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    預(yù)制納米碳-鉑復(fù)合基質(zhì)用于表面輔助激光解吸電離質(zhì)譜成像分析植物組織中的小分子成分

    2025-03-15 00:00:00楊帆沈鈺琳龔燦劉兆鑫郭強(qiáng)勝許旭
    分析化學(xué) 2025年2期
    關(guān)鍵詞:信號(hào)強(qiáng)度信噪比質(zhì)譜

    摘要 與使用有機(jī)小分子基質(zhì)的基質(zhì)輔助激光解吸電離質(zhì)譜(MALDI-MS)技術(shù)相比,基于納米材料基質(zhì)的表面輔助激光解吸電離質(zhì)譜(SALDI-MS)對(duì)小分子化合物的分析效果更好。本研究采用離子濺射儀將碳/鉑材料濺射到玻璃蓋玻片上制備納米碳-鉑(C-Pt)復(fù)合基質(zhì),建立了基于預(yù)制碳-鉑復(fù)合基質(zhì)的SALDI-MS 分析方法。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,使用C-Pt 復(fù)合基質(zhì)顯著提高了待測(cè)成分質(zhì)譜峰的信號(hào)強(qiáng)度和信噪比??疾炝颂寂c鉑的比例、離子濺射的時(shí)長(zhǎng)和質(zhì)譜激光強(qiáng)度的影響,得到C-Pt 預(yù)制基質(zhì)的最佳制備條件和質(zhì)譜分析條件。在預(yù)制C-Pt 復(fù)合基質(zhì)上點(diǎn)樣,采用SALDI-MS 分析蜜三糖和大豆苷元,質(zhì)譜峰強(qiáng)度點(diǎn)內(nèi)重復(fù)性(相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差,RSD)≤4.8%,點(diǎn)間重復(fù)性RSD≤6.4%;在0.05~1.0 mg/mL 范圍內(nèi),槲皮素和蜜三糖的質(zhì)譜峰強(qiáng)度與濃度的線(xiàn)性相關(guān)系數(shù)(R2)gt;0.994,顯示出較好的定量分析及用于質(zhì)譜成像的潛力。在預(yù)制C-Pt 復(fù)合基質(zhì)上點(diǎn)樣大豆50%乙醇提取液用于SALDI-MS 分析,從提取液中識(shí)別出寡糖和甘油三酯等15 種化合物。在預(yù)制C-Pt 復(fù)合基質(zhì)上覆蓋玉米組織切片,用于SALDI-MS 成像分析,獲得了玉米中寡糖、甘油二酯和甘油三酯的分布圖,結(jié)果顯示,甘油二酯和甘油三酯主要分布在玉米的胚及胚的周?chē)?,寡糖的分布較為均勻。

    關(guān)鍵詞 表面輔助激光解吸電離質(zhì)譜;質(zhì)譜成像;預(yù)制基質(zhì);納米碳-鉑復(fù)合基質(zhì)

    基質(zhì)輔助激光解吸電離質(zhì)譜(MALDI-MS)是一種軟電離技術(shù),可以在低激光功率下產(chǎn)生完整的低電荷態(tài)分子離子[1]。因此, MALDI-MS 成像(MALDI-MSI)技術(shù)不但能夠用于分析生物大分子[2],還能夠在植物組織切片中定位多種小分子代謝物[3-5]。盡管已經(jīng)有大量的基質(zhì)被證明可用于MALDI-MS 分析檢測(cè)完整的分子,但是許多基質(zhì)的背景信號(hào)容易出現(xiàn)在低質(zhì)量范圍內(nèi),當(dāng)采用強(qiáng)的激光能量時(shí),甚至?xí)a(chǎn)生基質(zhì)的碎片,導(dǎo)致譜圖復(fù)雜[6]。為了減少低質(zhì)量范圍內(nèi)基質(zhì)的干擾,以無(wú)機(jī)納米材料為基質(zhì)的表面輔助激光解吸電離-質(zhì)譜成像(SALDI-MSI)引起了研究者的關(guān)注,并得到了廣泛應(yīng)用。SALDI 基質(zhì)可以是放置在組織切片下的納米基底,也可以是沉積在樣品表面的納米材料粉末。

