不同木豆幼苗低溫脅迫下的生理響應(yīng)及耐寒性鑒定

摘""要：木豆[Cajanus"cajan"（L.）"Millsp.]為熱區(qū)重要的糧飼兼用作物。為解析木豆響應(yīng)低溫脅迫生理特性及耐寒能力，本研究以8份木豆種質(zhì)幼苗為試驗(yàn)材料，通過(guò)低溫脅迫（4"℃）處理，對(duì)木豆8個(gè)生理指標(biāo)測(cè)定分析，運(yùn)用隸屬函數(shù)綜合分析法鑒定其耐寒性。結(jié)果表明：隨低溫脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)，木豆相對(duì)電導(dǎo)率（REC）和可溶性糖（SS）、丙二醛（MDA）、脯氨酸（Pro）的含量呈升高趨勢(shì)，超氧化物氣化酶（SOD）、過(guò)氧化物酶（POD）活性隨低溫處理時(shí)間的延長(zhǎng)呈先升后降之勢(shì)，葉綠素（Chl）含量總體呈下降趨，過(guò)氧化氫酶（CAT）活性變化存在差異，僅P2中CAT活性差異顯著。運(yùn)用隸屬函數(shù)綜合評(píng)價(jià)木）豆耐寒性強(qiáng)弱為：緬甸木豆gt;海南儋州木豆gt;木豆（170306001）gt;木豆（060302216）gt;ICPL7086gt;木豆（南02137）gt;廣西木豆gt;海南瓊中木豆，且木豆耐寒性與Chl含量、SOD和POD活性呈顯著相關(guān)，這些指標(biāo)可以作為木豆耐寒性評(píng)價(jià)的可信指標(biāo)。

關(guān)鍵詞：木豆；低溫脅迫；生理指標(biāo)；耐寒性中圖分類(lèi)號(hào)：S541.9""""""文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

Physiological"Response"to"Cold"Stress"and"Identification"of"Its"Cold"Tolerance"in"Different"Pigeonpea"Seedling"Stage

TANG"Jun1，2，"WANG"Wenqiang1，"DING"Xipeng1，"MA"Xiangli2，"BI"Yufen2，"GUO"Fenggen2*

1."Tropical"Crops"Genetic"Resources"Institute，"Chinese"Academy"of"Tropical"Agricultural"Sciences"/"Key"Laboratory"of"Crop"Gene"Resources"and"Germplasm"Enhancement"in"Southern"China，"Ministry"of"Agriculture"and"Rural"Affairs，"Haikou，"Hainan"571101，"China;"2."College"of"Animal"Science"and"Technology，"Yunnan"Agricultural"University，"Kunming，"Yunnan"650201，"China

Abstract："Pigeonpea"is"an"important"food"and"forage"crop"in"the"tropics."In"order"to"dissect"the"physiological"characteristics"of"pigeonpea"under"cold"stress"and"its"cold"tolerance，"eight"seedlings"of"pigeonpea"were"tested"and"analyzed"by"8"physiological"indexes"under"4"℃"stress，"and"cold"tolerance"of"pigeonpea"were"evaluated"by"subordinate"function"value"method"in"this"study."The"results"showed"that"with"the"prolongation"explored"to"cold"stress，"REC，"SS，"MDA"and"Pro"increased"respectively，"SOD"and"POD"increased"firstly"and"then"decreased，"and"Chl"showed"a"general"trend"of"decline，"and"the"variation"of"CAT"activity"was"significant"difference"only"in"P2"among"the"8"accessions."The"cold"tolerance"of"the"8"accessions"was"in"the"order："Miandiangt;Danzhougt;170306001gt;060302216gt;ICPL7086gt;Nan"02137gt;Guangxigt;Qiong zhong."The"content"of"Chl，"SOD"and"POD"activity"were"significantly"correlated"with"cold"tolerance"of"pigeonpea，"which"could"be"the"reliable"physiological"indexes"to"evaluate"the"cold"tolerance"of"pigeonpea.

