纖維素降解菌和溫度對(duì)水稻秸稈纖維降解和發(fā)酵品質(zhì)的影響

摘要：本研究從白蟻腸道中篩選出了一株纖維素降解菌，并探討其在不同溫度下水稻（Oryza sativa L.）秸稈青貯中的發(fā)酵效果。青貯試驗(yàn)設(shè)置對(duì)照組（CK）和纖維素降解菌處理組（CS），纖維素降解菌添加量為1×10⁷cfu·g^-1，分別進(jìn)行常溫（28℃）和高溫（37℃）青貯，30 d后取樣分析青貯品質(zhì)。結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，添加纖維素降解菌在常溫條件下能夠顯著增加乳酸菌數(shù)量和乳酸含量，顯著降低pH值（P<0.05）；在高溫條件下降低了氨態(tài)氮含量，pH值顯著下降（P<0.05）。兩種溫度條件下，添加纖維素降解菌均顯著降低中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維含量（P<0.05）。綜上所述，纖維素降解菌有助于降解纖維素，促進(jìn)乳酸發(fā)酵，對(duì)水稻秸稈青貯飼料發(fā)酵品質(zhì)具有改善作用。在37℃條件下，水稻秸稈青貯飼料纖維降解效果更佳。

關(guān)鍵詞：纖維素降解菌；纖維；水稻秸稈；溫度；青貯

中圖分類號(hào)：S816.53 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1007-0435（2024）10-3305-08

Effects of Cellulose-degrading Bacteria and Temperature on Fibre Degradation and Fermentation Quality of Rice Straw

YANG Dan， ZHOU Yu-xin， YIN Han-xue， CHEN Dan-dan， ZHANG Qing^*

（College of Forestry and Landscape Architecture， South China Agricultural University， Guangzhou， Guangdong Province 510642， China）

Abstract：This study isolated a cellulose-degrading bacterium from the termite gut and investigated its fermentation effects on rice straw silage at different temperatures. The silage experiment included a control group （CK） and a cellulose-degrading bacterium treatment group （CS），with the addition of cellulose-degrading bacteria at a concentration of 1×10⁷ cfu·g^-1. Fermentation was conducted at room temperature （28℃） and high temperature （37℃） for 30 days，after which samples were taken for quality analysis. The findings indicated that compared to the control，the addition of the cellulose-degrading bacterium significantly increased the quantity and content of lactic acid bacteria，markedly reduced pH values （P<0.05） under normal temperature condition，and lowered ammonia nitrogen content （P>0.05） while significantly reducing pH values （P<0.05） under high-temperature condition. In both temperature conditions，the cellulose-degrading bacterium notably decreased the levels of neutral detergent fiber and acid detergent fiber content （P<0.05）. In summary，the cellulose-degrading bacterium aided in cellulose degradation，promoted lactic acid fermentation，and improved the fermentation quality of rice straw silage. Particularly，the effectiveness of fiber degradation in rice straw silage feed was enhanced under 37℃ condition.

Key words：Cellulose-degrading bacteria;Fiber;Rice straw;Temperature;Silage

收稿日期：2024-04-08；修回日期：2024-06-12

基金項(xiàng)目：廣州市科技特派員項(xiàng)目（2024E04J0301）;國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)項(xiàng)目（2022YFE0111000-2，2022YFD1300901）資助

作者簡(jiǎn)介：楊丹（1999-），女，漢族，江西南昌人，碩士研究生，主要從事牧草青貯加工研究，E-mail：ydycbwywtb@163.com；*通信作者Author for correspondence，E-mail：zqing1988@126.com

水稻（Oryza sativa L.）是我國(guó)最主要的糧食作物，隨著水稻單產(chǎn)的增加，每年廢棄水稻秸稈產(chǎn)量也在持續(xù)增加^［1］。青貯是一種利用乳酸菌厭氧發(fā)酵調(diào)制天然飼草的方法，經(jīng)過(guò)青貯發(fā)酵過(guò)的飼草具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，且適口性強(qiáng)、消化率高、利用率高^［2-3］。因此將水稻秸稈進(jìn)行青貯發(fā)酵，不僅可以有效地解決冬季新鮮牧草不足的問(wèn)題，還可以解決直接焚燒和填埋廢棄秸稈所造成的環(huán)境污染和資源浪費(fèi)問(wèn)題^［4］。然而，秸稈纖維素含量豐富，且內(nèi)部結(jié)構(gòu)穩(wěn)定不易被降解，粗糙堅(jiān)硬，適口性差，青貯后的水稻秸稈不利于畜禽營(yíng)養(yǎng)吸收與消化，難以達(dá)到預(yù)期的效果^［5］。因此，如何降低秸稈的纖維素含量，提升秸稈飼料適口性的同時(shí)增強(qiáng)其營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)，為動(dòng)物提供更為優(yōu)質(zhì)的飼料是亟需解決的問(wèn)題。

