基于數(shù)據(jù)挖掘和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)探討含桔梗方劑的用藥規(guī)律及作用機(jī)制

〔摘要〕 目的 綜合運(yùn)用數(shù)據(jù)挖掘、網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)等方法，旨在揭示桔梗的配伍規(guī)律、潛在作用機(jī)制及其藥效，為桔梗在臨床治療和科研開(kāi)發(fā)中的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。方法 從藥智網(wǎng)中藥方劑數(shù)據(jù)庫(kù)中收集含桔梗的方劑數(shù)據(jù)，運(yùn)用頻數(shù)、關(guān)聯(lián)規(guī)則、聚類(lèi)等統(tǒng)計(jì)分析方法進(jìn)行數(shù)據(jù)挖掘，并利用Cytoscape 3.8.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)可視化。通過(guò)TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)獲取桔梗的作用靶點(diǎn)，并結(jié)合GeneCards和OMIM數(shù)據(jù)庫(kù)中的肺炎疾病靶點(diǎn)，構(gòu)建蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò)，進(jìn)行GO富集分析和KEGG富集分析。此外，通過(guò)脂多糖（LPS）構(gòu)建急性肺炎模型，以評(píng)估桔梗治療肺炎的療效。結(jié)果 共納入1 811首含桔梗的方劑，涉及484味中藥，累計(jì)用藥總頻數(shù)達(dá)22 155次。桔梗常與補(bǔ)虛藥、化痰止咳平喘藥、解表藥、清熱藥、理氣藥等類(lèi)別的中藥配伍，藥性以溫、寒、平為主，藥味以辛、苦為主，主要?dú)w肺、脾、胃、心經(jīng)。關(guān)聯(lián)規(guī)則分析揭示了7組核心藥物組合（支持度gt;25%）。聚類(lèi)分析篩選出頻數(shù)gt;300的高頻藥物，得到3組3味藥物組合和1組2味藥物組合，以及3味單藥。主治病證以肺系、氣血津液及脾胃系病證為主，其中肺系病證頻率最高。在治療肺系病證時(shí)，聚類(lèi)分析得到2組3味藥物組合和3味單藥。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析顯示，桔梗中的主要活性成分金合歡素、順二氫槲皮素和木犀草素能夠通過(guò)調(diào)節(jié)多個(gè)途徑和靶點(diǎn)減緩肺炎的發(fā)展。桔梗能夠顯著減輕LPS引起的肺組織結(jié)構(gòu)損傷和血清中炎性細(xì)胞因子的分泌水平（Plt;0.05）。結(jié)論 桔梗作為一種常用的臨床中藥，尤其在治療肺系疾病方面，能夠通過(guò)與多種中藥配伍，從多途徑發(fā)揮治療作用。

〔關(guān)鍵詞〕 桔梗;數(shù)據(jù)挖掘;配伍規(guī)律;網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué);肺炎;動(dòng)物實(shí)驗(yàn);藥效

〔中圖分類(lèi)號(hào)〕R285.5" " " " "〔文獻(xiàn)標(biāo)志碼〕A" " " " " 〔文章編號(hào)〕doi：10.3969/j.issn.1674-070X.2025.01.007

Exploring the medication patterns and mechanism of action of Jiegeng （Platycodonis Radix）-containing formulas based on data mining and animal experiments

HUANG Jiawang1， FU Jingmin1， FENG Zhiying1， WANG Kangyu1， LIU Zhuolin2， JIANG Xuelian1，

YANG Jiaxin1， YU Rong1*， LI Ling2*

1. School of Chinese Medicine， Hunan University of Chinese Medicine， Changsha， Hunan 410208， China; 2. School of Integrated Chinese and Western Medicine， Hunan University of Chinese Medicine， Changsha， Hunan 410208， China