Keywords："Cajanus"cajan;"cold"stress;"physiological"indexes;"cold"tolerance

DOI："10.3969/j.issn.1000-2561.2024.08.012

低溫是影響植物地理分布和生長(zhǎng)發(fā)育的重要的環(huán)境限制因子，影響植物的正常生長(zhǎng)發(fā)育[1]。植物受傷害嚴(yán)重程度關(guān)鍵在于低溫的強(qiáng)度影響和暴露在低溫下的持續(xù)時(shí)間，溫度在0～15"℃之間，苗期最容易受傷[2]。低溫脅迫后，植物細(xì)胞膜透性增大，導(dǎo)致膜系統(tǒng)結(jié)構(gòu)的變化及膜上酶活性的改變，膜的選擇透性喪失導(dǎo)致細(xì)胞物質(zhì)交換平衡破壞，細(xì)胞代謝發(fā)生混亂[3-6]。低溫脅迫下植物產(chǎn)生大量的超氧自由基（O2–），引起過(guò)氧化物酶（POD）、超氧化物歧化酶（SOD）、過(guò)氧化氫酶（CAT）等抗逆反應(yīng)，減少低溫對(duì)植物的損傷[7-8]。狗牙根[Cynodon"dactylon"（L.）"Pers.]細(xì)胞電解質(zhì)滲透率能夠很好地反映出品種間抗寒能力的差異，SOD、POD活性及其持續(xù)時(shí)間的長(zhǎng)短與其抗寒能力呈正相關(guān)性[9]。薛云云等[10]發(fā)現(xiàn)耐寒花生（Arachis"hypogaea"L.）中脯氨酸（proline，"Pro）含量、SOD和POD活性高于不耐寒材料。南麗麗等[11]以苜蓿（Medicago"sativa"L.）根系丙二醛（MDA）、可溶性糖（soluble"sugar，"SS）、Pro含量和CAT、SOD活性為指標(biāo)探討了苜蓿品種間在不同生態(tài)區(qū)隨氣溫變化的生理規(guī)律。HAN等[12]利用葉綠素（chlorophyll，"Chl）、Pro、MDA、SOD、CAT等9個(gè)生理指標(biāo)對(duì)水稻（Oryza"sativa"L.）的耐寒機(jī)理進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)MDA含量和SOD活性與耐寒性呈顯著相關(guān)。

木豆[Cajanus"cajan"（L.）"Millsp.]為豆科木豆屬多年生常綠灌木，株高1.5～3.0"m，世界種植面積400多萬(wàn)hm2[13]。嫩莖葉可用作動(dòng)物飼料，籽實(shí)可食用或藥用[14]。本課題組調(diào)研發(fā)現(xiàn)我國(guó)木豆花期、結(jié)莢期一般在11月至翌年的2月，受到冷害的影響，木豆籽實(shí)產(chǎn)量會(huì)受到嚴(yán)重的影響。筆者在查閱國(guó)內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)，發(fā)現(xiàn)木豆在耐寒性方面的研究報(bào)道極少。本研究通過(guò)對(duì)木豆低溫脅迫處理后，開(kāi)展木豆生理指標(biāo)的變化及相關(guān)性研究，以期揭示木豆耐寒生理機(jī)制，為耐寒木豆資源的鑒定和新品種的培育提供科學(xué)參考依據(jù)。

1""材料與方法

1.1""材料

選用8份木豆種質(zhì)，試驗(yàn)代號(hào)分為P1（瓊中木豆，采集地：海南瓊中）、P2（種質(zhì)編號(hào)：170306001，采集地：海南白沙）、P3（ICPL7086，來(lái)源地：印度引入）、P4（緬甸木豆，來(lái)源地：緬甸引入）、P5（種質(zhì)編號(hào)：060302216，采集地：廣西大新）、P6（儋州木豆，采集地：海南儋州）、P7（南02137，黑種，來(lái)源地：庫(kù)存）和P8（廣西木豆，采集地：廣西崇左），所有參試材料均由中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶作物品種資源研究所提供。

1.2""試驗(yàn)設(shè)計(jì)

采用育苗袋直播的方法，每袋5粒種子，每份材料36袋，待苗長(zhǎng)致20"cm以上，置于20"℃準(zhǔn)備間預(yù)處理12"h，再轉(zhuǎn)入低溫4"℃冷庫(kù)處理，設(shè)4個(gè)處理時(shí)間，即0（CK）、24、48、72"h，每份木豆幼嫩葉片材料混合取樣，測(cè)定生理指標(biāo)包括相對(duì)電導(dǎo)率（REC）、SS、Chl、Pro、MDA含量和SOD、CAT、POD活性，每個(gè)指標(biāo)設(shè)3個(gè)生物學(xué)重復(fù)。相關(guān)生理指標(biāo)測(cè)定方法均參照王學(xué)奎[15]的方法。

1.3""木豆資源耐寒性綜合評(píng)價(jià)方法

木豆資源耐寒性綜合評(píng)價(jià)采用模糊綜合評(píng)判方法[13]。隸屬函數(shù)值的計(jì)算方法及具體步驟如下：

若某一指標(biāo)與耐寒性呈正相關(guān)，則公式為Xi=（X–Xmin）／（Xmax–Xmin）；若REC、MDA與耐寒性呈負(fù)相關(guān)，則公式為X?i=1–（X–Xmin）／（Xmax–"Xmin），式中，Xi為各指標(biāo)的隸屬度值；X為某一指標(biāo)的測(cè)定值；Xmin為某一指標(biāo)測(cè)定值中的最小值；Xmax為某一指標(biāo)測(cè)定值中的最大值。最后計(jì)算各指標(biāo)隸屬函數(shù)值的平均值，隸屬函數(shù)平均值越大則表明耐寒性越強(qiáng)。

1.4""數(shù)據(jù)處理

本研究數(shù)據(jù)采用Excel"2019和IBM"SPSS"20軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)與分析。

2""結(jié)果與分析"

