4種微生物殺蟲劑對(duì)點(diǎn)尾尺蛾幼蟲的時(shí)間劑量死亡率模型分析

摘要為篩選適用于防治點(diǎn)尾尺蛾Ourapteryx nigrociliaris的微生物殺蟲劑，發(fā)展粗榧Cephalotaxus sinensis等藥用植物害蟲的生物防治，采用浸漬法測(cè)定了甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒Mamestra brassicae nuclear polyhedrosis virus、蘇云金芽胞桿菌Bacillus thuringiensis、球孢白僵菌Beauveria bassiana、金龜子綠僵菌Metarhizium anisopliae CQMa421對(duì)點(diǎn)尾尺蛾幼蟲的致死效應(yīng)，并使用時(shí)間劑量死亡率（TDM）模型進(jìn)行模擬。結(jié)果表明，TDM模型均通過(guò)Hosmer-Lemoshow擬合異質(zhì)性檢驗(yàn)，4種微生物殺蟲劑處理10 d的幼蟲校正死亡率最高分別達(dá)到79.31%、86.21%、93.10%和72.41%，半致死濃度LC50分別為1.81×106 PIB/mL、2.71×103 IU/mL、9.40×106孢子/mL以及9.86×106孢子/mL。綜合考慮藥劑致死率和致死速度，球孢白僵菌、蘇云金芽胞桿菌和甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒的殺蟲效果優(yōu)于金龜子綠僵菌CQMa421，更具應(yīng)用潛力。本研究為點(diǎn)尾尺蛾的生物防治提供了參考依據(jù)。

關(guān)鍵詞點(diǎn)尾尺蛾;粗榧;微生物殺蟲劑;時(shí)間劑量死亡率模型;毒力測(cè)定

中圖分類號(hào)：S 763.7文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：ADOI：10.16688/j.zwbh.2023492Time-dose-mortality model of four microbial insecticides on

Ourapteryx nigrociliaris LeechWANG Shujie LIU Ziye SUN Bin LU Xiaojun WEN Junbao（1. State Key Laboratory of Efficient Production of Forest Resources， Beijing Key Laboratory for Forest

Pest Control， Beijing Forestry University， Beijing100083， China;Gko+gINjMhJGs4ReDW9ZLc//Zpio+PwqLN0IED/NBOs= 2. Dongcha Forest Farm of Xiaolong

Mountain Forest Conservation Center， Gansu Province， Tianshui741035， China）AbstractTo identify microbial pesticides suitable for controlling Ourapteryx nigrociliaris and develop biocontrol strategies for pests damaging Cephalotaxus sinensis and other medicinal plants， the laboratory toxicities of Mamestra brassicae nuclear polyhedrosis virus， Bacillus thuringiensis， Beauveria bassiana， and Metarhizium anisopliae strain CQMa421 against O.nigrociliaris larvae were measured by using the dipping method. A time-dose-mortality model （TDM） was established and validated using the Hosmer-Lemeshow test. The highest corrected mortality rates of the four microbial pesticides reached 79.31%， 86.21%， 93.10%， and 72.41%， respectively. The LC50 values were determine as 1.81×106 PIB/mL， 2.71×103 IU/mL， 9.40×106 spores/mL， and 9.86×106 spores/mL， respectively. Considering both mortality rate and speed of mortality， B.bassiana， B.thuringiensis， and Mamestra brassicae nuclear polyhedrosis virus demonstrated superior insecticidal efficacy compared to M.anisopliae strain CQMa421， demonstrating higher potential for application. This study provides valuable insights for the biocontrol of O.nigrociliaris.