    在SALDI 納米基質(zhì)中,包括石墨烯和碳納米管等的碳納米材料具有高紫外線(xiàn)吸收、高表面積以及高電子導(dǎo)電性等優(yōu)勢(shì)[7-8]。Ma 等[9]以石墨烯作為基質(zhì),采用SALDI-TOF MS 技術(shù)定量分析了PM 2.5 樣品中的硝基多環(huán)芳烴。Khan 等[10]使用碳點(diǎn)(CDs)作為基質(zhì)檢測(cè)了小鼠血液中的血清素、谷氨酸和多巴胺鹽酸鹽。然而,碳納米材料也存在單個(gè)組分電離效率不足的問(wèn)題。由于貴金屬納米顆粒具有高導(dǎo)熱性和生物相容性,可為樣品中的代謝物成分提供豐富的吸附位點(diǎn)并能提高基質(zhì)的電離效率,因此,與貴金屬納米顆粒的摻雜已被證明是很好的解決方案[11-13]。Alsaeed 等[11]使用炭黑-Fe3O4(CB-Fe3O4)復(fù)合材料作為基質(zhì)分析5 種化妝品,對(duì)右旋泛酚、水楊酸二乙胺、尿素、水楊酸鈉和雙氯芬酸鈉的檢出限分別為300、30、6、1.2 和6 ng/mL。Yang 等[12]將球形共價(jià)有機(jī)骨架與金屬納米顆粒結(jié)合,制備了比表面積大且表面粗糙的復(fù)合基質(zhì)COF-V@Au,該基質(zhì)粗糙的表面結(jié)構(gòu)有利于樣品的吸附,并且高比表面積的結(jié)構(gòu)也能顯著提高電離效率。利用COF-V@Au 基質(zhì)檢測(cè)了克羅恩病患者和健康對(duì)照組的血清代謝指紋圖譜,建立的方法有助于克羅恩病的輔助診斷。Li 等[13]制備了摻雜鈷和氮的多孔碳基質(zhì)Co-NC,此基質(zhì)具有較大的比表面積,即使在高真空環(huán)境下也能強(qiáng)烈吸附和富集空氣中的揮發(fā)性化合物,并且在低質(zhì)量區(qū)(lt;500 Da)無(wú)背景干擾,因此可用于分析苯乙醇以及丁香、藿香、肉桂和沙參中的揮發(fā)性成分。

    離子濺射儀在制備納米材料基質(zhì)方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)[14-17]。Xu 等[14]使用離子濺射儀將銀基質(zhì)濺射在樣品上,用MALDI-離子遷移質(zhì)譜分析細(xì)胞中的膽固醇和7-脫氫膽固醇(7-DHC),結(jié)果表明,相比于A(yíng)gNO3 溶液和膠體Ag 納米顆粒,濺射銀基質(zhì)具有更高的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性,并且檢出限低至0.5 pmol/mm2。Shen 等[18]證明使用離子濺射儀濺射的鉑金屬納米預(yù)制基質(zhì)可以用于SALDI-MSI 分析植物組織中的糖類(lèi)和脂類(lèi),并且效果比有機(jī)小分子基質(zhì)更好。

    本研究采用離子濺射技術(shù)制備鉑與碳混合的納米材料(C-Pt),將其作為預(yù)制基質(zhì)用于植物組織中小分子成分的SALDI-MSI 分析。結(jié)果表明,使用C-Pt 復(fù)合基質(zhì)檢測(cè)到的化合物的信號(hào)強(qiáng)度和信噪比優(yōu)于僅使用鉑納米基質(zhì)時(shí)的信號(hào)強(qiáng)度和信噪比,并且能夠在植物組織中檢出更多的成分,進(jìn)一步使用此基質(zhì)對(duì)玉米組織中的寡糖、甘油二酯和甘油三酯進(jìn)行了質(zhì)譜成像。

    1 實(shí)驗(yàn)部分

    1.1 儀器與試劑

    SolariX 7.0 型傅里葉變換離子回旋共振質(zhì)譜儀(FT-ICR-MS,瑞士Bruker 公司),配備N(xiāo)d∶YAG 二級(jí)管泵浦固體激光器(波長(zhǎng)為355 nm);E-1010 型離子濺射儀(日本日立公司);ESCALAB 250Xi 型X 射線(xiàn)光電子能譜儀(美國(guó)賽默飛公司);Tecnai G2 20 TWIN 型透射電子顯微鏡(美國(guó)FEI 公司);BS224S 型電子天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司);PS-100A 型超聲波清洗機(jī)(東莞市潔康超聲波設(shè)備有限公司)。

