腹瀉性疾病是規(guī)?;pB(yǎng)殖場(chǎng)中發(fā)生流行率相對(duì)較高的一類綜合性創(chuàng)造性疾病,對(duì)犢牛造成的危害嚴(yán)重。由于引起犢牛腹瀉的原因極其復(fù)雜,包括了細(xì)菌因素、病毒性因素和營(yíng)養(yǎng)因素,在疾病診斷過(guò)程中,如果不能夠及時(shí)明確主要發(fā)病原因、治療方案不針對(duì),將會(huì)嚴(yán)重影響到犢牛的成活率和牛養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。本次研究在對(duì)規(guī)?;B(yǎng)殖場(chǎng)犢牛腹瀉疾病發(fā)病原因進(jìn)行探討的基礎(chǔ)上,結(jié)合一起病例分析了犢牛腹瀉病的診斷與防控要點(diǎn),希望對(duì)更好地提高該類疾病的防控成效,有一定幫助。
犢牛腹瀉性疾病多在牛生長(zhǎng)發(fā)育的初期階段高發(fā),會(huì)嚴(yán)重影響到犢牛的正常生長(zhǎng)正常增重,甚至因?yàn)榉乐尾坏轿?,?dǎo)致大批量的牛群發(fā)病死亡,影響到養(yǎng)殖場(chǎng)的規(guī)模擴(kuò)大和經(jīng)濟(jì)效益的提升。為更好地降低犢牛腹瀉的發(fā)生流行率,就需要結(jié)合實(shí)際養(yǎng)殖現(xiàn)狀,不斷加強(qiáng)工作經(jīng)驗(yàn)的總結(jié),做到早發(fā)現(xiàn)早處理,有效降低犢牛腹瀉的流行率,確保養(yǎng)殖安全。
一、犢牛腹瀉的發(fā)病原因
1、飲食因素
犢牛在生長(zhǎng)過(guò)程中對(duì)飲食的適應(yīng)能力較差,突然的飲食改變、飼料質(zhì)量不佳或過(guò)度喂食都可能引起腹瀉。此外,過(guò)度使用抗生素或過(guò)量添加化學(xué)物質(zhì)(如魚(yú)粉、魚(yú)油等)也會(huì)導(dǎo)致腹瀉。
2、感染因素
病原菌和病毒感染是犢牛腹瀉的常見(jiàn)原因。常見(jiàn)的病原菌包括大腸桿菌、沙門氏菌、硫酸鹽還原弧菌等。寄生蟲(chóng)感染如蠅幼蟲(chóng)、球蟲(chóng)等也可能引起犢牛腹瀉。犢牛常容易受到環(huán)境中病原菌的感染,尤其是在規(guī)?;曫B(yǎng)場(chǎng)環(huán)境中傳播風(fēng)險(xiǎn)更高。
3、養(yǎng)殖管理因素
犢牛處于成長(zhǎng)發(fā)育階段,當(dāng)面臨溫度變化、濕度增加或寒冷條件時(shí),免疫力可能較弱,容易發(fā)生腹瀉。此外,不適宜的飼養(yǎng)環(huán)境,如濕度過(guò)高、空氣污濁和緊湊的生長(zhǎng)空間,也會(huì)增加犢牛腹瀉的風(fēng)險(xiǎn)。不合理的飲水管理、飲水設(shè)備不潔凈、不合理的斷奶和過(guò)早引入粗料等飼養(yǎng)管理不當(dāng)?shù)囊蛩?,都可能引起腹瀉。同時(shí),缺乏胎盤(pán)傳遞的免疫物質(zhì)和沖母乳免疫的作用,也使得犢牛在最初幾周內(nèi)容易受到病原菌的感染,導(dǎo)致腹瀉。
二、犢牛腹瀉的病例分析