Key wordsOurapteryx nigrociliaris;Cephalotaxus sinensis;microbial insecticide;time-dose-mortality model;

toxicity bioassay粗榧Cephalotaxus sinensis （Rehder & E.H. Wilson） H.L.Li又名中國(guó)粗榧、粗榧杉，為三尖杉科Cephalotaxaceae三尖杉屬Cephalotaxus植物，其化學(xué)內(nèi)含物三尖杉酯堿和高三尖杉酯堿對(duì)急性非淋巴細(xì)胞性白血病和慢性粒細(xì)胞白血病有較好療效，在國(guó)內(nèi)已被開發(fā)為臨床使用的抗癌藥物［1］，高三尖杉酯堿也成為了我國(guó)首創(chuàng)推薦應(yīng)用于臨床的抗白血病新藥，收載于1990年版《中國(guó)藥典》并被衛(wèi)生部列入常用47種抗癌藥之一［2］。自1976年以來(lái)，江西省九江市［3］、安徽省安慶市［4］、陜西省寶雞市［5］等地的粗榧曾受點(diǎn)尾尺蛾幼蟲Ourapteryx nigrociliaris Leech取食為害，由于缺乏種群動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)方法和防治經(jīng)驗(yàn)，大量枝葉被取食，植株枯死，珍稀的粗榧資源遭到嚴(yán)重破壞。

點(diǎn)尾尺蛾又稱粗榧尺蠖、點(diǎn)尾尺蠖，隸屬于鱗翅目Lepidoptera尺蛾科Geometridae灰尺蛾亞科Ennominae尾尺蛾屬Ourapteryx，寄主除粗榧外，還包括紅豆杉Taxus wallichiana var. chinensis （Pilger） Florin［5］和三尖杉Cephalotaxus fortunei Hooker［4］等植物。點(diǎn)尾尺蛾在我國(guó)陜西、甘肅、貴州、西藏、湖南、河南、江西、安徽、福建、四川、臺(tái)灣等地均有分布［37］。幼蟲期長(zhǎng)，1～2齡幼蟲聚集取食寄主新梢的嫩葉上表皮，導(dǎo)致嫩葉受太陽(yáng)暴曬后呈焦灼狀;隨著齡期增加，幼蟲為害加重，3齡及以上幼蟲嚙食嫩葉、老葉以及新萌發(fā)的枝梢樹皮，導(dǎo)致木質(zhì)部暴露、枝條枯死，嚴(yán)重影響樹勢(shì)以及新梢萌發(fā)［5］。

目前對(duì)點(diǎn)尾尺蛾的防治以噴施滅幼脲、高效氯氰菊酯、敵敵畏、樂果等化學(xué)藥劑為主，兼有人工捕殺、清理雜槎等措施［5］，缺乏生物防治的相關(guān)研究。近年來(lái)我國(guó)生防微生物及新型微生物農(nóng)藥種類逐漸增加，應(yīng)用于林業(yè)害蟲的防治案例逐步增多。已有學(xué)者篩選出一批對(duì)尺蛾科害蟲致死率較高的微生物，病毒（灰茶尺蠖核型多角體病毒、油桐尺蠖核型多角體病毒、甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒等）、細(xì)菌（短隱桿菌、蘇云金芽胞桿菌等）和真菌（球孢白僵菌、金龜子綠僵菌等）等微生物殺蟲劑具有對(duì)環(huán)境影響小、對(duì)人畜毒性低等優(yōu)點(diǎn)［89］，對(duì)茶尺蠖Ectropis obliqua Prout［1011］、灰茶尺蠖E.grisescens Warren［11］、油桐尺蠖Buzura suppressaria Guenée［1213］、橙帶藍(lán)尺蛾Milionia basalis Druce［14］、小蜻蜓尺蛾Cystidia couaggaria （Guenée）［15］等害蟲有良好防效，尚無(wú)應(yīng)用于點(diǎn)尾尺蛾防治的相關(guān)報(bào)道。

