有機肥和微生物菌劑配施對‘赤霞珠’葡萄根際土壤細(xì)菌群落多樣性的影響

摘 要 為了研究有機肥與微生物菌劑配施對‘赤霞珠’葡萄根際土壤性質(zhì)及細(xì)菌群落的影響，并提出高效可行的有機肥配施模式。以7 a生‘赤霞珠’葡萄為研究對象進(jìn)行田間試驗，設(shè)置7個施肥處理：CK（傳統(tǒng)施肥）、A1（蚯蚓糞+未腐熟枝條+100倍光合細(xì)菌菌劑）、A2（蚯蚓糞+未腐熟枝條+200倍光合細(xì)菌菌劑）、A3（蚯蚓糞+未腐熟枝條+300倍光合細(xì)菌菌劑）、B1（蚯蚓糞+腐熟枝條+100倍光合細(xì)菌菌劑）、B2（蚯蚓糞+腐熟枝條+200倍光合細(xì)菌菌劑）、B3（蚯蚓糞+腐熟枝條+300倍光合細(xì)菌菌劑）。結(jié)果表明：與CK處理比較，B2處理顯著降低土壤pH，提高土壤有機質(zhì)、堿解氮、速效鉀、全氮含量。A2處理顯著提高Chao1 87.60%，且其OTU數(shù)量最多，說明A2處理可顯著提高根際細(xì)菌群落豐富度。與CK比較，B2處理改變根際土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)，顯著增加變形菌門、放線菌門和擬桿菌門的相對豐度，降低厚壁菌門的相對豐度。與施用未腐熟枝條A2比較，施用腐熟枝條B2處理顯著增加擬桿菌門的相對豐度。相關(guān)分析結(jié)果表明，土壤中速效鉀、堿解氮、全氮、有機質(zhì)的含量與細(xì)菌群落優(yōu)勢菌群存在顯著正相關(guān)關(guān)系。因此，B2處理為最佳施肥配比方案，其次為A2處理。

關(guān)鍵詞 蚯蚓糞；微生物菌劑；葡萄園根際土壤；土壤養(yǎng)分；細(xì)菌群落

葡萄（Vitis vinifera" L.）是一種多年生藤本植物，由于其適應(yīng)性強，廣泛分布在世界各地[1]，是常見的一類經(jīng)濟(jì)作物，以葡萄為原料加工生產(chǎn)的產(chǎn)品在全球市場中十分常見，發(fā)展前景廣闊。近年來，越來越多的人注重養(yǎng)生和保健，對葡萄酒的熱愛越來越強[2]。寧夏賀蘭山東麓葡萄酒產(chǎn)區(qū)位于中國中溫帶干旱氣候區(qū)，具有典型的大陸性氣候特征，降水稀少，光照充足，晝夜溫差大，是重要的葡萄酒地理標(biāo)志保護(hù)產(chǎn)區(qū)，被譽為釀酒葡萄的‘黃金生長地帶’[3]。然而，該區(qū)土壤富含砂礫、有機質(zhì)含量偏低，氮磷鉀等養(yǎng)分供給不足，是制約該區(qū)葡萄生產(chǎn)的重要因素。

與化肥相比，有機肥料對土壤中氮、磷、鉀等土壤養(yǎng)分的提高作用優(yōu)于化肥[4]。施用有機肥可以通過調(diào)節(jié)微生物群落，增強農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)中多種土壤功能對生物多樣性喪失的適應(yīng)性與恢復(fù)能力[5]。土壤細(xì)菌是影響土壤碳動態(tài)、養(yǎng)分循環(huán)和植物生長的重要因素[6]。已有研究指出，施用微生物菌劑后土壤菌群發(fā)生了明顯變化，利用其特殊功能或與土壤中的菌群共同作用，進(jìn)而影響根際的微生物活性和植株的生長[7-8]。劉璐等[9]研究發(fā)現(xiàn)，施用膠凍樣芽孢桿菌0.5 kg能更好地增加土壤養(yǎng)分釋放，增強土壤生物活性，從而促進(jìn)葡萄更好地生長和土壤性質(zhì)的提升，實現(xiàn)土壤的可持續(xù)利用。說明微生物菌劑可提高土壤養(yǎng)分供應(yīng)能力，提高土壤肥力。同時，Wang等[10]將豬糞與小麥秸稈混合制成有機肥進(jìn)行堆肥試驗，在處理中加入了微生物菌劑，對堆肥過程中的細(xì)菌群落特征進(jìn)行分析，結(jié)果表明在門水平上，變形桿菌和綠彎曲菌的相對豐度較高，這表明在堆肥過程中，微生物菌肥可顯著改變其理化性質(zhì)和細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)。