3月下旬在一個(gè)規(guī)?;馀pB(yǎng)殖場(chǎng)的犢牛群體當(dāng)中出現(xiàn)了一類腹瀉疾病,年齡越小的犢牛發(fā)病越嚴(yán)重,短時(shí)間內(nèi)出現(xiàn)了脫水現(xiàn)象,腹部蜷縮,眼球向內(nèi)凹陷。獸醫(yī)接到求助之后到達(dá)養(yǎng)殖場(chǎng)對(duì)發(fā)病情況進(jìn)行了診斷分析,該養(yǎng)殖場(chǎng)主要以犢牛發(fā)病為主,哺乳階段和斷奶階段的犢牛都會(huì)出現(xiàn)典型的臨床癥狀,但是哺乳犢牛的發(fā)病癥狀最嚴(yán)重,死亡率較高。結(jié)合外在癥狀初步判定為某些病原感染引發(fā)的腹瀉,隨即對(duì)病死牛進(jìn)行了進(jìn)一步的解剖,采集了典型病料組織帶回實(shí)驗(yàn)室之后進(jìn)行了進(jìn)一步的分離鑒定,在病例當(dāng)中分離到了輪狀病毒,由此可以判定輪狀病毒感染引發(fā)的犢牛腹瀉,在明確病原的基礎(chǔ)上為牛群制定了針對(duì)性的治療方案,很好地控制了病情,避免損失進(jìn)一步加大。
三、犢牛腹瀉的流行病學(xué)
1、病原學(xué)
犢牛輪狀病毒病的病原體屬于輪狀病毒,是一種RNA病毒。輪狀病毒根據(jù)其抗原特性被分為A、B、C、D、E五群,其中A群為典型輪狀病毒,而B(niǎo)、C、D、E群則為非典型輪狀病毒。形態(tài)上,輪狀病毒粒子呈圓形或橢圓形,直徑約為70~80nm,病毒粒子在電子顯微鏡下觀察類似車輪狀,病毒有囊膜,囊膜上存在突起,這些突起在某些群中可以形成特定的放射狀排列。環(huán)境適應(yīng)能力方面,輪狀病毒對(duì)外界環(huán)境有較強(qiáng)的抵抗力,能在多種環(huán)境中存活較長(zhǎng)時(shí)間。在糞便和不含抗體的乳汁中輪狀病毒甚至可以保持侵染性達(dá)半年之久,使得輪狀病毒能夠在自然環(huán)境中長(zhǎng)期存活和傳播。此外,輪狀病毒在pH值5~7的條件下較為穩(wěn)定,而在極端的pH值下(如pHlt;4或pHgt;8)則容易失去活性。理化特點(diǎn)方面,輪狀病毒對(duì)物理和化學(xué)因素的抵抗力較強(qiáng),病毒在56℃下需要30min以上才能被滅活,而在室溫下則相對(duì)穩(wěn)定。紫外線照射和一些消毒劑如碘制劑、甲醛等可以用來(lái)滅活輪狀病毒。
2、發(fā)病機(jī)制
輪狀病毒主要通過(guò)消化道傳播,感染犢牛后侵入腸道上皮細(xì)胞,導(dǎo)致細(xì)胞損傷和死亡,影響腸道正常的吸收功能。病毒感染還可能導(dǎo)致腸道菌群失衡,有害菌增多,進(jìn)一步加劇腸道損傷,并且會(huì)引起犢牛免疫系統(tǒng)的反應(yīng),導(dǎo)致炎癥反應(yīng)和腹瀉。持續(xù)的腹瀉會(huì)導(dǎo)致?tīng)倥Jゴ罅克趾碗娊赓|(zhì),從而引發(fā)脫水和電解質(zhì)失衡。
3、流行特點(diǎn)