〔Abstract〕 Objective To elucidate the combination rules with other Chinese medicines， underlying mechanism of action， and pharmacological effects of Jiegeng （Platycodonis Radix） through the integrated use of data mining， network pharmacology， and animal experimentation， thereby providing a scientific basis for its application in clinical treatment and research and development. Methods Data on formulas containing Jiegeng （Platycodonis Radix） were collected from the Traditional Chinese Medicine Formula Database of the Drug Intelligence Network. Statistical analysis methods such as frequency， association rules， and clustering were applied for data mining， and data visualization was conducted using Cytoscape 3.8.0 software. Theraputic targets of Jiegeng （Platycodonis Radix） obtained from the Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology （TCMSP） database， integrated with the disease targets of pneumonia from the GeneCards and Online Mendelian Inheritance in Man （OMIM） databases， were used to construct a protein-protein interaction （PPI） network. Subsequently， GO and KEGG enrichment analyses were performed. Furthermore， an acute pneumonia model was established using lipopolysaccharide （LPS） to assess the efficacy of Jiegeng （Platycodonis Radix） in treating pneumonia. Results A total of 1，811 formulas containing Jiegeng （Platycodonis Radix） were included， involving 484 types of Chinese medicines with a cumulative frequency of 22，155 administrations. Jiegeng （Platycodonis Radix） was commonly combined with tonic medicines， phlegm-transforming， cough-stopping， and panting-alleviating medicines， exterior-releasing medicines， heat-clearing medicines， and qi-regulating medicines， which were mainly warm， cold， or neutral in property and pungent or bitter in flavor， and primarily entered the lung， spleen， stomach， and heart meridians. Association rule analysis revealed seven core Chinese medicine combinations with a support rate greater than 25%. Cluster analysis identified high-frequency Chinese medicines with a frequency greater than 300， resulting in three three-medicine combinations， one two-medicine combination， and three single Chinese medicines. The main indications were disorders of lung system， qi， blood， and body fluids， and spleen and stomach system， with the highest frequency in disorders of lung system. In the treatment of lung system disorders， cluster analysis yielded two three-medicine combinations and three single Chinese medicines. Network pharmacology analysis showed that the main active ingredients of Jiegeng （Platycodonis Radix）， including acacetin， cis-dihydroquercetin， and luteolin， can modulate multiple pathways and targets to alleviate pneumonia. Results of the animal experiments confirmed that Jiegeng （Platycodonis Radix） significantly reduced lung tissue structural damage and the secretion levels of inflammatory factors in serum induced by LPS （Plt;0.05）. Conclusion As a commonly used Chinese medicine in clinical practice， especially in the treatment of lung system diseases， Jiegeng （Platycodonis Radix） can exert therapeutic effects through various pathways when combined with a range of other Chinese medicines.

〔Keywords〕 Jiegeng （Platycodonis Radix）; data mining; combination rule; network pharmacology; pneumonia; animal experiments; pharmacodynamics

桔梗[Platycodon grandiflorum（Jacq.）A.DC.]屬于桔?？浦参?，其干燥根部被用作化痰止咳平喘的藥材。桔梗味苦、辛，性平，主要?dú)w肺經(jīng)。桔梗的主要功效為宣肺祛痰，能緩解咽痛和聲音嘶啞，可治療咳嗽多痰、肺癰和吐膿等癥狀[1]。文獻(xiàn)研究表明，在漢唐時(shí)期，桔梗主要用于治療中焦、下焦疾病，而非現(xiàn)代所公認(rèn)的以肺系病證為代表的上焦疾病。金元時(shí)期的醫(yī)學(xué)家張?jiān)厥状翁岢鼋酃椤胺谓?jīng)引藥”的觀點(diǎn)，將桔梗比作“舟楫”，認(rèn)為其“主升不降”，主要治療上焦疾病，這一觀點(diǎn)對(duì)后世醫(yī)家產(chǎn)生了深遠(yuǎn)影響，對(duì)于桔梗的認(rèn)識(shí)在此時(shí)期發(fā)生重要變化[2]。