2.1""低溫脅迫對(duì)木豆REC和MDA含量的影響

REC和MDA直接反映細(xì)胞膜受傷害程度。參試木豆的REC隨低溫脅迫時(shí)間的增加，總體呈上升趨勢(shì)，峰值出現(xiàn)時(shí)間點(diǎn)不同（圖1）。處理24"h后，P1的REC變化最小，為CK的0.71倍；P4變化最大，為CK的3.37倍，差異顯著。處理48"h后，P5變化最小，為CK的1.01倍，差異不顯著；P6變化最大，為CK的3.81倍，差異顯著。處理72"h后，P2、P3、P5、P6和P8出現(xiàn)最大值，細(xì)胞膜透性最大，P4變化最小，為CK的2.27倍，差異顯著；P5驟然升高，為CK的5.45倍，差異顯著。P1的REC在48、72"h較24"h時(shí)呈驟然上升趨勢(shì)，分別為24"h的4.96倍和3.83倍，差異顯著。P4的REC在48、72"h與24"h時(shí)的REC差異不顯著。REC與植物耐寒特性呈負(fù)相關(guān)，P4材料受低溫脅迫后，REC先升高后降低并保持相對(duì)穩(wěn)定的趨勢(shì)，維持較好相對(duì)電導(dǎo)率，說(shuō)明其在抵御低溫脅迫的能力上強(qiáng)于其他材料，表明P4為較耐寒材料；P5在脅迫時(shí)間延長(zhǎng)時(shí)，同時(shí)間處理中增加倍數(shù)最大，說(shuō)明其耐寒性較差。

受低溫脅迫時(shí)長(zhǎng)變化，P1的MDA含量先升后降，但差異不顯著；P2的MDA含量逐漸升高，P3和P4呈先降后升再降的趨勢(shì)；P5、P6、P7和P8中MDA含量呈現(xiàn)先升后降再升的變化趨勢(shì)，處理24"h后達(dá)到最大值。其中，P4增加倍數(shù)最小，為CK的0.89倍，差異不顯著；P5增加最大，為CK的1.47倍，差異顯著。處理48"h后，P6差異不顯著；P8增加達(dá)到CK的1.12倍，差異不顯著。處理72"h后，P5增加最大，為CK的1.25倍，差異顯著，P4降低為CK的0.70倍，差異顯著。P1中MDA含量隨時(shí)間處理無(wú)顯著變化，為相對(duì)較耐寒種質(zhì)。

2.2""低溫脅迫對(duì)木豆SS、Chl和Pro含量的影響

參試材料中SS含量總體呈上升趨勢(shì)（圖2）。P1、P2、P3和P8中的SS含量呈先降低后升高的趨勢(shì)，P4、P6和P7呈逐步升高，P5先降低后升高再降低。處理24"h，P6增加倍數(shù)最多，為CK的1.32倍；P8的含量最少，為CK的0.47倍。處理48"h，P6增加的倍數(shù)最高，為CK的6.06倍，P5增加的倍數(shù)最小，為CK的1.68倍。處理72"h，P6增加的倍數(shù)最多，為CK的6.83倍。處理48、72"h，P8中SS增加倍數(shù)最高，分別為處理24"h的6.87倍、8.02倍，差異顯著，而P5增加倍數(shù)最小，分別為處理24"h的1.22倍和2.20倍。P6、P8中SS含量增加的倍數(shù)較大，其相對(duì)為較耐寒材料。

Chl含量的變化直接反映葉片受傷害的程度。P1、P2中Chl含量隨處理時(shí)間增加逐漸降低，P3、P4、P7和P8中Chl含量呈先升后降的趨勢(shì)，P5和P6呈現(xiàn)先降后升再降（圖2）。處理24"h后，P4中Chl含量相較于CK增加倍數(shù)最大，為CK的1.21倍，差異顯著；P5增加的最小，為CK的0.84倍，差異不顯著。處理48"h后，P5為CK的1.10倍，差異顯著；P2為CK的0.83倍，差異顯著。處理72"h后，P3中Chl含量顯著下降最少，為CK的0.78倍；P2顯著下降最大，為CK的0.51倍。P4、P5和P8中相較于CK，Chl含量保持較高含量，相對(duì)為較耐寒材料。

Pro為植物響應(yīng)低溫脅迫的重要指標(biāo)，在8份材料中Pro含量均呈現(xiàn)顯著增加趨勢(shì)（圖2）。處理24"h，P6增加倍數(shù)最大，為CK的1.16倍；P7增加倍數(shù)最小，為CK的0.47倍。處理48"h，P1增加倍數(shù)最大，為CK的2.83倍；P7增加倍數(shù)最小，為CK的0.83倍。處理72"h，P8的Pro含量顯著增加最大，為CK的4.29倍，P6提高倍數(shù)最小，為CK的2.6倍。木豆Pro含量呈逐步上升的趨勢(shì)，P1、P4和P8較CK增加的倍數(shù)較高，為相對(duì)較耐寒種質(zhì)。

2.3""低溫脅迫時(shí)長(zhǎng)木豆SOD、CAT和POD活性變化

SOD是植物的抗氧化酶系統(tǒng)，能有效去除O2-歧化對(duì)植物體造成的毒害。8份木豆材料的SOD活性變化趨勢(shì)不一樣，P1、P3、P5、P6的SOD活性先緩慢升高后逐步下降。P2、P4和P8的SOD活性隨時(shí)間處理變化的差異不顯著，P7先降低后升高再降低（圖3）。處理24"h，P3的SOD活性增加倍數(shù)最大，為CK的1.18倍，差異顯著；P7下降最多，僅為CK最低0.91倍，差異不顯著。處理48"h后，P3的SOD活性增加倍數(shù)最高，為CK的1.18倍，差異顯著；P8的SOD活性下降最多，為CK的0.88倍，差異不顯著。處理72"h后，

