• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    小麥新種質(zhì)普冰3228籽粒礦質(zhì)元素QTL定位與候選基因分析

    2024-11-07 00:00:00王健勝王二偉馬愛鋤侯桂玲程世平
    江蘇農(nóng)業(yè)科學 2024年18期

    摘要:小麥籽粒礦質(zhì)元素含量對人體健康具有重要影響。為解析小麥新種質(zhì)普冰3228礦質(zhì)元素遺傳機制并為小麥礦質(zhì)元素遺傳改良提供新材料。以小麥新種質(zhì)普冰3228與京4839雜交產(chǎn)生的重組自交系群體為材料,利用55K SNP芯片對小麥籽粒Ca、Mg、Fe、Zn這4種元素含量進行了QTL定位及候選基因分析。結(jié)果表明,普冰3228×京4839 RIL群體4種礦質(zhì)元素均存在豐富的遺傳差異;共檢測到與礦質(zhì)元素相關的QTL 15個,這些QTL主要分布于1A、1D、3D、5A、5B、6B和7D染色體上,QTL LOD值介于2.58~35.89之間,解釋變異率分布于0.16%~12.30%之間,其中包括與Zn元素含量相關的QTL 4個,與Ca元素含量相關的QTL 4個,與Mg元素含量相關的QTL 7個。進一步分析發(fā)現(xiàn),與籽粒礦質(zhì)元素含量相關的候選基因18個,這些候選基因主要與小麥礦質(zhì)元素的吸收、轉(zhuǎn)運、累積等功能相關。該結(jié)果將為小麥籽粒礦質(zhì)元素遺傳機制深入解析及遺傳改良提供有用的信息和豐富的基因資源。

    關鍵詞:小麥;普冰3228;礦質(zhì)元素;QTL定位;候選基因

    中圖分類號:S512.103.2 文獻標志碼:A

    文章編號:1002-1302(2024)18-0026-09

    收稿日期:2023-10-16

    基金項目:國家自然科學基金委員會-河南省人民政府聯(lián)合基金(編號:U1804102)。

    作者簡介:王健勝(1978—),男,陜西禮泉人,博士,副教授,主要從事小麥遺傳育種。E-mail:wjsheng1998@163.com。

    礦質(zhì)元素在人體新陳代謝中發(fā)揮著重要作用,其直接影響人體健康。近年來由于礦質(zhì)元素缺乏引起的相關疾病已在臨床醫(yī)學中被發(fā)現(xiàn)并引起了社會的普遍關注[1-2。例如,據(jù)估計世界范圍內(nèi)有近20億人患有因鐵元素缺乏引起的貧血,這個問題在發(fā)展中國家表現(xiàn)尤為突出。小麥是世界主要糧食作物之一,其籽粒礦質(zhì)元素含量對保障人體礦質(zhì)元素正常攝入具有重要影響,為此,國際農(nóng)業(yè)研究磋商組織(CCIAR)等國際機構(gòu)于2003年開始實施國際性重大農(nóng)業(yè)項目Harvest Plus計劃,旨在通過培育富含礦物營養(yǎng)成分的小麥等主要糧食作物,解決礦質(zhì)營養(yǎng)元素缺乏問題??梢?,開展小麥礦質(zhì)元素研究進而提高其礦質(zhì)元素含量已成為目前小麥生產(chǎn)的緊迫科學問題。

    小麥礦質(zhì)元素遺傳機制研究是遺傳改良并提升小麥籽粒礦質(zhì)元素含量的重要基礎。眾所周知,小麥籽粒礦質(zhì)元素含量是受多基因控制的數(shù)量性狀,而數(shù)量性狀基因座(QTL)分析為礦質(zhì)元素遺傳機制解析提供了一條有效途徑。圍繞小麥籽粒礦質(zhì)元素QTL定位,國內(nèi)外學者開展了較多的相關研究。郝志利用雙單倍體群體對小麥籽粒Fe、Zn、Cu、Mn這4種元素含量進行了QTL定位,結(jié)果共檢測到10個QTL位點,其中Fe元素檢測到4個QTL位點,Zn元素檢測到3個QTL位點,Cu元素共檢測到3個QTL位,Mn元素只檢測到1個QTL位點,這些QTL分別位于1B、2A、5D、3D、5A、5B、1D、2B、4D和3A染色體上[3。Wang等對小麥苗期和成株期Se元素含量進行了QTL定位分析,結(jié)果共檢測到與Se元素相關的QTL 16個,其中苗期發(fā)現(xiàn)7個QTL,成株期發(fā)現(xiàn)9個QTL,這些QTL主要L8Sxyhwa/B3C8XFcn2rdPQ==分布于1B、2B、4B、5A、5B、5D、6A和7D染色體上[4。Wang等利用京冬8號與矮抗58產(chǎn)生的254個重組自交系群體,結(jié)合55K SNP芯片對小麥籽粒Zn元素和Fe元素含量進行了QTL分析,結(jié)果共檢測到與Zn元素含量相關的QTL 7個,發(fā)現(xiàn)與Fe元素含量相關的QTL 4個[5。另外,也有學者利用全基因組關聯(lián)分析的方法檢測到了小麥礦質(zhì)元素相關的部分QTL[6-10。