纖維素酶能破壞植物細(xì)胞壁，將纖維降解為可利用的還原糖，促進(jìn)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)吸收，整個(gè)反應(yīng)過(guò)程中所需條件溫和且生態(tài)友好，受到了越來(lái)越多人的關(guān)注^［6］。近年來(lái)，研究者將目光聚焦到微生物產(chǎn)酶這一方法上，篩選并識(shí)別具有降解纖維素的功能性微生物，試圖通過(guò)微生物之間的協(xié)同作用，以高效率、低成本的方式對(duì)植物中存在的纖維素進(jìn)行降解^［7-9］。一般情況下，所篩選的微生物中，真菌降解纖維素的能力較細(xì)菌強(qiáng)，但是由于其生長(zhǎng)較慢、相關(guān)酶類較復(fù)雜，且熱穩(wěn)定較差，限制了它的生產(chǎn)，所使用的菌株仍然存在纖維素降解能力低、活性不夠穩(wěn)定和pH作用不顯著等問(wèn)題^［10-11］。Li等^［12］從蠶糞中分離到了三株纖維素降解菌，經(jīng)過(guò)16S rRNA基因序列比對(duì)分析，分別鑒定為地衣芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌，且這三株細(xì)菌展現(xiàn)了高效的降解纖維素能力，水解能力值在1.86～5.97之間，酶活力范圍為5.07～7.31 U·mL^-1。從中可以看出篩選降解纖維素的細(xì)菌更具有其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)：（1）細(xì)菌培養(yǎng)周期短、生長(zhǎng)速度快、可以依靠低成本的氮源和碳源作為纖維素酶生產(chǎn)的能源；（2）細(xì)菌纖維素基因表達(dá)量相對(duì)較高、相對(duì)容易獲得；（3）細(xì)菌纖維素酶的熱穩(wěn)定性好，原核表達(dá)控制系統(tǒng)相對(duì)簡(jiǎn)單方便^［13］。

微生物產(chǎn)酶降解植物性纖維素已成為當(dāng)前較為普遍的研究，研究者們通過(guò)利用微生物產(chǎn)酶的方式來(lái)加速堆肥腐熟的效率以及促進(jìn)生物能源的轉(zhuǎn)化^［14-15］。然而，關(guān)于在水稻秸稈中添加纖維素降解菌制成青貯飼料，從而降解纖維素并有效改善其發(fā)酵品質(zhì)的研究較少。因此，本研究從白蟻腸道中篩選出一株高效纖維素降解菌，應(yīng)用于水稻秸稈中，觀察其在兩種不同溫度下的發(fā)酵效果，為促進(jìn)纖維素降解菌在農(nóng)作物秸稈青貯飼料中的應(yīng)用，纖維的降解能力和水稻秸稈發(fā)酵品質(zhì)的改善提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

本試驗(yàn)所選用的白蟻來(lái)自華南農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)與風(fēng)景園林學(xué)院昆蟲生物防治實(shí)驗(yàn)室，于2023年1月對(duì)200只白蟻進(jìn)行養(yǎng)殖后收集的新鮮白蟻腸道。水稻種植于華南農(nóng)業(yè)大學(xué)啟林北試驗(yàn)田（23°16′ N，113°36′ E），于2023年12月人工收割水稻秸稈，在實(shí)驗(yàn)室切成2 cm左右的水稻秸稈碎段，用微型植物粉碎機(jī)（天津市泰斯特儀器有限公司）將水稻秸稈粉碎成粉狀。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)設(shè)置對(duì)照組（CK）和纖維素降解菌處理組（CS）。將青貯原料水分含量調(diào)到65%，把篩選的纖維素降解菌按照1×10⁷cfu·g^-1添加量加進(jìn)水稻秸稈中，對(duì)照組添加等量的生理鹽水，混合均勻后分別裝入聚乙烯塑料包裝袋中，每袋約100 g，然后用真空密封機(jī)密封，按照28℃和37℃分別進(jìn)行常溫和高溫青貯，一共24青貯樣品袋（4個(gè)處理×6個(gè)重復(fù)）。青貯30 d后對(duì)青貯飼料進(jìn)行發(fā)酵品質(zhì)、纖維含量和可溶性糖含量分析。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 菌株的分離與純化 將采集到的白蟻腸道內(nèi)容物放置于研磨儀中加入10 mL 0.9%生理鹽水進(jìn)行研磨成勻漿。并以10倍梯度對(duì)菌液進(jìn)行逐層稀釋直至10^-7梯度，隨后分別取100 μL各梯度液涂布到LB固體培養(yǎng)基上。待菌液放干后倒置放于37℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)2 d后，挑取單菌落劃線培養(yǎng)，二代劃線后轉(zhuǎn)移至LB液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)1 d。