    D-(+)-蜜三糖(gt;98%)購(gòu)于梯希愛(ài)(上海)化成工業(yè)發(fā)展有限公司;脫落酸(ABA, 98%)購(gòu)自Sigma-Aldrich(St. Louis, USA);L-苯丙氨酸(99%)購(gòu)自上海泰坦科技股份有限公司;大豆苷元(gt;97%)、槲皮素(gt;95%)和α-氰基-4-羥基肉桂酸(CHCA,gt;99%)購(gòu)自Adamas 試劑有限公司;2,5-二羥基苯甲酸(DHB,99%)購(gòu)自百靈威科技有限公司;甲醇(HPLC 級(jí))、無(wú)水乙醇(AR 級(jí))和無(wú)水乙腈(AR 級(jí))購(gòu)自玻爾化學(xué)試劑公司;屈臣氏蒸餾水購(gòu)自本地超市。

    顯微鏡蓋玻片(22 mm×22 mm)購(gòu)自泰坦科技有限公司(中國(guó)上海);高純石墨紙購(gòu)自探乾郎新材料公司(江蘇蘇州);導(dǎo)電膠帶(5mm,無(wú)鋁基)購(gòu)自上海柳津微電子有限公司。大豆和玉米購(gòu)自本地超市。

    1.2 實(shí)驗(yàn)方法

    1.2.1 無(wú)機(jī)基質(zhì)的制備與有機(jī)基質(zhì)和樣品溶液的配制

    鉑預(yù)制基質(zhì)的制備:采用離子濺射儀(日本東京日立E-1010),使用高純度鉑靶(gt;99.9%)作為濺射源,鉑靶與樣品之間的距離約為3.5 cm,在減壓(15 Pa)條件下,將鉑濺射在玻璃蓋玻片上。

    C-Pt 復(fù)合基質(zhì)的制備:將高純石墨紙用少量導(dǎo)電膠帶粘貼在離子濺射儀的鉑靶表面,使用和上述鉑預(yù)制基質(zhì)同樣的條件進(jìn)行濺射,在蓋玻片上沉積包含碳和鉑元素的納米顆粒。

    有機(jī)小分子基質(zhì)溶液的制備:將DHB 和CHCA 溶于乙腈-水(1∶1, V/V)溶液中,濃度為10 mg/mL。

    樣品溶液配制:將L-苯丙氨酸、蜜三糖和脫落酸溶于純水中,槲皮素和大豆苷元溶于甲醇,濃度均為1 mg/mL,超聲至完全溶解。

    大豆提取液樣品的制備:將大豆放入研磨機(jī)研磨,粉碎后的大豆粉末置于離心管中,與乙醇-水(1∶1, V/V)溶液以固液比=1∶20(g/mL)混合后超聲2.5 h,取上清液,備用。

    1.2.2 SALDI-MS 分析參數(shù)

    使用Bruker DataAnalysis 4.0 軟件設(shè)置質(zhì)譜實(shí)驗(yàn)參數(shù)并處理所得的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。SALDI-MS 采用正離子模式,質(zhì)荷比檢測(cè)范圍為m/z 53~1000, 單掃描光譜包括25 次累積的600 Hz 激光射擊, 激光聚焦設(shè)置為“Minimum”。

    SALDI-MSI 采用正離子模式,檢測(cè)范圍為m/z 53~1000,測(cè)樣精度為1 M。單掃描光譜包括40 次累積的600 Hz 激光射擊,激光聚焦設(shè)置為“Minimum”,正離子模式下激光功率為70%。在120 μm 空間分辨率下獲得玉米種子的MALDI 圖像,使用HyStar Version 3.4 軟件進(jìn)行成像數(shù)據(jù)分析。

    2 結(jié)果與討論

    2.1 材料的表征

    通過(guò)調(diào)整高純石墨紙覆蓋純鉑靶材面積的比例來(lái)調(diào)整濺射出的基質(zhì)中C 與Pt 元素的比例。利用X 射線(xiàn)光電子能譜(XPS)對(duì)濺射的預(yù)制基質(zhì)進(jìn)行分析,如電子版文后支持信息圖S1 所示,在濺射出的材料中同時(shí)檢出了C 和Pt 元素的XPS 峰, C/Pt摩爾比分別為57∶43、69∶31 和49∶51。C-Pt 復(fù)合基質(zhì)的透射電子顯微鏡(TEM)圖如圖1 所示,基質(zhì)中的納米顆粒近似為球形,顆粒之間存在一定的堆疊,不同堆疊之間存在納米級(jí)的空隙,粒徑在10 nm 以?xún)?nèi)。