P4的SOD活性倍數(shù)增加最大，為CK的1.09倍，差異不顯著；P7的SOD活性呈現(xiàn)顯著下降，僅為CK的0.75倍。P3、P4受低溫脅迫后，SOD活性逐步增加，為相對(duì)耐寒種質(zhì)。

CAT在去除植物體內(nèi)的O2-過(guò)程中有著重要作用。8份木豆材料的CAT活性變化趨勢(shì)不同，P1、P5先緩慢升高后降低，P4、P7、P8先緩慢降低后升高，P2先降低后升高再降低，P3一直緩慢升高，P6的CAT活性先升高后降低再升高（圖3）。處理24"h后，P6的CAT活性變化最大，為CK的1.12倍；變化最小的是P2，為CK的0.97倍。處理48"h后，P5的CAT活性增加倍數(shù)最大，為1.19倍；P7增加倍數(shù)最小，為CK的0.97倍。處理72"h，P3增加倍數(shù)最大，為CK的1.15倍，增加倍數(shù)最小的為P2，為CK的0.89倍。P3材料隨處理時(shí)間延長(zhǎng)，CAT活性逐步增加，為最耐寒材料，其次為P1、P5材料。

POD可以催化各種還原劑的氧化反應(yīng)。8份材料中POD活性先逐漸升高后再降低（圖3）。處理24"h后，P1、P3、P4、P5、P6的POD活性達(dá)到峰值，其中，P1、P2、P3、P6的POD活性顯著增加，P6增加倍數(shù)最大，為CK的2.11倍，P3的POD活性增加最小，為CK的1.43倍。處理48"h后，P2的POD活性顯著增加，為CK的1.74倍；P7的POD活性增加倍數(shù)最小，為CK的1.31倍，差異不顯著。處理72"h后，P2的POD活性顯著增加，為CK的1.74倍。P2的POD活性一直顯著高于CK，為最耐寒材料。

2.4""各生理指標(biāo)隸屬函數(shù)值及耐寒性綜合評(píng)價(jià)

由公式計(jì)算各生理指標(biāo)間隸屬值，如表1所示。對(duì)低溫脅迫下8份木豆種質(zhì)耐冷指標(biāo)平均隸屬函數(shù)值進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)Xi，平均值越大，表明木豆幼苗的耐寒性越強(qiáng)。P4各項(xiàng)指標(biāo)隸屬函數(shù)平均值最大，為0.57，P1隸屬函數(shù)平均值最小，為0.35。經(jīng)隸屬函數(shù)分析得出，低溫脅迫下8份木豆種質(zhì)耐寒性從強(qiáng)到弱排序?yàn)椋篜4gt;P6gt;P2gt;P5gt;P3gt;P7gt;P8gt;P1。

2.5""各項(xiàng)生理指標(biāo)的隸屬函數(shù)平均值的相關(guān)性

由相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，各份材料的耐寒性綜合隸屬指數(shù)（I）與Chl、SOD、POD均呈極顯著正相關(guān)。其中，相關(guān)系數(shù)最大值是Chl，達(dá)0.67；其次為SOD和POD，相關(guān)系數(shù)分別是0.61和0.59（表2）。

3""討論

3.1""木豆耐寒的生理特性

3.1.1""低溫脅迫對(duì)木豆REC和MDA含量的影響""REC直接反映植物在脅迫下細(xì)胞膜的傷害程度，MDA是膜脂過(guò)氧化的終產(chǎn)物，其含量高低代表質(zhì)膜受損傷的程度，REC與MDA與耐寒性呈負(fù)相關(guān)[1，"16]。8份參試材料受低溫脅迫后，REC呈總體上升趨勢(shì)，說(shuō)明低溫脅迫下木豆葉片細(xì)胞膜受到一定程度的傷害，細(xì)胞膜透性增大，導(dǎo)致電解質(zhì)滲漏。MDA呈先升高再降低的變化趨勢(shì)，說(shuō)明

木豆脅迫時(shí)間延長(zhǎng)，木豆的生理活動(dòng)受損嚴(yán)重。木豆低溫脅迫REC和MDA變化趨勢(shì)與馬鈴薯（Solanum"tuberosum"L.）[17]、果蔗（Saccharum"officinarum"L.）[18]、木薯（Manihot"esculenta"Crantz.）[19]的低溫脅迫研究結(jié)果部分相似。不同參試種質(zhì)低溫脅迫后的REC和MDA峰值出現(xiàn)的時(shí)間不一樣，在一定程度上說(shuō)明木豆不同的種質(zhì)耐寒性存在差異。