針對寧夏賀蘭山東麓長期大量使用化肥造成土壤板結(jié)，有機質(zhì)含量低，土壤養(yǎng)分失衡以及細(xì)菌群落多樣性降低等問題，本研究在寧夏銀川市君祥酒莊的葡萄園中施用有機肥（蚯蚓糞+葡萄枝條渣）配施微生物菌劑，通過高通量測序?qū)ΩH土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)進(jìn)行研究，對土壤物理化學(xué)性質(zhì)、菌群結(jié)構(gòu)以及有機肥配施微生物菌劑的關(guān)系進(jìn)行分析，提出高效可行的配施方案，以期為寧夏賀蘭山東麓葡萄園合理施肥提供重要的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗地概況

試驗地點位于寧夏銀川市君祥酒莊，海拔 "1 010～1 150 m。試驗樣地年平均溫度≥10" ℃，有效積溫1 534.9 ℃，7-9月有效積溫961.6 ℃，年降水量為193.4 mm，全年日照達(dá)3 000 h。地形平坦，土壤侵蝕度輕，土壤為淡灰鈣土，土質(zhì)為沙壤土，土壤呈堿性。

1.2 試驗設(shè)計

試驗于2021年4月至2022年10月在寧夏銀川市君祥酒莊葡萄園進(jìn)行，株行距為2.5 m×0.8 m，選取7個小區(qū)，總面積為60 m2，無隔離行，南北走向，“廠”字型架勢栽培。供試品種為 "7 a生的‘赤霞珠’葡萄；有機肥為蚯蚓糞（含有機質(zhì)26.6%，N 1.69%，P2O5 1.09%，K2O" "3.13%）、腐熟（含有機質(zhì)33.1%，N 1.0%，P" "1.0%，K" "1.3%）/未腐熟葡萄枝條（直接將田間采集的葡萄枝條粉碎后施入），蚯蚓糞由寧夏萬輝生物環(huán)?？萍加邢薰旧a(chǎn)，腐熟葡萄枝條渣由寧夏中青生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)；微生物菌劑由山西果粟康生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)，功能菌為光合細(xì)菌菌劑，沼澤紅假單細(xì)胞≥2.0。

試驗采用雙因素隨機區(qū)組設(shè)計，共設(shè)置7種處理，每個處理設(shè)置3 個重復(fù)，共24 個處理。于2021年4月6日采用穴施方式，施入蚯蚓糞和葡萄枝條各5 kg，光合細(xì)菌菌劑4.5 mL，稀釋倍數(shù)為100倍、200倍、300倍，分別于5月31日、6月15日和6月30日進(jìn)行葉面噴施。各處理的施肥方案如表1所示。施肥后每隔10～15 d澆1次水，后期不進(jìn)行任何追肥措施，11月埋土。

1.3 采樣與分析

1.3.1 土樣采集 2022年10月1日，收集收獲期距離植株10～20 cm的根際土壤，首先將表層5 cm左右土壤碎石及枯落葉清除，通過五點取樣法，用滅菌的取土器挖取距葡萄根際約0～20 cm的土壤，輕輕抖動以除去較大的土塊，混合均勻后利用四分法使每個處理保留1 kg土壤。將采集的土壤其中一份放入無菌自封袋中，將其風(fēng)干[11]，用1 mm篩子過篩，用于測定土壤養(yǎng)分指標(biāo)。另一份土樣迅速通過1 mm篩子后，加入到5 mL凍存管中，轉(zhuǎn)移至液氮中暫時保存，隨后將樣品轉(zhuǎn)移到-80 ℃冰箱中，利用高通量測序測定細(xì)菌群落多樣性。