為了篩選適用于防治點(diǎn)尾尺蛾的微生物殺蟲劑，發(fā)展粗榧等藥用植物蟲害的無(wú)害化防治技術(shù)，本研究選取已實(shí)現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn)的甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒Mamestra brassicae nuclear polyhedrosis virus、蘇云金芽胞桿菌Bacillus thuringiensis、球孢白僵菌Beauveria bassiana、金龜子綠僵菌Metarhizium anisopliae CQMa421，研究它們對(duì)點(diǎn)尾尺蛾幼蟲的室內(nèi)毒力，運(yùn)用時(shí)間劑量死亡率（TDM）模型分析4種藥劑的劑量效應(yīng)及時(shí)間效應(yīng)，計(jì)算并比較各藥劑的半致死時(shí)間LT50和半致死濃度LC50，旨在為點(diǎn)尾尺蛾的防治提供參考。

1材料和方法

1.1供試材料

點(diǎn)尾尺蛾6齡幼蟲于2023年6月采自甘肅省小隴山林業(yè)保護(hù)中心東岔林場(chǎng)（34°08′N-34°15′N，106°16′E -106°26′E），之后將幼蟲轉(zhuǎn)移至帶孔的一次性圓形帶蓋塑料餐盒（容量1 000 mL）中，飼以清水沖洗過(guò)的新鮮粗榧枝葉，每日更換。飼養(yǎng)和試驗(yàn)均在人工氣候培養(yǎng)箱（PRX-250A，寧波賽福實(shí)驗(yàn)儀器有限公司）內(nèi)進(jìn)行，條件為溫度（23±3）℃，相對(duì)濕度（75±5）%，光周期L∥D=14 h∥10 h。

4種微生物殺蟲劑包括：20億PIB/mL甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒懸浮劑（江西新龍生物科技股份有限公司）、8 000 IU/μL蘇云金芽胞桿菌懸浮劑（山東魯抗生物農(nóng)藥有限責(zé)任公司）、100億孢子/mL球孢白僵菌可分散油懸浮劑（重慶聚立信生物工程有限公司）、80億孢子/mL金龜子綠僵菌CQMa421可分散油懸浮劑（重慶聚立信生物工程有限公司）。使用無(wú)菌水作為對(duì)照（CK）。預(yù)試驗(yàn)于2022年7月-8月在西北農(nóng)林科技大學(xué)火地塘試驗(yàn)林場(chǎng)完成，參考預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，每種殺蟲劑設(shè)置5種濃度梯度（表1）。

1.2室內(nèi)毒力測(cè)定

采集新鮮健康的粗榧枝葉，稱重后分成重量相等的多份備用，每份（55±1） g。每個(gè)處理濃度均配制500 mL藥液。將單份粗榧枝葉置于藥液中浸泡1 min后取出，晾干至無(wú)液滴滴落后放入均勻打孔的一次性圓形帶蓋塑料盒（1 000 mL）中（盒底部放置1張直徑9 cm的濾紙，加入2 mL無(wú)菌水保濕），用潔凈玻璃棒挑入10頭饑餓處理12 h的6齡幼蟲，蓋好盒蓋。帶藥葉片飼喂24 h后，每隔24 h更換清水沖洗并晾干的新鮮粗榧枝葉，并檢查和記錄幼蟲死亡情況。用直頭鑷輕觸并移動(dòng)蟲體，無(wú)躲避或扭動(dòng)則判定為死亡。空白對(duì)照中，粗榧枝葉的浸漬使用無(wú)菌水，其余處理同前述。每種殺蟲劑設(shè)置5個(gè)濃度，每濃度處理重復(fù)3次。