    綜上所述,雖然前人針對小麥籽粒礦質(zhì)元素開展了較多的QTL定位研究,但有關小麥新種質(zhì)普冰3228礦質(zhì)元素的遺傳研究仍未見報道?;诖?,本研究以小麥新種質(zhì)普冰3228×京4839自交系群體(RIL)為材料,利用55K SNP芯片對小麥籽粒礦質(zhì)元素進行了QTL定位及候選基因分析,以期為小麥礦質(zhì)元素遺傳改良提供有益信息和有效材料。

    1 材料與方法

    1.1 研究材料

    本研究材料是小麥新種質(zhì)普冰3228與京4839雜交產(chǎn)生的重組自交系(RIL)群體,該群體共包括203個株系。普冰3228是普通小麥與冰草通過遠緣雜交獲得的遺傳穩(wěn)定的新種質(zhì),其具有高產(chǎn)、抗病、抗旱等多種優(yōu)異農(nóng)藝性狀[11-13。本研究所用材料均由中國農(nóng)業(yè)科學院作物科學研究所李立會課題組提供。

    1.2 小麥田間種植

    2018—2019年和2019—2020年將普冰3228×京4839 RIL群體分株系在河南平頂山和陜西咸陽2個環(huán)境下種植,株系間采用隨機區(qū)組設計,每個株系種植4行,設3次重復。種植行長保持2 m,行距20 cm,株距6.7 cm,單籽粒點播。試驗地周圍均種植保護行,按照普通產(chǎn)田水平進行田間統(tǒng)一管理。待小麥成熟后,在每個株系中隨機收獲5~6株,分單株收獲并脫粒。

    1.3 小麥籽粒礦質(zhì)元素含量測定

    收獲的小麥籽粒自然充分晾干,取一定量籽粒粉碎并過篩后,稱取0.50 g樣品放入50 mL微波消解管中,加入適量硝酸和過氧化氫,混勻后放入微波消解儀進行消解,消解液經(jīng)充分過濾后用1%硝酸溶液定容至50 mL。接著利用日本島津原子吸收分光光度儀AA-6300,采用火焰-原子吸收法測定小麥種質(zhì)籽粒的Ca、Mg、Fe、Zn這4種元素含量,每個小麥樣品重復測定3次,取平均值作為每個材料籽粒的元素含量。

    1.4 基因型檢測

    本研究采用十二烷基苯磺酸鈉(SDS)法提取基因組DNA[14,取親本和RIL群體幼苗葉片提取DNA,將提取后的DNA保存在TE中,并用瓊脂糖凝膠電泳法檢測其純度。然后將遺傳群體檢測質(zhì)量合格的樣品DNA送往北京博奧晶典生物技術有限公司,由該公司基于Illumina SNP Genotyping技術測試平臺使用微珠芯片技術進行檢測,其多態(tài)性使用Genomestudio v 1.0軟件進行分析,最終獲得研究遺傳群體的有效基因型。

    1.5 遺傳圖譜構(gòu)建及QTL定位

    基于上述獲得的定位群體的基因型,通過QTL IciMapping 4.0軟件構(gòu)建群體的分子標記遺傳連鎖圖譜,接著結(jié)合籽粒礦質(zhì)元素含量的表型性狀,采用完備區(qū)間作圖法(ICIM-ADD)進行QTL檢測,LOD閾值為2.0[15-16。QTL按照通用規(guī)則命名,具體為:QTL+性狀英文縮寫+染色體。

    1.6 候選基因分析

    以與籽粒礦質(zhì)元素含量緊密連鎖SNP標記序列為探針,以QTL定位置信區(qū)間作為候選基因的預測區(qū)間,在NCBI(https://www.ncbi.nlm.nih.gov)和ENA(https://www.ebi.ac.uk/ena)數(shù)據(jù)庫中進行Blast比對,獲得籽粒礦質(zhì)元素含量相關候選基因,并對部分候選基因進行功能注釋。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 普冰3228×京4839 RIL群體籽粒主要礦質(zhì)元素含量表型分析

    由圖1、表1可知,普冰3228×京4839 RIL群體中Ca、Mg、Fe、Zn這4種元素含量在不同環(huán)境下表現(xiàn)不盡相同。在籽粒Ca元素含量方面,RIL群體在平頂山地區(qū)分布在70.11~744.67 mg/kg之間,平均為167.35 mg/kg,而在咸陽地區(qū),RIL群體分布在61.97~993.77 mg/kg之間,平均為230.80 mg/kg,可以看出,該群體籽粒Ca元素含量在咸陽環(huán)境下相對較高,但從RIL群體籽粒Ca元素含量變異程度來看,平頂山環(huán)境下變異更豐富,其變異系數(shù)為64.74%,稍高于咸陽環(huán)境下的58.66%。在籽粒Mg元素含量方面,平頂山環(huán)境下分布在279.68~1 082.02 mg/kg之間,平均為512.00 mg/kg,而在咸陽地區(qū)分布在328.33~1 096.41 mg/kg之間,平均為588.99 mg/kg,可以看出,不同環(huán)境下群體Mg元素含量較為接近。Zn元素含量在2個環(huán)境下差異較大,在平頂山地區(qū)分布在7.79~68.78 mg/kg之間,而在咸陽地區(qū)分布在2.99~130.52 mg/kg之間,但2個環(huán)境下Zn元素含量平均值較為接近,分別為23.76、22.46 mg/kg,從Zn元素含量的變異程度來看,咸陽地區(qū)較平頂山地區(qū)具有更豐富的遺傳變異。RIL群體Fe元素含量在平頂山地區(qū)最小值為21.42 mg/kg,最大值為757.81 mg/kg,平均值為155.11 mg/kg,而在咸陽地區(qū),其最小值為88.76 mg/kg,最大值達到了997.32 mg/kg,平均值為278.79 mg/kg,F(xiàn)e元素含量變異程度以平頂山地區(qū)較為豐富,其變異系數(shù)達到了73.64%。從4種元素的綜合表現(xiàn)來看,以Mg元素的含量為最高,其次是Fe元素和Ca元素,Zn元素的含量為最低。

