血清孤兒核受體4A1對兒童難治性肺炎支原體肺炎的預(yù)測價值

［摘要］目的探討血清孤兒核受體4A1（NR4A1）對兒童難治性肺炎支原體肺炎（RMPP）的預(yù)測價值。方法選取2022年4月至2023年4月河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院收治的200例肺炎支原體肺炎（MPP）患兒為研究對象，依據(jù)病情分為普通肺炎支原體肺炎（GMPP）組（n=132）、RMPP組（n=68）。比較各組血清NR4A1及臨床資料的差異；Pearson法分析血清NR4A1與血清C反應(yīng)蛋白（CRP）水平、白介素6（IL6）、白介素8（IL8）的相關(guān)性；受試者工作特征（ROC）曲線分析血清NR4A1對兒童RMPP的預(yù)測價值。結(jié)果RMPP組住院時間、高熱率、胸腔積液、肺實(shí)變、肺不張、中性粒細(xì)胞百分比（NEUT%）均較GMPP組增高，白蛋白較GMPP組降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t/Z/χ2值介于6.386～41.599之間，P＜0.05）；RMPP組血清NR4A1較GMPP組降低，CRP、IL6、IL8較GMPP組增高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t值介于10.279～16.889之間，P＜0.05）；急性期RMPP患兒血清NR4A1較恢復(fù)期降低，CRP、IL6、IL8較恢復(fù)期增高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t值介于6.367～16.889之間，P＜0.05）；Pearson相關(guān)性分析顯示，血清NR4A1與CRP、IL6、IL8呈負(fù)相關(guān)性（r值分別為-0.335、-0.507、-0.291，P＜0.05）；ROC曲線分析顯示，血清NR4A1預(yù)測RMPP的曲線下面積（AUC）為0.870（95%CI：0.821～0.919），最佳截斷值為0.89，靈敏度和特異度分別為74.21%、92.60%。結(jié)論RMPP患兒血清NR4A1低表達(dá)，且與病情恢復(fù)程度、炎癥因子表達(dá)相關(guān)，對兒童RMPP具有較好的預(yù)測價值。

［關(guān)鍵詞］孤兒核受體4A1；難治性肺炎支原體肺炎；兒童；肺炎支原體；炎癥因子

Doi：10.3969/j.issn.1673-5293.2024.12.007

［中圖分類號］R179［文獻(xiàn)標(biāo)識碼］A" "［文章編號］1673-5293（2024）12-0048-05

［Abstract］ Objective To investigate predictive value of serum nuclear receptor 4A1（NR4A1） for refractory Mycoplasma pneumoniae pneumonia （RMPP） in children. Methods 200 children with Mycoplasma pneumoniae pneumonia （MPP） who admitted to The First Affiliated Hospital of Hebei North University from April 2022 to April 2023 were selected as the study subjects，and they were divided into general Mycoplasma pneumoniae pneumonia （GMPP） group （n=132） and RMPP group （n=68） according to disease condition of the child.The differences in serum NR4A1 level and clinical data of the children were compared between the two groups.Pearson correlation analysis was used to analyze correlations of serum NR4A1 with serum Creactive protein （CRP），interleukin6 （IL6） and interleukin8 （IL8）.Receiver operating characteristic （ROC） curve was used to analyze predictive value of serum NR4A1 for RMPP in children. Results Compared with GMPP group，length of hospital stay，high fever rate，incidences of pleural effusion，lung consolidation，pulmonary atelectasis and neutrophil percentage （NEUT%） of the children in RMPP group were higher than those in GMPP group，while the serum albumin level was lower，and the differences were statistically significant （t/Z/2 values ranged from 6.386 to 41.599，all Plt;0.05）.The serum NR4A1 level of the children in RMPP group was lower than that in GMPP group，while the serum levels of CRP，IL6 and IL8 were higher than those in GMPP group，and the differences were statistically significant （t values ranged from 10.279 to 16.889，all Plt;0.05）.The serum NR4A1 level of the children in acute RMPP stage was lower than that in recovery RMPP stage，while the serum levels of CRP，IL6 and IL8 were higher than those in recovery stage，and the differences were statistical significant （t value ranged from 6.36716.889，all Plt;0.05）.Pearson correlation analysis showed that the serum NR4A1 was negatively correlated with CRP，IL6 and IL8 （r=-0.335，-0.507 and -0.291 respectively，all Plt;0.05）.ROC curve analysis showed that the area under the curve （AUC） of serum NR4A1 for predicting RMPP was 0.870 （95%CI：0.8210.919），the best cutoff value was 0.89，and the sensitivity and the specificity were 74.21% and 92.60%，respectively. Conclusion The expression of NR4A1 in serum is low in children with RMPP，and is related to recovery degree of the disease and expression of inflammatory factors，therefore，it has a good predictive value for RMPP in children.

