砜吡草唑?qū)?種環(huán)境生物的毒性研究

摘要 ［目的］明確砜吡草唑?qū)?種環(huán)境生物的急性毒性 。［方法］參照《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則》GB/T 31270—2014和《化學(xué)農(nóng)藥天敵（瓢蟲）急性接觸毒性試驗(yàn)準(zhǔn)則》NY/T 3088—2017，開展了20%砜吡草唑懸浮劑對(duì)鳥、家蠶、蚯蚓、蜜蜂、赤眼蜂和瓢蟲的急性毒性試驗(yàn)。［結(jié)果］20%砜吡草唑懸浮劑對(duì)日本鵪鶉7 d-LD50＞2 000.0 mg/kg 、家蠶4 d-LC50為2 942.87 mg/L、蜜蜂48 h-LD50＞100.0 μg/蜂和蚯蚓14 d-LC50>100 mg/kg，對(duì)寄生性天地赤眼蜂的安全系數(shù)為0.803，對(duì)七星瓢蟲的安全系數(shù)為6.927。［結(jié)論］20%砜吡草唑懸浮劑對(duì)鳥、家蠶、蚯蚓、蜜蜂均為低毒，對(duì)七星瓢蟲為低風(fēng)險(xiǎn)，對(duì)赤眼蜂為中等風(fēng)險(xiǎn)，對(duì)陸生生物友好。

關(guān)鍵詞 砜吡草唑；環(huán)境生物；急性毒性

中圖分類號(hào) X171.5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 0517-6611（2024）21-0114-05

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2024.21.024

開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識(shí)碼（OSID）：

Acute Toxicity of Pyroxasulfone to Six Environmental Organisms

LI Yu-lu1，KONG Xuan-qing2，3，CHENG Ang1 et al

（1.Hunan University of Humanities，Science and Technology，Loudi，Hunan 413800；2.Hunan Research Institute of Chemical Industry Co.，Ltd./National Engineering Research Center for Agrochemicals，Changsha，Hunan 410014;3.Hunan Safety Science and Technology Co.，Ltd.，Changsha， Hunan 410014）

Abstract ［Objective］To confirm the acute toxicity of pyroxasulfone to terrestrial organisms.［Method］ Tests were conducted according to“Test guidelines on environmental safety assessment for chemical pesticides”，GB/T 31270—2014 and“Chemical pesticide-Guideline for natural enemy （ladybird beetles） acute contact toxicity test”NY/T 3088—2017，and to test the acute toxicity of pyroxasulfone to six terrestrial organisms.［Result］20% pyroxasulfone SC for 7 d-LD50 of Coturnix japonica was ＞2 000.0 mg/kg，4 d-LC50 of Bombyx mori was 2 942.87 mg/L，48 h-LD50 of Apis mellifera L was ＞100.0 μg/bee，14 d-LC50 of Eisenia foetida was >100 mg/kg;the safety factor of pyroxasulfone to Trichogramma japonicun Ashmead and Coccinella septempunctata were 0.803 and 6.927.［Conclusion］The herbicide is low toxicity to C.japonica，B.mori，A.mellifera and A.mellifera，low risk to C.septempunctata，and moderate risk to T.japzonicun Ashmead.So the herbicide is friendly to terrestrial organisms.

Key words Pyroxasulfone;Environmental organisms;Acute toxicity

基金項(xiàng)目 湖南省科技創(chuàng)新計(jì)劃項(xiàng)目（2019NK4170）；湖南省普通高等學(xué)?？萍紕?chuàng)新團(tuán)隊(duì)支持項(xiàng)目“農(nóng)藥無(wú)害化應(yīng)用”。

作者簡(jiǎn)介 李雨露（1998—），女，湖南冷水江人，碩士研究生，研究方向：農(nóng)藥環(huán)境毒理。*通信作者，研究員，博士，從事農(nóng)藥殘留及環(huán)境毒理研究。