中藥配伍能夠考慮到病情的復(fù)雜性，不僅可以增強(qiáng)治療效果，還能減少毒副作用，這對(duì)于臨床應(yīng)用具有重大意義[3]。但是由于中醫(yī)學(xué)的證候、方藥等數(shù)據(jù)具有多因素、非線性的特點(diǎn)，常規(guī)統(tǒng)計(jì)方法難以有效挖掘其中的臨床經(jīng)驗(yàn)，而數(shù)據(jù)挖掘技術(shù)能夠幫助解決這一難題，更好地反映其配伍規(guī)律與臨床應(yīng)用特點(diǎn)[4]。中藥及其復(fù)方治療疾病的機(jī)制復(fù)雜多樣，網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)通過(guò)構(gòu)建“藥物-成分-靶點(diǎn)-疾病”網(wǎng)絡(luò)，從整體角度研究并揭示中藥治療疾病的多成分、多靶點(diǎn)、多通路的協(xié)同增效機(jī)制，符合中醫(yī)的整體觀和辨證論治思想，能夠彌補(bǔ)一般藥理研究方法的不足[5]。目前，關(guān)于含桔梗方劑的配伍規(guī)律和用藥特點(diǎn)尚不明確，其治療作用機(jī)制也相對(duì)缺乏。因此，本研究篩選了現(xiàn)有研究中的含桔梗方劑，通過(guò)數(shù)據(jù)挖掘、網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)技術(shù)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，探討含桔梗方劑的組分規(guī)律、用藥特點(diǎn)以及治療疾病的潛在作用機(jī)制和藥物療效，旨在為深入研究和臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1" 數(shù)據(jù)挖掘

1.1.1" 數(shù)據(jù)來(lái)源" 本研究以“桔梗、苦桔梗、苦梗、包袱花、鈴鐺花、道拉基、符蔰、利如、梗草、盧如、房圖、苦菜根”等為關(guān)鍵詞，在藥智網(wǎng)的中藥方劑數(shù)據(jù)庫(kù)中進(jìn)行檢索，收集含桔梗的方劑作為數(shù)據(jù)來(lái)源。所涉及中藥的性味歸經(jīng)信息參考自《中藥學(xué)》新世紀(jì)第4版[6]（以下簡(jiǎn)稱(chēng)《中藥學(xué)》）和《中國(guó)人民共和國(guó)藥典》2020版（以下簡(jiǎn)稱(chēng)《中國(guó)藥典》）[7]等。

1.1.2" 納入及排除標(biāo)準(zhǔn)" 納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）組成不同的方劑;（2）組成相同但功效不同的方劑。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）組成不明確的方劑，包括無(wú)藥物組成記載或藥名混淆無(wú)法確定的方劑。（2）除方劑出處不同之外，其余均相同的方劑。（3）除方劑方名不同外，其余均相同的方劑。最終共收集到1 811首含桔梗的方劑。

1.1.3" 數(shù)據(jù)規(guī)范處理" 將納入的含桔梗方劑的藥物組成及主治病證等信息錄入Excel表格，并依據(jù)《中藥學(xué)》《中國(guó)藥典》等，利用Excel的查找替換功能對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行規(guī)范處理。具體包括將合寫(xiě)中藥拆分，如“羌獨(dú)活”拆分為“羌活”和“獨(dú)活”;將名稱(chēng)不同但實(shí)為同一中藥的統(tǒng)一規(guī)范為標(biāo)準(zhǔn)名稱(chēng)，如將“將軍”統(tǒng)一改為“大黃”;將不同炮制方法的同種中藥規(guī)范為標(biāo)準(zhǔn)名稱(chēng)，如將“酒大黃”統(tǒng)一改為“大黃”;將冠以不同產(chǎn)地的藥材規(guī)范為標(biāo)準(zhǔn)名稱(chēng)，如將“云苓”統(tǒng)一改為“茯苓”。

