• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    48份小麥品種(系)抗條銹病和條銹病基因的分子標(biāo)記檢測(cè)及其抗性評(píng)價(jià)

    2024-11-07 00:00:00刁文達(dá)李超玲李昭燕權(quán)衡亢玲閆曉翠
    江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2024年18期

    摘要:為明確寧夏小麥品種(系)對(duì)小麥條銹病和赤霉病的抗病水平,采用與已知抗病基因緊密連鎖的特異性標(biāo)記法對(duì)48份小麥材料進(jìn)行分子標(biāo)記檢測(cè),并對(duì)供試小麥品種(系)進(jìn)行系譜分析。通過對(duì)抗條銹病和抗赤霉病典型代表基因Yr5、Yr9、Yr10、Yr15、Yr18、Yr26、Yr30和Fhb1進(jìn)行檢測(cè),并對(duì)其在寧夏小麥中的分布頻率進(jìn)行分析。結(jié)果表明,在48份參試品種(系)中,分別含有Yr5、Yr9、Yr10、Yr15、Yr18、Yr26、Yr30抗性基因的小麥材料有41、15、5、16、20、45、26份,占供試材料的85%、31%、1%、33%、41%、93%、54%;在所測(cè)的小麥品系中有42份供試材料攜帶Fhb1基因,占供試材料的87%。本研究,通過選用中國(guó)寧夏48份典型小麥品種(系)進(jìn)行抗條銹病和赤霉病的分子標(biāo)記檢測(cè),為作物育種和遺傳研究提供有效遺傳信息。

    關(guān)鍵詞:小麥;條銹病;分子標(biāo)記;基因檢測(cè);種質(zhì)資源;抗性評(píng)價(jià)

    中圖分類號(hào):S435.121.4+2 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

    文章編號(hào):1002-1302(2024)18-0154-06

    收稿日期:2023-10-31

    基金項(xiàng)目:華北作物改良與調(diào)控國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、河北農(nóng)業(yè)大學(xué)引進(jìn)人才項(xiàng)目(編號(hào):NCCIR2021RC-6)。

    作者簡(jiǎn)介:刁文達(dá)(1999—),男,河北邢臺(tái)人,碩士研究生,從事玉米、小麥抗病性研究。E-mail:d16632233175@163.com。

    通信作者:亢 玲,從事小麥抗病性研究,E-mail:kangling1005@163.com;閆曉翠,講師,主要從事玉米、小麥抗病遺傳育種,E-mail:yxc1234jy@163.com。

    小麥(Triticum aestivum L.)是我國(guó)重要的糧食作物,對(duì)我國(guó)糧食的供給作出了重大貢獻(xiàn)[1。而小麥條銹病是世界上影響范圍zsx+9fWw+SUeXo6v7PRE8RA8MXn+BRvdZJ3QSgZwCrI=較大的小麥病害之一,也是寧夏小麥產(chǎn)區(qū)主要病害之一,每年都會(huì)對(duì)寧夏小麥的產(chǎn)量造成嚴(yán)重?fù)p失,因此對(duì)寧夏小麥產(chǎn)區(qū)的遺傳多樣性進(jìn)行分析,并為小麥抗病育種提供一些參考價(jià)值。小麥條銹病是一種由小麥條銹菌(Puccinia striiformis f. sp. tririci)引起的氣傳性真菌類病害,它的變異類型較多,分布范圍較廣,可降低感病品種的籽粒數(shù)量和品質(zhì),進(jìn)而使產(chǎn)量減少40%[2-4。小麥條銹病病原體可在種植季節(jié)的大部分生長(zhǎng)階段都感染小麥植株,主要是降低小麥的光合效率,進(jìn)而導(dǎo)致植物有機(jī)物的合成減少。此外,赤霉病隨氣候的變化也對(duì)小麥的產(chǎn)量造成了嚴(yán)重影響。至目前為止,小麥赤霉病常發(fā)區(qū)已擴(kuò)展到我國(guó)黃淮海南部麥區(qū),且西北麥區(qū)也已日益加重,該病害已成為我國(guó)小麥產(chǎn)區(qū)常發(fā)性的重大小麥病害。已有研究人員發(fā)現(xiàn),來源于望水白的Fhb1是目前抗性最高且應(yīng)用廣泛的抗赤霉病基因。利用已知分子標(biāo)記對(duì)抗赤霉病基因Fhb1進(jìn)行快速檢測(cè),從而篩選出獲得小麥抗赤霉病的種質(zhì)資源,為小麥抗赤霉病育種選擇提供依據(jù),但當(dāng)前抗病資源匱乏、抗性遺傳基礎(chǔ)狹窄是我國(guó)小麥在抗病育種中面臨的主要問題[5-6。要解決以上問題,必須發(fā)掘新的抗病種質(zhì),挖掘新的抗病基因,才能豐富其遺傳多樣性7。然而,噴施農(nóng)藥對(duì)小麥條銹病和赤霉病進(jìn)行防治,盡管能夠達(dá)到一定的控制效果,但它的成本昂貴,而且還會(huì)對(duì)生態(tài)環(huán)境造成影響,而使用抗銹品種是減少各種作物病害損害的最經(jīng)濟(jì)和有效的方法8-9。