［Key words］ NR4A1;refractory Mycoplasma pneumoniae pneumonia;children；Mycoplasma pneumoniae; inflammatory factor

肺炎支原體肺炎（mycoplasma pneumoniae pneumonia，MPP）由肺炎支原體（mycoplasma pneumoniae，MP）感染所致，是兒童社區(qū)獲得性肺炎的最常見類型，其發(fā)病率約占兒童社區(qū)獲得性肺炎的10%～30%［12］。大部分MPP患兒病情輕、呈自限性，臨床預(yù)后良好，但仍有部分患兒發(fā)展為難治性肺炎支原體肺炎（refractory Mycoplasma pneumoniae pneumonia，RMPP），以肺外臟器損害、肺實(shí)變、胸腔積液等為主要表現(xiàn)，臨床治療較為棘手，預(yù)后較差，嚴(yán)重者甚至死亡［3］。因此，對兒童RMPP進(jìn)行早期識別、干預(yù)對改善臨床預(yù)后至關(guān)重要［4］。RMPP的發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，多認(rèn)為與大環(huán)內(nèi)酯類耐藥MP感染及免疫炎癥反應(yīng)有關(guān)。孤兒核受體4A1（nuclear receptor subfamily 4 group A member 1，NR4A1）為NR4A超家族成員，對細(xì)胞增殖、分化、炎癥、代謝等過程均具有調(diào)控作用［5］。研究表明，NR4A1參與了慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）、肺癌、哮喘等多種炎癥性肺部疾病的發(fā)生發(fā)展，但NR4A1與MPP的相關(guān)研究鮮見報道，其在RMPP臨床診療中的價值尚不清楚［6］。本研究旨在探討MPP患兒血清NR4A1變化規(guī)律及其與RMPP的相關(guān)性，以期為RMPP的臨床診療提供新思路。

1資料與方法

1.1研究對象

選取2022年4月至2023年4月河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院收治的200例MPP患兒為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《兒童肺炎支原體肺炎診療指南（2023年版）》制定的MPP診斷標(biāo)準(zhǔn)［7］；②年齡2～14歲；③血清MP抗體滴度≥1：160；④臨床資料完整；⑤監(jiān)護(hù)人知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：①細(xì)菌、真菌、病毒等其他病原菌感染所致的肺炎；②合并惡性腫瘤、免疫性疾病等；③支氣管肺發(fā)育不良、肺結(jié)核、支氣管哮喘等肺部疾病。MPP患兒均接受大環(huán)內(nèi)酯類藥物治療，若≥7d治療無效，且持續(xù)發(fā)熱、咳嗽，肺部影像學(xué)檢查無改善或加重，則診斷為RMPP［8］。依據(jù)病情將MPP患兒分為普通肺炎支原體肺炎組（general Mycoplasma pneumoniae pneumonia，GMPP）、RMPP組。研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審核批準(zhǔn)（批準(zhǔn)號：W2023035）。

1.2資料采集

采集患兒年齡、性別、住院時間、臨床癥狀、肺部影像學(xué)及實(shí)驗(yàn)室檢查等基線資料。臨床癥狀包括高熱、呼吸急促、咳嗽、肺部哮鳴音、細(xì)濕啰音；肺部影像學(xué)表現(xiàn)包括肺實(shí)變、肺不張、肺壞死、胸腔積液等。全自動生化分析儀檢測白蛋白，全自動模塊式血液體液分析儀檢測白細(xì)胞計(jì)數(shù)（white blood cell，WBC）、血小板計(jì)數(shù)（platelet，PLT）、血紅蛋白（hemoglobin，Hb）、嗜酸性粒細(xì)胞百分比（Eosinophils，EOS%）、中性粒細(xì)胞百分比（neutrophil，NEUT%）。免疫透射比濁法測定血清C反應(yīng)蛋白（Creactive protein，CRP）水平，酶聯(lián)免疫吸附試劑盒（購于武漢賽培生物有限公司）測定血清白介素6（interleukin6，IL6）、白介素8（interleukin8，IL8）水平。