1.1.4" 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析" 將Excel中規(guī)范處理后的數(shù)據(jù)導(dǎo)入IBM SPSS Statistics軟件，進(jìn)行藥物頻次、方劑藥味個(gè)數(shù)、性味歸經(jīng)、主治病證的統(tǒng)計(jì)分析以及藥物聚類(lèi)分析。隨后，使用IBM SPSS Modeler 18.0軟件的apriori算法進(jìn)行中藥配伍的關(guān)聯(lián)分析，并利用Cytoscape 3.8.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行可視化處理。

1.2" 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)

1.2.1" 桔梗相關(guān)靶點(diǎn)篩選" 通過(guò)TCMSP（https：//www.tcmsp.org/）數(shù)據(jù)庫(kù)獲取桔梗有效成分，以生物利用度gt;30%和類(lèi)藥性gt;0.18作為條件篩選作用靶點(diǎn)，并利用UniProt（https：//www.uniprot.org/）數(shù)據(jù)庫(kù)將桔梗作用靶點(diǎn)名稱(chēng)標(biāo)準(zhǔn)化。

1.2.2" 肺炎相關(guān)靶點(diǎn)篩選" 以“pneumonia”為關(guān)鍵詞，在GeneCards（https：//www.genecards.org/）和OMIM（https：//omim.org/）數(shù)據(jù)庫(kù)中檢索肺炎疾病靶點(diǎn)，合并2個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)的肺炎靶點(diǎn)并刪除重復(fù)值，以獲得肺炎疾病靶點(diǎn)。

1.2.3" 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析" （1）通過(guò)在線繪制韋恩圖網(wǎng)站繪制桔梗作用靶點(diǎn)和肺炎疾病靶點(diǎn)的韋恩圖，并取交集。（2）將關(guān)鍵靶點(diǎn)輸入STRING數(shù)據(jù)庫(kù)，并且使用Cytoscape 3.8.0獲取桔梗與肺炎交集靶點(diǎn)的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（protein-protein interaction， PPI）網(wǎng)絡(luò)及核心靶點(diǎn)。（3）使用Cytoscape 3.8.0繪制“藥物-成分-靶點(diǎn)-疾病”網(wǎng)絡(luò)圖。（4）使用Metascape數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//metascape.org/）對(duì)交集靶點(diǎn)進(jìn)行GO富集分析和KEGG富集分析。

1.3" 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

1.3.1" 主要實(shí)驗(yàn)儀器和試劑" 臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)（型號(hào)：ST8R，美國(guó)Thermo Fisher公司）;石蠟切片機(jī)（型號(hào)：02387，德國(guó)徠卡）;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（型號(hào)：SY-5000，上海亞榮生化儀器廠）;真空冷凍干燥機(jī)（型號(hào)：CS110-4，丹麥 Scanlaf 公司）。

白細(xì)胞介素（interleukin， IL）-1β和IL-6 ELISA檢測(cè)試劑盒（武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司，批號(hào)：CV01NVZX4238、CV03DJF09553）。

1.3.2" 桔梗水提液的制備" 將來(lái)源于中國(guó)內(nèi)蒙赤峰的新鮮桔梗根用去離子水洗滌干凈，切成小塊，用適量預(yù)冷PBS在慢速榨汁機(jī)中低溫充分研磨，得到新鮮的桔梗汁。于2 000×g，4 ℃條件下離心20 min，棄去殘?jiān)?收集上清液，置于新的圓底燒瓶中，使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進(jìn)行蒸發(fā)濃縮;收集濃縮后的桔梗鮮品水提物于-80 ℃保存。根據(jù)體表面積換算公式，桔梗組小鼠給藥劑量為0.2 g·kg-1。

1.3.3" 脂多糖（lipopolysaccharide， LPS）誘導(dǎo)急性肺炎模型" 將15只C57BL/6J雄性小鼠隨機(jī)分為正常組、LPS組和桔梗組3組，桔梗組在LPS構(gòu)建模型前7天開(kāi)始灌胃給藥桔梗水提液，每天灌胃1次，連續(xù)灌胃7 d，正常組和LPS組僅給予純水，除正常組外，其余兩組均使用LPS（5 mg·kg-1）滴鼻構(gòu)建急性肺炎模型，造模24 h后處理動(dòng)物收集樣本。本研究動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)為：SCXK（湘）2019-0004，所有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)均通過(guò)湖南中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)（批準(zhǔn)號(hào)：SLBH-202307190001）。