3.1.2""低溫脅迫對(duì)木豆SS、Chl和Pro含量的影響""SS是滲透調(diào)節(jié)重要的物質(zhì)，其含量的變化能提高細(xì)胞的保水能力，降低逆境傷害程度；葉片受到傷害后，會(huì)導(dǎo)致Chl的合成受阻和含量下降；Pro是膜穩(wěn)定物質(zhì)，積累量與植物抗寒性呈正相關(guān)[20]。本研究中，木豆低溫脅迫后，大部分SS出現(xiàn)逐步上升的趨勢(shì)，一定程度上說(shuō)明SS在木豆中積累需要相對(duì)長(zhǎng)的發(fā)生時(shí)間。Chl相較于對(duì)照總體呈下降趨勢(shì)，Pro呈上升的趨勢(shì)，不同材料間變化趨勢(shì)不一樣，與在甘藍(lán)（Brassica"spp）[8]、馬鈴薯[17]和甘蔗[21]等的低溫脅迫研究結(jié)果相似。隨時(shí)間處理、變化趨勢(shì)和增加倍數(shù)一定程度上反映不同材料的抗寒性差異。

3.1.3""低溫脅迫對(duì)木豆SOD、CAT和POD活性的影響""SOD、CAT和POD是植物抗氧化酶系統(tǒng)，SOD能有效去除O2–歧化對(duì)植物的毒害；CAT能去除植物體內(nèi)的氧自由基；POD可以催化由過(guò)氧化氫參加的各種還原劑的氧化反應(yīng)[22]。SOD、POD、CAT活性的提高有助于緩解低溫脅迫造成的傷害。本研究中，不同的低溫脅迫時(shí)間參試材料的SOD、POD活性呈先升高后降低的趨勢(shì)，峰值出現(xiàn)時(shí)間各不相同；CAT活性因種質(zhì)差異，其變化趨勢(shì)各不相同。苜蓿受連續(xù)低溫脅迫后，SOD、POD活性呈先升高后降低的趨勢(shì)[23]。低溫脅迫后不同苜蓿材料間CAT活性的變化差異較大[24]。甘藍(lán)在受低溫脅迫后POD、CAT活性呈先升高后降低的趨勢(shì)，而SOD逐漸升高[25]?？Х龋–offea"spp.）受低溫脅迫的時(shí)間延長(zhǎng)，SOD、POD和CAT活性呈先升后降的趨勢(shì)[26]。水稻低溫下耐冷品種體內(nèi)的CAT活性變化很小，而冷敏感品種CAT活性的變化相對(duì)較大[27]。通過(guò)本研究發(fā)現(xiàn)活性酶中SOD、POD活性與木豆的耐寒性呈現(xiàn)一定程度的正相關(guān)，脅迫后快速響應(yīng)的種質(zhì)相對(duì)較耐寒。CAT穩(wěn)定性相對(duì)較差，且不同材料耐寒性差異也導(dǎo)致其變化差異較大。

3.2""木豆種質(zhì)耐寒性鑒定

植物耐寒性受到多因素影響，單一生理指標(biāo)無(wú)法準(zhǔn)確反映植物耐寒性強(qiáng)弱，隸屬函數(shù)評(píng)價(jià)法是行之有效的一種綜合評(píng)價(jià)方法，已在馬鈴薯[28]、披堿草（Elymus"dahuricus"Turcz.）[29]、早熟禾（Poa"annua"L.）[30]和草類(lèi)植物[31]耐寒性評(píng)價(jià)中應(yīng)用。本試驗(yàn)通過(guò)8項(xiàng)生理指標(biāo)及隸屬函數(shù)法對(duì)低溫脅迫下木豆種質(zhì)進(jìn)行耐寒性綜合分析，參試材料的耐寒性強(qiáng)弱為：緬甸木豆gt;海南儋州木豆gt;木豆（170306001）gt;木豆（060302216）gt;木豆ICPL708gt;木豆（南02137）gt;廣西木豆gt;海南瓊中木豆。緬甸木豆較采集于廣西、海南等地的其他材料更為耐寒，一定程度上說(shuō)明高海拔地區(qū)木豆的耐寒特性要優(yōu)于其他材料，可能是對(duì)環(huán)境不斷適應(yīng)的一種表現(xiàn)。

木豆的種質(zhì)資源比較豐富，但木豆種質(zhì)材料耐寒性鑒定和生理評(píng)價(jià)的報(bào)道較少，無(wú)法進(jìn)行相同研究的比較討論。通過(guò)綜合隸屬的指數(shù)與8個(gè)生理指標(biāo)間的相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)Chl、SOD、POD均呈極顯著正相關(guān)，說(shuō)明在木豆耐寒研究中的這些生理指標(biāo)較其他指標(biāo)更能有效評(píng)判木豆耐寒性。

本研究為木豆的耐寒生理機(jī)制研究提供科學(xué)數(shù)據(jù)支撐，為發(fā)掘耐寒木豆資源和育種研究奠定重要的工作基礎(chǔ)。

參考文獻(xiàn)