1.3.2 纖維素降解菌的初篩 取出上述菌液以0.5 μL以三點(diǎn)法接種到羧甲基纖維素鈉固體培養(yǎng)基中，37℃培養(yǎng)2 d～4 d，待菌落長(zhǎng)出來(lái)以后，將培養(yǎng)基平鋪在試驗(yàn)臺(tái)上，沿著培養(yǎng)基邊緣緩慢加入5 mL 0.2%剛果紅染液使其鋪平整個(gè)平板后靜置染色15～30 min，隨后倒掉染液，加入5 mL的1 mol·L^-1氯化鈉溶液進(jìn)行脫色30 min后倒掉。若菌落出現(xiàn)明顯的透明圈則初步斷定該菌株具有纖維素降解能力。用游標(biāo)卡尺記錄所篩選菌株的透明圈直徑（D）與菌落直徑（d），根據(jù)兩者的比值大?。―/d）推測(cè)其產(chǎn)纖維素酶能力大小^［16］。根據(jù)比值的大小選擇酶活較高的菌株進(jìn)行復(fù)篩。

1.3.3 纖維素降解菌的復(fù)篩 測(cè)定菌株的胞外酶活力，并篩選出一株酶活力較高的菌株用于水稻秸稈青貯，在常溫和高溫條件下比較青貯效果。（1）纖維素酶活測(cè)定：試驗(yàn)采用二硝基水楊酸法（Dinitrosalicylic acid，DNS）測(cè)定^［17-19］，將所篩選到的微生物按2%接種量加入50 mL液體產(chǎn)酶培養(yǎng)基中，37℃，以180 r·min^-1恒溫?fù)u床上振蕩培養(yǎng)48小時(shí)。取5 mL發(fā)酵液轉(zhuǎn)入10 mL離心管8000 r離心10 min。取上清液0.5 mL作為粗酶液?？瞻讓?duì)照為煮沸10 min滅活的等體積粗酶液，取0.5 mL粗酶液到20 mL試管中，加入1.5 mL的1%的底物，抽打混勻后將試卷放水浴鍋50℃恒溫條件酶解30 min，加入3 mL DNS溶液終止反應(yīng)，充分混勻后沸水浴10 min，冷卻后利用酶標(biāo)儀比較540 nm處的吸光度，再代入所制作的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線，得出纖維素降解菌所產(chǎn)生的葡萄糖含量。根據(jù)酶活力計(jì)算公式計(jì)算纖維素酶活性。（2）制作葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線：分別取1 mg·mL^-1葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液0，0.4，0.6，0.8，1.0，1.2 mL加入到10 mL已標(biāo)記的試管中，再依次加入2，1.8，1.6，1.4，1.2，1，0.8 mL蒸餾水，分別準(zhǔn)確加入DNS試劑3 mL，沸水浴加熱2 min。自來(lái)水冷卻后，檢測(cè)620 nm處吸光度，縱坐標(biāo)為吸光度，橫坐標(biāo)為各標(biāo)準(zhǔn)濃度（mL），作圖得到標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.3.4 菌株鑒定 根據(jù)SK8255 Ezup柱式細(xì)菌基因組DNA抽提試劑盒提取DNA，細(xì)菌通用引物擴(kuò)增16S rDNA序列。PCR產(chǎn)物在1.5%瓊脂凝膠，1×TAE緩沖液中進(jìn)行電泳檢測(cè)。將擴(kuò)增產(chǎn)物送至生工生物工程（上海）股份有限公司進(jìn)行測(cè)序，獲得16S rRNA序列信息與GenBank基因庫(kù)中的序列進(jìn)行Blast相似性比較。