1.3.4" HE染色法觀察各組小鼠肺組織病理學(xué)改變

將小鼠組織樣本用4%多聚甲醛固定，按常規(guī)步驟制備石蠟包埋切片，二甲苯脫蠟、乙醇梯度脫水后，進(jìn)行染色，再常規(guī)脫水、透明、樹(shù)脂封片，于光學(xué)顯微鏡下觀察各組小鼠肺組織的病理學(xué)變化。

1.3.5" ELISA檢測(cè)各組小鼠血清中炎性細(xì)胞因子IL-1β和IL-6的含量" 處理動(dòng)物收集血清后，根據(jù)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，檢測(cè)各組小鼠血清中IL-1β和IL-6的含量，酶標(biāo)儀450 nm波長(zhǎng)處讀取數(shù)值，計(jì)算各組血清中IL-1β和IL-6的濃度。

1.3.6" 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析" 計(jì)量資料以“x±s”表示，對(duì)樣本先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，方差齊時(shí)，用One-Way ANOVA檢驗(yàn)，并用LSD法進(jìn)行組間的多重比較;方差不齊時(shí)，用非參數(shù)秩和檢驗(yàn)，先用Kruskal-Wallis H test比較總的差異，再用Mann-Whitney U進(jìn)行兩組之間的比較。

2 結(jié)果

2.1" 數(shù)據(jù)挖掘結(jié)果

2.1.1" 高頻藥物統(tǒng)計(jì)結(jié)果" 在納入的1 811個(gè)方劑中，共有484種中藥，累計(jì)出現(xiàn)頻數(shù)22 155次。其中，除去桔梗外，有14味中藥的頻次較高（≥300次），累計(jì)出現(xiàn)頻次為6 883次，占總頻次的31.06%。詳見(jiàn)表1。

2.1.2" 中藥分類(lèi)統(tǒng)計(jì)結(jié)果" 在對(duì)收載藥物進(jìn)行分析時(shí)，發(fā)現(xiàn)納入方劑的藥物共有20 181種，可以參考《中藥學(xué)》進(jìn)行明確分類(lèi)。統(tǒng)計(jì)分析顯示，方劑中涵蓋了21種中藥類(lèi)別，其中9個(gè)高頻類(lèi)別（gt;500次）的藥物使用頻次共計(jì)18 094次，占總使用頻次的89.66%。詳見(jiàn)表2。

2.1.3" 性味歸經(jīng)統(tǒng)計(jì)結(jié)果" 參照《中藥學(xué)》《中國(guó)藥典》等錄入含桔梗方劑所涉及的藥物性味歸經(jīng)信息，如果以上參考來(lái)源間有分歧，則取其共同性味歸經(jīng)錄入，不能確定藥物剔除，利用Excel進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。詳見(jiàn)表3—5。

2.1.4" 關(guān)聯(lián)規(guī)則分析結(jié)果" 利用IBM SPSS Modeler 18.0進(jìn)行中藥配伍的關(guān)聯(lián)分析，共得到78組藥物組合，涉及32味藥物，其中包括35組藥對(duì)組合、35組3味藥組合和8組4味藥組合。如圖1a所示，對(duì)所涉及32味藥物進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析網(wǎng)狀圖可視化。并對(duì)前10味高頻藥物與桔梗關(guān)聯(lián)分析的支持度和置信度結(jié)果進(jìn)行氣泡圖的展示（圖1b）。詳見(jiàn)表6—8。

2.1.5" 聚類(lèi)分析結(jié)果" 如圖1c所示，選取含桔梗方劑中出現(xiàn)頻數(shù)gt;300次的高頻藥物進(jìn)行聚類(lèi)分析，得到3組3味藥物組合、1組2味藥物組合、3味單藥。分別是當(dāng)歸-川芎-防風(fēng)、茯苓-人參-白術(shù)、陳皮-半夏-枳殼;黃芩-連翹;生地黃、柴胡、甘草。