收稿日期 2023-11-14

隨著農(nóng)業(yè)栽培模式與栽培技術(shù)的不斷發(fā)展，除草劑在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中得到了廣泛的應(yīng)用。使用除草劑不僅能提高農(nóng)田雜草的管理效率，同時(shí)也降低了農(nóng)業(yè)生產(chǎn)成本，這是在目前農(nóng)村勞動(dòng)力短缺情況下勞動(dòng)人民的一種理性選擇［1］。我國(guó)農(nóng)田雜草危害每年發(fā)生面積超過(guò)9.3億hm2，除草劑的使用大量減少了農(nóng)產(chǎn)品的損失，目前，全球除草劑銷售額已占農(nóng)藥總銷售額的50%以上［2］。除草劑在使用過(guò)程中，常為器械噴施或撒施，導(dǎo)致藥液在施藥過(guò)程中產(chǎn)生蒸發(fā)、漂移等現(xiàn)場(chǎng)，對(duì)大氣、土壤、水體等產(chǎn)生嚴(yán)重的污染［3］，從而致使環(huán)境生物受到威脅。研究發(fā)現(xiàn)，除草劑草甘膦的大量使用，對(duì)水生、陸生以及兩棲動(dòng)物在神經(jīng)毒性、氧化毒性、生殖毒性、基因毒性以及致畸、致癌作用等方面均能產(chǎn)生一定的影響［4］。農(nóng)藥對(duì)環(huán)境生物的毒性日益受到人們的關(guān)注，在國(guó)內(nèi)外的農(nóng)藥登記資料要求中，對(duì)非靶標(biāo)環(huán)境生物的安全性評(píng)價(jià)已是必不可少的材料之一。

砜吡草唑（ pyroxasulfone）是日本組合化學(xué)和日本庵原化學(xué)公司開發(fā)的一種芽前土壤處理除草劑，化學(xué)名稱為3-（（（5-（二氟甲氧基）-1-甲基-3-（三氟甲基）-1H-吡唑-4-基）甲基）磺?；?5，5-二甲基-4，5-二氫異噁唑，CAS號(hào)為447399-55-5［5-6］。其作用機(jī)制是被雜草幼根與幼芽吸收之后，幼苗的分生組織和胚芽鞘受到破壞，抑制植物體內(nèi)超長(zhǎng)鏈脂肪酸的生物合成，從而導(dǎo)致雜草的死亡［7］。砜吡草唑在日本、澳大利亞、美國(guó)、加拿大、新西蘭等國(guó)家已經(jīng)批準(zhǔn)登記，目前在我國(guó)獲得登記的制劑產(chǎn)品僅有1個(gè)［8］，但國(guó)內(nèi)對(duì)砜吡草唑田間雜草防效的研究較多。砜吡草唑?qū)Χ喾N夏熟作物田間雜草均具有良好活性，對(duì)鵝觀草、多花黑麥草、雀麥、棒頭草、播娘蒿、蠟燭草、大巢菜、麥家公、澤漆的株抑制率和鮮重抑制率均可達(dá)90%以上，且與其他除草劑復(fù)配后同樣具有較好的防效［9-11］，對(duì)小麥、玉米、花生、向日葵、大豆等作物田間雜草的防效較好，且對(duì)農(nóng)作物安全［12-14］，具有較好的市場(chǎng)應(yīng)用前景。目前國(guó)內(nèi)關(guān)于砜吡草唑生態(tài)毒理相關(guān)的研究還未見報(bào)道，基于此，為明確砜吡草唑?qū)Νh(huán)境生物的安全性，筆者參照試驗(yàn)指南［15-20］，開展了該藥劑對(duì)鳥、家蠶、蚯蚓、蜜蜂、瓢蟲和赤眼蜂的急性毒理試驗(yàn)，為評(píng)價(jià)該藥劑的環(huán)境安全性和風(fēng)險(xiǎn)提供理論依據(jù)，并為其在田間的合理使用提供指導(dǎo)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試生物 日本鵪鶉（Coturnix japonica），長(zhǎng)沙市三通鵪鶉養(yǎng)殖有限公司提供，購(gòu)入后在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)飼養(yǎng)，飼料由長(zhǎng)沙華港飼料油公司提供，每天給食2次，自動(dòng)給水器不間斷提供純水。