    2.2 C-Pt 復(fù)合基質(zhì)制備條件的優(yōu)化

    2.2.1 濺射時(shí)間

    分別使用不同濺射時(shí)長(zhǎng)預(yù)制的C-Pt 基質(zhì)(C∶Pt=57∶43),在正離子模式下,采用SALDI-MS 分析L-苯丙氨酸、蜜三糖、大豆苷元和槲皮素4 種樣品,各樣品均重復(fù)測(cè)定3 次, 4 種樣品的濃度均為1 mg/mL。比較在采用1、2、3、4、5 和6 min 濺射時(shí)間制備的C-Pt 基質(zhì)上的4 種樣品質(zhì)譜峰的信噪比。結(jié)果如圖2 所示,隨著濺射時(shí)間的延長(zhǎng),信噪比先增加然后趨于穩(wěn)定或降低。當(dāng)濺射時(shí)長(zhǎng)為4 min 時(shí), 4 種樣品的信噪比均最高。因此,選擇制備基質(zhì)時(shí)的濺射時(shí)間為4 min。

    2.2.2 C/Pt 比例

    考察了基質(zhì)中C/Pt的摩爾比對(duì)SALDI-MS 信號(hào)的影響。選擇L-苯丙氨酸、蜜三糖、槲皮素、大豆苷元和脫落酸5 種化合物,比較了3 種不同摩爾比的C/Pt 基質(zhì)以及純Pt 基質(zhì)片的信號(hào)強(qiáng)度,制備基質(zhì)時(shí)的濺射時(shí)長(zhǎng)為4 min, 4 種化合物溶液濃度均為1 mg/mL。結(jié)果如圖3 所示,這5 種化合物在C∶Pt=57∶43時(shí)制備的基質(zhì)片上具有更好的信噪比,因此后續(xù)實(shí)驗(yàn)均采用此比例制備C-Pt 基質(zhì)。

    根據(jù)文獻(xiàn)[19],使用碳納米材料作為SALDI 基質(zhì)時(shí),存在熱解吸和非熱解吸兩種機(jī)理;使用鉑納米材料時(shí),之前的研究顯示其主要表現(xiàn)為非熱解吸。這兩種單一基質(zhì)在SALDI 機(jī)理上的區(qū)別可能是本研究中不同C/Pt 比例基質(zhì)對(duì)樣品MS 信號(hào)強(qiáng)度產(chǎn)生差異的原因。

    2.3 質(zhì)譜激光強(qiáng)度的影響

    使用濺射時(shí)間為4 min 制備的C-Pt 復(fù)合基質(zhì),以蜜三糖和苯丙氨酸為樣品,考察了激光能量(30%~90%)對(duì)SALDI-MS 信號(hào)強(qiáng)度的影響,結(jié)果如圖4 所示。隨著激光強(qiáng)度的增加,蜜三糖的信號(hào)強(qiáng)度先增大后減小,苯丙氨酸的信號(hào)強(qiáng)度先增大后趨于平穩(wěn)。在70%激光強(qiáng)度時(shí),兩種化合物的信號(hào)強(qiáng)度最高,因此后續(xù)實(shí)驗(yàn)選擇70%的激光強(qiáng)度。

    2.4 采用C-Pt 復(fù)合基質(zhì)的SALDI-MS 方法的性能評(píng)價(jià)

    使用上述最佳條件下制備的C-Pt 復(fù)合基質(zhì),按照1.2.2 節(jié)的質(zhì)譜實(shí)驗(yàn)條件,評(píng)價(jià)C-Pt 復(fù)合基質(zhì)用于SALDI-MS 分析的重復(fù)性、線(xiàn)性和清洗穩(wěn)定性,并比較其與小分子基質(zhì)用于質(zhì)譜分析效果的差異。

    2.4.1 C-Pt 復(fù)合基質(zhì)用于SALDI-MS 分析的重復(fù)性

    在70%的激光強(qiáng)度、25 次掃描次數(shù)的條件下,選擇蜜三糖和槲皮素為樣品,考察C-Pt 預(yù)制基質(zhì)的點(diǎn)內(nèi)與點(diǎn)間重復(fù)性。