2.1.6" 含桔梗方劑主治病證統(tǒng)計(jì)結(jié)果" 采用關(guān)鍵詞映射法，借助Excel中的IF函數(shù)、OR函數(shù)和ISNUMBER函數(shù)對(duì)含桔梗方劑的主治病證進(jìn)行分類(lèi)，最終得到含桔梗方劑各種主治病證共計(jì)3 040個(gè)，其中以肺系病證最多，其次是氣血津液病證和脾胃系病證。詳見(jiàn)表9。

2.1.7" 桔梗高頻配伍藥對(duì)與對(duì)應(yīng)中藥分類(lèi)以及歸經(jīng)的關(guān)聯(lián)分析結(jié)果" 篩選與桔梗配伍頻次較高的甘草、茯苓、黃芩等共12味中藥;篩選與桔梗配伍頻次較高的中藥分類(lèi)共14種;篩選與桔梗配伍頻次較高的中藥歸經(jīng)共10個(gè)。運(yùn)用Cytoscape繪制桔梗高頻配伍藥對(duì)-分類(lèi)-歸經(jīng)的關(guān)聯(lián)網(wǎng)絡(luò)圖，結(jié)果見(jiàn)圖2。

2.1.8" 主治肺系病證含桔梗方劑統(tǒng)計(jì)結(jié)果" 因含桔梗方劑的主治病癥分類(lèi)中肺系疾病排名第一，重新對(duì)含桔梗方劑治療肺系疾病進(jìn)行數(shù)據(jù)挖掘分析。如表6—8所示，利用IBM SPSS Modeler 18.0對(duì)主治肺系病證的含桔梗方劑進(jìn)行關(guān)聯(lián)規(guī)則分析，共得到13組藥物組合，其中藥對(duì)組合9組、3味藥組合4組。如圖3a—3b所示，對(duì)所涉及10味藥物進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析網(wǎng)狀圖可視化及其與桔梗關(guān)聯(lián)分析的支持度和置信度結(jié)果進(jìn)行氣泡圖的展示。

2.1.9" 主治肺系病證含桔梗方劑聚類(lèi)分析結(jié)果" 選取主治肺系病證含桔梗方劑中常用藥物組合當(dāng)中所涉及的藥物進(jìn)行聚類(lèi)分析，得到3味單藥、2組3味藥物組合，分別是甘草、人參、黃芩;陳皮-半夏-茯苓、杏仁-桑白皮-貝母。具體結(jié)果見(jiàn)圖3c。主治肺系病證含桔梗方劑的聚類(lèi)結(jié)果中多為治療不同類(lèi)型的肺炎[8-10]，故后續(xù)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)靶點(diǎn)預(yù)測(cè)以“肺炎”為關(guān)鍵詞進(jìn)行預(yù)測(cè)。

2.2" 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的結(jié)果

2.2.1" 桔梗治療肺炎關(guān)鍵靶點(diǎn)" 共獲取桔梗作用靶點(diǎn)17個(gè)，肺炎疾病靶點(diǎn)5 384個(gè)。通過(guò)韋恩圖在線繪制網(wǎng)站繪制桔梗作用靶點(diǎn)和肺炎疾病靶點(diǎn)的韋恩圖，獲得桔梗治療肺炎關(guān)鍵靶點(diǎn)16個(gè)。詳見(jiàn)圖4a。

2.2.2" 桔梗治療肺炎關(guān)鍵靶點(diǎn)PPI分析" 如圖4b所示，將關(guān)鍵靶點(diǎn)輸入STRING數(shù)據(jù)庫(kù)，獲取桔梗與肺炎交集靶點(diǎn)PPI網(wǎng)絡(luò)。