傳染源主要包括臨床癥狀明顯的病牛和無(wú)癥狀的攜帶者,病毒可以從感染動(dòng)物的糞便、嘔吐物以及呼出的氣體中排出,污染環(huán)境。多數(shù)情況下輪狀病毒主要通過(guò)糞-口途徑傳播,即犢牛通過(guò)攝入被病毒污染的水或食物而感染。此外,病毒也可以通過(guò)直接接觸傳播如犢牛之間的舔舐行為,或者通過(guò)間接接觸等傳播。犢牛是輪狀病毒的主要易感群體,尤其是出生后不久的哺乳犢牛,因?yàn)槊庖呦到y(tǒng)尚未完全發(fā)育,對(duì)病毒抵抗力較弱極容易受到病毒入侵感染。輪狀病毒病在秋末冬初和春末夏初較為常見(jiàn),呈現(xiàn)季節(jié)性流行趨勢(shì),這可能與氣溫下降、犢牛集中出生以及飼養(yǎng)條件有關(guān)。
四、犢牛腹瀉的臨床癥狀
牛輪狀病毒性腹瀉的潛伏期通常為12~24h,但也有短至6~8h或長(zhǎng)達(dá)36~48h。在潛伏期結(jié)束后,牛會(huì)開(kāi)始出現(xiàn)臨床癥狀。急性型病程通常在1~2d,表現(xiàn)為牛只突然出現(xiàn)嚴(yán)重腹瀉,糞便呈水樣或糊狀,顏色較淡,有惡臭,牛只出現(xiàn)食欲不振、消瘦、脫水等癥狀。急性型病例通常死亡率較高。慢性型病程通常在7~10d,表現(xiàn)為牛只腹瀉,糞便稀薄,但死亡率較低,慢性型病例中,牛只出現(xiàn)消瘦、生長(zhǎng)緩慢、毛發(fā)粗亂等癥狀,部分牛出現(xiàn)關(guān)節(jié)炎、肺炎等并發(fā)癥。亞臨床型病程通常在3~5d,表現(xiàn)為牛只輕度腹瀉,食欲不振,但無(wú)其他明顯癥狀,牛只在短時(shí)間內(nèi)恢復(fù),但會(huì)成為帶犢牛,進(jìn)一步傳播病毒。
五、犢牛腹瀉的病理學(xué)變化
腸道病變是牛輪狀病毒性腹瀉的主要表現(xiàn),小腸黏膜上皮細(xì)胞變性、脫落,導(dǎo)致腸黏膜失去正常結(jié)構(gòu),在嚴(yán)重病例中,腸黏膜出現(xiàn)潰瘍和壞死。腸系膜淋巴結(jié)充血、水腫,有時(shí)出現(xiàn)壞死,淋巴結(jié)內(nèi)有大量的炎性細(xì)胞浸潤(rùn),如淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞等。肝、脾、肺等實(shí)質(zhì)器官充血、水腫,肝細(xì)胞變性、壞死,脾、肺等器官的淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞等炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。腎小球充血、水腫,腎小管上皮細(xì)胞變性、壞死,在嚴(yán)重病例中,腎出現(xiàn)實(shí)質(zhì)性病變,導(dǎo)致腎功能不全。關(guān)節(jié)囊充血、水腫,關(guān)節(jié)腔內(nèi)有炎性滲出物,慢性病例中,關(guān)節(jié)軟骨和骨組織受損,導(dǎo)致關(guān)節(jié)僵硬、跛行等癥狀。肺泡充血、水腫,肺泡壁增厚,有時(shí)出現(xiàn)肺炎灶,病程較長(zhǎng)者,肺泡腔內(nèi)有炎性滲出物,肺泡壁纖維化。
六、犢牛腹瀉的診斷
1、熒光抗體染色