    2.2 普冰3228×京4839 RIL群體主要礦質(zhì)元素QTL定位

    利用55K SNP芯片,本研究構(gòu)建了普冰3228×京4839 RIL群體高密度遺傳連鎖圖譜,利用該圖譜結(jié)合群體不同環(huán)境下元素表型性狀對Ca、Mg、Fe、Zn這4種元素進行了QTL分析,共檢測到相關QTL 15個(表2),這些QTL主要分布于1A、1D、3D、5A、5B、6B和7D染色體上(圖2)。檢測到的QTL中包括與Zn元素相關的QTL4個,與Ca元素相關的QTL 4個,與Mg元素相關的QTL 7個,而未檢測到與Fe元素相關的QTL。檢測到的QTL LOD值介于2.58~35.89之間,解釋變異率分布在0.16%~12.30%之間,其中定位于5B染色體上AX-110439607~AX-109516387區(qū)間的控制小麥籽粒Zn含量的QZn-5B.2表現(xiàn)最為突出,其LOD值達到了35.89,解釋變異率為12.30%。從QTL的加性效應來看,除定位于5B、6B控制Zn含量的2個QTL為負值外,其余QTL的加性效應均為正值,這表明絕大多數(shù)QTL都來自普冰3228。同時可以看出,檢測到的QTL在小麥不同基因組間分布比較均勻,在A基因組上發(fā)現(xiàn)5個QTL,在B基因組上發(fā)現(xiàn)4個QTL,而在D基因組上發(fā)現(xiàn)的QTL最多,為6個。

    2.3 普冰3228×京4839 RIL群體主要礦質(zhì)元素候選基因分析

    基于上述QTL定位結(jié)果,本研究對籽粒礦質(zhì)元素進行了候選基因分析,具體結(jié)果見表3。由表3可知,共獲得籽粒礦質(zhì)元素相關的候選基因18個,這些基因主要位于1A、3D和5B染色體上,其中在1A染色體上與AX-110515151關聯(lián)的候選基因有5個,分別是TraesCS1A01G140300.1、TraesCS1A01G141000.1、TraesCS1A01G161200.1、TraesCS1A01G163700.2和TraesCS1A01G165400.1。與3D染色體上AX-111579109關聯(lián)的候選基因有7個,包括TraesCS3D01G111300.1、TraesCS3D01G123700.1、TraesCS3D01G123800.2、TraesCS301G138200LC.1、TraesCS3D01G124800.6、TraesCS3D01G127800.1和TraesCS3D01G143300.1。與5B染色體上AX-110439607關聯(lián)的候選基因有6個,包括TraesCS5B01G073900.1、TraesCS5B01G117200LC.1、TraesCS5B01G117300LC.1、TraesCS5B01G081100.1、TraesCS5B01G121600LC.1和TraesCS5B01G085100.1。從候選基因的注釋可以看出,這些候選基因主要與小麥礦質(zhì)元素的吸收、轉(zhuǎn)運、累積等功能相關。

    3 討論與結(jié)論

    隨著人們生活水平的提升和對自身健康的日益關注,提高籽粒微量礦質(zhì)元素含量已成為主要糧食作物遺傳改良的重要目標之一,在其他作物上如玉米、水稻等已經(jīng)開展了較多籽粒礦質(zhì)元素研究[17-19,而有關小麥礦質(zhì)元素的相關研究較少。在小麥籽粒礦質(zhì)元素遺傳改良中,開展小麥新種質(zhì)礦質(zhì)元素測定與遺傳分析是培育高含量礦質(zhì)元素小麥新品種的基礎性工作。普冰3228作為普通小麥與冰草遠緣雜交獲得的新種質(zhì),此前有關該種質(zhì)礦質(zhì)元素的研究尚未見報道。本研究以普冰3228和京4839為親本構(gòu)建了重組自交系群體并對其Ca、Mg、Fe、Zn這4種礦質(zhì)元素含量進行了QTL定位分析,結(jié)果檢測到與Zn相關的QTL 4個,其分別位于1A、5B和6B染色體上。張鵬霞在6B染色體上也發(fā)現(xiàn)了控制籽粒Zn含量的QTL[20;郝志在5B染色體上也檢測到控制籽粒Zn含量的QTL[3;孫憲印將小麥Zn含量QTL定位于3D、4A和6D染色體上[21;而Xu等在4B和5A染色體上檢測到了Zn含量QTL[22。本研究在1A染色體上發(fā)現(xiàn)的Zn含量QTL在以往的研究中未見報道,可能為新發(fā)現(xiàn)的QTL。本研究將籽粒Ca元素含量QTL定位于1A、1D、5A和7D染色體上。張鵬霞也在7D染色體上發(fā)現(xiàn)了控制小麥籽粒Ca含量的QTL[20。Shi等將小麥籽粒Ca含量QTL定位于2A、3A、4A、4B和5B等染色體上[9。前人開展小麥籽粒Mg元素含量QTL分析研究較少,本研究和張鵬霞的研究[20均在1A染色體上發(fā)現(xiàn)Mg含量QTL,在5A染色體上,本研究和孫憲印的研究[21也均檢測到了Mg含量QTL。