1.3.5 水稻秸稈青貯飼料發(fā)酵品質(zhì)測(cè)定

（1）微生物數(shù)量測(cè)定

青貯30 d后開袋，混合均勻后使用五點(diǎn)法稱取樣品10 g，注入90 mL無(wú)菌生理鹽水充分振蕩混勻，將上清液從10^-1至10^-6進(jìn)行梯度稀釋，微生物數(shù)量測(cè)定采用平板計(jì)數(shù)法，乳酸菌和大腸菌分別采用MRS瓊脂培養(yǎng)基和結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂（VRBA）進(jìn)行培養(yǎng)計(jì)數(shù)，酵母菌和霉菌采用孟加拉紅培養(yǎng)基（虎紅瓊脂）進(jìn)行培養(yǎng)計(jì)數(shù)^［20］。

（2）pH值及有機(jī)酸測(cè)定

取10 g鮮樣加入90 mL純水于4℃冰箱浸泡過(guò)夜，24 h后取出用濾紙過(guò)濾后，使用雷磁PHS-3C型pH計(jì)（上海市精密科學(xué)儀器有限公司）測(cè)定濾液的pH值。其余濾液經(jīng)0.22 μm孔徑的濾膜進(jìn)行過(guò)濾，采用島津GC-14型高效液相色譜儀測(cè)定有機(jī)酸（乳酸、乙酸、丙酸和丁酸）含量。

（3）化學(xué)成分測(cè)定

采用蒽酮比色法測(cè)定可溶性碳水化合物，用葡萄糖制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，將樣品煮沸10 min，冷卻過(guò)濾定容，吸取搖勻后加入蒽酮，在620 nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算原料中所含可溶性碳水化合物含量。取適量樣品，稱重記錄，置于65℃恒溫干燥箱烘干48 h，計(jì)算樣品烘干后的重量與烘干前的重量的百分比就是干物質(zhì)含量。根據(jù)Van Soest^［21］的方法，使用纖維分析儀（2000，英國(guó)Ringbio）分析粗纖維、中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維含量。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

所有的試驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析均SPSS 27.0軟件完成，采用獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)對(duì)不同溫度下纖維降解菌添加處理的各個(gè)樣本平均值之間差異進(jìn)行比較，P<0.05為差異顯著，P<0.01為差異極顯著。所有圖片則使用GraphPad Prism 8軟件進(jìn)行繪制后導(dǎo)出。

2 結(jié)果與分析

2.1 初篩纖維素降解菌

分離純化后，通過(guò)初篩得到20株有透明圈的菌株，初步判定這些菌株具有產(chǎn)纖維素酶的能力，其中篩選出透明圈直徑/菌落直徑≥3的5株菌株，分別為2，9，11，13，20號(hào)菌株，菌株20的透明圈直徑/菌落直徑值最大，其次是菌株9。之后對(duì)這些比值較大的菌株進(jìn)行復(fù)篩。

2.2 復(fù)篩纖維素降解菌

（1）葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線

通過(guò)DNS法測(cè)得葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖1所示，以三次重復(fù)值的均值得到葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線為y=2.666x-0.021，線性相關(guān)系數(shù)R²=0.999，由此可得，該標(biāo)準(zhǔn)曲線線性良好，達(dá)到基本要求。

（2）纖維素酶活力

對(duì)初篩后選出的5株菌進(jìn)行酶活力測(cè)定，篩選出20號(hào)菌株透明圈與菌落直徑最大且纖維素酶活力最高，因此20號(hào)菌株為最終獲得的目的菌株。

2.3 纖維素降解菌16S rDNA鑒定

通過(guò)對(duì)復(fù)篩出的目的菌株進(jìn)行提取DNA，以此模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增，通過(guò)測(cè)序結(jié)果在NCBI網(wǎng)站進(jìn)行Blast比對(duì)后，結(jié)果表明20號(hào)菌株歸屬于Cellulomonas sp.。

2.4 水稻秸稈化學(xué)成分和微生物組成

水稻秸稈的化學(xué)成分和微生物組成如表2所示。水稻秸稈干物質(zhì)含量為54.67%；可溶性碳水化合物含量為3.50%DM；中性洗滌纖維含量和酸性洗滌纖維含量分別為83.91%和49.03%DM；原料表面附著的微生物數(shù)量豐富，其中乳酸菌和大腸桿菌分別為5.92和6.52 lg cfu·g^-1 FW。