家蠶（Bombyx mori），品種為7湘×9芙，蠶卵購(gòu)于湖南省蠶?？茖W(xué)研究所，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)置于人工氣候箱中孵化。

赤子愛勝蚓（Eisenia foetida），引種于山東農(nóng)業(yè)大學(xué)，實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)繁殖，采用腐熟牛糞和人工土壤飼養(yǎng)，試驗(yàn)前挑選出符合試驗(yàn)要求的蚯蚓置于人工土壤中馴養(yǎng)。

意大利蜜蜂（Apis mellifera L），購(gòu)于益陽(yáng)市資陽(yáng)區(qū)博采蜜蜂養(yǎng)殖專業(yè)合作社，置于室外飼養(yǎng)，飼喂白糖水和蜂蜜水，試驗(yàn)前1 d清晨從蜂箱中引入至試驗(yàn)蜂籠中馴養(yǎng)。

稻螟赤眼蜂（Trichogramma japonicun Ashmead），購(gòu)于湖南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院水稻研究所，寄主為米蛾卵，試驗(yàn)前置于人工氣候箱中孵化，選擇羽化48 h內(nèi)的成蜂進(jìn)行試驗(yàn)。

七星瓢蟲（Coccinella septempunctata），采自長(zhǎng)沙縣春華鎮(zhèn)野外，實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)繁殖3代以上，人工收集同一批次卵塊，孵化后選擇2齡幼蟲進(jìn)行試驗(yàn)。

1.2 試驗(yàn)儀器 AUY220型萬(wàn)分之一電子天平和TXB422L型百分之一電子天平（日本島津）；PRX-250B型人工氣候箱（寧波海曙賽福）；WSB-1-H2型溫濕度計(jì)（鄭州博洋）；移液槍、燒杯、量筒、玻璃棒等。

1.3 供試藥劑與試劑 20%砜吡草唑懸浮劑，由湖南省農(nóng)用化學(xué)品重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供；丙酮（分析純），購(gòu)于國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

1.4 試驗(yàn)方法

1.4.1 鳥毒性試驗(yàn)。

鳥毒性試驗(yàn)采用經(jīng)口灌藥法［15］。選擇同批孵化的健康、無(wú)病、活潑鵪鶉，試驗(yàn)前在實(shí)驗(yàn)室馴養(yǎng)8 d，體重在90～100 g，試驗(yàn)前24 h停止喂食。根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果設(shè)計(jì)2 000.0 mg/kg試驗(yàn)劑量，用純水將供試藥劑配制成相應(yīng)的染毒濃度，采用經(jīng)口一次性灌胃染毒，灌胃藥量為1 mL/100 g，設(shè)置空白對(duì)照，每處理不設(shè)重復(fù)，雌雄各5只鵪鶉。染毒后置于溫度25～28 ℃、濕度50%～75%、光照周期為L(zhǎng)∶D=16 h∶8 h的觀察室內(nèi)培養(yǎng)，試驗(yàn)周期7 d，藥劑處理4 h后按日常飼養(yǎng)給食，自動(dòng)給水器不間斷提供飲水，每天觀察并記錄受試鵪鶉的中毒癥狀及死亡數(shù)，計(jì)算毒力回歸方程及LD50值。

1.4.2 家蠶毒性試驗(yàn)。

家蠶毒性試驗(yàn)采用浸葉法［16］。試驗(yàn)用蠶選擇健康2齡起蠶，由筆者所在實(shí)驗(yàn)室孵化，孵化率超過(guò)95%。根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果設(shè)計(jì)1 929.01、2 314.81、2 777.78、3 333.33、4 000.00 mg/L試驗(yàn)劑量，將藥劑用純水配制成相應(yīng)試驗(yàn)濃度，將桑葉浸入藥液中10 s，取出陰干后置于15 cm培養(yǎng)皿中，每皿接入20頭家蠶。同時(shí)設(shè)置空白對(duì)照，每處理3次重復(fù)。染毒后置于培養(yǎng)箱中觀察，設(shè)置溫度為25±2℃、濕度為70%～85%、光照周期為L(zhǎng)：D=16 h：8 h，試驗(yàn)周期為4 d，觀察并記錄中毒癥狀及死亡數(shù)，計(jì)算毒力回歸方程和LC50值。