    性狀候選基因分析是解析其分子遺傳機制和進行分子遺傳改良的重要工作,雖然前人針對小麥礦質(zhì)元素含量進行了部分QTL分析,但開展候選基因分析的研究報道甚少。本研究在對小麥籽粒礦質(zhì)元素QTL定位的基礎上,對其也開展了候選基因分析,結(jié)果共獲得與籽粒元素相關的候選基因18個,這些候選基因主要編碼與元素吸收、轉(zhuǎn)運、累積等功能相關的蛋白或功能酶等。例如,TraesCS1A01G165400.1可能編碼一種水通道蛋白,已有研究證實該蛋白可影響植物體對部分礦質(zhì)元素的吸收[23-24。TraesCS5B01G081100.1可能編碼一種植物鈣調(diào)素結(jié)合蛋白,該蛋白可以影響植物對Ca元素的吸收[25-27。TraesCS3D01G124800.6可能編碼一種轉(zhuǎn)錄輔助抑制因子,其可能通過影響與元素吸收轉(zhuǎn)運等代謝過程相關基因的轉(zhuǎn)錄間接影響植物對某些元素的吸收[28。當然,本研究只是對小麥籽粒礦質(zhì)元素含量相關候選基因的初步分析,這些基因還有待于下一步進行更為深入的研究。

    參考文獻:

    [1]譚綠貴,傅先蘭,張 鑫,等. 微量元素·人體健康·環(huán)境變化[J]. 微量元素與健康研究,2005,22(4):49-51.

    [2]Anglani C. Wheat minerals:a review[J]. Plant Foods for Human Nutrition,1998,52:177-186.

    [3]郝 志. 小麥籽粒主要有益礦質(zhì)元素的含量及其QTL定位[D]. 泰安:山東農(nóng)業(yè)大學,2008.

    [4]Wang P,Wang H N,Liu Q,et al. QTL mapping of selenium content using a RIL population in wheat[J]. PLoS One,2017,12(9):e0184351.

    [5]Wang Y,Xu X T,Hao Y F,et al. QTL mapping for grain zinc and iron concentrations in bread wheat[J]. Frontiers in Nutrition,2021,8:680391.

    [6]AlomariD Z,Eggert K,von Wirén N,et al. Whole-genome association mapping and genomic prediction for iron concentration in wheat grains[J]. International Journal of Molecular Sciences,2018,20(1):76.

    [7]AroraS,Cheema J,Poland J,et al. Genome-wide association mapping of grain micronutrients concentration in Aegilops tauschii[J]. Frontiers in Plant Science,2019,10:54.

    [8]GorafiY S A,Ishii T,Kim J S,et al. Genetic variation and association mapping of grain iron and zinc contents in synthetic hexaploid wheat germplasm[J]. Plant Genetic Resources:Characterization and Utilization,2018,16(1):9-17.

    [9]Shi X,Zhou Z F,Li W X,et al. Genome-wide association study reveals the genetic architecture for calcium accumulation in grains of hexaploid wheat (Triticum aestivum L.)[J]. BMC Plant Biology,2022,22(1):229.

    [10]Wang J S,Shi X,Zhou Z F,et al. Genetic dissection of grain iron concentration in hexaploid wheat (Triticum aestivum L.) using a genome-wide association analysis method[J]. PeerJ,2022,10:e13625.

    [11]王健勝,王 輝,劉偉華,等. 小麥-冰草多粒新種質(zhì)及其多粒性遺傳分析[J]. 中國農(nóng)業(yè)科學,2009,42(6):1889-1895.

    [12]王健勝,劉偉華,王 輝,等. 小麥-冰草衍生系3228主要產(chǎn)量性狀的遺傳分析[J]. 植物遺傳資源學報,2010,11(2):147-151,156.

    [13]Wang J S,Liu W H,Wang H,et al. QTL mapping of yield-related traits in the wheat germplasm 3228[J]. Euphytica,2011,177(2):277-292.

    [14]Dellaporta S L,Wood J,Hicks J B. A plant DNA minipreparation:version Ⅱ[J]. Plant Molecular Biology Reporter,1983,1(4):19-21.

    [15]Wang J K. Inclusive composite interval mapping of quantitative trait genes[J]. Acta Agronomica Sinica,2009,35(2):239-245.