收集犢牛的糞便樣本或組織樣本,按照1∶20的比例稀釋樣本,以減少樣本中的蛋白質(zhì)濃度,便于后續(xù)的免疫染色。將稀釋后的樣本涂抹在玻璃片上或用于染色的微孔板上,用丙酮或其他固定劑固定樣本,以保持病毒的形態(tài)和抗原性,固定后,用PBS或其他緩沖液進(jìn)行洗滌,去除多余的固定劑。為了減少非特異性結(jié)合,用含有血清或牛血清白蛋白的免疫染色封閉液進(jìn)行阻斷,室溫下放置30min,以減少背景熒光。加入已知針對(duì)犢牛輪狀病毒的特異性熒光標(biāo)記抗體(一抗),室溫或4℃孵育1h,孵育后,用洗滌緩沖液清洗,去除未結(jié)合的抗體。然后加入帶有不同熒光標(biāo)記的二抗(如 FITC 或 RFP 標(biāo)記的抗小鼠抗體),與一抗形成夾心結(jié)構(gòu),室溫下孵育30min,再次用洗滌緩沖液清洗,去除未結(jié)合的抗體。清洗樣本,去除多余的抗體和洗滌緩沖液,必要時(shí),用吹風(fēng)機(jī)輕輕吹干樣本。在適當(dāng)?shù)募ぐl(fā)波長(zhǎng)下,使用熒光顯微鏡觀察樣本并記錄熒光信號(hào)。樣本區(qū)域出現(xiàn)特異性熒光信號(hào),且信號(hào)強(qiáng)度清晰可辨表示為陽(yáng)性,樣本區(qū)域無(wú)特異性熒光信號(hào)或信號(hào)非常弱,難以區(qū)分表示為陰性。如果信號(hào)較弱可能需要重復(fù)實(shí)驗(yàn)或使用更高倍數(shù)的放大來(lái)進(jìn)一步判斷。
2、鑒別診斷
①與犢牛大腸桿菌病的鑒別診斷
犢牛輪狀病毒病和大腸桿菌病是兩種常見(jiàn)的犢牛疾病,它們的臨床癥狀和病理變化有一定的相似性,在疾病防控過(guò)程中,需要做好有效的鑒別。首先,從病因上區(qū)分,犢牛輪狀病毒病是由輪狀病毒引起的,而犢牛大腸桿菌病是由致病性大腸桿菌引起的。輪狀病毒屬于呼腸孤病毒科,是一種單股RNA病毒,而大腸桿菌則屬于腸桿菌科是一種革蘭氏陰性菌。其次,從臨床癥狀上區(qū)分,犢牛輪狀病毒病的主要癥狀是腹瀉,糞便呈水樣或糊狀,顏色為黃色或白色,有時(shí)伴有脫水和食欲不振。而犢牛大腸桿菌病的主要癥狀也是腹瀉,但糞便呈綠色或棕色,有時(shí)伴有惡臭,嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致敗血癥。再次,從病理變化上區(qū)分,犢牛輪狀病毒病的病理變化主要表現(xiàn)為腸道黏膜充血、水腫和出血,腸道內(nèi)有大量的輪狀病毒粒子。而犢牛大腸桿菌病的病理變化主要表現(xiàn)為腸道黏膜壞死、潰瘍和腸道內(nèi)有大量的大腸桿菌。最后,從實(shí)驗(yàn)室檢查上區(qū)分,犢牛輪狀病毒病的診斷主要依靠病毒分離和核酸檢測(cè),而犢牛大腸桿菌病的診斷主要依靠細(xì)菌培養(yǎng)和抗原檢測(cè)。
②與犢牛病毒性腹瀉的鑒別診斷
犢牛輪狀病毒病的病原為輪狀病毒,病毒粒子呈圓形或橢圓形,具有雙層衣殼,基因組為單股RNA,病毒對(duì)酸堿環(huán)境敏感,抵抗力不強(qiáng),一般消毒劑均可將其滅活。犢牛病毒性腹瀉的病原為牛病毒性腹瀉病毒(BVDV),屬于黃病毒科的一員,病毒粒子呈球形,具有單層衣殼,基因組為單股RNA,對(duì)酸堿環(huán)境具有一定的抵抗力,一般消毒劑難以將其滅活。