    自20世紀(jì)50年代條銹病廣泛流行以來,我國(guó)對(duì)該病的流行和管理進(jìn)行了廣泛的研究。小麥的病害防治對(duì)于小麥的產(chǎn)量來說至關(guān)重要,迄今,在國(guó)際上以Yr系統(tǒng)正式命名的主效抗條銹病基因共有84個(gè)位點(diǎn),即Yr1~Yr84[10-11;其中大多數(shù)在小麥的所有生長(zhǎng)階段對(duì)葉銹病都有效,在苗期很容易被識(shí)別,這被稱為全生育期抗性(all stage resistance,簡(jiǎn)稱ASR),這種類型的抗性通常由1個(gè)在幼苗期開始表達(dá)的單一基因控制(幼苗抗性)。然而,一些Lr基因通常在成株期階段表達(dá),這種類型的抗性被稱為成株植物抗性(adult plant resistance,簡(jiǎn)稱APR),進(jìn)一步分為小種?;禺愋院头切》N?;禺愋?種類型[12-13。由于小麥的抗病基因?qū)ζ贩N小種的?;院軓?qiáng),在生產(chǎn)上使用的抗病基因很容易隨著毒力的頻繁變化而失去抗性[14-16。由于小麥可以在不同的地理和氣候條件下種植,銹病病原體在不同的環(huán)境條件下也展現(xiàn)了增強(qiáng)的適應(yīng)能力。如果氣候條件適合銹病,并在大面積內(nèi)種植單一抗性小麥品種,這些品種便可以產(chǎn)生抗性。

    本研究利用分子標(biāo)記檢測(cè)和系譜分析方法對(duì)48份供試材料進(jìn)行抗病基因篩選,其目的是通過分子標(biāo)記診斷和家系分析來鑒定小麥品種(系)和改良種質(zhì)的抗性。了解這些小麥品種(系)的抗性,挖掘新的抗性種質(zhì)資源,對(duì)我國(guó)小麥抗銹性育種的篩選具有重要價(jià)值。

    1 試驗(yàn)材料與方法

    1.1 試驗(yàn)材料

    48份供試寧夏小麥材料(表1)(感條銹病的對(duì)照品種Avocet S、感赤霉病對(duì)照品種Tatara以及含有已知抗赤霉病基因的品種Yr27),由寧夏農(nóng)林科學(xué)院農(nóng)作物研究所提供。已知條銹病抗性基因陽性對(duì)照材料包括Yr5(T.spelta Album)、Avocet S*6/Yr9、Avocet S*6/Yr10/6、Avocet S*6/Yr15/6、Avocet S*6/Yr18、Avocet S*6/Yr26、Yr30(Opata85)、Avocet S;鄭州5389作為陰性對(duì)照材料;赤霉病以Tatara品種為陽性對(duì)照、鄭州5389為陰性對(duì)照。條銹病和赤霉病分子標(biāo)記檢測(cè)于2022—2023年間在河北農(nóng)業(yè)大學(xué)華北作物種質(zhì)資源研究與利用省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室完成。

    1.2 小麥基因組DNA的提取與分子檢測(cè)

    將供試小麥材料種植于育苗盤內(nèi),以營(yíng)養(yǎng)土和蛭石3∶1的比例進(jìn)行種植,播種20~25粒/盆飽滿的種子,覆土,在底部澆水,使其吸收并直至土壤濕潤(rùn)移出,放到22~25 ℃室內(nèi)培養(yǎng)6~8 d,待用。待幼苗長(zhǎng)到3葉期時(shí)用CTAB法提取基因組DNA[17,然后進(jìn)行Yr基因檢測(cè),用于檢測(cè)分子標(biāo)記引物,該引物由北京擎科生物科技股份有限公司合成(表2)。

    1.3 PCR擴(kuò)增

    選取國(guó)際上主效抗條銹病基因Yr5[18、Yr9[19、Yr10[20、Yr15[21、Yr18[22、Yr26[23、Yr30[24以及抗赤霉病基因Fhb1[25共8個(gè)緊密連鎖分子標(biāo)記,對(duì)所供試的48份小麥材料進(jìn)行鑒定。PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系:2×Taq Master Mix 10 μL;10 μmol/L上游特異引物 0.5 μL,終濃度為0.1~0.3 μmol/L;10 μmol/L下游特異引物0.5 μL,終濃度為0.1~0.3 μmol/L;模板DNA 2 μL;補(bǔ)水至20 μL。PCR擴(kuò)增反應(yīng)程序:預(yù)變性95 ℃ 3 min;變性95 ℃ 15 s,退火55~62 ℃ 15 s,延伸 72 ℃ 15 s,35次循環(huán);延伸72 ℃ 5 min。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 已知抗條銹病基因分子標(biāo)記檢測(cè)結(jié)果