1.3.2 土壤的理化性質(zhì)分析 土壤電導(dǎo)率（EC）和pH分別用電導(dǎo)率儀和pH計測定。土壤速效鉀檢測利用火焰光度法，有效磷檢測利用NaHCO3鉬銻抗比色法，全磷檢測通過HClO4-H2SO4法，堿解氮和全氮含量通過凱氏定氮法測定，有機質(zhì)檢測通過重鉻酸鉀容量法-外加熱法。以上指標(biāo)的檢測方法參照鮑士旦《土壤農(nóng)化分析》[12]。

1.3.3 土壤DNA提取、PCR擴增和高通量基因測序分析 每個樣品取0.5 g土樣，利用SDS或CTAB法提取樣品基因組DNA，通過瓊脂糖凝膠電泳對DNA的濃度及純度進(jìn)行檢測，取一定量樣品，加入無菌水將濃度稀釋到1 ng/μL[13]。

以稀釋后的基因組DNA為模板，基于測序區(qū)域的序列，使用帶Barcode的特異引物，New England Biolabs公司的Phusion High-Fidelity PCR Master Mix with GC Buffer。高保真和高效的酶保證PCR的準(zhǔn)確性與效率。前引物序列為5′-GGAAGTAAAAGTCGTAACAAGG-3′，后引物序列為5′-GCTGCGTTCTTCATCGATGC-3′。

將擴增產(chǎn)物進(jìn)行等濃度混樣，混合均勻后通過2%瓊脂糖凝膠電泳對擴增產(chǎn)物進(jìn)行檢測，Thermo Scientific公司的GeneJET膠回收試劑盒對產(chǎn)物進(jìn)行回收[14]。

文庫構(gòu)建采用New England Biolabs公司的Neb Next UltraTMDNA Library Prep Kit for Illumina建庫試劑盒，利用Qubit進(jìn)行檢測和定量，再利用Miseq進(jìn)行上機測序。

1.3.4 統(tǒng)計與分析 將試驗數(shù)據(jù)輸入Excel 2022，利用SPSS 23.0軟件分析土壤理化因子差異、細(xì)菌多樣性指數(shù)和組間顯著性。采用Mothur（version v.1.30）軟件進(jìn)行Alpha多樣性分析。利用Canoco 5.0做冗余分析（RDA）以及主成分分析（PCA）。Pearson分析環(huán)境因素與細(xì)菌群落之間的相關(guān)性。利用Origin 2022軟件繪制細(xì)菌群落稀疏曲線、花瓣圖、門水平相對豐度柱狀圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同施肥處理對土壤理化性質(zhì)的影響

由表2 可知，不同施肥處理顯著影響土壤理化性質(zhì)（Plt;0.05）。與CK相比，各處理組土壤EC值、有機質(zhì)含量提高，其中有機質(zhì)含量最高的是B1、B2，提高18.83%、13.8%，A2、B2土壤的EC值最高。B1、B2處理土壤的速效鉀含量提高，其他處理均降低。與CK相比，B2、B3、A2處理土壤pH降低，其他處理均有所提高，B1、A1土壤pH最高，分別提高2.37%、1.18%。與CK相比，除A1處理外，其他處理的堿解氮含量均有所提高，表現(xiàn)為B3＞B1＞B2＞A2＞A3＞CK＞A1，A1、A3土壤有效磷含量降低，其中以A3最低，為14.86 mg/kg。與CK相比，A3與CK土壤的全氮含量相等，為0.49 g/kg，B1的全氮含量降低20.41%。A3、B2顯著增加全磷含量，其他各處理均降低。

相比CK，B2處理下EC、有機質(zhì)、堿解氮、有效磷、速效鉀、全氮含量顯著提高27.37%、 "13.8%、9.57%、22.23%、23.10%、24.62%。B2處理降低pH，其次為A2處理。除速效鉀、全磷含量、pH降低外，其他理化性質(zhì)都有所提高。