2.5 纖維素降解菌和溫度對(duì)水稻秸稈青貯飼料發(fā)酵品質(zhì)和微生物數(shù)量的影響

不同溫度下纖維素降解菌對(duì)水稻秸稈青貯發(fā)酵品質(zhì)如表3所示。兩個(gè)溫度條件下，添加纖維素降解菌后，水稻秸稈青貯飼料的pH值均顯著降低（P<0.05）。當(dāng)溫度在37℃時(shí)，乳酸菌數(shù)量顯著下降（P<0.05）。與此相反，乳酸菌數(shù)量和乳酸含量在常溫條件下顯著增加（P<0.05）。水稻秸稈自然青貯后，與28℃相比，37℃條件下的pH值顯著降低，而乳酸含量、氨態(tài)氮含量、乳酸菌和酵母菌數(shù)量顯著升高（P<0.05）。添加纖維素降解菌后，28℃下的乳酸菌，酵母菌數(shù)量和氨態(tài)氮含量較37℃顯著增加（P<0.05）。

2.6 纖維素降解菌和溫度對(duì)水稻秸稈青貯飼料纖維含量和碳水化合物含量的影響

由表4可知，相比常溫條件下的CK組，37℃條件下自然青貯后水稻秸稈的可溶性碳水化合物含量顯著增加，然而，添加CS后，可溶性碳水化合物含量顯著降低（P<0.05）。在兩種溫度條件下，添加CS降低了中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維含量，且中性洗滌纖維含量顯著降低了近4個(gè)百分點(diǎn)，酸性洗滌纖維含量顯著降低了近5個(gè)百分點(diǎn)（P<0.05）。當(dāng)溫度在37℃條件下，不論是自然青貯還是添加CS，酸性洗滌纖維含量顯著降低（P<0.05）。

3 討論

3.1 水稻秸稈營(yíng)養(yǎng)成分

優(yōu)質(zhì)的水稻秸稈青貯的關(guān)鍵在于乳酸菌能否大量且迅速增殖。一般情況下，新鮮原材料本身附生乳酸菌的數(shù)量超過(guò)10⁵cfu·g^-1 FW就可以很好的滿足青貯發(fā)酵品質(zhì)^［22］。本研究中的水稻秸稈乳酸菌數(shù)量正好符合快速發(fā)酵的要求，但不良微生物如酵母菌、霉菌和大腸桿菌的數(shù)量也較多，可能會(huì)增加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的損耗，不利于青貯發(fā)酵。青貯原料中可溶性糖也是影響發(fā)酵品質(zhì)的一個(gè)重要因素，充足的可溶性糖可以為乳酸菌提供充分的發(fā)酵底物^［23］。水稻秸稈中可溶性碳水化合物大多是以木質(zhì)纖維素（纖維素，半纖維素和木質(zhì)素）的形式存在于細(xì)胞壁中，而水稻秸稈中纖維素含量最高，很難被乳酸菌充分利用^［24-25］。同時(shí)，本研究中水稻秸稈的粗纖維、中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維含量偏高，單獨(dú)青貯不利于反芻動(dòng)物消化，結(jié)果往往不理想。

3.2 纖維素降解菌和溫度對(duì)水稻秸稈青貯發(fā)酵品質(zhì)的影響

生產(chǎn)過(guò)程中通過(guò)應(yīng)用添加劑來(lái)提高青貯發(fā)酵質(zhì)量。纖維素降解菌產(chǎn)生的纖維素酶能夠促進(jìn)秸稈中結(jié)構(gòu)性碳水化合物的分解，釋放出額外的可溶性碳水化合物以補(bǔ)充乳酸菌發(fā)酵所需的底物，促進(jìn)乳酸發(fā)酵，降低pH值并抑制有害微生物的活性，從而提高青貯發(fā)酵品質(zhì)^［26-27］。