1.3數(shù)據(jù)處理與分析

根據(jù)Abbott氏校正公式，使用Excel計(jì)算處理組的校正死亡率。

校正死亡率=（處理死亡率-對(duì)照死亡率）/（1-對(duì)照死亡率）×100%

采用時(shí)間劑量死亡率（TDM）模型分析4種微生物殺蟲劑不同濃度藥液對(duì)點(diǎn)尾尺蛾幼蟲的毒力測(cè)定數(shù)據(jù)。參考馮明光［1617］的方法，將劑量效應(yīng)和時(shí)間效應(yīng)統(tǒng)一到一個(gè)模型中并考察互作關(guān)系，體現(xiàn)所測(cè)數(shù)據(jù)的完整性和客觀性。對(duì)于一個(gè)包含I個(gè)變量、觀察J次的生物測(cè)定，任意劑量di （i=1， 2， 3， …，I ） 在任意時(shí)間tj （j=1， 2， 3， …，J ）導(dǎo)致的試蟲累計(jì)死亡概率（cumulative mortality probability） pij公式為：

p_ij=1-exp｛-exp［τ_j+βlg（d_i）］｝

上式中待估參數(shù)β為描述劑量效應(yīng)的斜率，是描述假設(shè)存在的每個(gè)關(guān)鍵生物受體接受到的活性或毒性分子的平均數(shù)目;實(shí)際對(duì)應(yīng)于時(shí)間tj的參數(shù)為τj，指對(duì)應(yīng)于時(shí)間區(qū)間［t_j-1， t_j］的未知參數(shù)。由于累計(jì)死亡概率是包含連續(xù)性時(shí)間變量的非獨(dú)立性變量，因而不能直接模擬p_ij。若時(shí)間區(qū)間［t_j-1， t_j］足夠短，且各區(qū)間相互獨(dú)立，則di使試蟲在區(qū)間［t_j-1， t_j］內(nèi)可能發(fā)生的死亡概率就是獨(dú)立變量，即條件死亡概率（conditional mortality probability），指區(qū)間結(jié)束時(shí)死亡數(shù)與區(qū)間起始時(shí)的存活數(shù)之比，表示為：

q_ij=1-exp｛-exp［γ_j+βlg（d_i）］｝

q_ij式中待估參數(shù)β意義同pij計(jì)算公式，γ_j為描述區(qū)間［t_j-1， t_j］內(nèi)的待估時(shí)間效應(yīng)參數(shù)。條件概率的計(jì)算依賴于完全相互獨(dú)立的時(shí)間區(qū)間［18］，模型中參數(shù)γ_j和β的最大似然估計(jì)可通過(guò)二項(xiàng)式分布變量的最大似然函數(shù)逼近法求得，進(jìn)而估計(jì)出所有參數(shù)。

本研究采用DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)（v 9.01）進(jìn)行TDM模型擬合以及相關(guān)參數(shù)的估計(jì)，并通過(guò)Hosmer-Lemeshow法檢驗(yàn)?zāi)Ｐ偷臄M合優(yōu)度，再使用擬合的時(shí)間效應(yīng)和劑量效應(yīng)參數(shù)估計(jì)隨時(shí)間變化的致死中時(shí)、致死中濃度及95%置信區(qū)間。

2結(jié)果與分析

2.1不同處理中點(diǎn)尾尺蛾幼蟲的死亡率變化

不同濃度的甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒、蘇云金芽胞桿菌、球孢白僵菌和金龜子綠僵菌CQMa421對(duì)點(diǎn)尾尺蛾幼蟲處理不同時(shí)間內(nèi)累計(jì)校正死亡率見圖1，各處理的校正死亡率隨處理后時(shí)間的延長(zhǎng)而遞增，隨濃度的降低而遞減。部分處理組在藥后1 d出現(xiàn)少量死亡，與對(duì)照組相比，處理組存活的幼蟲取食量均有減少，行為和反應(yīng)相對(duì)遲緩。最高濃度的4種藥劑對(duì)幼蟲的校正死亡率在處理2～4 d后迅速增加，至藥后10 d，上述濃度藥劑的校正死亡率分別達(dá)到79.31%、86.21%、93.10%和72.41%。