    48份供試材料是來自于寧夏小麥主產(chǎn)區(qū),所有供試材料可能攜帶的基因均列在表3。以感病材料Acocet S為陽性對(duì)照,對(duì)其供試材料的抗條銹病基因Yr5、Yr9、Yr10、Yr15、Yr18、Yr26、Yr30已知標(biāo)記檢測(cè)。結(jié)果(表3)顯示:以Avocet S為陽性對(duì)照,在寧春32號(hào)、寧春33號(hào)和寧春35號(hào)等41份材料中,均可以擴(kuò)增出100 bp的目的條帶,表明這些材料中可能含有Yr5這個(gè)基因;Avocet S*6/Yr9為陽性對(duì)照,發(fā)現(xiàn)在15份小麥材料可以擴(kuò)增出1 500 bp的抗條銹病基因Yr9目的條帶(圖1),說明這些供試材料中均攜帶有Yr9;寧春33號(hào)、34號(hào)、35號(hào)、36號(hào)和寧春39號(hào)5份材料中鑒定出含有Yr10,且目的條帶為543 bp的條帶;以Avocet S*6/Yr15為陽性對(duì)照,在寧春32號(hào)、隴春7號(hào)和春山4號(hào)等16份供試材料中,可以擴(kuò)增出與Yr15緊密連鎖的目的條帶190 bp,表明在這些材料中均攜帶有Yr15抗病基因;用Avocet S*6/Yr18為陽性對(duì)照,在寧春32號(hào)、33號(hào)和寧春44號(hào)等20份小麥材料中,均可以擴(kuò)增出150 bp的Yr18目的條帶(圖2),這表明這21份供試小麥材料中含有Yr18抗病基因;同理,以AvocetS*6/Yr26為陽性對(duì)照,在春山1號(hào)、索諾拉64和隴春7號(hào)等45份材料,均攜帶有抗條銹病基因Yr26(圖3);索諾拉64、隴春7號(hào)和寧春44號(hào)等26份材料,均含有抗條銹病基因Yr30(圖4)。此外,分別對(duì)這8個(gè)已知廣譜抗條銹病基因在所有供試小麥材料中進(jìn)行占比分析,結(jié)果表明:其攜帶有抗條銹病基因Yr5、Yr9、Yr10、Yr15、Yr18、Yr26、Yr30,分別占供試材料的85%、31%、1%、33%、41%、93%、54%。

    2.2 抗赤霉病基因Fhb1的分子標(biāo)記檢測(cè)結(jié)果

    對(duì)48份供試小麥品種(系)進(jìn)一步利用抗赤霉病基因Fhb1的特異功能連鎖SSR標(biāo)記Xbarc147進(jìn)行檢測(cè),且以Tatara(攜帶Fhb1)為陽性對(duì)照;結(jié)果表明(圖5),48份供試小麥材料中可成功擴(kuò)增出與Fhb1目的條帶(122 bp)相一致的材料有42份(如寧春34號(hào)、35號(hào)和寧春44號(hào)等),且占比達(dá)到87%。這表明在寧夏小麥材料中普遍攜帶有抗赤霉病基因,且對(duì)赤霉病有一定的抗性,為抗赤霉病遺傳育種的研究提供良好的供試材料。

    3 討論

    分子標(biāo)記為基因檢測(cè)提供了一種更有效和更經(jīng)濟(jì)的方法[26。本研究使用已知抗病基因緊密連鎖標(biāo)記來檢測(cè)8個(gè)已知抗病基因在48份寧夏小麥種質(zhì)資源上的分布情況。結(jié)果顯示,在同一供試材料中可能均攜帶有2個(gè)以上抗病基因存在,其寧春38號(hào)中攜帶有抗條銹病基因Yr5和Yr15,該品種由永T2945與永1265(Veer后代)雜交,經(jīng)寧夏永寧縣

    小麥育繁所育成,其具有良好的抗條銹病。至今,在國(guó)內(nèi)外Yr5和Yr15仍然是少有的幾乎對(duì)所有條銹病菌表現(xiàn)出廣譜抗性[27-28,且普遍應(yīng)用于西北(四川)和西南(寧夏)麥區(qū)的小麥育種中。Bastian材料中攜帶有抗葉銹病基因Lr26和抗赤霉病基因Fhb1,表明Bastian對(duì)葉銹病和赤霉病具有良好的抗性。寧春40號(hào)品種同時(shí)攜帶Yr5、Yr15、Yr26、Fhb1,該品種是寧夏大學(xué)以中寧58912和永1712進(jìn)行雜交,采用雜交系譜法選育優(yōu)良單株,系統(tǒng)選育而成,高抗銹病。

    目前我國(guó)在小麥21條染色體上已經(jīng)定位超過250個(gè)抗性位點(diǎn)[29-30,其中Fhb1是世界上公認(rèn)的主效基因,這個(gè)基因已經(jīng)被克隆,這為利用該基因進(jìn)行分子標(biāo)記輔助選擇提供了便利。本研究通過對(duì)48個(gè)供試小麥材料的遺傳分析,結(jié)果表明,這些標(biāo)記物穩(wěn)定,可用于基因檢測(cè)。在所有攜帶有抗條銹病基因分Yr5、Yr9、Yr10、Yr15、Yr18、Yr26和Yr30中,Yr26占比最大,說明Yr26作為抗銹病源仍廣泛用于生產(chǎn)品種中。但我們應(yīng)合理利用不同類型的抗性基因,發(fā)掘優(yōu)良抗源,為小麥抗病育種及病害精準(zhǔn)防控提供參考。

    參考文獻(xiàn):

    [1]郭天財(cái). 試論中國(guó)的小麥生產(chǎn)與國(guó)家糧食安全[C]//農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新與生產(chǎn)現(xiàn)代化學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集.蘇州,2001:118-123.