兩者之間的臨床癥狀也存在一定差異,犢牛輪狀病毒病的臨床癥狀主要表現(xiàn)為食欲不振、嘔吐、腹瀉、脫水、生長(zhǎng)遲緩等,病程一般為7~14d,死亡率較低。而犢牛病毒性腹瀉的臨床癥狀與輪狀病毒病相似,但病程較長(zhǎng),可達(dá)數(shù)周甚至數(shù)月。病情較重時(shí),可出現(xiàn)頑固性腹瀉、食欲喪失、消瘦、生長(zhǎng)發(fā)育受阻等癥狀。死亡率較高,嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致?tīng)倥H捍罅克劳?。從病理學(xué)角度來(lái)看,前者主要表現(xiàn)為小腸黏膜充血、出血、潰瘍等。腸道內(nèi)容物呈水樣,含有黏液和少量血液。犢牛病毒性腹瀉主要體現(xiàn)在肝臟、腎臟、肺臟等器官的實(shí)質(zhì)性病變,腸道病變較輪狀病毒病嚴(yán)重,腸道內(nèi)容物呈黏液狀,有時(shí)可見(jiàn)到纖維素性偽膜。
七、犢牛腹瀉的治療方案
1、西藥治療方案
西藥治療輪狀病毒引起的腹瀉主要采用抗菌消炎,增強(qiáng)身體抵抗力、止瀉,加強(qiáng)電解質(zhì)補(bǔ)充為主要原則。常用的抗生素主要有慶大霉素和鹽酸環(huán)丙沙星兩種抗生素的使用劑量分別為2萬(wàn)~4萬(wàn)IU/kg·bw,和20mg/kg·bw,每日2次,肌內(nèi)注射,使用周期為3~5d。增強(qiáng)牛全身體抵抗力推薦使用黃芪多糖,按照每噸飼料添加1000g,每天投喂2次,連續(xù)使用一周。緩解腹瀉癥狀推薦使用藥用炭,按照每頭牛使用200g,一次口服。補(bǔ)充電解質(zhì)推薦使用5%的葡萄糖氯化鈉注射液500mL,搭配使用10%的維生素C注射液10mL,20%的安鈉咖注射液10mL,混合之后靜脈注射,每天1次,連續(xù)使用3~5d。
2、中藥治療
中醫(yī)辨證犢牛腹瀉主要根據(jù)臨床癥狀和肛門色澤進(jìn)行辨證論治。一般濕熱瀉推薦使用葛根芩連湯加減。每頭牛葛根、黃芩、黃連各20g,甘草、茯苓、澤瀉、白術(shù)、車前子各15g。每劑藥加水量約為2000~2500mL。脾虛瀉推薦使用參苓白術(shù)散加減。每頭牛黨參、茯苓、白術(shù)、甘草各15g,山藥、蓮子、扁豆、砂仁、薏苡仁各20g,加水量約為2000~2500mL。頭煎沸后煎30min,二煎沸后煎20min。寒濕瀉推薦使用溫中散寒湯加減。每頭牛干姜、肉桂、甘草各15g,吳茱萸、白術(shù)、茯苓、陳皮、草果各20g。上述三種中藥組方每劑藥加水量約為2000~2500mL,頭煎沸后煎30min,二煎沸后煎20min,每劑藥煎煮后剩余約500~700mL藥液,將剩余藥液分成2~3次,每次給??诜?00~150mL,連服3~5劑。按照上述中西醫(yī)結(jié)合治療手段,對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)的患病牛進(jìn)行了9d的治療,有3頭犢牛因?yàn)椴∏閲?yán)重治療無(wú)效死亡,剩余患病牛逐漸恢復(fù)健康。
八、犢牛腹瀉的預(yù)防措施
