寧夏地區(qū)2019—2022年羊口蹄疫O型免疫抗體檢測分析

摘要：：為了了解評估寧夏地區(qū)2019—2022年羊口蹄疫O型免疫抗體檢測效果情況，從22個縣、市（區(qū)）分別隨機抽取1個規(guī)模羊場、5個散養(yǎng)戶，共264個規(guī)模羊場、880個散養(yǎng)戶，采集5330份羊血清樣品，通過液相阻斷ELISA方法進行O型口蹄疫免疫抗體檢測。結(jié)果：2019—2022年羊血清樣品口蹄疫O型免疫抗體合格率分別為97.58%、87.95%、95.61%和93.14%，均達到國家規(guī)定≥70%的標準要求。結(jié)論：寧夏地區(qū)22個縣、市（區(qū)）羊O型口蹄疫免疫抗體效果整體較好，強制免疫工作達到預期效果，但部分地區(qū)免疫水平偏低，仍需要加強基層動物防疫體系建設(shè)，強化養(yǎng)殖場動物防疫主體責任，加大強制免疫宣傳力度，及時進行排查補免，提高羊群免疫抗體水平，從而達到保護效果。

關(guān)鍵詞：羊O型口蹄疫；抗體檢測；分析

口蹄疫病毒（foot-and-mouth disease virus，F(xiàn)MDV）是細小核糖核酸病毒科（picornaviridae）口瘡毒屬（aphthovirus）的成員[1]。FMDV有七個不同的血清型：A、O、C、SAT1（南非1型）、SAT2（南非2型） 、SAT3（南非3型）和Asia1（亞洲1型）。各型之間不產(chǎn)生交叉免疫。易于出錯的RNA復制過程發(fā)生的突變、重組以及宿主選擇（host selection）不斷產(chǎn)生新的FMDV變異株[2]。FMD潛伏期2～14 d?！禣IE陸生動物衛(wèi)生法典》描述的潛伏期14 d。臨床癥狀的嚴重程度因毒株、感染劑量、年齡、動物品質(zhì)、宿主物種和免疫水平而異。癥狀表現(xiàn)從輕微或不明顯到嚴重。發(fā)病率可能接近100%。成年動物通常死亡率低（1%～5%），但幼犢、羔羊和仔豬較高（20%或更高）。在不發(fā)生繼發(fā)或混合感染情況下，通常2周左右康復。為掌握寧夏地區(qū)羊O型口蹄疫強制免疫效果，寧夏回族自治區(qū)動物疾病預防控制中心每年對全區(qū)22個縣（市、區(qū)）羊口蹄疫免疫血清開展隨機抽查監(jiān)測，為科學防控羊口蹄疫提供參考。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

分別于2019—2022年春秋集中免疫結(jié)束后，從22個縣、市（區(qū)）分別隨機抽取1個規(guī)模羊場、5個散養(yǎng)戶，采集免疫注射20 d以上的羊全血樣品并及時按要求分離血清備用。

1.2 儀器和設(shè)備

單道微量移液器和多道微量移液器，購自Eppendorf公司；洗板機，購自北京普朗新技術(shù)有限公司；酶標儀，購自美國Bio-Rad公司；37 ℃恒溫箱，購自法國Jouan Innovens。

1.3 實驗試劑

實驗試劑采用中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)的口蹄疫O型液相阻斷ELISA抗體檢測試劑盒，所有試劑均按照產(chǎn)品說明書要求保存并使用。

1.4 實驗方法

采用口蹄疫液相阻斷ELISA試驗方法對羊血清進行免疫抗體檢測，檢測方法按檢測試劑盒使用說明書進行?？贵w液相阻斷ELISA的抗體效價≥26判定為合格，存欄家畜免疫抗體合格率≥70%即判定為免疫抗體水平合格。

1.5樣品來源及處理

中心實驗室于2019—2022年采集寧夏地區(qū)羊血液樣本共5 330份，每年采集樣品情況（見表1）。樣品采集后將采血管傾斜45 ℃放置，室溫靜置2～4 h，待血液完全凝固后血清自然析出，3 000 r/min離心5 min，將上清轉(zhuǎn)移至無菌離心管中，做好標記，置-20 ℃保存、備用。