    [2]李振岐,商鴻生. 小麥銹病及其防治[M].上海:上??茖W(xué)技術(shù)出版社,1989.

    [3]黃 亮,劉太國(guó),肖星芷,等. 中國(guó)79個(gè)小麥品種(系)抗條銹病評(píng)價(jià)及基因分子檢測(cè)[J]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué),2017,50(16):3122-3134.

    [4]Wellings C R. Global status of stripe rust:a review of historical and current threats[J]. Euphytica,2011,179(1):129-141.

    [5]GilliganC A. Sustainable agriculture and plant diseases:an epidemiological perspective[J]. Philosophical Transactions of the Royal Society of London(Series B:Biological Sciences),2008,363(1492):741-759.

    [6]Thrall P H,Laine,A L,Ravensdale,M,et al. Rapid genetic change underpins antagonistic coevolution in a natural host-pathogen metapopulation[J]. Ecology Letters,2012,15(5):425-435.

    [7]周 軍,李魁印,張 立,等. 242份小麥品種(系)成株期抗條銹病鑒定及分子標(biāo)記檢測(cè)[J]. 河南農(nóng)業(yè)科學(xué),2020,49(6):84-97.

    [8]楊文香,劉大群. 小麥抗葉銹基因的定位及分子標(biāo)記研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué),2004,37(1):65-71.

    [9]閆紅飛,楊文香,陳云芳,等. 偃麥草屬E染色體組特異SCAR標(biāo)記對(duì)Lr19的特異性和穩(wěn)定性研究[J]. 植物病理學(xué)報(bào),2009,39(1):76-81.

    [10]McIntosh R A,Hart G E,Gale M D. Catalogue of gene symbols for wheat:2021 supplement[J]. Annual Wheat Newsletter,2021,67:104-113.

    [11]KlymiukV,Chawla H S,Wiebe K,et al. Discovery of stripe rust resistance with incomplete dominance in wild emmer wheat using bulked segregant analysis sequencing[J]. Communications Biology,2022,5(1):826.

    [12]Wan A M,Chen X M,He Z H. Wheat stripe rust in China[J]. Australian Journal of Agricultural Research,2007,58(6):605.

    [13]張海泉. 小麥抗白粉病分子育種研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)生態(tài)農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2008,16(4):1060-1066.

    [14]詹海仙,暢志堅(jiān),楊足君,等. 小麥抗白粉病基因來源及抗性評(píng)價(jià)的研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào),2010,26(10):42-46.

    [15]李 欣,暢志堅(jiān),詹海仙,等. 小麥抗條銹病基因來源及染色體定位的研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào),2015,31(5):92-95.

    [16]曾慶東,沈川,袁鳳平,等. 小麥抗條銹病已知基因?qū)χ袊?guó)當(dāng)前流行小種的有效性分析[J]. 植物病理學(xué)報(bào),2015,45(6):641-650.

    [17]徐如宏,任明見,思彬彬,等. 貴農(nóng)001中抗白粉病基因的RAPD標(biāo)記研究[J]. 山地農(nóng)業(yè)生物學(xué)報(bào),2005,24(4):283-286.

    [18]Smith P H,Hadfield J,Hart N J,et al. STS markers for the wheat yellow rust resistance gene Yr5 suggest a NBS-LRR-type resistance gene cluster[J]. Genome,2007,50(3):259-265.

    [19]Francis H A,Leitch A R,Koebner R M D. Conversion of a RAPD-generated PCR product,containing a novel dispersed repetitive element,into a fast and robust assay for the presence of rye chromatin in wheat[J]. Theoretical and Applied Genetics,1995,90(5):636-642.

    [20]Singh R,Datta D,Priyamvada,et al. A diagnostic PCR based assay for stripe rust resistance gene Yr10 in wheat[J]. Acta Phytopathologica et Entomologica Hungarica,2009,44(1):11-18.

    [21]Peng J H,F(xiàn)ahima T,R?der M S,et al. Microsatellite high-density mapping of the stripe rust resistance gene YrH52 region on chromosome 1B and evaluation of its marker-assisted selection in the F2 generation in wild emmer wheat[J]. New Phytologist,2000,146(1):141-154.

    [22]Lagudah E S,McFadden H,Singh R P,et al. Molecular genetic characterization of the Lr34/Yr18 slow rusting resistance gene region in wheat[J]. Theoretical and Applied Genetics,2006,114(1):21-30.