• RITONGA"F"N，"CHEN"S."Physiological"and"molecular"mechanism"involved"in"cold"stress"tolerance"in"plants[J]."Plants，"2020，"9（5）："560.
• 吳幗秀."H2S調(diào)控黃瓜耐冷性及其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)理[D]."濟(jì)南："山東農(nóng)業(yè)大學(xué)，"2016.WU"G"X."The"mechanism"of"hydrogen"sulfide"regulating"chilling"Tolerance"and"its"signal"transduction"in"cucumber[D]."Jinan："Shangdong"Agricultural"University，"2016."（in"Chinese）
• 付娟娟."西藏野生垂穗披堿草低溫適應(yīng)機(jī)理研究[D]."楊凌："西北農(nóng)林科技大學(xué)，"2017.FU"J"J."The"physiological"and"molecular"mechanisms"of"Tibetan"wild"Elymus"nutans"responses"to"cold"stress[D]."Yangling："Northwest"A"amp;"F"University，"2017."（in"Chinese）
• 王俊娟."棉花抗冷性鑒定及相關(guān)基因的表達(dá)研究[D]."北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院大學(xué)，"2016.WANG"J"J."Identification"of"the"chilling"resistance"of"cotton"and"the"expression"of"cold"resistance"eelated"genes[D]."Beijing："University"of"Chinese"Agricultural"Sciences，"2016."（in"Chinese）
• 馬媛媛，"肖霄，"張文娜."植物低溫逆境脅迫研究綜述[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，"2012（12）：7007-7008.MA"Y"Y，"XIAO"X，"ZHANG"W"N."Research"progress"of"plants"under"cold"stress[J]."Journal"of"Anhui"Agricultural"Sciences，"2012（12）："7007-7008."（in"Chinese）
• YADAV"S"K."Cold"stress"tolerance"mechanisms"in"plants."a"review[J]."Agronomy"for"Sustainable"Development，"2010，"30（3）："515-527.
• MEHROTRA"S，"VERMA"S，"KUMAR"S，"KUMARI"S，"MISHRA"B"N."Transcriptional"regulation"and"signalling"of"cold"stress"response"in"plants："an"overview"of"current"understanding[J]."Environmental"and"Experimental"Botany，"2020，"180："104243.

[8]"姚悅梅，"戴忠良，"張振超，"肖燕，潘躍平."羽衣甘藍(lán)對(duì)低溫的生理響應(yīng)與耐寒性綜合評(píng)價(jià)[J]."江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，"2017，"33（6）："1349-1357.YAO"Y"M，DAI"Z"L，"ZHANG"Z"C，"XIAO"Y，"PAN"Y"P."Physiological"response"to"low"temperature"and"comprehensive"evaluation"of"cold"tolerance"in"kale[J]."Jiangsu"Journal"of"Agriculuture"Sciences，"2017，"33（6）："1349-1357."（in"Chinese）

[9]"孫宗玖，"阿不來(lái)提，"齊曼，"李培英，楊文英."狗牙根新品種抗寒性評(píng)價(jià)及生理基礎(chǔ)的研究[J]."中國(guó)草地學(xué)報(bào)，"2003，"25（4）："25-30.SUN"Z"J，"ABULAITI，"QI"M，"LI"P"Y，"YANG"W"Y."Evaluation"and"physiological"basis"for"cold"resistance"of"Bermudagrass"varieties[J]."Grassland"of"China，"2003，"25（4）："25-30."（in"Chinese）

[10]"薛云云，"白冬梅，"田躍霞，"權(quán)寶全."24份山西花生資源芽期和苗期耐寒性鑒定[J]."核農(nóng)學(xué)報(bào)，"2018，"32（3）："582-590.XUE"Y"Y，"BAI"D"M，"TIAN"Y"X，"QUAN"B"Q."Cold"tolerance"identification"for"24"peanut"resources"from"Shanxi"province"at"the"stage"of"germination"and"seedling[J]."Journal"of"Nuclear"Agricultural"Sciences，"2018，"32（3）："582-590."（in"Chinese）

[11]"南麗麗，"師尚禮，"陳建綱，"朱新強(qiáng)，"郭全恩，"趙文翰."不同根型苜蓿根系對(duì)低溫脅迫的響應(yīng)及其抗寒性評(píng)價(jià)[J].nbsp;中國(guó)生態(tài)農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，"2011，"19（3）："619-625.NAN"L"L，"SHI"S"L，"CHEN"J"G，"ZHU"X"Q，"GUO"Q"E，"ZHAO"W"H."Field"evaluation"of"the"response"and"resistance"to"low"temperature"of"alfalfa"root"with"different"root"types"during"over-wintering[J]."Chinese"Journal"of"Eco-Agriculture，"2011，"19（3）："619-625."（in"Chinese）

[12]"HAN"B，"MA"X，"CUI"D，"WANG"Y"J，"HAN"L"Z."Comprehensive"evaluation"and"analysis"of"the"mechanism"of"cold"tolerance"based"on"the"transcriptome"of"weedy"rice"seedlings[J]."Rice，"2020，"13（1）："1-14.

[13]"FAKRUDIN"B，"SINGH"M"N，"SUBHOJIT"D，"BANDHOPADHYA"T"K，"RAJE"R"S，"SHARMA"T"R，"KISHOR"G，"VIVEK"D，"DANGEEDA"S，"GUPTA"D"K."Development"of"genic-SSR"markers"by"deep"transcriptome"sequencing"in"pigeonpea"[Cajanus"cajan"（L.）"Millspaugh][J]."BMC"Plant"Biology，"2011，"11（1）："17-29.