2 結(jié)果與分析

1）2019—2022年寧夏羊O型口蹄疫春秋季集中免疫抗體檢測結(jié)果（見表2）。由表2可知，2019—2022年，全年平均羊口蹄疫O型抗體檢測合格率分別為97.58%、87.95%、95.61%、93.14%，均高于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部≥70%的要求。

2）2019—2022年寧夏羊O型口蹄疫春季規(guī)模場、散養(yǎng)戶集中免疫抗體檢測合格率分別為96.21%、81.52%、94.09%、96.9%，均達到農(nóng)業(yè)農(nóng)村部的要求（見表3）。

3）2019—2022年寧夏羊O型口蹄疫秋季規(guī)模場、散養(yǎng)戶集中免疫抗體檢測合格率分別為98.64%、94.39%、96.21%、89.09%，均達到農(nóng)業(yè)農(nóng)村部的要求（見表4）。

3 討論

2019—2022年寧夏羊O型口蹄疫春季集中免疫抗體檢測結(jié)果顯示，全區(qū)羊O型口蹄疫整體抗體合格率均超過農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定≥70%要求，其中2019年秋季更是高達98.94%，能夠起到較好的免疫保護水平，表明寧夏地區(qū)動物疫病強制免疫工作落實到位。

1）動物疫病保持較高免疫水平。2019—2022年寧夏羊O型口蹄疫免疫抗體合格率均超過70%以上，分別為97.58%、87.95%、95.61%、93.14%。

2）繼續(xù)高度重視動物疫病防控工作。雖然2019—2022年未發(fā)生口蹄疫等疫情，但疫情的風險點主要在免疫薄弱環(huán)節(jié)，如活畜調(diào)運環(huán)節(jié)和免疫不確實的養(yǎng)殖場點。

3）加強活畜移動監(jiān)管?；钚蟮漠惖匾苿优c動物疫病的發(fā)生密切相關(guān)。建議完善活畜調(diào)運的檢疫監(jiān)管、運前免疫、追溯調(diào)查等措施，減少運輸環(huán)節(jié)的發(fā)病風險。

4 建議

動物免疫接種是防止傳染病發(fā)生最直接有效的方法，國家對動物疫病實行預防為主、防治結(jié)合、分類管理、依靠科學、依靠群眾的方針，加強基礎(chǔ)免疫，有效防控重大動物疫病。繼續(xù)做好口蹄疫、高致病性禽流感等6種動物疫病強制免疫工作，在春、秋兩季集中免疫工作中，寧夏地區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳畜牧獸醫(yī)主管部門組織開展大規(guī)模疫苗接種活動，力求應免全免，總體達到群體免疫的基礎(chǔ)水平。本次監(jiān)測結(jié)果顯示，2019—2022年寧夏地區(qū)羊口蹄疫免疫效果總體較好，基本達到了預期的目標。

1）切實落實生產(chǎn)經(jīng)營者的防疫主體責任。寧夏地區(qū)制定“先打后補”標準，推進各縣“先打后補”工作，進一步實現(xiàn)強制免疫養(yǎng)殖場戶主采購、財政直補的政策。大力培育和鼓勵獸醫(yī)社會化服務(wù)組織發(fā)展，拓展獸醫(yī)社會化服務(wù)組織服務(wù)內(nèi)容。進一步提高各個環(huán)節(jié)生產(chǎn)經(jīng)營者的防疫意識，改造防疫設(shè)施，健全防疫制度，提高生物安全水平，壓實防疫主體責任[3]。要加強對生產(chǎn)經(jīng)營者與群眾開展相關(guān)動物疫病防控知識的宣傳與指導，增強養(yǎng)殖戶疫病防治意識與疫情報告意識，鼓勵廣大群眾互相監(jiān)督，積極主動上報動物疫情，盡可能地實現(xiàn)疫情早發(fā)現(xiàn)、早報告、早診斷、早處置。