    [23]Zeng Q D,Han D J,Wang Q L,et al. Stripe rust resistance and genes in Chinese wheat cultivars and breeding lines[J]. Euphytica,2014,196(2):271-284.

    a19b963c2fc3320006079bd13a4fff77de650e56c509cf0b9908ae82664d12c3

    [24]張 悅. 中國(guó)小麥主產(chǎn)區(qū)305份品種抗條銹病評(píng)價(jià)及抗病基因分析[D]. 楊凌:西北農(nóng)林科技大學(xué),2022.

    [25]Liu S X,Pumphrey M O,Gill B S,et al. Toward positional cloning of Fhb1,a major QTL for Fusarium head blight resistance in wheat[J]. Cereal Research Communications,2008,36(6):195-201.

    [26]郭 瑞,姚維成,陳 琛,等. 鎮(zhèn)麥品種相關(guān)品質(zhì)性狀基因的分子標(biāo)記檢測(cè)分析[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2023,39(1):1-14.

    [27]BuerstmayrH,Lemmens M,Hartl L,et al. Molecular mapping of QTLs for Fusarium head blight resistance in spring wheat. Ⅰ. Resistance to fungal spread (Type Ⅱ resistance)[J]. Theoretical and Applied Genetics,2002,104(1):84-91.

    [28]Jia H Y,Zhou J Y,Xue S L,et al. A journey to understand wheat Fusarium head blight resistance in the Chinese wheat landrace Wangshuibai[J]. The Crop Journal,2018,6(1):48-59.

    [29]Marchal C,Zhang J P,Zhang P,et al. BED-domain-containing immune receptors confer diverse resistance spectra to yellow rust[J]. Nature Plants,2018,4(9):662-668.

    [30]Klymiuk V,Yaniv E,Huang L,et al. Cloning of the wheat Yr15 resistance gene sheds light on the plant tandem kinase-pseudokinase family[J]. Nature Communications,2018,9(1):3735.

