一起牛病毒性腹瀉病毒、副結(jié)核分枝桿菌和彎曲桿菌混合感染的診治報(bào)告

摘要：牛病毒性腹瀉病毒能夠引起牛腹瀉，而副結(jié)核分枝桿菌和彎曲桿菌同樣能引起各個(gè)年齡段的牛腹瀉，甚至流產(chǎn)，當(dāng)三種病原混合感染時(shí)，則會(huì)加重牛場(chǎng)的經(jīng)濟(jì)損失。本文通過(guò)一起牛病毒性腹瀉病毒、副結(jié)核分枝桿菌和彎曲桿菌混合感染的案例，從發(fā)病情況、實(shí)驗(yàn)室診斷、藥敏試驗(yàn)、防治等方面進(jìn)行論述，旨在為防控這三種疾病提供參考。

關(guān)鍵詞：牛病毒性腹瀉病毒；副結(jié)核分枝桿菌；彎曲桿菌；混合感染；診治

牛病毒性腹瀉是由于牛感染病毒性腹瀉病毒（BVDV）引起的傳染病，各年齡段牛均能感染，主要癥狀表現(xiàn)為發(fā)燒、黏膜病變、腹瀉、奶牛產(chǎn)奶量下降等[1]；副結(jié)核病是由副結(jié)核分枝桿菌（MAP）引起的牛羊等反芻動(dòng)物的疾病，本病以頑固性腹瀉、腸黏膜增厚為特征，副結(jié)核病在世界范圍內(nèi)廣泛流行，給養(yǎng)牛業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[2]；牛彎曲桿菌主要有兩種病型，即由胎兒彎曲桿菌引起的不育、胚胎早死及流產(chǎn)和由空腸彎曲桿菌引起的牛水樣腹瀉。當(dāng)牛場(chǎng)同時(shí)感染以上三種病原時(shí)，將會(huì)加重牛場(chǎng)的損失。現(xiàn)將一起牛病毒性腹瀉病毒、副結(jié)核分枝桿菌與彎曲桿菌混合感染的案例報(bào)道如下。

1 發(fā)病情況

齊齊哈爾某奶牛場(chǎng)共存欄奶牛2 500多頭，2023年5月中旬，5頭懷孕三月齡左右母牛先后發(fā)病，最初癥狀為食欲減退，下頜水腫，水樣腹瀉，獸醫(yī)技術(shù)人員針對(duì)腹瀉進(jìn)行了輸液治療，因發(fā)病奶牛下頜水腫，故懷疑有肝片吸蟲或者前后盤吸蟲感染，隨即用阿苯達(dá)唑按牛體重進(jìn)行了驅(qū)蟲，驅(qū)蟲后3 d有兩頭母牛流產(chǎn)，至來(lái)就診時(shí)，流產(chǎn)母牛精神狀態(tài)尚可，有食欲，腹瀉癥狀持續(xù)。

2 實(shí)驗(yàn)室診斷

將送檢的胎盤組織、母牛血液、母牛糞便等樣品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。

2.1 布氏桿菌檢測(cè)

將母牛血清進(jìn)行虎紅平板凝集試驗(yàn)，結(jié)果顯示陰性，排除布氏桿菌感染。

2.2 病原PCR檢測(cè)

按照病毒檢測(cè)試劑盒的操作說(shuō)明，對(duì)胎盤組織和糞便進(jìn)行研磨，提取模板DNA和RNA，然后設(shè)計(jì)好程序，在PCR擴(kuò)增儀上進(jìn)行牛病毒性腹瀉病毒、衣原體（CT）、牛冠狀病毒（BCV）、牛輪狀病毒（BRV）、牛細(xì)小病毒（BPV）、牛生殖道彎曲桿菌（BGC）、副結(jié)核分枝桿菌（MAP）的擴(kuò)增，再進(jìn)行電泳，在凝膠成像系統(tǒng)上觀察結(jié)果（見圖1～3）。第2泳道，在167 bp左右處出現(xiàn)亮帶，說(shuō)明BVDV陽(yáng)性（見圖1）；第6泳道和第7泳道分別在851 和452 bp左右處出現(xiàn)亮帶，說(shuō)明BGC和MAP陽(yáng)性（見圖3）；其余病原陰性。