2.2.3" 藥物-成分-靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò)圖" 如圖4c所示，將桔梗作用成分、靶點(diǎn)以及疾病靶點(diǎn)導(dǎo)入Cytoscape 3.8.0，構(gòu)建“藥物-成分-靶點(diǎn)-疾病”可視化網(wǎng)絡(luò)圖。

2.2.4" GO富集分析與KEGG通路富集分析" GO分析結(jié)果顯示，分子功能（molecular function， MF）分析得到結(jié)果74條，生物過(guò)程（biological process， BP）分析得到結(jié)果1 121條結(jié)果，細(xì)胞成分（cellular component， CC）得到結(jié)果18條。分別選取基因富集數(shù)目前10進(jìn)行圖片展示（圖5a）。如圖5b所示，對(duì)16個(gè)關(guān)鍵靶點(diǎn)進(jìn)行KEGG通路富集分析，共富集到15條信號(hào)通路。

2.3" 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

2.3.1" HE染色觀察各組小鼠肺組織病理學(xué)改變" 正常組小鼠肺組織結(jié)構(gòu)完整清晰，未見(jiàn)充血水腫和炎性浸潤(rùn);LPS組小鼠肺組織結(jié)構(gòu)紊亂，部分肺泡間隔破裂，視野內(nèi)可見(jiàn)炎性浸潤(rùn)和滲出;桔梗組小鼠給藥治療后肺組織損傷程度減輕，仍可見(jiàn)部分肺組織破損和炎性浸潤(rùn)。詳見(jiàn)圖6。

2.3.2" 各組小鼠血清炎性細(xì)胞因子IL-1β和IL-6情況" 與正常組相比，LPS組和桔梗組小鼠血清中IL-1β和IL-6含量顯著增加（Plt;0.05），與LPS組相比，桔梗組小鼠血清中IL-1β和IL-6含量顯著降低（Plt;0.05）。詳見(jiàn)圖7。

4 討論

桔梗作為“肺經(jīng)引藥”，其性苦、辛，歸肺經(jīng)，主要用于宣肺祛痰，緩解咽痛及聲音嘶啞，治療咳嗽多痰、肺癰和吐膿等癥狀[11]。本研究采用數(shù)據(jù)挖掘、網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)相結(jié)合的方法，探討含桔梗方劑的組方配伍規(guī)律、用藥特點(diǎn)及療效，旨在為臨床運(yùn)用桔梗治療疾病提供理論基礎(chǔ)。

通過(guò)藥物頻數(shù)統(tǒng)計(jì)和關(guān)聯(lián)規(guī)則分析，發(fā)現(xiàn)桔梗常與甘草、茯苓、當(dāng)歸、黃芩、陳皮、防風(fēng)、人參等藥物配伍。桔梗與甘草的配伍最為常見(jiàn)，最早見(jiàn)于《傷寒論》，現(xiàn)代藥理研究也證實(shí)了其協(xié)同抗炎效應(yīng)[12]。桔梗-茯苓藥對(duì)中，桔梗宣肺助降，茯苓利水消腫，共同治療肺失宣降導(dǎo)致的水腫、小便不利。桔梗常與陳皮等行氣藥、人參等補(bǔ)氣藥相配伍以調(diào)氣，而桔梗-當(dāng)歸藥對(duì)則補(bǔ)血活血，助心行血。研究表明，活血化瘀之法可用于治療肺纖維化等肺系疾病[13]。桔梗-黃芩藥對(duì)中，黃芩清熱燥濕、瀉火解毒，與桔梗配伍治療咳喘等肺熱證。桔梗與防風(fēng)相配伍，主治外感導(dǎo)致的咳喘。此外，桔梗與苦杏仁、桑白皮的組合雖未在核心藥物組合中出現(xiàn)，但在治療肺系疾病中有所應(yīng)用。桔梗具有宣肺祛痰作用，杏仁止咳平喘，兩者結(jié)合發(fā)揮顯著效果?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究也表明，苦杏仁與桔梗的配伍使用在止咳、祛痰、平喘方面的效果優(yōu)于單獨(dú)使用[14]。桔梗與桑白皮的組合，桑白皮歸肺經(jīng)，具有瀉肺平喘的功效，與桔梗配伍可以清肺降氣、化痰止咳，如在桑白皮湯中用于治療痰熱郁肺證[15]。除常配伍的中藥類(lèi)別外，桔梗常配伍的中藥藥性包括溫、寒、平，這與桔梗性平的特性相吻合。