2.2 不同施肥處理對土壤細(xì)菌多樣性的影響

本研究使用分類操作進(jìn)行序列優(yōu)化。稀有曲線分析表明，每條曲線最終接近平坦，表明該測序的樣本量充足，測序數(shù)據(jù)合理（圖1），可進(jìn)行下一步分析。聚類分析獲得18 562個OTU。7個處理共同擁有2 434個細(xì)菌OTU，分別為172、230、169、192、231、303、220（圖2）。各處理OTU數(shù)量始終高于CK，表明施用有機肥配施菌劑增加OTU數(shù)量。其中A2處理的OTU數(shù)量最多，為303個，B2處理的OTU數(shù)量最少。表明A2處理葡萄根際土壤的細(xì)菌類群最豐富。

對不同處理土壤細(xì)菌群落進(jìn)行α多樣性指數(shù)計算，結(jié)果如表3所示。所有樣本的Goods coverage估計值均大于0.998，表明這些數(shù)據(jù)較好地代表了樣本中微生物的真實情況。對于細(xì)菌群落，與CK處理相比，各處理土層中的Chao 1指數(shù)均顯著增加，其中A2處理顯著增加87.60% "（Plt;0.05），該土壤中含有的物種數(shù)目（Observed-species）也最多，說明A2處理可以提高土壤細(xì)菌群落豐富性。Shannon指數(shù)反映物種的多樣性，與CK相比，A2處理的Shannon指數(shù)最高，A1最低，其他處理均高于CK。說明A2處理可顯著提高根際細(xì)菌群落多樣性指數(shù)與豐富度。

2.3 不同施肥處理對土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)和組成的影響

圖3表明細(xì)菌在門水平上的相對豐度。放線菌門（Actinobacteria）、擬桿菌門（Bacteroidota）、厚壁菌門（Firmicutes）、變形菌門（Proteobacteria）是處理的優(yōu)勢細(xì)菌門，占總相對豐度的" "34.05%～42.64%。與CK相比，不同施肥處理不僅改變了主要細(xì)菌門的相對豐度，而且改變了主要細(xì)菌門的組成。在0～20 cm深度土層中，CK中變形菌門（Proteobacteria）是優(yōu)勢細(xì)菌門，與CK相比，A2、B2處理的變形菌門相對豐度最高，分別增加24.7%和24.0%，B3、A3的相對豐度最低。相反，與CK相比，B2、A1、A2降低厚壁菌門（Firmicutes）的相對豐度。擬桿菌門（Bacteroidota）的相對豐度中，施用腐熟枝條高于未腐熟枝條，表現(xiàn)為T3＞B2＞B1＞CK＞A2＞A1＞A3。除A2、A3外，其他各處理放線菌門（Actinobacteriota）的相對豐度均顯著提高。結(jié)果表明：各處理中細(xì)菌群落相對豐度隨不同施肥處理而變化，腐熟枝條和微生物菌劑的添加可以改變葡萄園中土壤優(yōu)勢細(xì)菌群落的相對豐度。

通過主坐標(biāo)分析（PCA）法，分析根際土壤菌群結(jié)構(gòu)的變化。根據(jù)圖4得知，第一、二主坐標(biāo)成分的總貢獻(xiàn)率分別為35.96%、38.76%和 "36.23%。樣本的處理不同，在PC軸上的分布也不同，施用未腐熟枝條處理組（A1、A2、A3）細(xì)菌群落與施用腐熟枝條處理組（B1、B2、B3）細(xì)菌群落明顯分布在不同象限，A1和B1顯著分離（圖4-a），A2和B2顯著分離（圖4-b），A3和B3顯著分離（圖4-c），說明施用未腐熟枝條處理組與施用腐熟枝條處理組土壤的細(xì)菌群落數(shù)量差異明顯。從各處理的細(xì)菌群落分布來看，CK細(xì)菌的群落其他處理有較大差異，B2處理細(xì)菌的群落聚集在一起，分布在第三坐標(biāo)軸，含有較高的第一主成分，結(jié)果表明，施用腐熟枝條和蚯蚓糞+200倍菌劑處理能顯著改變土壤中細(xì)菌的群落組成。

2.4 不同施肥處理土壤理化性質(zhì)與細(xì)菌多樣的相關(guān)性

由圖5可知，第一排序軸和第二排序軸分別解釋細(xì)菌群落變化的19.47%和16.96%，兩個軸總共解釋36.43%。優(yōu)勢細(xì)菌群落的相對豐度主要與土壤中AK、TP、AN、OM含量顯著相關(guān) "（P＜0.05），其中AK、AN、OM含量與土壤中放線菌門、擬桿菌門的相對豐度正相關(guān)，與酸桿菌門、疣微菌門、綠彎菌門的相對豐度負(fù)相關(guān)。相反，TP與厚壁菌門、酸桿菌門、疣微菌門、綠彎菌門的相對豐度正相關(guān)。