    采用九宮格方法,將一個(gè)樣品點(diǎn)分成9 個(gè)區(qū)域,對(duì)各個(gè)區(qū)域進(jìn)行SALDI-MS 分析和數(shù)據(jù)采集,再計(jì)算各區(qū)域的信號(hào)強(qiáng)度的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD),用于評(píng)價(jià)點(diǎn)內(nèi)重復(fù)性。在預(yù)制基質(zhì)層上將同一標(biāo)準(zhǔn)樣品點(diǎn)9 個(gè)樣品點(diǎn),對(duì)每個(gè)樣品點(diǎn)進(jìn)行SALDI-MS 信號(hào)采集,然后計(jì)算9 個(gè)樣品點(diǎn)信號(hào)強(qiáng)度的RSD 值,用于評(píng)價(jià)點(diǎn)間重復(fù)性。結(jié)果如圖5 所示,兩種物質(zhì)的點(diǎn)間重復(fù)性RSD≤6.4%,點(diǎn)內(nèi)重復(fù)性RSD≤4.8%,表明濺射C-Pt 預(yù)制基質(zhì)具有良好的重復(fù)性。

    2.4.2 峰強(qiáng)度與濃度的線(xiàn)性關(guān)系

    分別移取2 μL 不同濃度的槲皮素或蜜三糖滴加在預(yù)制C-Pt 復(fù)合基質(zhì)上進(jìn)行SALDI-MS 分析,重復(fù)點(diǎn)樣測(cè)定3 次。以[M+Na]+的MS 峰強(qiáng)度為縱坐標(biāo)、樣品濃度為橫坐標(biāo)進(jìn)行線(xiàn)性擬合,結(jié)果見(jiàn)圖6。蜜三糖和槲皮素均在0.05~1 mg/mL 濃度范圍內(nèi)具有良好的線(xiàn)性關(guān)系,線(xiàn)性方程分別為y=50.23x–1.61 和y=23.55x–0.50,線(xiàn)性相關(guān)系數(shù)(R2)gt;0.994,表明此預(yù)制C-Pt 復(fù)合基質(zhì)具有較好的定量分析性能及用于質(zhì)譜成像分析的潛力。

    2.4.3 C-Pt 復(fù)合基質(zhì)的清洗穩(wěn)定性

    取3 片制備好的預(yù)制C-Pt 基質(zhì)片,移取配制的大豆苷元、槲皮素和脫落酸樣品溶液各2 μL 分別滴加在預(yù)制C-Pt 基質(zhì)層上,每種化合物在每片預(yù)制基質(zhì)片上點(diǎn)樣2 個(gè)點(diǎn)進(jìn)行分析,獲得質(zhì)譜峰強(qiáng)度和信噪比。分析結(jié)束后,使用無(wú)水乙醇對(duì)C-Pt 基質(zhì)片進(jìn)行清洗,晾干后再次進(jìn)行質(zhì)譜檢測(cè),確定無(wú)法檢出原來(lái)樣品的信號(hào)后用同樣的方法測(cè)試上述3 種樣品溶液。結(jié)果表明,與清洗前相比,清洗后的C-Pt 基質(zhì)片上3 種樣品的質(zhì)譜峰強(qiáng)度分別降低了約50%~60%,同時(shí)噪音也降低了40%左右。C-Pt 基質(zhì)片清洗前后大豆苷元的信噪比下降了32.7%,槲皮素下降了17.3%,脫落酸下降了28.6%??梢?jiàn),即使是清洗后的C-Pt基質(zhì),仍然保持約70%~80%的信噪比,說(shuō)明此預(yù)制C-Pt 基質(zhì)較為穩(wěn)定,不易被溶劑洗掉。因此,本研究制備的C-Pt 復(fù)合基質(zhì)在改善基質(zhì)性能的同時(shí),也避免了單獨(dú)使用C 基質(zhì)時(shí)容易被溶劑洗掉的問(wèn)題[20]。

    2.4.4 C-Pt 復(fù)合基質(zhì)與有機(jī)小分子基質(zhì)的比較

    比較了C-Pt 基質(zhì)和傳統(tǒng)有機(jī)小分子基質(zhì)分析苯丙氨酸、蜜三糖、槲皮素、大豆苷元和脫落酸5 種化合物的信號(hào)強(qiáng)度。將這5 種化合物分別滴加在C-Pt 基質(zhì)片以及作為對(duì)比的DHB 和CHCA 基質(zhì)(濃度為10 mg/mL)上,在70%激光能量下進(jìn)行SALDI-MS 分析,結(jié)果如圖7 所示, C-Pt 復(fù)合基質(zhì)的信號(hào)強(qiáng)度和信噪比遠(yuǎn)高于有機(jī)小分子基質(zhì)。