研究發(fā)現(xiàn)，桔梗中的金合歡素、順二氫槲皮素、木犀草素等活性成分通過(guò)作用于多個(gè)靶點(diǎn)，調(diào)控丙型肝炎、光動(dòng)力療法誘導(dǎo)的激活蛋白-1存活信號(hào)等通路，抑制疾病癥狀[16]。金合歡素具有抗炎作用[17]，木犀草素能降低髓體過(guò)氧化物酶（myeloperoxidase， MPO）活性，抑制腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor-α， TNF-α）、IL-1β和IL-6等蛋白的表達(dá)，同時(shí)提高IL-4和IL-10水平，減輕炎癥反應(yīng)[18]。桔梗皂苷D和木犀草素通過(guò)調(diào)節(jié)IL-17信號(hào)通路和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor， VEGF）介導(dǎo)的信號(hào)通路，減少流感病毒感染后肺上皮細(xì)胞中IL-6、TNF-α等炎性因子的分泌和病毒載量，緩解炎癥損傷[19-21]。RELA原癌基因在病毒感染后被激活，誘導(dǎo)β干擾素以及其他免疫介質(zhì)的編碼，抑制病毒繁殖，發(fā)揮抗病毒感染的作用[22]，同時(shí)通過(guò)調(diào)控核因子κB（nuclear factor kappa B， NF-κB）的轉(zhuǎn)錄激活調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)[23]。在LPS誘導(dǎo)的肺損傷小鼠模型中，腫瘤抑制因子53（tumor suppressor gene 53， p53）的表達(dá)水平升高[24]，這些研究成果支持了本研究中成分和靶點(diǎn)的可靠性。此外，本研究的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)也證實(shí)，桔梗能顯著降低LPS誘導(dǎo)的血清中IL-1β和IL-6的分泌，緩解肺組織的炎性損傷。

綜上所述，本研究多學(xué)科交叉進(jìn)行，從不同角度深入探討含桔梗方劑的用藥規(guī)律及作用機(jī)制，揭示了桔梗在治療肺系疾病中的配伍規(guī)律和用藥特點(diǎn)，為臨床醫(yī)生提供了用藥參考，以提高治療效果和安全性。同時(shí)，通過(guò)分析桔梗的主要活性成分及其作用靶點(diǎn)，為開(kāi)發(fā)以桔梗為主要成分的新藥提供了理論基礎(chǔ)和研究方向。研究提供的桔梗與其他藥物的配伍組合有助于根據(jù)患者具體病情設(shè)計(jì)個(gè)體化治療方案。但本研究尚需進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)探討分子機(jī)制，進(jìn)行長(zhǎng)期毒性和安全性評(píng)估以及臨床試驗(yàn)以驗(yàn)證其療效和安全性，并擴(kuò)大研究范圍以探索桔梗在其他疾病治療中的潛力，優(yōu)化其給藥途徑和劑型以提高治療效果。

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〔收稿日期〕2024-10-06

〔基金項(xiàng)目〕國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（81973670）;湖南省教育廳優(yōu)秀青年項(xiàng)目（23B0379）;湖南省中醫(yī)藥科研課題重點(diǎn)項(xiàng)目（A2024010）;長(zhǎng)沙市自然科學(xué)基金項(xiàng)目（kq2402183）。

〔通信作者〕*李" 玲，女，博士，教授，碩士研究生導(dǎo)師，E-mail：liling1049@hnucm.edu.cn;喻" 嶸，女，博士，教授，博士研究生導(dǎo)師，E-mail： yurong8072@qq.com。