    [16]Meng L,Li H H,Zhang L Y,et al. QTL IciMapping:integrated software for genetic linkage map construction and quantitative trait locus mapping in biparental populations[J]. The Crop Journal,2015,3(3):269-283.

    [17]Hindu V,Palacios-Rojas N,Babu R,et al. Identification and validation of genomic regions influencing kernel zinc and iron in maize[J]. Theoretical and Applied Genetics,2018,131(7):1443-1457.

    [18]Zhang J,Chen K,Pang YKOZyJch5WTAt+Ajtb8dxvw== L,et al. QTL mapping and candidate gene analysis of ferrous iron and zinc toxicity tolerance at seedling stage in rice by genome-wide association study[J]. BMC Genomics,2017,18(1):828.

    [19]楊洪強,顧晶晶,田文仲,等. 不同灌水處理對小麥產(chǎn)量和籽粒品質(zhì)的影響[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學,2022,50(19):74-78.

    [20]張鵬霞. 不同氮鉀處理下小麥籽粒礦質(zhì)元素相關性狀的QTL分析[D]. 泰安:山東農(nóng)業(yè)大學,2021.

    [21]孫憲印. 不同環(huán)境下小麥籽粒形態(tài)性狀及微營養(yǎng)物質(zhì)含量的QTL分析[D]. 泰安:山東農(nóng)業(yè)大學,2009.

    [22]Xu Y F,An D G,Liu D C,et al. Molecular mapping of QTLs for grain zinc,iron and protein concentration of wheat across two environments[J]. Field Crops Research,2012,138:57-62.

    [23]Li L Y,Pan S R,Melzer R,et al. Apoplastic barriers,aquaporin gene expression and root and cell hydraulic conductivity in phosphate-limited sheepgrass plants[J]. Physiologia Plantarum,2020,168(1):118-132.

    [24]Maurel C,Verdoucq L,Luu D T,et al. Plant aquaporins:membrane channels with multiple integrated functions[J]. Annual Review of Plant Biology,2008,59:595-624.

    [25]Wang W,Takezawa D,Narasimhulu S B,et al. A novel kinesin-like protein with a calmodulin-binding domain[J]. Plant Molecular Biology,1996,31(1):87-100.

    [26]Xing J Y,Gruda N,Xiong J,et al. Influence of organic substrates on nutrient accumulation and proteome changes in tomato-roots[J]. Scientia Horticulturae,2019,252:192-200.

    [27]PreussM L,Delmer D P,Liu B. The cotton kinesin-like calmodulin-binding protein associates with cortical microtubules in cotton fibers[J]. Plant Physiology,2003,132(1):154-160.

    [28]Martin-Arevalillo R,Nanao M H,Larrieu A,et al. Structure of the Arabidopsis TOPLESS corepressor provides insight into the evolution of transcriptional repression[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America,2017,114(30):8107-8112.