1.4.3 蚯蚓毒性試驗(yàn)。

采用人工土壤法進(jìn)行試驗(yàn)［17］。蚯蚓室內(nèi)飼養(yǎng)2月齡以上，挑選已出現(xiàn)繁殖環(huán)帶的、體重300～600 mg的健康成蚓用于試驗(yàn)。為判斷供試生物赤子愛勝蚓是否符合試驗(yàn)要求，開展99%氯乙酰胺對(duì)蚯蚓急性毒性參比試驗(yàn)，其LC50（14 d）=44.07 mg/kg，95%置信限為36.91～53.54 mg/kg，在20～80 mg/kg范圍內(nèi)，說(shuō)明該批次蚯蚓符合試驗(yàn)要求。試驗(yàn)前，蚯蚓在人工土壤中馴養(yǎng)1 d。人工土壤的配制配比為10%泥炭蘚、20%高嶺土、70%石英砂，測(cè)得土壤pH為6.47。根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果試驗(yàn)濃度設(shè)計(jì)為100.0 mg/kg，用純水將供試物配制成一定濃度的藥液，移取藥液與人工土壤混合均勻后用純水調(diào)節(jié)土壤水分，含藥人工土轉(zhuǎn)入標(biāo)本瓶中并移入10條蚯蚓后用保鮮膜封好瓶口并用大頭針扎20～30個(gè)小孔，保持蚯蚓生存環(huán)境透氣。每處理設(shè)3個(gè)重復(fù)，同時(shí)設(shè)空白對(duì)照組。試驗(yàn)標(biāo)本瓶放入人工氣候箱中，試驗(yàn)周期為14 d，設(shè)置溫度（20±2）℃，濕度70%～90%，400～800 lx光強(qiáng)連續(xù)光照。第7、14天調(diào)查試驗(yàn)結(jié)果，記錄中毒癥狀和死亡數(shù)，計(jì)算毒力回歸方程和LC50值。

1.4.4 蜜蜂毒性試驗(yàn)。

蜜蜂急性毒性試驗(yàn)采用經(jīng)口飼喂法和點(diǎn)滴法［18］。為判斷供試生物意大利蜜蜂是否符合試驗(yàn)要求，分別開展了98.7%樂果原藥對(duì)蜜蜂急性經(jīng)口和接觸毒性參比試驗(yàn)，其經(jīng)口LD50（24 h）=0.189 μg/蜂，95%置信限為0.153～0.277 μg/蜂，在0.10～0.35 μg/蜂范圍內(nèi)，其接觸LD50（24 h）=0.178 μg/蜂，95%置信限為0.143～0.271 μg/蜂，在0.10～0.30 μg/蜂范圍內(nèi)，說(shuō)明該批次蜜蜂符合試驗(yàn)質(zhì)量要求。選擇大小一致、活潑、健康的成年工蜂作為供試蜜蜂，試驗(yàn)前馴養(yǎng)24 h，馴養(yǎng)期間死亡率0，經(jīng)口試驗(yàn)的供試蜜蜂試驗(yàn)前2 h停止喂食。蜜蜂經(jīng)口毒性試驗(yàn)設(shè)置劑量為100 μg/蜂，用50%蔗糖水將供試藥劑配制成濃度為10 000 mg/L的藥液，每籠中取100 μL藥液加入飼喂器中供蜜蜂取食，同時(shí)設(shè)置空白對(duì)照，每重復(fù)10只蜜蜂，每處理設(shè)置3次重復(fù)，待蜜蜂吃完藥液后用蔗糖水飼喂。蜜蜂接觸試驗(yàn)中設(shè)置染毒劑量為100.0 μg/蜂，用丙酮將供試物配制成5.00×104 mg/L的藥液，將供試蜜蜂采用氮?dú)饴樽砗笥檬殖质轿⒘奎c(diǎn)滴器將藥液點(diǎn)滴在蜜蜂的中胸背板處，每只蜜蜂的點(diǎn)滴量為2.0 μL，同時(shí)設(shè)置丙酮溶劑對(duì)照和空白對(duì)照，每重復(fù)10只蜜蜂，每處理3次重復(fù)，采用蔗糖水飼喂。將試驗(yàn)蜂籠置于溫度（25±2） ℃、相對(duì)濕度50%～70%的黑暗環(huán)境中培養(yǎng)，觀察并記錄蜜蜂處理后24、48 h中毒癥狀及死亡數(shù)，并計(jì)算毒力回歸方程和LD50值。