土壤中AK、AN、TP、OM的積累會提高土壤細(xì)菌群落的豐富度。

2.5 不同施肥處理對根際微生物群落結(jié)構(gòu)的影響

使用LEfSe分析不同處理根際土壤細(xì)菌群落中主要差異物種（P＜0.05，LDA＞3）。由圖6可知，在門水平上，酸桿菌門（Acidobacteriota）、放線菌門（Actinobacteria）的相對豐度分別在A2、B3處理中顯著增加；在綱水平上，Polyangia、鄰里菌綱（Vicinamibacteria）、念珠菌綱（Saccharimonadia）相對豐度分別在CK、A3、B2處理中顯著增加；在目水平上，嗜熱厭氧桿菌目（Thermoanaerobaculales）、芽單胞菌目（Gemmatimonadales）、丙酸桿菌目（Saccharimonadales）、微球菌目（Micrococcales）的相對豐度分別在A1、A2、B2、B3處理中顯著增加；在科水平上，嗜熱厭氧桿菌科（Thermoanaerobaculaceae）、芽單胞菌科（Gemmatimonadaceae）的相對豐度分別在A1、A2處理中顯著增加；在屬水平上，嗜熱厭氧菌屬（Thermoanaerobaculales）、擬桿菌屬（Bacteroidales）的相對豐度分別在A1、B1處理中顯著增加。

2.6 土壤理化性質(zhì)與土壤細(xì)菌群落Pearson相關(guān)性分析

通過Pearson相關(guān)性分析不同處理下環(huán)境因子與細(xì)菌群落的相關(guān)性，得到兩者之間的相關(guān)性系數(shù)。如表4所示：pH與全磷與厚壁菌門活性呈正顯著相關(guān)，EC值與全氮厚壁菌門呈負(fù)顯著相關(guān)，速效鉀與疣微菌門活性呈負(fù)顯著相關(guān)，全氮與放線菌門、擬桿菌門呈正顯著相關(guān)，各處理土壤速效鉀、堿解氮、全氮、全磷、pH和EC值是影響土壤細(xì)菌微生物種豐富度及細(xì)菌優(yōu)勢菌群的土壤養(yǎng)分因子。

3 討" 論

3.1 土壤理化性質(zhì)對不同施肥處理的響應(yīng)

研究表明，長時間施用無機肥會造成土壤pH下降，從而造成土壤酸化。用有機肥代替無機肥，能夠提高深層土壤的養(yǎng)分，緩解由于單一施用無機肥而造成的土壤酸化趨勢，使土壤pH處于持續(xù)穩(wěn)定狀態(tài)[15]。李磊等[16]研究發(fā)現(xiàn)，在以有機肥代替化肥的情況下，土壤pH與全鹽含量較常規(guī)施肥有所降低，土壤有機質(zhì)則顯著提高。對鹽堿土壤的改良和利用具有很好的效果。于丹丹等[17]研究發(fā)現(xiàn)施用園林廢棄腐熟物＋生物有機肥，土壤營養(yǎng)水平明顯提升，特別是全氮和有機質(zhì)含量，這與本研究中施用腐熟枝條和蚯蚓糞處理結(jié)果一致。另外，與對照相比，微生物菌劑的添加顯著提高土壤有效磷、堿解氮、速效鉀和有機質(zhì)含量，與萬水霞等[18]研究結(jié)果一致。

本試驗結(jié)果表明，加入有機肥結(jié)合微生物菌劑能夠改善酸化的土壤，土壤有機質(zhì)含量和土壤堿解氮水平得以提高，為葡萄樹體生長提供良好的生長環(huán)境，因此，在一定程度上可以減輕由于施用肥料而引起的土壤理化性質(zhì)的變化，以及土壤營養(yǎng)元素的損失。

3.2 土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)及多樣性對不同施肥處理的響應(yīng)