[14]"唐軍，"王文強(qiáng)，"丁西朋，"馬向麗，"畢玉芬，"郭鳳根."木豆遺傳多樣性及抗逆機(jī)制研究進(jìn)展[J]."熱帶作物學(xué)報(bào)，"2021，"42（10）："2798-2805.TANG"J，"WANG"W"Q，"DING"X"P，"MA"X"L，"BI"Y"F，"GUO"F"G."Review"of"research"in"genetic"diversity"and"mechanism"of"stress"resistance"of"pigeonpea[J]."Chinese"Journal"of"Tropical"Crops，"2021，"42（10）："2798-2805."（in"Chinese）

[15]"王學(xué)奎."植物生理生化實(shí)驗(yàn)原理和技術(shù)[M]."第2版."北京："高等教育出版社，"2006.WANG"X"K."Principles"and"techniques"of"plant"physiological"and"biochemical"experiments[M]."2nd"ed."Beijing："Higher"Education"Press，"2006."（in"Chinese）

[16]"艾希珍，"于賢昌，"王紹輝，"邢禹賢．低溫脅迫下黃瓜嫁接苗與自根苗某些物質(zhì)含量的變化[J]."植物生理學(xué)通訊，"1999，"35（1）："26-29．AI"X"Z，"YU"X"C，"WANG"S"H，"XING"Y"X."Changes"of"some"substances"of"grafted"and"own"root"cucmber"seedlings"under"low"temperature"stress[J]."Plant"Physiological"Bulletin，"1999，"35（1）："26-29."（in"Chinese）

[17]"楊慧菊，"郭華春."馬鈴薯幼苗低溫脅迫的生理響應(yīng)及品種耐寒性綜合評(píng)價(jià)[J]."西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，"2016，"11（9）："2560-2567.YANG"H"J，"GUO"H"C."Physiological"responds"of"potato"seedlings"to"low"temperature"stress"and"comprehensive"evaluation"on"their"cold"tolerance[J]."Southwest"China"Journal"of"Agricultural"Sciences，"2016，"11（9）："2560-2567."（in"Chinese）

[18]"陳明輝，"程世平，"張志錄，"張保青."不同品種果蔗幼苗對(duì)低溫的生理響應(yīng)及耐寒性評(píng)價(jià)[J]."華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，"2018，"39（2）："40-46.CHEN"M"H，"CHENG"S"P，"ZHANG"Z"L，"ZHANG"B"Q."Physiological"response"and"cold"resistance"evaluation"of"seedlings"of"different"chewing"cane"cultivars"to"low"temperature[J]."Journal"of"South"China"Agricultural"University，"2018，"39（2）："40-46."（in"Chinese）

[19]"張瑋，"易拓，"唐維，"宋勇."木薯耐寒性種質(zhì)資源及其鑒定指標(biāo)的篩選與綜合評(píng)價(jià)[J]."熱帶作物學(xué)報(bào)，"2019，"40（1）："1-10.ZHANG"W，"YI"T，"TANG"W，"SONG"Y."Selection"and"comprehensive"evaluation"of"cassava"cold-resistant"germplasm"resources"and"identification"indexes[J]."Chinese"Journal"of"Tropical"Crops，"2019，"40（1）："1-10."（in"Chinese）

[20]"武輝，"侯麗麗，"周艷飛，"范志超，"石俊毅，"阿麗艷·肉孜，"張巨松."不同棉花基因型幼苗耐寒性分析及其鑒定指標(biāo)篩選[J]."中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，"2012，"45（9）："1703-1713.WU"H，"HOU"L"L，"ZHOU"Y"F，"FAN"Z"C，"SHI"J"Y，"ALIYAN·R"Z，"ZHANG"J"S."Analysis"of"chilling"tolerance"and"determination"of"chilling-tolerance"evaluation"indicators"in"cotton"of"different"genotypes[J]."Scientia"Agricultura"Sinica，"2012，"45（9）："1703-1713.nbsp;（in"Chinese）

[21]"唐仕云，"楊麗濤，"李楊瑞."不同甘蔗基因型對(duì)低溫脅迫的響應(yīng)及其耐寒性評(píng)價(jià)[J]."熱帶作物學(xué)報(bào)，"2012，"33（4）："635-641.TANG"S"Y，"YANG"L"T，"LI"Y"R."Response"of"different"sugarcane"genotypes"to"low"temperature"and"evaluation"for"cold"tolerance"of"sugarcane[J]."Chinese"Journal"of"Tropical"Crops，"2012，"33（4）："635-641."（in"Chinese）

[22]"許英，"陳建華，"朱愛(ài)國(guó)，"奕明寶，"王曉飛，"孫志民．低溫脅迫下植物響應(yīng)機(jī)理的研究進(jìn)展[J]."中國(guó)麻類(lèi)科學(xué)，"2015，"37（1）："40-49.XU"Y，"CHEN"J"H，"ZHU"A"G，"LUAN"M"B，"WANG"X"F，"SUN"Z"M."Research"progress"on"response"mechanism"of"plant"under"low"temperature"stress[J]."Plant"Fiber"Sciences"in"China，"2015，"37（1）："40-49."（in"Chinese）

[23]"亓春宇."低溫脅迫對(duì)F2代紫花苜蓿生理特性的影響及抗寒性研究[D]."哈爾濱："哈爾濱師范大學(xué)，"2017.QI"C"Y."Effects"of"low"temperature"stress"on"physiological"characteristics"and"cold"resistance"of"F2"alfalfa[D]."Harbin："Harbin"Normal"University，"2017."（in"Chinese）