    2.5 采用C-Pt 基質(zhì)分析植物組織

    2.5.1 大豆提取液的分析

    分別使用C-Pt 基質(zhì)、純Pt 納米基質(zhì)和DHB 基質(zhì)分析大豆提取液,比較檢測(cè)大豆成分的信噪比以及在大豆提取液中檢出的質(zhì)譜峰(信噪比≥10)數(shù)量。參考文獻(xiàn)[21]并結(jié)合HMDB(http://www.HMDB.ca)數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)質(zhì)譜峰進(jìn)行鑒別。結(jié)果如表1、表2 和圖8 所示,采用C-Pt 基質(zhì)在大豆提取液中檢出的二糖、三糖、四糖和脂類(lèi)信號(hào)均高于Pt 納米基質(zhì)和DHB 基質(zhì)。此外,采用C-Pt 基質(zhì)在大豆提取液中檢出的成分?jǐn)?shù)量也多于Pt 納米基質(zhì)。如表1 和表2 所示,相比于純Pt 納米基質(zhì),采用C-Pt 基質(zhì)多檢出了5 種成分,包括一種黃酮類(lèi)成分以及多種脂類(lèi)成分。因此,相比于純Pt 納米基質(zhì),采用C-Pt 復(fù)合基質(zhì)能夠更有效地檢測(cè)植物組織中的小分子成分。

    2.5.2 玉米種子的SALDI-MSI 分析

    使用融化的切片石蠟將玉米種子包埋在模具中,隨后用石蠟切片機(jī)切下厚度約為12 μm 玉米種子的橫截面切片,固定在預(yù)制C-Pt 復(fù)合基質(zhì)上進(jìn)行SALDI-MSI 分析。參考文獻(xiàn)[19]與HMDB(http://www.HMDB.ca)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行質(zhì)譜峰的識(shí)別,成像結(jié)果見(jiàn)圖9(其中左上角為玉米種子的光學(xué)照片),顯示出玉米種子中寡糖、甘油二酯和甘油三酯等成分的分布。其中,在玉米種子中檢出的寡糖為二糖(m/z 381.0793)和三糖(m/z 543.1321),檢出的甘油二酯為DG(18∶2/18∶2)(m/z 655.4698),甘油三酯包括PLL(m/z877.7295, 893.6994)、POL/PLO(m/z 879.7412, 895.7151)、POO/PLS(m/z 881.7568)、LLL(m/z 901.7255,917.6994)、OLL(m/z 903.7412, 919.7151)、OOL(m/z 905.7568, 921.7307)和OOO(m/z 907.7725)(其中P 表示棕櫚酸, L 表示亞油酸, O 表示油酸, S 表示硬脂酸)。如圖9 所示,多種甘油三酯在玉米種子的胚乳和胚芽之間分布存在差異,主要分布在胚芽以及胚芽的周?chē)?,寡糖在玉米種子中的分布較為均勻。

    3 結(jié)論

    本研究制備了一種預(yù)制C-Pt 納米基質(zhì),可作為SALDI-MS 和SALDI-MSI 的有效基質(zhì)用于植物組織中各種小分子成分分析。使用離子濺射儀,只需對(duì)靶材稍加改進(jìn),即可以批量制備此基質(zhì),簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)步驟,有效提高了SALDI-MS 的分析效率??疾炝薈-Pt 基質(zhì)制備的實(shí)驗(yàn)條件的影響,最終選擇4 min 的濺射時(shí)長(zhǎng)、C/Pt=57∶43 的比例制備預(yù)制C-Pt 基質(zhì),得到的基質(zhì)與玻璃基板結(jié)合較強(qiáng)、不易被溶劑洗脫。將此預(yù)制基質(zhì)用于SALDI-MS 分析大豆提取液樣品,識(shí)別出15 種化合物成分?;诖嘶|(zhì)的SALDI-MSI分析獲得了玉米種子中寡糖和脂類(lèi)的MSI 圖,顯示甘油二酯和甘油三酯主要分布在玉米種子的胚及胚的周?chē)?,寡糖的分布較為均勻。本研究制備的預(yù)制C-Pt 納米基質(zhì)為研究不同化合物在組織切片中的空間分布提供了新的選擇。

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    支持信息

    預(yù)制納米碳-鉑復(fù)合基質(zhì)用于表面輔助激光解吸電離質(zhì)譜成像分析植物組織中的小分子成分

    楊帆 沈鈺琳 龔燦 劉兆鑫 郭強(qiáng)勝 許旭

    國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No. 31671928)和上海應(yīng)用技術(shù)大學(xué)科技發(fā)展基金項(xiàng)目(No. KJFZ2023-11)資助。

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