本研究通過(guò)添加纖維素降解菌到水稻秸稈中發(fā)現(xiàn)，常溫條件下添加CS，乳酸含量和乳酸菌數(shù)量顯著增加，pH值顯著降低，說(shuō)明纖維素酶能夠降解植物細(xì)胞壁為乳酸菌生長(zhǎng)提供底物來(lái)源，促進(jìn)乳酸增加，與王玉榮^［28］和He等^［29］觀點(diǎn)一致，能有效抑制大腸桿菌和霉菌等不良微生物，加快乳酸的積累，降低pH值。確保厭氧環(huán)境是青貯飼料制作成功的關(guān)鍵因素，高溫條件下，溫度升高，酵母菌等其他不良微生物生長(zhǎng)活躍，利用可溶性糖等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)產(chǎn)生乙醇和二氧化碳，導(dǎo)致本試驗(yàn)在水稻秸稈青貯中發(fā)現(xiàn)丁酸的存在，pH值下降遲緩，酵母菌數(shù)量和氨態(tài)氮含量顯著增加^［30］。

3.3 纖維素降解菌和溫度對(duì)水稻秸稈可溶性碳水化合物和纖維的影響

常規(guī)青貯條件下，可溶性碳水化合物含量一般隨青貯時(shí)間的延長(zhǎng)呈現(xiàn)下降趨勢(shì)^［31］。然而，纖維素降解菌能分泌高活性纖維素酶，纖維素酶通過(guò)酶解作用能直接將水稻秸稈中的纖維素和半纖維素降解，釋放可溶性糖^［33-34］。在常溫條件下，相較于CK，纖維素降解菌很好地發(fā)揮了酶解作用，增加了WSC含量。在高溫條件水稻秸稈自然青貯下，WSC含量顯著增加，這可能是使乳酸菌迅速增殖的最佳溫度，其代謝產(chǎn)物乳酸含量增加，使pH維持穩(wěn)定，抑制了好氧微生物對(duì)可溶性碳水化合物的分解，從而減少了對(duì)WSC的消耗量^［23］。

纖維含量是評(píng)價(jià)青貯飼料的一個(gè)重要指標(biāo)。水稻秸稈中擁有較高的粗纖維以及較低的可溶性碳水化合物含量，不利于動(dòng)物的采食和干物質(zhì)消化率，對(duì)動(dòng)物生產(chǎn)性能也會(huì)產(chǎn)生影響^［20］。本試驗(yàn)中，CF，NDF和ADF含量在添加CS的作用下均有所降低，尤其NDF和ADF含量顯著低于對(duì)照組，這或許是因?yàn)槔w維素降解菌在青貯過(guò)程中的酶解作用改變了水稻秸稈的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)，持續(xù)對(duì)水稻秸稈中的纖維素和半纖維素進(jìn)行降解^［34］。這與Lee等研究結(jié)果相似^［35］，他們發(fā)現(xiàn)在水稻秸稈青貯過(guò)程中添加含有纖維素降解活性的真菌，真菌能夠降解含木質(zhì)素的植物結(jié)構(gòu)，對(duì)纖維素和半纖維素的降解很有效，與對(duì)照組對(duì)比后，發(fā)現(xiàn)處理組均能降低青貯飼料的NDF和ADF含量。一般情況下，青貯后的NDF和ADF含量會(huì)比原料低。然而，本研究中發(fā)現(xiàn)青貯后高溫和常溫下的NDF和ADF含量均比原料高，37℃下添加纖維素降解菌的CF，NDF和ADF含量均低于28℃下儲(chǔ)存的青貯飼料。這可能是青貯過(guò)程中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被消耗，導(dǎo)致干物質(zhì)含量中纖維含量占比更大^［34-36］。高溫下有利于促進(jìn)具有纖維素分解活性的細(xì)菌生長(zhǎng)。因此，當(dāng)水稻秸稈在高溫條件下，添加纖維素降解菌對(duì)青貯飼料纖維降解效果更佳。

4 結(jié)論

添加纖維素降解菌有助于水稻秸稈青貯飼料纖維素的降解，對(duì)青貯品質(zhì)有一定的改善作用。本研究表明，纖維素降解菌的添加為青貯過(guò)程中微生物發(fā)酵提供了更多的發(fā)酵底物，兩種溫度條件下，中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維含量均顯著降低。常溫條件下能夠顯著增加乳酸含量和乳酸菌數(shù)量，顯著降低pH值，有利于改善水稻秸稈青貯飼料的發(fā)酵品質(zhì)?？傮w而言，纖維素降解菌有助于降解纖維素，促進(jìn)乳酸發(fā)酵，尤其在37℃條件下，水稻秸稈青貯的纖維降解效果更佳。

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（責(zé)任編輯 閔芝智）