1.4.5 赤眼蜂毒性試驗(yàn)。

赤眼蜂毒性試驗(yàn)采用指形管藥膜法［19］。根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，試驗(yàn)設(shè)計(jì)86.77、121.48、170.07、238.10、333.33 g/hm2共5個(gè)試驗(yàn)劑量。將供試物用少量純水溶解后加入丙酮定容，配制成相應(yīng)的試驗(yàn)濃度，取0.5 mL藥液加入內(nèi)表面積為37.5 cm2的指形管中，于香腸機(jī)上滾動(dòng)至晾干，晾干后接入羽化后24～48 h的赤眼蜂，讓其在藥膜管中爬行1 h后，轉(zhuǎn)入到無(wú)藥管中，并飼喂10%蜂蜜水，用黑布封緊管口。染毒后放置于人工氣候箱觀察，溫度控制在（25±2）℃，相對(duì)濕度為70%～80%，黑暗。每管接入（100±10）頭赤眼蜂，每處理設(shè)3次重復(fù)。試驗(yàn)周期為24 h，計(jì)算毒力回歸方程和LR50。

1.4.6 瓢蟲毒性試驗(yàn)。

采用藥膜法［20］。為判斷供試生物七星瓢蟲是否符合試驗(yàn)要求，開展了相關(guān)的參比試驗(yàn)，98.7%樂果原藥在0.20 g/hm2劑量下，對(duì)天敵瓢蟲急性接觸的死亡率為46.67%，在40%～80%范圍內(nèi)，說(shuō)明該批次七星瓢蟲符合試驗(yàn)的質(zhì)量要求。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果，設(shè)計(jì)964.51、1 157.41、1 388.89、1 666.67、2 000.00 g/hm2試驗(yàn)劑量，將供試物用純水溶解后轉(zhuǎn)移至容量瓶中，再加丙酮定容，制成試驗(yàn)所需的濃度，取0.5 mL藥液加入內(nèi)表面積37.5 cm2的指形管中，于香腸機(jī)上滾動(dòng)至晾干。每支指形管中接入1只二齡七星瓢蟲幼蟲，飼喂適量的活蚜蟲，并用紗布封住管口，保持封口透氣性并防止瓢蟲逃逸。染毒后水平放置于人工氣候箱中［溫度控制在（25±2）℃，相對(duì)濕度為60%～90%，光照強(qiáng)度設(shè)置為2 400 lx，光照周期為L(zhǎng)：D=16 h：8 h］。試驗(yàn)過(guò)程中每天飼喂蚜蟲，保證適量的活蚜蟲作為食物，飼喂蚜蟲前需將殘余的蚜蟲清理干凈，以保證瓢蟲充分接觸藥膜。每處理設(shè)置3個(gè)重復(fù)，每重復(fù)10只瓢蟲，試驗(yàn)周期直至瓢蟲成蟲羽化，每天觀察并記錄瓢蟲的中毒癥狀及死亡數(shù)。

1.5 數(shù)據(jù)處理

采用 SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件中的Probit回歸方法對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。以藥劑濃度/劑量對(duì)數(shù)為自變量，死亡率為因變量，進(jìn)行線性回歸，計(jì)算其回歸方程、決定系數(shù)（R2）以及供試藥劑對(duì)各陸生生物的毒性終點(diǎn)及其 95% 置信限。死亡率、校正死亡率和安全系數(shù)計(jì)算公式分別為（1）、（2）、（3）。