2.2時(shí)間劑量死亡率（TDM）模型輸出結(jié)果和分析使用各處理組的校正死亡率進(jìn)行 TDM 模型分析和參數(shù)估計(jì)，結(jié)果見表2。經(jīng)Hosmer-Lemeshow 擬合度測(cè)試，χ²_MbNPV=4.738 8（df=8， P=0.785 09），χ²_Bt=3.335 1（df=8， P=0.911 60），χ²_Bb=1.323 9（df=8， P=0.995 26），χ²_CQMa421=4.357 8（df=8， P=0.823 49），均小于相同自由度的χ²_0.05，表明4種微生物殺蟲劑的數(shù)據(jù)均通過(guò)了Hosmer-Lemeshow擬合度測(cè)試，擬合模型的異質(zhì)性不顯著，模型有效。

甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒、蘇云金芽胞桿菌、球孢白僵菌和金龜子綠僵菌CQMa421各濃度處理與時(shí)間效應(yīng)參數(shù)的t值均達(dá)到極顯著水平（P＜0.01），表明各參數(shù)估計(jì)的標(biāo)準(zhǔn)誤（SE）相對(duì)于參數(shù)估計(jì)值極小，模型擬合良好，各藥劑都對(duì)點(diǎn)尾尺蛾幼蟲有極顯著的劑量效應(yīng)和時(shí)間效應(yīng)。4種微生物殺蟲劑對(duì)點(diǎn)尾尺蛾劑量效應(yīng)的斜率β分別為1.021 6、1.354、1.554 3和1.210 7，時(shí)間效應(yīng)參數(shù)γ分別在處理后第10天、第5天、第10天和第8天達(dá)到最大（表2）。

2.3致死濃度及致死時(shí)間

隨著處理后時(shí)間的增加，LC50和LC90對(duì)數(shù)值降低，表明藥劑達(dá)到LC50和LC90所需的濃度下降（圖2）。各組試蟲在處理1～3 d內(nèi)死亡數(shù)較少，因此1～3 d的LC50偏大;處理后4～10 d，甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒LC50由2.33×107 PIB/mL降至1.81×106 PIB/mL，蘇云金芽胞桿菌LC50由1.71×104 IU/mL降至2.7wtjnqH08rRJmxUdNvRuDcZTaI36YSOzloYjV+WUUCZY=1×103IU/mL，球孢白僵菌LC50由8.22×107孢子/mL降至9.40×106孢子/mL，金龜子綠僵菌CQMa421的LC50由1.22×108孢子/mL 降至9.86×106孢子/mL。整個(gè)試驗(yàn)中僅球孢白僵菌1.00×108孢子/mL處理組的校正死亡率超過(guò)90%，因此模型中各藥劑的LC90整體偏大。

另外，4種微生物殺蟲劑對(duì)點(diǎn)尾尺蛾的半致死時(shí)間（LT₅₀）隨著處理劑量的增加而遞減，其中1.00×10⁸ 孢子/mL球孢白僵菌和20 000 IU/mL蘇云金芽胞桿菌的致死速度較快，LT₅₀分別為3.60 d和3.86 d，而2.00×10⁷ PIB/mL甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒及5.00×10⁷孢子/mL金龜子綠僵菌CQMa421致死速度稍慢，LT50分別為4.33 d和5.15 d（表3）。部分劑量處理中試蟲最終的校正死亡率低于50%，無(wú)法計(jì)算對(duì)應(yīng)的LT50。此外，僅1.0×10⁸孢子/mL球孢白僵菌處理的點(diǎn)尾尺蛾校正死亡率超過(guò)90%，該濃度藥劑的LT90為8.07 d，其余處理組均無(wú)LT90的。