2.3 寄生蟲檢測(cè)

采用飽和鹽水吸附法檢測(cè)糞便，未見蟲卵（見圖4）。

3 藥敏試驗(yàn)

將糞便稀釋后接種到血瓊脂平板上，選擇12種常用抗菌藥（頭孢氨芐、氟苯尼考、青霉素、多西環(huán)素、林可霉素、磺胺間甲氧嘧啶、慶大霉素、環(huán)丙沙星、鏈霉素、阿米卡星、新霉素、卡那霉素）均勻放置于平板上，培養(yǎng)過(guò)夜。結(jié)果顯示，細(xì)菌對(duì)環(huán)丙沙星和氟苯尼考敏感，對(duì)其他抗生素不敏感（見圖5）。

4 防治

4.1 治療

由于BVDV沒(méi)有特效藥，主要采取對(duì)癥治療的方法，可選用白芍散（白芍、大黃各24 g，車前子21 g，地榆炭18 g，金銀花、滑石、白頭翁各30 g，茯苓21 g，甘草9 g）等中藥方劑，研為細(xì)末，溫水一次灌服，連用3 d；對(duì)脫水較重的病牛，可用10%葡萄糖溶液緩解血容量降低；針對(duì)MAP和BGC的感染，可以靜脈注射敏感藥物環(huán)丙沙星，2.5～5 mg/kg·bw，2次/d，連用2～3 d，同時(shí)注意補(bǔ)液維持電解質(zhì)平衡。

4.2 預(yù)防

目前針對(duì)BVDV感染，主要采取預(yù)防為主的方針，加強(qiáng)檢疫，及時(shí)清除持續(xù)感染牛（PI牛），防止垂直感染；采取免疫預(yù)防，目前市場(chǎng)上有商業(yè)化的疫苗，自然康復(fù)牛和免疫接種的牛均可獲得良好的免疫力。要認(rèn)真對(duì)待引種工作，引種不慎或者飼喂被污染的飼料往往是導(dǎo)致發(fā)生MAP和BGC感染的主要原因，所以要定期消毒，飲用清潔水。目前我國(guó)市場(chǎng)尚無(wú)副結(jié)核病疫苗和彎曲桿菌病疫苗。

5 討論

BVDV結(jié)構(gòu)復(fù)雜，容易變異，在一些規(guī)模化奶牛場(chǎng)，BVDV的感染率逐步上升，有調(diào)查表明[3]一些地區(qū)BVDV抗原陽(yáng)性高達(dá)39.06%，對(duì)養(yǎng)牛業(yè)帶來(lái)了嚴(yán)重的危害。因此，在做好疫苗免疫的同時(shí)，需要定期進(jìn)行BVDV抗體監(jiān)測(cè)。PI牛為雌牛在懷孕期間前三個(gè)月感染BVDV所產(chǎn)下的犢牛，其體內(nèi)沒(méi)有BVDV抗體，外觀正常，生產(chǎn)性能下降，但機(jī)體持續(xù)對(duì)外排毒[4]。為切斷傳染源，須對(duì)PI牛進(jìn)行抗體檢測(cè)，首次檢測(cè)后對(duì)PI牛隔離，間隔21 d后檢測(cè)仍為陽(yáng)性牛進(jìn)行淘汰。MAP和BGC的根除，需要對(duì)養(yǎng)牛場(chǎng)定期進(jìn)行細(xì)菌的檢測(cè)，配合敏感抗生素進(jìn)行治療，及時(shí)淘汰陽(yáng)性牛，發(fā)病時(shí)盡早治療能取得較好的效果。