    成人亚洲精品一区在线观看| 一本久久精品| 悠悠久久av| 亚洲精品国产av蜜桃| 另类亚洲欧美激情| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 七月丁香在线播放| 午夜日韩欧美国产| 国产一级毛片在线| 午夜福利,免费看| 久久久久久久久久久久大奶| 777米奇影视久久| av国产久精品久网站免费入址| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 午夜免费男女啪啪视频观看| 只有这里有精品99| 久久久久久久精品精品| 亚洲精品国产区一区二| 久久av网站| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 欧美中文综合在线视频| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 国产日韩欧美亚洲二区| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 亚洲国产av新网站| av电影中文网址| 如何舔出高潮| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 成人手机av| 国产成人欧美在线观看 | 老司机深夜福利视频在线观看 | 国产精品国产三级国产专区5o| 国产精品香港三级国产av潘金莲 | 国产男人的电影天堂91| 男人爽女人下面视频在线观看| 午夜福利视频在线观看免费| 99国产综合亚洲精品| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频 | 国产精品 欧美亚洲| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 男女边吃奶边做爰视频| 欧美成人午夜精品| 成年动漫av网址| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 视频在线观看一区二区三区| 久久久久国产一级毛片高清牌| 国产成人啪精品午夜网站| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 18禁观看日本| videosex国产| 国产成人91sexporn| 色播在线永久视频| videos熟女内射| 国产精品av久久久久免费| 欧美日韩一级在线毛片| 午夜福利视频精品| 久久久久久人妻| 岛国毛片在线播放| 亚洲av男天堂| 在线 av 中文字幕| 宅男免费午夜| 日本av免费视频播放| 青青草视频在线视频观看| 激情视频va一区二区三区| 国产精品久久久人人做人人爽| 精品免费久久久久久久清纯 | 中文乱码字字幕精品一区二区三区| av在线老鸭窝| 麻豆av在线久日| 777米奇影视久久| 成年人午夜在线观看视频| 国产色婷婷99| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 搡老乐熟女国产| 国产精品国产三级国产专区5o| 亚洲国产精品999| 黄片无遮挡物在线观看| 精品少妇内射三级| 少妇精品久久久久久久| 日韩人妻精品一区2区三区| 啦啦啦在线观看免费高清www| 2021少妇久久久久久久久久久| 国产日韩欧美在线精品| 日韩一本色道免费dvd| 成人影院久久| 丝瓜视频免费看黄片| 天天添夜夜摸| 日本wwww免费看| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 亚洲第一av免费看| 美女大奶头黄色视频| av一本久久久久| 日韩中文字幕欧美一区二区 | 在线观看免费午夜福利视频| 一二三四中文在线观看免费高清| 丁香六月天网| 91精品伊人久久大香线蕉| 老汉色∧v一级毛片| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 黄频高清免费视频| 久久久久久久大尺度免费视频| 1024香蕉在线观看| 只有这里有精品99| 国产免费一区二区三区四区乱码| 人妻 亚洲 视频| 欧美在线一区亚洲| 搡老乐熟女国产| 蜜桃国产av成人99| 90打野战视频偷拍视频| 成年女人毛片免费观看观看9 | 美女国产高潮福利片在线看| 宅男免费午夜| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| h视频一区二区三区| 亚洲av中文av极速乱| 两个人看的免费小视频| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 成人亚洲欧美一区二区av| 国产成人欧美在线观看 | 亚洲第一青青草原| 日韩大码丰满熟妇| 制服人妻中文乱码| 午夜精品国产一区二区电影| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| av网站在线播放免费| 美女国产高潮福利片在线看| 日韩一区二区视频免费看| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 亚洲色图综合在线观看| av在线老鸭窝| 大香蕉久久成人网| 久久97久久精品| 国产野战对白在线观看| 久久免费观看电影| 中文字幕高清在线视频| tube8黄色片| 麻豆av在线久日| 精品第一国产精品| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 国产成人精品在线电影| 久久久国产一区二区| 国产亚洲av高清不卡| 午夜福利,免费看| 少妇人妻 视频| 无限看片的www在线观看| 人人妻,人人澡人人爽秒播 | 精品一区二区三区四区五区乱码 | 在线观看www视频免费| 国产成人精品福利久久| 高清av免费在线| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 亚洲在久久综合| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 国产黄色视频一区二区在线观看| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| xxx大片免费视频| 99热全是精品| 亚洲成人av在线免费| 成人三级做爰电影| 丝袜脚勾引网站| 男女床上黄色一级片免费看| 成人国语在线视频| 少妇人妻精品综合一区二区| 国产高清不卡午夜福利| 国产精品女同一区二区软件| 亚洲欧美色中文字幕在线| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 涩涩av久久男人的天堂| 91国产中文字幕| 久久99热这里只频精品6学生| 亚洲少妇的诱惑av| 丝袜人妻中文字幕| 大片免费播放器 马上看| 国产精品香港三级国产av潘金莲 | 亚洲,一卡二卡三卡| 涩涩av久久男人的天堂| 国产黄色免费在线视频| 亚洲欧美清纯卡通| 高清视频免费观看一区二区| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 国产成人免费观看mmmm| 丰满饥渴人妻一区二区三| 色94色欧美一区二区| 久久久国产一区二区| 亚洲精品中文字幕在线视频| 免费观看人在逋| 久久久国产一区二区| 老汉色∧v一级毛片| 国产高清不卡午夜福利| 我的亚洲天堂| 一级爰片在线观看| 国产极品粉嫩免费观看在线| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 大香蕉久久网| 精品一区在线观看国产| 日本欧美视频一区| 精品国产一区二区久久| 天堂俺去俺来也www色官网| 夫妻性生交免费视频一级片| 国产成人av激情在线播放| 欧美成人精品欧美一级黄| 国产av精品麻豆| www.