2）切實強化疫病防控關(guān)鍵措施的落實。堅持半年和全年動物疫情監(jiān)測分析培訓工作；創(chuàng)新人才培養(yǎng)方式，繼續(xù)開展全區(qū)獸醫(yī)技術(shù)骨干人才輪訓；選送一批有想法、肯干事、有能力的鄉(xiāng)鎮(zhèn)和獸醫(yī)社會化服務(wù)組織的技術(shù)骨干在高校開展封閉式培訓，并將培訓知識應用于實際工作中。掌握真實的養(yǎng)殖情況，及時整頓各類養(yǎng)殖戶，清退落后養(yǎng)殖散戶；要詳細梳理販運人員和販運車輛相關(guān)信息，規(guī)范其經(jīng)營行為；要真正做到“到村、到場、到戶”的疫情排查；要做到科學抽樣、準確采樣、真實檢測的疫病監(jiān)測。只有疫病防控的各個關(guān)鍵環(huán)節(jié)都正常運轉(zhuǎn)起來，整個動物防疫體系才能有效運行[4]。

3）全力做好突發(fā)疫情的應急處置。按照自治區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳獸醫(yī)局動物疫病凈化總體要求，結(jié)合寧夏科技廳、農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳主推技術(shù)和動物疫病凈化項目建設(shè)，進一步做好動物疫病防控督查，對督查中存在問題的相關(guān)養(yǎng)殖場及縣、鄉(xiāng)（鎮(zhèn)）動物防疫機構(gòu)進行通報，督促及時整改。各級部門應加強人員隊伍、技術(shù)力量及防控物資等的應急儲備，當突發(fā)動物疫情時，要堅持“早、快、嚴、小”原則，力爭在最短時間內(nèi)徹底拔點滅源，防止疫情擴散蔓延。

4）強化聯(lián)防聯(lián)控，提高風險管理能力。進一步加強科研院所等部門的人畜共患病聯(lián)防聯(lián)控和技術(shù)研發(fā)與應用工作。獸醫(yī)部門單打獨斗是不可能做好動物疫病防控工作，從養(yǎng)殖到屠宰的全產(chǎn)業(yè)鏈條上，有許多動物疫情發(fā)生風險點。只有強化多部門的聯(lián)防聯(lián)控，才能切實提高全鏈條的風險管控能力，規(guī)范各類場所和車輛的清洗消毒程序，加強落實屠宰環(huán)節(jié)生物安全管理、樣品監(jiān)測、清洗消毒和無害化處理等措施?！?/p>

參考文獻：

[1] 朱紅剛，寧華杰，張韜，等.2018-2020年長沙市牛羊O型口蹄疫免疫抗體監(jiān)測分析[J].河南農(nóng)業(yè)，2021（24）：59-60.

[2] 索南卓瑪.牛羊O型口蹄疫免疫抗體檢測[J].中國畜牧獸醫(yī)文摘，2011，27（6）：44.

[3] 張玉巧.2017-2021年順昌縣牛羊O型口蹄疫免疫抗體檢測與分析[J].福建畜牧獸醫(yī)，2022，44（5）：17-19+22.

[4] 黃宇，何文娜，陳忠偉，等.2017-2019年廣西玉林市牛羊口蹄疫和小反芻獸疫血清抗體檢測[J].中國動物檢疫，2021，38（02）：13-19.

收稿日期：2023-10-07

基金項目：自治區(qū)重點研發(fā)項目《規(guī)模羊場地方高發(fā)疫病快速診斷技術(shù)研究與示范》（2021BEF02026）；自治區(qū)青年拔尖人才“自治區(qū)學術(shù)技術(shù)帶頭人”后備人選人才項目；自治區(qū)動物疫病凈化科技創(chuàng)新團隊項目（2020CXTDLX05）。

作者簡介：李莉（1987—" ），女，寧夏鹽池人，本科，獸醫(yī)師，研究方向：畜禽疾病診斷；李知新（1981- ），寧夏隆德人，博士，高級獸醫(yī)師，主要從事畜禽疾病診斷工作。

*通信作者：馬龍（1983.09— ），寧夏固原人，本科，獸醫(yī)師，研究方向：畜禽疾病診斷。