在臨床診療過(guò)程中，經(jīng)常碰到一些獸醫(yī)從業(yè)者或者養(yǎng)殖戶見到牛羊下頜水腫，會(huì)馬上判斷這牛羊得了肝蛭病，需要馬上驅(qū)蟲，但不見得有效果。在這就需要先弄明白一個(gè)問(wèn)題，哪些因素能夠引起牛羊水腫，首先是心臟病變，能引起心肌收縮力不足或右心衰竭的因素，如菌血癥、敗血癥等，它們能夠?qū)е蚂o脈回流受阻，引起牛羊下頜、胸前、腹下及四肢水腫；其次是腎臟疾病，當(dāng)某些細(xì)菌或毒性物質(zhì)引起牛羊患有慢性腎炎時(shí)，嚴(yán)重者就會(huì)出現(xiàn)面部、胸腹下和四肢水腫；再者就是肝臟疾病，飼料中含有毒性物質(zhì)或長(zhǎng)期食用霉變飼料，致使肝細(xì)胞變性，造成胃、腸靜脈血回流受阻，發(fā)生腹水、水腫、黃疸等癥狀；最后是吸蟲病，肝片吸蟲或前后盤吸蟲在瘤胃、膽管等位置長(zhǎng)期性機(jī)械刺激或產(chǎn)生的毒素引起牛羊消瘦，下頜、四肢水腫。

本案例中流產(chǎn)的兩頭牛出現(xiàn)下頜水腫的癥狀，在排除了寄生蟲因素外，基本上可以考慮為因腹瀉導(dǎo)致脫水，繼而電解質(zhì)失衡，時(shí)間一長(zhǎng)發(fā)生酸中毒，引起心力衰竭，發(fā)生下頜水腫。而流產(chǎn)則很可能由BGC導(dǎo)致。10 d后，筆者電話回訪，除1頭發(fā)病牛病情加重死亡外，其余牛未出現(xiàn)流產(chǎn)現(xiàn)象，大群已經(jīng)穩(wěn)定。下一步將繼續(xù)進(jìn)行檢測(cè)，以淘汰PI牛和控制住MAP和BGC感染。牛場(chǎng)腹瀉不可怕，怕的是找不到病因，濫用藥物，盲目治療，結(jié)果適得其反。隨著養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴(kuò)大，越來(lái)越多的養(yǎng)殖場(chǎng)出現(xiàn)病原混合感染的現(xiàn)象，這時(shí)就需要查明病因，精準(zhǔn)施治，減少損失，以最大程度地提高經(jīng)濟(jì)效益?！?/p>

參考文獻(xiàn)：

[1] 陳穎彬，李林，夏穎，等.牛病毒性腹瀉病毒E0基因重組嗜酸乳桿菌pMG36e-E0-LA-5對(duì)犢牛的免疫保護(hù)作用[J].中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2019，39（6）：1080-1084.

[2] WOLF R， BARKEMA H W， DE BUCK J， et al. High herd-level prevalence of Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis in Western Canadian dairy farms， based on environmental sampling [J]. Dairy Sci， 2014， 97 （10）：

6250-6259.

[3] 李娜，韓猛立，黃新，等.新疆石河子地區(qū)牛病毒性腹瀉病毒的分子流行病學(xué)調(diào)查[J].石河子大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2009，27（6）：706-711.

[4] WALZ PAUL H， CHAMORRO MANUEL F， M FALKENBERG SHOLLIE， et al. Bovine viral diarrhea virus：An updated American College of Veterinary Internal Medicine consensus statement with focus on virus biology， hosts， immunosuppression， and vaccination[J]. J Vet Intern Med， 2020， 34（5）：1690-1706.

收稿日期：2023-11-07

基金項(xiàng)目：黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)分院自擬重點(diǎn)項(xiàng)目（ZNKT-2022-ZD03）。

作者簡(jiǎn)介：陳亮（1983— ），山東臨朐人，碩士研究生，助理研究員，主要從事畜禽疾病診療技術(shù)的研究。