熟女人妻精品国产| 亚洲图色成人| 午夜av观看不卡| 亚洲精品国产av成人精品| 免费在线观看完整版高清| 国产国语露脸激情在线看| 色婷婷久久久亚洲欧美| 亚洲精品美女久久av网站| 最近最新中文字幕免费大全7| 欧美成人午夜精品| 免费高清在线观看日韩| av天堂久久9| 精品亚洲成a人片在线观看| 日韩大码丰满熟妇| 老司机深夜福利视频在线观看 | 午夜免费男女啪啪视频观看| 久久久久国产一级毛片高清牌| 青春草国产在线视频| 大陆偷拍与自拍| 黑人欧美特级aaaaaa片| av在线app专区| 大香蕉久久成人网| 老司机影院成人| 久久鲁丝午夜福利片| 国产不卡av网站在线观看| 欧美精品一区二区免费开放| 日韩 亚洲 欧美在线| 午夜福利免费观看在线| 夫妻午夜视频| 一级爰片在线观看| 亚洲国产av新网站| 中文字幕亚洲精品专区| 国产精品成人在线| 色婷婷久久久亚洲欧美| 国产熟女欧美一区二区| 91精品国产国语对白视频| 一区二区日韩欧美中文字幕| 日本vs欧美在线观看视频| 最近2019中文字幕mv第一页| 制服丝袜香蕉在线| 咕卡用的链子| 国产一卡二卡三卡精品 | 久久久久久久国产电影| 国产黄频视频在线观看| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 国产熟女欧美一区二区| 国产免费视频播放在线视频| 日韩欧美一区视频在线观看| 亚洲免费av在线视频| 女性被躁到高潮视频| 岛国毛片在线播放| 午夜免费鲁丝| 亚洲第一青青草原| 2018国产大陆天天弄谢| 成年av动漫网址| 国产黄色免费在线视频| 国产精品99久久99久久久不卡 | 99热全是精品| 日韩一本色道免费dvd| 精品国产国语对白av| 高清视频免费观看一区二区| 久久午夜综合久久蜜桃| 久热这里只有精品99| 少妇人妻久久综合中文| 18禁动态无遮挡网站| 午夜日本视频在线| 下体分泌物呈黄色| 男女免费视频国产| 嫩草影院入口| 看十八女毛片水多多多| 最近中文字幕高清免费大全6| 午夜福利一区二区在线看| 中文字幕人妻熟女乱码| 亚洲欧美激情在线| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 男女午夜视频在线观看| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 不卡av一区二区三区| 国产在线视频一区二区| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| h视频一区二区三区| 最新在线观看一区二区三区 | 日韩精品免费视频一区二区三区| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 亚洲成人一二三区av| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 日韩免费高清中文字幕av| 欧美激情极品国产一区二区三区| 精品第一国产精品| 国产色婷婷99| 日日撸夜夜添| 新久久久久国产一级毛片| 观看av在线不卡| 亚洲欧美激情在线| 日韩人妻精品一区2区三区| 好男人视频免费观看在线| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 国产精品人妻久久久影院| 99久久人妻综合| 国产熟女午夜一区二区三区| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 亚洲国产欧美一区二区综合| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 久久人人97超碰香蕉20202| 久久久久久久久久久久大奶| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 午夜福利在线免费观看网站| 国产成人av激情在线播放| 在线观看免费视频网站a站| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 欧美成人精品欧美一级黄| 街头女战士在线观看网站| 九色亚洲精品在线播放| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 91精品国产国语对白视频| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 国产片内射在线| 国产一区有黄有色的免费视频| 成人国产麻豆网| 国产精品久久久久久精品古装| 午夜日本视频在线| 亚洲欧美激情在线| 亚洲国产欧美一区二区综合| av不卡在线播放| 精品国产露脸久久av麻豆| 久久韩国三级中文字幕| 久久精品人人爽人人爽视色| 国精品久久久久久国模美| 国产精品二区激情视频| 成人影院久久| 亚洲国产精品999| 成人影院久久| 国产成人一区二区在线| 观看美女的网站| 久久av网站| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 欧美变态另类bdsm刘玥| 伦理电影免费视频| 午夜福利,免费看| 青春草亚洲视频在线观看| 一区二区日韩欧美中文字幕| 美女扒开内裤让男人捅视频| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 69精品国产乱码久久久| 久久久久久人妻| 久久久久精品久久久久真实原创| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 日本一区二区免费在线视频| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 免费观看a级毛片全部| 蜜桃国产av成人99| 成人黄色视频免费在线看| 在线观看www视频免费| 一区二区三区精品91| 国产精品国产三级国产专区5o| 亚洲av国产av综合av卡| 天堂俺去俺来也www色官网| 超色免费av| 国产老妇伦熟女老妇高清| 精品免费久久久久久久清纯 | 一区二区日韩欧美中文字幕| 日韩av免费高清视频| 日本欧美视频一区| 国产精品欧美亚洲77777| 久热这里只有精品99| 男女高潮啪啪啪动态图| 国产精品国产av在线观看| 激情五月婷婷亚洲| 欧美黄色片欧美黄色片| 青青草视频在线视频观看| 中文字幕人妻丝袜一区二区 | 欧美激情高清一区二区三区 | 一区二区三区精品91| 国产精品一二三区在线看| 国产精品成人在线| 午夜精品国产一区二区电影| 国产成人91sexporn| 国产亚洲精品第一综合不卡| 99热网站在线观看| 国产色婷婷99| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 色精品久久人妻99蜜桃| 国产 精品1| 久久免费观看电影| 热re99久久精品国产66热6| 两性夫妻黄色片| 丰满饥渴人妻一区二区三| 制服诱惑二区| 国产精品久久久久久精品古装| 叶爱在线成人免费视频播放| 纯流量卡能插随身wifi吗| 午夜av观看不卡| 纯流量卡能插随身wifi吗| 午夜老司机福利片| www.