    日日夜夜操网爽| а√天堂www在线а√下载| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 一本久久中文字幕| 国产精品av视频在线免费观看| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| tocl精华| 久久午夜亚洲精品久久| 精品国产三级普通话版| 亚洲无线观看免费| 桃色一区二区三区在线观看| 免费大片18禁| 一区福利在线观看| 亚洲熟女毛片儿| 国产精品一区二区免费欧美| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 91在线精品国自产拍蜜月 | 黑人欧美特级aaaaaa片| 十八禁人妻一区二区| 国产免费av片在线观看野外av| 麻豆久久精品国产亚洲av| 在线观看舔阴道视频| 久久久国产成人免费| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 99国产极品粉嫩在线观看| 国语自产精品视频在线第100页| 久久人妻av系列| 精品一区二区三区四区五区乱码| 麻豆av在线久日| 欧美一区二区国产精品久久精品| 成人三级黄色视频| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 欧美乱色亚洲激情| 亚洲天堂国产精品一区在线| 亚洲欧美日韩高清专用| 中文字幕熟女人妻在线| 亚洲精品色激情综合| 97碰自拍视频| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 我的老师免费观看完整版| 国产 一区 欧美 日韩| 男插女下体视频免费在线播放| 亚洲中文av在线| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 12—13女人毛片做爰片一| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | x7x7x7水蜜桃| 嫩草影院入口| 国产成人福利小说| 国产成人系列免费观看| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 无限看片的www在线观看| 色综合欧美亚洲国产小说| 嫁个100分男人电影在线观看| 国产欧美日韩精品亚洲av| 国产又色又爽无遮挡免费看| 1000部很黄的大片| www日本在线高清视频| 91老司机精品| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 黄频高清免费视频| 日韩三级视频一区二区三区| 免费av毛片视频| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 一本综合久久免费| 色av中文字幕| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 久久久久久久精品吃奶| 国产一区二区在线av高清观看| 哪里可以看免费的av片| АⅤ资源中文在线天堂| 在线观看舔阴道视频| 99久久精品国产亚洲精品| 国产高清有码在线观看视频| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 日韩欧美国产在线观看| 国产精品1区2区在线观看.| 久久久精品大字幕| 精品久久久久久成人av| 两人在一起打扑克的视频| 欧美丝袜亚洲另类 | 国产精品,欧美在线| 在线观看66精品国产| 丁香六月欧美| 男女那种视频在线观看| 国产日本99.免费观看| 国产亚洲精品久久久com| 亚洲在线观看片| 色av中文字幕| 成年女人毛片免费观看观看9| 欧美色视频一区免费| 性色avwww在线观看| 美女cb高潮喷水在线观看 | 久久久久免费精品人妻一区二区| 99热这里只有是精品50| 成人亚洲精品av一区二区| 搡老妇女老女人老熟妇| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 午夜免费观看网址| 午夜免费成人在线视频| 国产精品99久久久久久久久| 午夜精品一区二区三区免费看| 亚洲欧美精品综合久久99| 可以在线观看的亚洲视频| 国产精品 国内视频| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 亚洲,欧美精品.| 精华霜和精华液先用哪个| 两个人的视频大全免费| 亚洲熟女毛片儿| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 亚洲男人的天堂狠狠| 欧美中文日本在线观看视频| 精品99又大又爽又粗少妇毛片 | 日本黄色片子视频| 亚洲成人久久爱视频| 久久久国产成人免费| 在线观看日韩欧美| 久99久视频精品免费| 亚洲国产色片| 亚洲国产精品成人综合色| 99国产精品一区二区蜜桃av| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 在线永久观看黄色视频| 999精品在线视频| 国产黄片美女视频| 亚洲在线观看片| 亚洲国产精品久久男人天堂| 国产亚洲欧美98| 免费在线观看亚洲国产| 99riav亚洲国产免费| 一边摸一边抽搐一进一小说| 男女之事视频高清在线观看| 日韩三级视频一区二区三区| 18禁观看日本| 白带黄色成豆腐渣| 亚洲av成人一区二区三| 国产综合懂色| 少妇的丰满在线观看| 成年女人毛片免费观看观看9| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 1000部很黄的大片| 日韩欧美国产一区二区入口| 在线永久观看黄色视频| 搡老妇女老女人老熟妇| 在线免费观看不下载黄p国产 | 成年版毛片免费区| 日本五十路高清| 国产欧美日韩一区二区三| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 国产亚洲精品久久久com| 中亚洲国语对白在线视频| 麻豆国产av国片精品| 国产精品亚洲av一区麻豆| 99久久综合精品五月天人人| 国产激情久久老熟女| 看片在线看免费视频| 激情在线观看视频在线高清| 亚洲中文字幕日韩| 午夜福利高清视频| 欧美日韩黄片免| 国产精品98久久久久久宅男小说| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 啦啦啦观看免费观看视频高清| av黄色大香蕉| 婷婷丁香在线五月| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 亚洲成av人片免费观看| 久久久久九九精品影院| 天天躁日日操中文字幕| 免费搜索国产男女视频| 操出白浆在线播放| 久久伊人香网站| 日韩欧美在线乱码| 看黄色毛片网站| 欧美激情久久久久久爽电影| 久久久久久九九精品二区国产| 日韩免费av在线播放| 一区二区三区激情视频| 亚洲精品一区av在线观看| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 亚洲中文字幕日韩| 网址你懂的国产日韩在线| 午夜精品久久久久久毛片777| 成年免费大片在线观看| 亚洲成av人片免费观看| 亚洲九九香蕉| aaaaa片日本免费| 免费一级毛片在线播放高清视频| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 国产伦在线观看视频一区| 欧美日韩国产亚洲二区| 麻豆成人av在线观看| 日本黄色视频三级网站网址| 日韩欧美 国产精品| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 日本a在线网址| 亚洲成人久久爱视频| 精品午夜福利视频在线观看一区| 亚洲在线观看片| 日本成人三级电影网站| 日本 av在线| 国产精品女同一区二区软件 | 国产男靠女视频免费网站| 欧美日韩黄片免| www.