3討論

本研究結(jié)果表明，4種微生物殺蟲劑對(duì)點(diǎn)尾尺蛾6齡幼蟲均有較好的殺蟲活性。室內(nèi)條件下，球孢白僵菌和蘇云金芽胞桿菌的最高濃度處理組達(dá)到半數(shù)致死量用時(shí)分別為3.60 d和3.86 d，甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒及金龜子綠僵菌CQMa421也分別在處理后4.33 d和5.15 d達(dá)到半數(shù)致死量，尤其是1.0×10⁸孢子/mL球孢白僵菌處理10 d后校正死亡率達(dá)到了93.10%。綜合考慮致死率和致死速度，可以進(jìn)一步探究甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒、蘇云金芽胞桿菌和球孢白僵菌3種藥劑在野外的防效。

甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒于1979年在甘藍(lán)夜蛾死亡幼蟲中成功分離［19］，對(duì)甘藍(lán)夜蛾Mamestra brassicae （Linnaeus）、棉鈴蟲Helicoverpa armigera （Hübner）［20］、茶尺蠖［21］等多種鱗翅目食葉害蟲防效良好。本研究通過(guò)測(cè)定甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒對(duì)點(diǎn)尾尺蛾6齡幼蟲的室內(nèi)毒力，發(fā)現(xiàn)幼蟲死亡率較高、達(dá)到半數(shù)致死量的時(shí)間較短，證明該藥劑具有一定的防治應(yīng)用潛力。蘇云金芽胞桿菌的致死作用可能與溫度有關(guān)，金銀花尺蠖Heterolocha jinyinhuaphaga Chu的老熟幼蟲（5齡）感染該菌后，在15～31℃范圍內(nèi)幼蟲死亡率隨溫度升高而上升，35℃時(shí)幼蟲校正死亡率開始下降［22］;幼蟲密度也可能影響蘇云金芽胞桿菌的藥效，例如黏蟲Mythimna separata （Walker）接種蘇云金芽胞桿菌后，隨著幼蟲密度的增加，幼蟲存活率上升，存活時(shí)間延長(zhǎng)［23］。這些因素可作為日后田間防治點(diǎn)尾尺蛾的施藥參考。球孢白僵菌對(duì)灰茶尺蠖也有較強(qiáng)致病力，且隨著球孢白僵菌濃度的增大，幼蟲死亡率升高［24］。另外，球孢白僵菌分生孢子在相對(duì)濕度>85%的環(huán)境中萌發(fā)和生長(zhǎng)狀況良好，毒力較高［25］，在相對(duì)濕度>90%且接近100%的環(huán)境中，孢子萌發(fā)和侵染效果最佳［2627］。本研究設(shè)置的濕度接近小隴山林區(qū)自然環(huán)境下的濕度，雖未達(dá)到最適生長(zhǎng)條件，但經(jīng)球孢白僵菌處理后的點(diǎn)尾尺蛾幼蟲校正死亡率較高，便于后續(xù)進(jìn)行野外防治試驗(yàn)。根據(jù)殺蟲真菌具有殺蟲速度慢、接觸侵染的特點(diǎn)，彭國(guó)雄等［28］強(qiáng)調(diào)，應(yīng)利用金龜子綠僵菌CQMa421提前防治低齡幼蟲（1～2齡），應(yīng)盡量避免在幼蟲老熟期施藥，而本研究的試蟲齡期較大，這有可能是CQMa421處理組幼蟲校正死亡率偏低的原因。

本研究采用時(shí)間劑量死亡率（TDM）模型分析了4種微生物殺蟲劑對(duì)點(diǎn)尾尺蛾幼蟲的毒力，發(fā)現(xiàn)隨著時(shí)間延長(zhǎng)，半致死濃度LC50的估計(jì)值減小;隨著劑量的增加，半致死時(shí)間LT50的估計(jì)值減小。時(shí)間效應(yīng)和劑量效應(yīng)是評(píng)價(jià)活性物質(zhì)生物活性的重要指標(biāo)，二者相互關(guān)聯(lián)［16］，而傳統(tǒng)的幾率值分析中，劑量和時(shí)間效應(yīng)指標(biāo)由相互獨(dú)立的經(jīng)驗(yàn)關(guān)系式確定，無(wú)法體現(xiàn)兩種效應(yīng)的相關(guān)關(guān)系［17］。TDM模型一定程度上彌補(bǔ)了幾率值分析法使劑量和時(shí)間效應(yīng)關(guān)系相互獨(dú)立的缺陷，在一個(gè)模型中同時(shí)分析時(shí)間、劑量及兩者互作的效應(yīng)，直接明確藥劑致死動(dòng)態(tài)規(guī)律、致死高峰期、致死劑量等評(píng)價(jià)指標(biāo)，更能充分體現(xiàn)生物測(cè)定數(shù)據(jù)的完整性和客觀性［2930］。