已有研究表明，施入無機肥料降低了細(xì)菌的多樣性和豐度，而施用有機肥料增加了土壤微生物群落的生物多樣性[19-20]。此外，優(yōu)良的微生物菌劑可以用作外源功能微生物，從而改變土壤中原有的微生物群落的組成以及優(yōu)勢種群的數(shù)量[21-22]。通過高通量測序研究‘赤霞珠’葡萄根際的細(xì)菌群落組成和多樣性，在本研究中發(fā)現(xiàn)，施用微生物菌劑對根際土壤菌群OTU數(shù)量增加有明顯的促進(jìn)作用，這與楊楠等[23]研究結(jié)果一致。同時，土壤菌群觀測物種數(shù)明顯增加，A1、B2處理Shannon指數(shù)降低，B2處理Chao 1也顯著降低，其他處理均顯著提高。另外，菌劑施用量也會影響細(xì)菌群落多樣性，本試驗中施用300倍微生物菌劑的細(xì)菌群落多樣性低于施用200倍微生物菌劑的細(xì)菌群落多樣性，這可能是由于過量施用微生物菌劑出現(xiàn)抑制的效果，這與李金花等[24]的研究結(jié)果一致。

研究發(fā)現(xiàn)，變形菌門、放線菌門、厚壁菌門在有機物質(zhì)的礦化和養(yǎng)分的循環(huán)過程中起到了關(guān)鍵作用[25]。在本研究中，所有處理土壤的優(yōu)勢細(xì)菌門是變形菌門、放線菌門、擬桿菌門、厚壁菌門，與以往的研究結(jié)果一致[26-27]。在本研究中，變形菌門是優(yōu)勢菌群，它們偏好于富營養(yǎng)化的環(huán)境，擬桿菌門在本研究中也是優(yōu)勢種，這一點與之前的研究十分相似[28]，也就是細(xì)菌在空間上分布主要由養(yǎng)分所驅(qū)動[29]。微生物菌劑由于其自身所含的有機質(zhì)和養(yǎng)分含量較高，能促進(jìn)植物根系的分泌物增多，施用微生物菌劑既能為土壤中的微生物提供更多的碳源，又能促進(jìn)土壤中益生菌的增殖。楊芳等[30]施用10 mL/株的稀釋光合細(xì)菌菌劑，定植60 d后，B1處理的細(xì)菌數(shù)明顯高于對照，B2和B3處理的放線菌數(shù)也明顯增加。這表明菌液中的光合細(xì)菌在土壤中一段時間后，可以適應(yīng)土壤環(huán)境，并進(jìn)行良好的生長繁殖，也有可能是菌液中的光合細(xì)菌對土壤中其他細(xì)菌的增加起到了促進(jìn)作用。這一點與本研究是一致的。另外，本研究中施用不同腐熟程度的有機肥處理（腐熟和未腐熟）施用不同比例的菌劑（100、200和300倍）提高了放線菌門、擬桿菌門的占比，整體來看腐熟枝條組＞未腐熟枝條組：B3＞B2＞B1，A3＞A2＞A1。

3.3 土壤細(xì)菌群落與環(huán)境因子的關(guān)系

土壤理化性質(zhì)與細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)密切相關(guān)[31-33]。基于對土壤理化性質(zhì)和土壤細(xì)菌群落（門水平）進(jìn)行的RDA分析，細(xì)菌群落組成的影響因子排序是AK＞AN＞TP＞OM＞TN＞ "EC＞pH＞AP。豐度排名前三的菌門相對豐度均與AK含量呈正相關(guān)，其中放線菌門受AK含量影響最大。豐度值最高的變形菌門的相對豐度和AK、TN、EC、AP含量呈正相關(guān)，與pH呈負(fù)相關(guān)，其中受AK含量的影響最大。其次相對豐度值排名第二的放線菌門和第三的擬桿菌門的相對豐度和AK、AN、TP、OM含量呈正相關(guān)，與pH值呈負(fù)相關(guān)。在本研究中，AK、AN、TP、OM是土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)改變的主要驅(qū)動因子，與田夏瓊[34-35]的研究結(jié)果一致，而與韋月平等[36]、劉婷如等[37]、褚德朋等[38]的研究中，不同施肥處理會提高土壤pH影響細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)，這一結(jié)果與本研究不一致。本研究中，Pearson相關(guān)性分析結(jié)果表明，pH和全磷與厚壁菌門活性呈正顯著相關(guān)，全氮與放線菌門、擬桿菌門呈正顯著相關(guān)，而EC值和全氮與厚壁菌門呈負(fù)顯著相關(guān)。