自偷自拍.com| 日韩三级视频一区二区三区| 成人av在线播放网站| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 欧美大码av| 国产精品99久久久久久久久| 久久人人精品亚洲av| 国产成人福利小说| 俺也久久电影网| 欧美中文日本在线观看视频| 色综合欧美亚洲国产小说| 两人在一起打扑克的视频| 成人av在线播放网站| 无人区码免费观看不卡| 99久久精品国产亚洲精品| 99热精品在线国产| 国产精品久久久久久久电影 | 国产精品免费一区二区三区在线| 久久久久国内视频| 亚洲av电影不卡..在线观看| 国产午夜精品论理片| 午夜福利高清视频| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 欧美成狂野欧美在线观看| 制服人妻中文乱码| av天堂中文字幕网| 热99在线观看视频| 岛国在线免费视频观看| 中出人妻视频一区二区| 又黄又粗又硬又大视频| 最好的美女福利视频网| 国产av不卡久久| 国产v大片淫在线免费观看| 国产极品精品免费视频能看的| 国产精品精品国产色婷婷| 伦理电影免费视频| 国产精品久久久av美女十八| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 免费观看精品视频网站| 午夜福利高清视频| 男人舔女人下体高潮全视频| 两性夫妻黄色片| 日本免费一区二区三区高清不卡| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 欧美日韩综合久久久久久 | 国产欧美日韩一区二区三| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| av福利片在线观看| 午夜福利欧美成人| 成人午夜高清在线视频| 特大巨黑吊av在线直播| 久久人妻av系列| 国产成+人综合+亚洲专区| 好男人电影高清在线观看| 五月伊人婷婷丁香| 国产精品精品国产色婷婷| 特大巨黑吊av在线直播| 九九在线视频观看精品| 国产精品九九99| 99久久国产精品久久久| 国内精品一区二区在线观看| 久久久成人免费电影| 欧美成人一区二区免费高清观看 | 美女大奶头视频| 成在线人永久免费视频| 99久久综合精品五月天人人| 99视频精品全部免费 在线 | 国产人伦9x9x在线观看| 看免费av毛片| 啦啦啦韩国在线观看视频| 动漫黄色视频在线观看| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 一进一出抽搐gif免费好疼| 啪啪无遮挡十八禁网站| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 久久中文看片网| 欧美黄色淫秽网站| 亚洲真实伦在线观看| 久久性视频一级片| 小说图片视频综合网站| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 看黄色毛片网站| 88av欧美| 两个人看的免费小视频| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 国内精品久久久久久久电影| 午夜视频精品福利| 欧美成狂野欧美在线观看| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 99国产精品一区二区蜜桃av| 不卡av一区二区三区| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 精品一区二区三区av网在线观看| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 婷婷丁香在线五月| 久久久国产欧美日韩av| 色视频www国产| 免费在线观看影片大全网站| 嫁个100分男人电影在线观看| 日本熟妇午夜| 偷拍熟女少妇极品色| 欧美一级a爱片免费观看看| 久久亚洲精品不卡| 色综合欧美亚洲国产小说| 此物有八面人人有两片| 久久午夜亚洲精品久久| 不卡一级毛片| 亚洲五月婷婷丁香| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 日韩欧美免费精品| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 久久久久久久午夜电影| 真人做人爱边吃奶动态| 国产亚洲欧美在线一区二区| 99精品在免费线老司机午夜| 亚洲18禁久久av| 级片在线观看| 亚洲激情在线av| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 在线视频色国产色| 国产69精品久久久久777片 | 日韩欧美在线二视频| 91av网一区二区| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 久久中文字幕人妻熟女| 国产精品野战在线观看| www.999成人在线观看| 伦理电影免费视频| 久久精品国产清高在天天线| 两个人看的免费小视频| 精品乱码久久久久久99久播| 国产成人av激情在线播放| 99久久精品热视频| 色尼玛亚洲综合影院| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 老司机午夜十八禁免费视频| 嫩草影视91久久| 最近在线观看免费完整版| 在线观看免费视频日本深夜| 中国美女看黄片| 国产毛片a区久久久久| 观看美女的网站| 99久久99久久久精品蜜桃| 哪里可以看免费的av片| 免费在线观看日本一区| 免费高清视频大片| 午夜精品一区二区三区免费看| 美女黄网站色视频| 国产 一区 欧美 日韩| 国产欧美日韩一区二区三| 久久伊人香网站| 少妇丰满av| 亚洲精品456在线播放app | 亚洲国产精品久久男人天堂| 色综合亚洲欧美另类图片| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 国产一区在线观看成人免费| 欧美成人免费av一区二区三区| 色在线成人网| 色av中文字幕| 午夜a级毛片| www.精华液| www日本黄色视频网| 国产97色在线日韩免费| 色在线成人网| 精品日产1卡2卡| 欧美在线黄色| 欧美另类亚洲清纯唯美| 日本 av在线| 日本三级黄在线观看| 一a级毛片在线观看| 国产v大片淫在线免费观看| 国产成人系列免费观看| 国产成人啪精品午夜网站| 国产不卡一卡二| 欧美成人免费av一区二区三区| 五月伊人婷婷丁香| 亚洲第一电影网av| 18禁国产床啪视频网站| 日本一本二区三区精品| 久久香蕉国产精品| 91九色精品人成在线观看| 亚洲中文av在线| 国产精品电影一区二区三区| 成在线人永久免费视频| 日本熟妇午夜| 国产精品日韩av在线免费观看| 亚洲avbb在线观看| 男女之事视频高清在线观看| 久久久久性生活片| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 国产高清激情床上av| 亚洲成a人片在线一区二区| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 国产熟女xx| 香蕉av资源在线| 精品一区二区三区四区五区乱码| 九色国产91popny在线| 