死亡率=死亡蟲數(shù)供試蟲總數(shù)×100%（1）

校正死亡率=處理組死亡率-對(duì)照組死亡率1-對(duì)照組死亡率×100%（2）

安全系數(shù)=供試物對(duì)供試生物的LR50供試物的田間推薦使用劑量（3）

2 結(jié)果與分析

2.1 鳥急性毒性

試驗(yàn)期間，對(duì)照組和處理組的日本鵪鶉死亡率為0，處理組的日本鵪鶉未出現(xiàn)明顯的中毒癥狀，表明20%砜吡草唑懸浮劑對(duì)日本鵪鶉為限度試驗(yàn)，其7 d-LD50＞2 000.0 mg/kg（表1）。依據(jù)農(nóng)藥對(duì)鳥類的急性毒性試驗(yàn)準(zhǔn)則［15］中的毒性等級(jí)劃分標(biāo)準(zhǔn)：劇毒LD50≤10 mg/kg；高毒10 mg/kg<LD50≤50 mg/kg；中毒50 mg/kg<LD50≤500 mg/kg；低毒LD50>500 mg/kg。該藥劑對(duì)日本鵪鶉的急性經(jīng)口毒性為低毒。

2.2 家蠶急性毒性

試驗(yàn)期間，對(duì)照組家蠶未出現(xiàn)死亡，隨著染毒濃度的升高，死亡家蠶數(shù)量增加，且不同處理間死亡情況均具有顯著差異（P＜0.05），染毒后第3～4天的結(jié)果見表2，中毒家蠶表現(xiàn)出活動(dòng)緩慢、吐水、側(cè)翻、蜷縮等癥狀，取食量與染毒濃度呈明顯的負(fù)相關(guān)。20%砜吡草唑懸浮劑對(duì)家蠶4 d-LC50為2 942.87 mg/L（表1）。依據(jù)化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則［16］中的毒性等級(jí)劃分標(biāo)準(zhǔn)：劇毒LC50≤0.5 mg/L；高毒0.5 mg/L<LC50≤20 mg/L；中毒20 mg/L <LC50≤200 mg/L；低毒LC50>200 mg/L。該藥劑對(duì)家蠶的急性毒性為低毒。

2.3 蚯蚓急性毒性

對(duì)照組和處理組蚯蚓死亡率為0，且均無(wú)異常，活動(dòng)正常。20%砜吡草唑懸浮劑對(duì)蚯蚓的急性毒性試驗(yàn)為限度試驗(yàn)，14 d-LC50>100 mg/kg（表1），依據(jù)農(nóng)藥對(duì)蚯蚓的急性毒性等級(jí)劃分標(biāo)準(zhǔn)［17］：劇毒LC50≤0.1 mg/kg；高毒0.1 mg/kg<LC50≤1.0 mg/kg；中毒1.0 mg/kg<LC50≤10 mg/kg；低毒LC50>10 mg/kg，20%砜吡草唑懸浮劑對(duì)蚯蚓的急性毒性為低毒。

2.4 蜜蜂急性毒性

蜜蜂急性經(jīng)口和蜜蜂接觸試驗(yàn)對(duì)照組和處理組蜜蜂死亡率均為0，且均無(wú)明顯中毒癥狀，表明20%砜吡草唑懸浮劑對(duì)蜜蜂急性經(jīng)口和急性接觸試驗(yàn)均為限度試驗(yàn)，其48 h-LD50＞100.0 μg/蜂（表1），依據(jù)農(nóng)藥對(duì)蜜蜂的急性毒性等級(jí)劃分標(biāo)準(zhǔn)［18］：劇毒LD50≤0.001 μg/蜂；高毒0.001 μg/蜂<LD50≤2.00 μg/蜂；中毒2.0 μg/蜂<LD50≤11.0 μg/蜂。低毒LD50>11 μg/蜂。該藥劑對(duì)蜜蜂急性經(jīng)口和接觸毒性均為低毒。