自偷自拍.com| 日本wwww免费看| 99久久人妻综合| 色吧在线观看| 日韩一区二区视频免费看| 男女国产视频网站| 在线精品无人区一区二区三| 美女福利国产在线| 国产成人精品久久久久久| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 伊人亚洲综合成人网| 韩国av在线不卡| 两性夫妻黄色片| 性色av一级| 哪个播放器可以免费观看大片| 男人舔女人的私密视频| 亚洲国产av新网站| 美女午夜性视频免费| xxx大片免费视频| 久久久精品免费免费高清| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 99国产精品免费福利视频| 国产免费视频播放在线视频| 亚洲第一区二区三区不卡| 欧美日韩av久久| 国产精品国产三级专区第一集| 亚洲精品在线美女| 欧美精品一区二区免费开放| www.自偷自拍.com| 亚洲国产av影院在线观看| 韩国精品一区二区三区| 七月丁香在线播放| 久热这里只有精品99| 国产精品女同一区二区软件| 午夜福利免费观看在线| 99九九在线精品视频| 久久女婷五月综合色啪小说| 在线 av 中文字幕| 一区二区三区精品91| 纯流量卡能插随身wifi吗| 七月丁香在线播放| 国产av一区二区精品久久| 亚洲情色 制服丝袜| 黄色一级大片看看| 午夜福利影视在线免费观看| 一级,二级,三级黄色视频| 亚洲精品美女久久av网站| 精品少妇久久久久久888优播| 女人久久www免费人成看片| netflix在线观看网站| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 黄色视频在线播放观看不卡| 制服诱惑二区| 九九爱精品视频在线观看| 色吧在线观看| 久久久欧美国产精品| 久久青草综合色| 亚洲成人av在线免费| 曰老女人黄片| 国产 一区精品| 丝瓜视频免费看黄片| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 欧美变态另类bdsm刘玥| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 老司机深夜福利视频在线观看 | 人妻一区二区av| 精品少妇内射三级| 男的添女的下面高潮视频| 久久久精品区二区三区| 观看av在线不卡| 男女午夜视频在线观看| 国产男女内射视频| 91精品三级在线观看| 久久 成人 亚洲| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 国产精品久久久久久精品电影小说| 国产精品偷伦视频观看了| 老熟女久久久| 免费av中文字幕在线| 久久久久精品人妻al黑| 久久精品国产综合久久久| 男女免费视频国产| 啦啦啦啦在线视频资源| 国产97色在线日韩免费| 午夜免费观看性视频| 黄色怎么调成土黄色| 国产av码专区亚洲av| 少妇人妻精品综合一区二区| 亚洲av成人精品一二三区| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 欧美精品av麻豆av| 黄色视频不卡| 婷婷色综合www| 最新的欧美精品一区二区| 成年av动漫网址| 一边亲一边摸免费视频| 看免费成人av毛片| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 街头女战士在线观看网站| 国产日韩欧美亚洲二区| 国产视频首页在线观看| 国产精品一区二区在线观看99| 欧美日韩精品网址| 只有这里有精品99| 91成人精品电影| 国产精品一区二区在线不卡| 免费高清在线观看日韩| 欧美日韩av久久| 99精品久久久久人妻精品| 国产日韩欧美亚洲二区| 久久影院123| 99精国产麻豆久久婷婷| 秋霞在线观看毛片| 国产成人91sexporn| 国产成人午夜福利电影在线观看| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 午夜日本视频在线| 高清在线视频一区二区三区| 伦理电影免费视频| 大陆偷拍与自拍| 亚洲欧美激情在线| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 久久久精品免费免费高清| 午夜福利视频精品| 亚洲一区二区三区欧美精品| 日日啪夜夜爽| 成人漫画全彩无遮挡| 最近中文字幕2019免费版| 亚洲欧美激情在线| 亚洲国产av影院在线观看| avwww免费| 国产一区二区 视频在线| 波野结衣二区三区在线| 在线免费观看不下载黄p国产| 久久这里只有精品19| 欧美97在线视频| 亚洲,一卡二卡三卡| 精品福利永久在线观看| 婷婷成人精品国产| 日韩大片免费观看网站| 99国产精品免费福利视频| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 街头女战士在线观看网站| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 看免费av毛片| 精品免费久久久久久久清纯 | 久久久久久久久久久免费av| 久久久久国产精品人妻一区二区| 性少妇av在线| 国产午夜精品一二区理论片| 99久久综合免费| 视频在线观看一区二区三区| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 亚洲国产中文字幕在线视频| 国产毛片在线视频| av不卡在线播放| 美女主播在线视频| 久久久精品免费免费高清| 亚洲国产欧美网| 日韩av不卡免费在线播放| 伊人久久国产一区二区| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 夫妻性生交免费视频一级片| 国产日韩欧美视频二区| 成人国产av品久久久| 黑人猛操日本美女一级片| 国产男女超爽视频在线观看| 在线观看www视频免费| 色综合欧美亚洲国产小说| a级片在线免费高清观看视频| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 久久性视频一级片| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 综合色丁香网| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 高清在线视频一区二区三区| 国产成人av激情在线播放| 国产精品一区二区在线观看99| 国产精品国产三级国产专区5o| 成年女人毛片免费观看观看9 | 电影成人av| 久久久久久人妻| 久久久久人妻精品一区果冻| av.在线天堂| 午夜精品国产一区二区电影| 成人影院久久| 久久精品国产亚洲av高清一级| 欧美亚洲日本最大视频资源| 亚洲国产欧美在线一区| 久久久久久久久久久免费av| 一区二区三区激情视频| 国产成人欧美在线观看 | 99热网站在线观看| 国产探花极品一区二区| 国产精品免费视频内射| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 亚洲视频免费观看视频| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 只有这里有精品99| 男女无遮挡免费网站观看| 9191精品国产免费久久| 久久99精品国语久久久| 欧美97在线视频| netflix在线观看网站| 超色免费av| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 老鸭窝网址在线观看| 亚洲伊人色综图| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 黄频高清免费视频| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观|