国产三级在线视频| 亚洲av熟女| 成熟少妇高潮喷水视频| 欧美三级亚洲精品| 亚洲国产精品成人综合色| 国产精品永久免费网站| 1024香蕉在线观看| 免费观看的影片在线观看| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 国产亚洲精品久久久久久毛片| 精品国产美女av久久久久小说| 色精品久久人妻99蜜桃| 国产在线精品亚洲第一网站| 99久久精品一区二区三区| 欧美成人免费av一区二区三区| 成人永久免费在线观看视频| 亚洲18禁久久av| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 免费看光身美女| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 成人特级黄色片久久久久久久| 久久久久久久午夜电影| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 亚洲真实伦在线观看| 精品欧美国产一区二区三| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 视频区欧美日本亚洲| 久久伊人香网站| 久久人人精品亚洲av| 国产欧美日韩一区二区精品| 国产乱人伦免费视频| 叶爱在线成人免费视频播放| 啦啦啦韩国在线观看视频| 亚洲激情在线av| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 97碰自拍视频| 久久久色成人| 白带黄色成豆腐渣| 黄色视频,在线免费观看| 国产激情欧美一区二区| 天堂动漫精品| 国产av一区在线观看免费| 亚洲成人精品中文字幕电影| 国产麻豆成人av免费视频| 亚洲精品在线美女| 变态另类丝袜制服| 999精品在线视频| 免费搜索国产男女视频| 午夜日韩欧美国产| 99热只有精品国产| 亚洲第一电影网av| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 亚洲欧美激情综合另类| 日韩免费av在线播放| 午夜福利视频1000在线观看| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 淫秽高清视频在线观看| 国产激情欧美一区二区| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 日韩欧美三级三区| 国产精品精品国产色婷婷| 欧美大码av| 在线免费观看的www视频| 99热这里只有精品一区 | 深夜精品福利| 观看免费一级毛片| 日韩欧美三级三区| 精品久久久久久久久久免费视频| 国产精品,欧美在线| 日本在线视频免费播放| 国产三级在线视频| 成年免费大片在线观看| 欧美丝袜亚洲另类 | 狠狠狠狠99中文字幕| 国产精品亚洲av一区麻豆| 日韩免费av在线播放| 一本一本综合久久| 国产99白浆流出| 一级作爱视频免费观看| 欧美+亚洲+日韩+国产| 美女高潮的动态| 男人舔女人下体高潮全视频| 久久久久精品国产欧美久久久| 欧美黑人欧美精品刺激| 淫妇啪啪啪对白视频| 久久久久久久午夜电影| 中文字幕高清在线视频| 一夜夜www| 老司机深夜福利视频在线观看| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 九九在线视频观看精品| 香蕉国产在线看| 一进一出抽搐gif免费好疼| 午夜激情福利司机影院| 日韩欧美国产一区二区入口| 国产单亲对白刺激| 一区福利在线观看| 久久国产精品人妻蜜桃| 国产v大片淫在线免费观看| 久久久久亚洲av毛片大全| 美女高潮的动态| 国产精品av视频在线免费观看| 日韩大尺度精品在线看网址| 国产成人福利小说| 成人精品一区二区免费| 国产伦人伦偷精品视频| 一二三四在线观看免费中文在| 精品欧美国产一区二区三| 国产三级中文精品| 成人三级做爰电影| 99精品欧美一区二区三区四区| 看片在线看免费视频| 偷拍熟女少妇极品色| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 亚洲片人在线观看| 一本精品99久久精品77| 亚洲熟妇熟女久久| 亚洲专区字幕在线| av视频在线观看入口| 亚洲五月婷婷丁香| 精品电影一区二区在线| 久久久久国产一级毛片高清牌| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 精品国产乱子伦一区二区三区| 欧美一区二区国产精品久久精品| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 亚洲五月天丁香| 国产视频一区二区在线看| 久9热在线精品视频| 大型黄色视频在线免费观看| 国产美女午夜福利| 国产精品久久久av美女十八| 欧美中文综合在线视频| 国产精品一区二区三区四区久久| 一级毛片高清免费大全| 精品免费久久久久久久清纯| 在线观看免费视频日本深夜| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 日韩欧美精品v在线| 久久伊人香网站| 免费高清视频大片| 一个人看视频在线观看www免费 | 国产成人啪精品午夜网站| 亚洲av美国av| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 午夜亚洲福利在线播放| 在线a可以看的网站| 精品欧美国产一区二区三| 波多野结衣高清无吗| 婷婷丁香在线五月| 97超视频在线观看视频| 一区二区三区国产精品乱码| 岛国在线免费视频观看| 国产极品精品免费视频能看的| 99热6这里只有精品| 国产不卡一卡二| 精品国内亚洲2022精品成人| 免费大片18禁| 国产精品99久久99久久久不卡| 亚洲精华国产精华精| 999久久久国产精品视频| 国产单亲对白刺激| 成人三级黄色视频| 国产精品一区二区免费欧美| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 国内精品一区二区在线观看| 青草久久国产| 亚洲欧美日韩无卡精品| 一本精品99久久精品77| 黄色视频,在线免费观看| 黄色日韩在线| 国产成人aa在线观看| 亚洲国产精品sss在线观看| www.999成人在线观看| 欧美日韩国产亚洲二区| 桃红色精品国产亚洲av| av天堂在线播放| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 哪里可以看免费的av片| 国内精品一区二区在线观看| 午夜激情欧美在线| 在线永久观看黄色视频| 在线国产一区二区在线| 午夜福利在线观看吧| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 亚洲精品456在线播放app | 波多野结衣巨乳人妻| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 国产黄片美女视频| 一边摸一边抽搐一进一小说| 亚洲 国产 在线| www国产在线视频色| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 国产激情偷乱视频一区二区| 成人特级av手机在线观看| 757午夜福利合集在线观看| а√天堂www在线а√下载| 999久久久精品免费观看国产| 国产成人欧美在线观看| 免费在线观看影片大全网站| 久久久国产成人精品二区| 长腿黑丝高跟| 亚洲国产精品合色在线| 在线观看免费午夜福利视频| 婷婷六月久久综合丁香| 久久精品国产综合久久久| 亚洲国产精品成人综合色|