本研究測(cè)定了4種微生物殺蟲劑的室內(nèi)毒力，結(jié)果可能與實(shí)際應(yīng)用情況有差異，還需進(jìn)一步測(cè)定在野外應(yīng)用的防效，明確適合在野外防治點(diǎn)尾尺蛾幼蟲的微生物殺蟲劑種類、劑型、濃度和施藥方式，探究其對(duì)環(huán)境中其他生物的影響。此外，還需要探究添加農(nóng)藥助劑［31］以及與化學(xué)農(nóng)藥復(fù)配混用［32］等方式對(duì)上述微生物殺蟲劑速效性和持效性的影響，從而更大限度地發(fā)掘微生物殺蟲劑的應(yīng)用潛力。

4結(jié)論

甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒、蘇云金芽胞桿菌、球孢白僵菌和金龜子綠僵菌CQMa421對(duì)點(diǎn)尾尺蛾6齡幼蟲均有較好的殺蟲活性，綜合考慮藥劑致死率和致死速度，球孢白僵菌、蘇云金芽胞桿菌和甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒的殺蟲效果優(yōu)于金龜子綠僵菌CQMa421，可用于下一步的野外防治試驗(yàn)。

參考文獻(xiàn)

［1］夏小鳳， 夏桂陽(yáng)， 武玉卓， 等. 中藥痕量藥效物質(zhì)：中藥創(chuàng)新藥物的重要來(lái)源［J］. 中國(guó)中藥雜志， 2022， 47（7）： 17051729.

［2］楊志欣， 王鑫， 張蕾， 等. 高三尖杉酯堿研究進(jìn)展［J］.藥物評(píng)價(jià)研究， 2019， 42（4）： 781786.

［3］方育卿. 點(diǎn)尾尺蛾的初步觀察及防治試驗(yàn)［J］. 昆蟲學(xué)報(bào)， 1976， 19（3）： 318324.

［4］周體英. 點(diǎn)尾尺蛾研究初報(bào)［J］. 昆蟲知識(shí)， 1985（5）： 212214.

［5］肖娟， 張玲， 劉亞荮， 等. 太白林區(qū)點(diǎn)尾尺蛾的調(diào)查研究［J］. 陜西林業(yè)科技， 2017（3）： 3437.

［6］任志勇， 張正武， 王文永， 等. 甘肅省隴南市油橄欖主栽區(qū)蛾類昆蟲調(diào)查［J］. 中國(guó)森林病蟲， 2015， 34（6）： 3133.

［7］薛大勇， 韓紅香， 伍玉明. 西藏尺蛾科昆蟲的訂正與增補(bǔ)［C］∥中國(guó)昆蟲學(xué)會(huì). 昆蟲學(xué)創(chuàng)新與發(fā)展——中國(guó)昆蟲學(xué)會(huì)2002年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集. 北京：中國(guó)科學(xué)技術(shù)出版社， 2002： 17.

［8］魏琪， 朱旭暉， 何佳春， 等. 5種微生物殺蟲劑對(duì)3種水稻主要害蟲的室內(nèi)毒力比較及致死表型觀察［J］. 植物保護(hù)， 2022， 48（4）： 165174.