1.3血清NR4A1水平檢測

發(fā)病第1d（急性期），抽取MPP患兒靜脈血3mL，3 500r/min、4℃離心10min，分離血清并于-80℃保存?zhèn)溆?。RTPCR法測定血清NR4A1水平，利用總RNA提取試劑盒提取血清總RNA并反轉(zhuǎn)錄為cDNA，以cDNA為模板行PCR擴(kuò)增，2-ΔΔCt法測算血清NR4A1相對表達(dá)，βactin為內(nèi)參。反應(yīng)條件：94℃ 5min，94℃ 1min，55℃ 1min，35個循環(huán)。NR4A1上游序列：5′GCACAGCTTGGGTGT TGATGT3′，下游序列：5′GAGCCCGTGTCGAT CAGTGAT3′。βactin上游序列：5′TGCGTGA CATCAAAGAGAAG3′，下游序列：5′TCCATAC CCAAGAAGGAAGG3′。RMPP患兒接受內(nèi)科保守治療，其中65例于病情好轉(zhuǎn)后（恢復(fù)期）再次采集血樣，檢測指標(biāo)、檢測方法同上，剩余3例未接受再次采集血樣。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用SPSS 28.0分析數(shù)據(jù)。計(jì)量資料非正態(tài)分布以中位數(shù)及四分位間距M（Q1～Q3）表示，組間比較采用MannWhitney U檢驗(yàn)；符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x-±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)（n）和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；相關(guān)性分析用Pearson相關(guān)性分析法。受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線分析血清NR4A1對RMPP的預(yù)測價值。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1 GMPP組與RMPP組基線資料比較

RMPP組住院時間、高熱率、胸腔積液、肺實(shí)變、肺不張、NEUT%均較GMPP組增高，白蛋白較GMPP組降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t/Z/χ2值介于6.386～41.599之間，P＜0.05），見表1。

2.2 GMPP組與RMPP組血清學(xué)指標(biāo)比較

發(fā)病第1d（急性期）時，RMPP組血清NR4A1較GMPP組降低，CRP、IL6、IL8較GMPP組增高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t值介于10.279～16.889之間，P＜0.05），見表2。

2.3急性期和恢復(fù)期RMPP患兒血清學(xué)指標(biāo)比較

急性期RMPP患兒血清NR4A1較恢復(fù)期降低，CRP、IL6、IL8較恢復(fù)期增高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t值介于6.367～16.889之間，P＜0.05），見表3。

2.4 NR4A1與CRP、IL6、IL8的相關(guān)性分析

Pearson相關(guān)性分析顯示，血清NR4A1與CRP、IL6、IL8呈負(fù)相關(guān)性（r值分別為-0.335、-0.507、-0.291，P＜0.05），見表4。

2.5血清NR4A1對RMPP的預(yù)測價值

ROC曲線分析顯示，血清NR4A1預(yù)測RMPP的曲線下面積（area under the curve，AUC）為0.870（95%CI：0.821～0.919），最佳截斷值為0.89，靈敏度和特異度分別為74.21%、92.60%，見圖1。

3討論

3.1 RMPP患兒肺部損害明顯，亟需開展早期識別和干預(yù)

近年來，隨著MP對大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物的耐藥性增加，RMPP發(fā)病率明顯上升，并趨于低齡化，其所導(dǎo)致的閉塞性細(xì)支氣管炎、肺不張、肺外并發(fā)癥等嚴(yán)重威脅患兒生命健康［9］。因此，對RMPP開展早期識別、干預(yù)尤為重要。既往研究對RMPP危險因素的分析主要集中于年齡、臨床表現(xiàn)、肺部影像學(xué)及血常規(guī)等方面。鄭雪香等［10］發(fā)現(xiàn)，普通MPP和RMPP患兒的高熱發(fā)生率、肺實(shí)變發(fā)生率、肺不張發(fā)生率、氣促發(fā)生率、胸腔積液發(fā)生率、WBC、PLT、NEUT%、Hb、白蛋白、降鈣素原、LDH、肺實(shí)變發(fā)生率、肺不張發(fā)生率比較存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，且高熱、Hb、LDH、肺實(shí)變?yōu)榛純喊l(fā)生RMPP的獨(dú)立危險因素。本研究顯示，RMPP組住院時間、高熱率、胸腔積液、肺實(shí)變、肺不張、NEUT%均較GMPP組明顯增高，白蛋白較GMPP組明顯降低，提示RMPP患兒肺部損害明顯，亟需早期識別、干預(yù)。

