrf2通路緩解代森錳鋅氧化和卵巢毒性［J］. 中國獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2021，41（8）：1575-1582.

［14］ NILSSON S， GUSTAFSSON J. Biological role of estrogen and estrogen receptors［J］. Critical reviews in biochemistry and molecular biology， 2002，37（1）：1-28.

［15］ DEVINE P J， PERREAULT S D， LUDERER U. Roles of reactive oxygen species and antioxidants in ovarian toxicity［J］. Biology of reproduction， 2012，86（2）：27，1-10.

［16］ 王海元， 池愛平. 絞股藍(lán)多糖對運(yùn)動小鼠組織抗氧化能力的影響［J］. 食品科學(xué)， 2008，29（11）：616-618.

［17］ 張潤祥，白玉婷，張穎蕾，等. 絞股藍(lán)多糖對D-gal半乳糖致衰老小鼠肝臟抗氧化能力的影響［J］. 中國畜牧獸醫(yī)，2022，49（2）：462-470.

［18］ WILSON S J， MARION R S， SPAIN J N， et al. Effects of controlled heat stress on ovarian function of Dairy Cattle. 1. Lactating Cows1［J］. Dairy Sci， 1998，81（8）：2124-2131.

［19］ LUO M， LI L， XIAO C， et al. Heat stress impairs mice granulosa cell function by diminishing steroids production and inducing apoptosis［J］. Molecular and cellular biochemistry，2016，412（1-2）：81-90.

［20］ 趙柯杰， 錢雯嫻， 李彥林， 等. 淫羊藿多糖對卵泡細(xì)胞凋亡的作用及機(jī)理研究［J］. 安徽科技學(xué)院學(xué)報(bào)， 2017，31（3）：6-10.

收稿日期：2023-10-08

基金項(xiàng)目：廣西大學(xué)“大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃”項(xiàng)目（S202110593148）

作者簡介：陳蕾曉（2000-），女，廣西北海人，本科生，專業(yè)方向?yàn)閯游镝t(yī)學(xué)，（電話）15677991969（電子信箱）1198060492@qq.com；通信作者，

王曉麗（1976-），女，內(nèi)蒙古赤峰人，教授，博士，主要從事細(xì)胞學(xué)、組織學(xué)以及胚胎工程的研究，（電子信箱）xiaoliwang@gxu.edu.cn。