2.5 赤眼蜂急性毒性

試驗(yàn)期間，空白對(duì)照組平均死亡率為4.48%，溶劑對(duì)照組平均死亡率為4.65%，均未超過(guò)10%，各處理間死亡赤眼蜂數(shù)量均具有顯著差異（P＜0.05），空白對(duì)照和溶劑對(duì)照間無(wú)顯著差異（表3），在燈光照射下輕敲試管赤眼蜂未動(dòng)便判定為死亡，處理組中高試驗(yàn)劑量下的未死亡赤眼蜂表現(xiàn)為緩慢爬行或靜止不爬，死亡赤眼蜂呈抱團(tuán)于指形管內(nèi)。20%砜吡草唑懸浮劑對(duì)赤眼蜂毒性LR50為160.533 g/hm2（表1）。田間最大推薦使用劑量為200 g/hm2，可得20%砜吡草唑懸浮劑對(duì)赤眼蜂的安全系數(shù)為0.803。依據(jù)農(nóng)藥對(duì)赤眼蜂的風(fēng)險(xiǎn)性等級(jí)劃分標(biāo)準(zhǔn)［19］：極高風(fēng)險(xiǎn)性安全系數(shù)≤0.05；高風(fēng)險(xiǎn)性0.05<安全系數(shù)≤0.5；中等風(fēng)險(xiǎn)性0.5<安全系數(shù)≤5；低風(fēng)險(xiǎn)安全系數(shù)>5。該藥劑對(duì)赤眼蜂的風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)為中等風(fēng)險(xiǎn)性。

2.6 瓢蟲急性毒性

在瓢蟲毒性試驗(yàn)中，用毛筆輕觸瓢蟲，沒有明顯的運(yùn)動(dòng)即為死亡，試驗(yàn)結(jié)束后未羽化瓢蟲均計(jì)入死亡蟲數(shù)。20%砜吡草唑懸浮劑對(duì)七星瓢蟲的急性接觸毒性試驗(yàn)共耗時(shí)17 d，空白對(duì)照組和溶劑對(duì)照組的瓢蟲未出現(xiàn)死亡，在試驗(yàn)后期，試驗(yàn)劑量越大，死亡的瓢蟲數(shù)量越多，且各處理間均存在顯著差異（P＜0.05）（表4）。處理組中中毒七星瓢蟲表現(xiàn)出靜止不動(dòng)、活動(dòng)抑制等癥狀，死亡瓢蟲幼蟲身體蜷縮，部分吐液與管壁黏連在一起，20%砜吡草唑懸浮劑對(duì)七星瓢蟲毒性LR50為1 385.446 g/hm2（表1）。田間最大推薦使用劑量為200 g/hm2，可得20%砜吡草唑懸浮劑對(duì)七星瓢蟲的安全系數(shù)為6.927。參照農(nóng)藥對(duì)赤眼蜂的風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)劃分標(biāo)準(zhǔn)，該藥劑對(duì)七星瓢蟲的風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)為低風(fēng)險(xiǎn)。