3.2 RMPP患兒血清NR4A1水平降低，與RMPP病情發(fā)展密切相關(guān)

NR4A1定位于人類12號染色體，由598個氨基酸組成，其可抑制多種炎癥因子和趨化因子表達(dá)，減輕機(jī)體炎癥反應(yīng)，從而發(fā)揮抗炎癥性肺部疾病的作用［11］。鄧俊華等［12］證實(shí)，COPD患者血清NR4A1水平低于對照組，且急性加重期患者血清NR4A1水平低于穩(wěn)定期；血清NR4A1水平與FEV1、FEV1% pred、FEV1/FVC等肺功能指標(biāo)成正相關(guān)，并與CRP、IL6等炎癥因子表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。Li等［13］研究發(fā)現(xiàn)，急性肺損傷（acute lung injury，ALI）模型大鼠肺組織中NR4A1表達(dá)下調(diào)，給予NR4A1激動劑預(yù)處理可提高肺組織NR4A1表達(dá)，并抑制NFκB炎癥信號通路，從而改善ALI大鼠肺損傷。Chen等［14］利用LPS誘導(dǎo)的哮喘小鼠模型證實(shí)，NR4A1可通過調(diào)控NFκB介導(dǎo)的炎癥信號通路，抑制支氣管上皮細(xì)胞凋亡，從而改善哮喘癥狀。但NR4A1在RMPP發(fā)生發(fā)展中的作用尚未明確。本研究結(jié)果顯示，RMPP組血清NR4A1較GMPP組明顯降低，急性期患兒血清NR4A1較恢復(fù)期明顯降低，提示NR4A1與RMPP患兒病情發(fā)展密切相關(guān)。

3.3血清NR4A1對RMPP病有較好的預(yù)測價值

目前認(rèn)為，RMPP所致肺部損害與MP感染介導(dǎo)的免疫炎癥反應(yīng)有關(guān)［15］。本研究結(jié)果顯示，RMPP組血CRP、IL6、IL8較GMPP組明顯增高，且急性期RMPP患兒血清CRP、IL6、IL8較恢復(fù)期明顯增高，與付彬彬等［16］報道一致。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，血清NR4A1與CRP、IL6、IL8呈負(fù)相關(guān)。分析其原因可能為肺部MP感染可激活T淋巴細(xì)胞免疫反應(yīng)，誘導(dǎo)炎癥因子大量釋放，加劇炎癥級聯(lián)反應(yīng)并導(dǎo)致病情進(jìn)一步加重；NR4A1則可通過負(fù)向調(diào)控炎癥因子表達(dá)，抑制炎癥級聯(lián)反應(yīng)，從而阻止RMPP病程進(jìn)展。ROC曲線分析顯示，血清NR4A1預(yù)測RMPP的AUC為0.870（95%CI：0.821～0.919），最佳截斷值為0.89，靈敏度和特異度分別為74.21%、92.60%。提示血清NR4A1對RMPP有良好的預(yù)測價值，可用于RMPP早期診斷及病情監(jiān)測。

綜上所述，RMPP患兒血清NR4A1低表達(dá)，且與病情恢復(fù)程度、炎癥因子表達(dá)相關(guān)，對兒童RMPP具有較好的預(yù)測價值。

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［專業(yè)責(zé)任編輯：孫新］

［中文編輯：郭樂倩；英文編輯：楊周岐］

［收稿日期］2023-12-04

［基金項(xiàng)目］河北省2021年度醫(yī)學(xué)科學(xué)研究課題計(jì)劃（20211026）

［作者簡介］史偉勛（1989—），男，初級檢驗(yàn)師，主要從事臨床檢驗(yàn)相關(guān)的研究。

［通訊作者］孫喜斌，副主任技師。