選擇優(yōu)質(zhì)、新鮮、干凈的飼料,避免喂食霉變、變質(zhì)或污染的飼料。合理搭配飼料,確保營(yíng)養(yǎng)全面。在斷奶時(shí),及時(shí)更換適宜的飼料,以防止消化不良。斷奶時(shí)機(jī)取決于多種因素,如牛的品種、氣候條件、飼養(yǎng)管理、飼料資源和犢牛的生長(zhǎng)發(fā)育等。通常,肉牛犢在3~4月齡、乳用牛犢在6~8月齡進(jìn)行斷奶較為合適。在這個(gè)階段,犢牛已經(jīng)具備了一定的采食能力,可以逐漸過(guò)渡到固體飼料。斷奶方法包括了逐漸斷奶法和一次性斷奶法,逐漸斷奶法是在一定時(shí)間內(nèi)逐漸減少母牛乳汁的供應(yīng),同時(shí)增加犢牛采食的固體飼料。這種方法較為緩和,有利于減輕犢牛的應(yīng)激反應(yīng)。一次斷奶法是將犢牛與母牛突然隔離開(kāi),使其無(wú)法繼續(xù)飲用乳汁。這種方法較為直接,但對(duì)犢牛的應(yīng)激相對(duì)較大。斷奶后,應(yīng)選擇營(yíng)養(yǎng)豐富、易消化的飼料,如玉米、豆粕、麥麩等。同時(shí),可額外添加0.1%~0.2%中草藥、礦物質(zhì)和維生素等添加劑,以提高飼料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和適口性。在斷奶過(guò)程中,要密切觀察犢牛的生長(zhǎng)發(fā)育和健康狀況,如發(fā)現(xiàn)異常情況,應(yīng)及時(shí)調(diào)整飼料和飼養(yǎng)管理措施。每天對(duì)犢舍進(jìn)行清理,保持干燥通風(fēng),確保牛舍溫度能夠控制在18~25℃。每天清理糞便,防止病原微生物滋生。牛舍環(huán)境消毒常用的消毒劑包括氯制劑、過(guò)氧化氫、次氯酸鈉、氫氧化鈉等。氯制劑有效氯濃度500mg/L。將氯制劑稀釋后,使用噴霧器對(duì)牛舍地面、墻壁、設(shè)施等進(jìn)行噴霧消毒。對(duì)于較難清洗的部位,可使用經(jīng)氯制劑浸泡的抹布進(jìn)行擦拭消毒。過(guò)氧化氫使用濃度為3%過(guò)氧化氫溶液。將過(guò)氧化氫稀釋后,使用噴霧器對(duì)牛舍地面、墻壁、設(shè)施等進(jìn)行噴霧消毒。次氯酸鈉有效氯濃度500mg/L。將次氯酸鈉稀釋后,使用噴霧器對(duì)牛舍地面、墻壁、設(shè)施等進(jìn)行噴霧消毒。氫氧化鈉濃度為1%~2%。將氫氧化鈉稀釋后,使用噴霧器對(duì)牛舍地面、墻壁、設(shè)施等進(jìn)行噴霧消毒,消毒作用30min。對(duì)于新引進(jìn)的犢牛,應(yīng)進(jìn)行隔離觀察,確認(rèn)健康后方可與原有牛群混養(yǎng)。
綜上所述,針對(duì)犢牛腹瀉的實(shí)際發(fā)病原因和流行趨勢(shì),注重做好規(guī)?;B(yǎng)殖場(chǎng)的流行病學(xué)分析,明確常發(fā)原因,并在治療方案制定過(guò)程中,應(yīng)該將抗病毒、抗菌綜合應(yīng)用,構(gòu)建完善的治療方案,確保在短時(shí)間內(nèi)控制患病牛的臨床癥狀,最終推動(dòng)牛養(yǎng)殖業(yè)的現(xiàn)代化和高質(zhì)量發(fā)展。
(作者單位:653300 云南省元江縣動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所)