[24]"王曉龍."苜?？购澡b定及耐寒種質(zhì)篩選[D]."呼和浩特："內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)，"2021.WANG"X"L."Identification"of"cold"tolerance"and"screening"of"cold"tolerant"germplasm"of"alfalfa[D]."Hohhot："Inner"Mongolia"Agricultural"University，"2021."（in"Chinese）

[25]"秦文斌，"山溪，"張振超，"姚悅梅，"肖燕，"戴忠良."低溫脅迫對(duì)甘藍(lán)幼苗抗逆生理指標(biāo)的影響[J]."核農(nóng)學(xué)報(bào)，"2018，"32（3）："576-581.QIN"W"B，"SHAN"X，"ZHANG"Z"C，"YAO"Y"M，"XIAO"Y，"DAI"Z"L."Effect"of"low"temperature"stress"on"anti-stress"physiological"indexes"of"cabbage"seedlings[J]."Journal"of"Nuclear"Agricultural"Sciences，"2018，"32（3）："576-581."（in"Chinese）

[26]"黃麗芳，"李金芹，"龍宇宙，"董云萍，"王曉陽(yáng)，"林興軍，"孫燕，"陳鵬，"閆林."低溫肋迫下不同咖啡生理生化指標(biāo)的變化及耐寒性評(píng)價(jià)[J]."熱帶作物學(xué)報(bào)，"2021，"42（7）："1941-1947.HUANG"L"F，"LI"J"Q，"LONG"Y"Z，"DONG"Y"P，"WANG"X"Y，"LIN"X"J，"SUN"Y，"CHEN"P，"YAN"L."Changes"of"physiological，"biochemical"and"evaluation"of"cold"tolerance"in"coffea[J]."Chinese"Journal"of"Tropical"Crops，"2021，"42（7）："1941-1947."（in"Chinese）

[27]"王國(guó)莉，"郭振飛."水稻耐冷機(jī)理的研究進(jìn)展[J]."惠州學(xué)院學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），"2004，"24（3）："8-12.WANG"G"L，"GUO"Z"F."Progress"on"the"research"of"chilling"tolerant"mechanism"in"rice[J]."Journal"of"Huizhou"University"（National"Science），"2004，"24（3）："8-12."（in"Chinese）

[28]"丁紅映，"田宇豪，"李青，"楊佳怡，"胡新喜，"熊興耀，"秦玉芝."馬鈴薯低溫脅迫的生理響應(yīng)及耐寒性綜合評(píng)價(jià)[J]."西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，"2020，"33（6）："1165-1171.D1NG"H"Y，"TIAN"Y"H，"LI"Q，"YANG"J"Y，"HU"X"X，"XIONG"X"Y，"QIN"Y"Z."Physiological"responds"of"potato"seedings"to"low"temperature"stress"and"comprehensive"evaluation"on"their"cold"tolerance[J]."Southwest"China"Journal"of"Agricultural"Sciences，"2020，"33（6）："1165-1171."（in"Chinese）

[29]"梁坤倫，"賈存智，"孫金豪，"王明艷，"傅華，"毛祝新."高寒地區(qū)垂穗披堿草種質(zhì)對(duì)低溫脅迫的生理響應(yīng)及其耐寒性評(píng)價(jià)[J]."草業(yè)學(xué)報(bào)，"2019，"28（3）："111-121.LIANG"K"L，"JIA"C"Z，"SUN"J"H，"WANG"M"Y，"FU"H，"MAO"Z"X."Evaluation"of"physiological"responses"and"tolerance"tonbsp;low-temperature"stress"of"Elymus"nutuns"varieties[J]."Acta"Prataculturae"Sinica，"2019，"28（3）："111-121."（in"Chinese）

[30]"呂優(yōu)偉，"賀佳圓，"白小明，"董沁，"雷亞偉."9個(gè)野生早熟禾對(duì)低溫脅迫的生理響應(yīng)及苗期抗寒性評(píng)價(jià)[J]."草地學(xué)報(bào)，"2014，"22（2）："326-333.LYU"Y"W，"HE"J"Y，"BAI"X"M，"DONG"Q，"LEI"Y"W."Evaluation"of"physiological"responses"and"resistances"of"nine"wild"Poa"to"low"temperature[J]."Acta"Agrestia"Sinica，"2014，"22（2）："326-333."（in"Chinese）

[31]"何子華，"楊成行，"王沛，"包愛(ài)科，"馬青."高寒地區(qū)6種禾本科牧草對(duì)低溫脅迫的生理響應(yīng)及耐寒性評(píng)價(jià)[J]."草業(yè)科學(xué)，"2021，"38（10）："2019-2028.HE"Z"H，"YANG"C"H，"WANG"P，"BAO"A"K，"MA"Q."Effect"of"low-temperature"stress"on"the"physiological"responses"of"six"gramineous"forages"in"alpine"regions"and"evaluation"of"their"cold"resistance[J]."Pratacultural"Science，"2021，"38（10）："2019-2028."（in"Chinese）.