4 結(jié)" 論

施用一定比例的有機肥結(jié)合微生物菌劑有效改善土壤理化性狀，其中B2（蚯蚓糞+腐熟枝條+200倍光合細(xì)菌菌劑）的效果最好，其次為A2（蚯蚓糞+未腐熟枝條+200倍光合細(xì)菌菌劑），使赤霞珠葡萄園根際土壤pH降低，提高了土壤有機質(zhì)、EC、堿解氮、全氮含量。在生產(chǎn)實踐中，適當(dāng)?shù)木鷦﹦┝考饶鼙ＷC作物的正常生長，又能降低生產(chǎn)成本，為科學(xué)使用微生物菌劑提供了理論依據(jù)。

在土壤優(yōu)勢細(xì)菌群落門水平下，B2（蚯蚓 "糞+腐熟枝條+200倍光合細(xì)菌菌劑）中放線菌門和變形菌門的相對豐度增加，厚壁菌門的相對豐度下降，另外發(fā)現(xiàn)擬桿菌門在本研究中也是優(yōu)勢門。

通過冗余分析，本試驗發(fā)現(xiàn)速效鉀、堿解氮、全磷、有機質(zhì)含量是影響‘赤霞珠’葡萄園土壤微生物群落結(jié)構(gòu)變化的主要環(huán)境因子。

綜上所述，在本研究中在寧夏賀蘭山東麓地區(qū)種植‘赤霞珠’葡萄，B2蚯蚓糞+腐熟枝條+200倍光合細(xì)菌菌劑更有利于改善根際土壤理化性質(zhì)和土壤微生物環(huán)境，其次為A2（蚯蚓糞+未腐熟枝條+200倍光合細(xì)菌菌劑），是最佳的配施方案。

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Effect of Organic" fertilizer and Microbial Agent Formulation

on Inter-root Soil" Bacterial Community Diversity in

‘Cabernet Sauvignon’""" Grapes

Abstract To investigate the effects of organic" fertilizers and microbial inoculants on the rhizosphere soil properties and bacterial communities of" ‘Cabernet Sauvignon’ grapes， and to propose an efficient and practical model for the application of organic" fertilizers， a field experiment was conducted with seven-year-old ‘Cabernet Sauvignon’ grapes.The experiment included seven treatments：CK （traditional fertilization）， A1 （vermicompost + undecayed branches + 100×photosynthetic bacterial inoculants）， A2 （vermicompost + undecayed branches + 200×photosynthetic bacterial inoculants）， A3 （vermicompost + undecayed branches + 300× photosynthetic bacterial inoculants）， B1 （vermicompost + decayed branches + 100×photosynthetic bacterial inoculants）， B2 （vermicompost + decayed branches + 200×photosynthetic bacterial inoculants）， and B3 （vermicompost + decayed branches + 300×photosynthetic bacterial inoculants）.Compared with CK treatment， B2 treatment significantly decreased soil pH and increased soil organic matter， alkaline dissolved nitrogen， available potassium and total nitrogen contents.A2 treatment significantly increased Chao1 for 87.60% and had the highest number of OTUs， indicating that A2 treatment significantly increased the richness of rhizosphere bacterial community.Compared with CK， B2 treatment altered the rhizosphere soil bacterial community， and significantly increased the relative abundance of Proteobacteria， Actinobacteria， Bacteroidota， and decreased the relative abundance of Firmicutes.Compared with A2 treatment， B2 treatment significantly increased the relative abundance of Bacteroidota.The correlation analysis showed that there was a significant positive correlation between available potassium， alkaline-dissolved nitrogen， total nitrogen， organic matter and the dominant bacterial communities in the rhizosphere soil.Therefore， the B2 treatment is the optimal fertilization， followed by the A2 treatment.

Key words Vermicompost; Microbial inoculants; Vineyard rhizosphere soil; Soil nutrients; Bacterial community