3 結(jié)論與討論

目前，農(nóng)藥對(duì)環(huán)境生物的影響越來(lái)越受大家關(guān)注，大力發(fā)展低毒、高效的農(nóng)藥已成為農(nóng)藥研發(fā)的目標(biāo)。該研究中，20%砜吡草唑懸浮劑對(duì)日本鵪鶉7 d-LD50＞2 000.0 mg/kg、家蠶4 d-LC50 2 942.87 mg/L，意大利蜜蜂48 h-LD50＞100.0 μg/蜂和蚯蚓14 d-LC50>100 mg/kg，其毒性均為低毒，對(duì)七星瓢蟲的安全系數(shù)為6.927，風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)為低風(fēng)險(xiǎn)，但對(duì)寄生性天敵赤眼蜂的安全系數(shù)為0.803，風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)為中等風(fēng)險(xiǎn)，說(shuō)明砜吡草唑?qū)?種陸生環(huán)境生物的急性毒性影響較小。研究發(fā)現(xiàn)除草劑精草銨膦對(duì)鳥、蜜蜂經(jīng)口和接觸毒性的LD50分別為282 mg/kg、19.5 μg/蜂和40.0 μg/蜂，對(duì)家蠶和蚯蚓的LC50分別為186 mg/L和>100 mg/kg，對(duì)赤眼蜂和瓢蟲的安全系數(shù)分別為0.415和0.278，均屬于高風(fēng)險(xiǎn)性［21］，可見精草銨膦對(duì)陸生環(huán)境生物的急性毒性高于該研究中的砜吡草唑。游泳等［22］研究表明4種煙嘧磺隆多元復(fù)配除草對(duì)赤眼蜂的安全系數(shù)分別為0.16、0.23、0.59和0.51，均低于該研究中砜吡草唑?qū)Τ嘌鄯涞陌踩禂?shù)0.803?？梢?，砜吡草唑?qū)﹃懮h(huán)境生物在急性暴露下較為友好。

農(nóng)藥在一定的較高暴露濃度下對(duì)環(huán)境生物雖未造成急性死亡，但長(zhǎng)期暴露在低劑量的農(nóng)藥環(huán)境中，也可對(duì)環(huán)境生物造成一定的影響。研究發(fā)現(xiàn)低劑量的多菌靈不會(huì)導(dǎo)致蜜蜂急性死亡，但對(duì)蜜蜂幼蟲的發(fā)育和體內(nèi)解毒酶系產(chǎn)生一定的影響，這可能對(duì)蜜蜂的健康發(fā)育和日后蜂群的穩(wěn)定具有潛在的危害［23］，除草劑草甘膦和草銨膦在低劑量處理下云7A、菁松A、皓月A 3個(gè)家蠶品種雖未出現(xiàn)死亡，但對(duì)家蠶的生長(zhǎng)發(fā)育及經(jīng)濟(jì)性狀均存在不良影響［24］。砜吡草唑在低劑量處理下也可能對(duì)環(huán)境生物造成影響，且砜吡草唑在東北黑土、江西紅壤和太湖水稻土中降解半衰期分別為86.6、115.5和115.5 d，因此在東北黑土中屬于中等降解農(nóng)藥，在江西紅壤和太湖水稻土中屬于較難降解農(nóng)藥，且還具有一定的淋溶性，可能對(duì)土壤和水環(huán)境具有一定污染風(fēng)險(xiǎn)［25］。因此，砜吡草唑在田間使用中，仍需注意對(duì)環(huán)境的影響。

農(nóng)藥環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估是農(nóng)藥環(huán)境安全管理的基礎(chǔ)，可以預(yù)估農(nóng)藥對(duì)環(huán)境生態(tài)的影響，與國(guó)外相比，我國(guó)于2016年才發(fā)布了《農(nóng)藥登記 環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估指南》［26］，起步較晚。單一的急性毒性試驗(yàn)結(jié)果不能準(zhǔn)確全面地反映該藥劑對(duì)生態(tài)環(huán)境的影響，還應(yīng)根據(jù)藥劑的環(huán)境歸趨、理化性質(zhì)和使用方法等，綜合計(jì)算判斷風(fēng)險(xiǎn)的可接受程度。因此，為準(zhǔn)確地評(píng)價(jià)砜吡草唑?qū)Νh(huán)境生態(tài)的影響，在后續(xù)研究中還應(yīng)增加20%砜吡草唑懸浮劑對(duì)水生生物的毒性試驗(yàn)，再參照《農(nóng)藥登記 環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估指南》，綜合判斷20%砜吡草唑懸浮劑對(duì)水生生態(tài)系統(tǒng)、地下水、鳥類、蜜蜂、家蠶、非靶標(biāo)節(jié)肢動(dòng)物、土壤生物等目標(biāo)的風(fēng)險(xiǎn)可接受程度。該研究為砜吡草唑的進(jìn)一步環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估提供了部分生態(tài)毒理方面的數(shù)據(jù)支撐。

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