［9］張慧， 許寧， 曹麗茹， 等. 我國(guó)微生物農(nóng)藥的研發(fā)與應(yīng)用研究進(jìn)展［J］. 農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào)， 2023， 25（4）： 769778.

［10］HAZARIKA L K， BARTHAKUR B K， SINGH K. A new pathogen of tea bunch caterpillar ［J］. Two and a Bud， 1995， 421： 4041.

［11］譚榮榮， 陳勛， 黃丹娟， 等. 灰茶尺蠖核型多角體病毒對(duì)兩種尺蠖的致病性［J］. 中國(guó)生物防治學(xué)報(bào)， 2023， 39（3）： 684689.

［12］GHATAK S S， REZA M W. Bio-efficacy of Beauveria bassiana against tea looper caterpillar， Buzura suppressaria Guen. （Lepidopera： Geometridae） ［J］. 昆蟲學(xué)報(bào)， 2007， 50（9）： 962966.

［13］石月娥. BsNPV大面積防治油桐尺蠖的經(jīng)濟(jì)效益［J］. 生物防治通報(bào)， 1985， 1（3）： 46.

［14］鄭宏. 綠僵菌MaFZ-13對(duì)橙帶藍(lán)尺蛾幼蟲致病力及林間防治效果［J］. 昆蟲學(xué)報(bào)， 2020， 63（10）： 11971200.

［15］林曦碧. 小蜻蜓尺蛾Cystidia couaggaria （Guenée）生物學(xué)特性及白僵菌防治效果［J］. 武夷科學(xué)， 2020， 36（1）： 3742.

［16］FENG Mingguang， LIU Cailing， XU Junhuan， et al. Modeling and biological implication of time-dose-mortality data for the entomophthoralean fungus， Zoophthora anhuiensis， on the green peach aphid Myzus persicae ［J］. Journal of Invertebrate Pathology， 1998， 72（3）： 246251.

［17］馮明光. 時(shí)間—?jiǎng)┝俊劳雎誓Ｐ腿〈鷻C(jī)率分析技術(shù)［J］. 應(yīng)用昆蟲學(xué)報(bào)， 1998， 35（4）： 233237.

［18］王艷秋， 周婷婷， 林華峰， 等. 球孢白僵菌Bb84對(duì)Q型煙粉虱的時(shí)間劑量死亡率模型分析［J］. 農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào)， 2016， 18（4）： 459464.

［19］孫發(fā)仁. 甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒的初步研究［J］. 微生物學(xué)通報(bào)， 1984（2）： 5254.

［20］MUKAWA S， GOTO C. Mamestra brassicae nucleopolyhedrovirus infection and enhancing effect of proteins derived from Xestia c-nigrum granulovirus in larvae of Mamestra brassicae and Helicoverpa armigera （Lepidoptera： Noctuidae） on cabbage ［J］. Journal of Economic Entomology， 2010， 103（2）： 257264.

［21］張曉陽(yáng)， 王義信， 易健， 等. 4種藥劑防治茶園尺蛾科害蟲的藥效評(píng)價(jià)［J］. 生物災(zāi)害科學(xué)， 2021， 44（3）： 327331.

［22］向玉勇， 隋姍姍， 劉沖， 等. 不同溫度下蘇云金芽孢桿菌對(duì)金銀花尺蠖幼蟲的致病力［J］. 浙江大學(xué)學(xué)報(bào)（理學(xué)版）， 2016， 43（4）： 436441.

［23］孔海龍， 袁琳， 董傳磊， 等. 幼蟲密度對(duì)粘蟲抵抗蘇云金芽孢桿菌和球孢白僵菌侵染能力的影響［J］. 應(yīng)用昆蟲學(xué)報(bào)， 2020， 57（6）： 14111416.

［24］王逸帆. 高致病力球孢白僵菌篩選及對(duì)灰茶尺蠖的生物學(xué)影響［D］.合肥： 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)， 2020.

［25］QUESADA-MORAGA E， MARANHAO E A A， VALVERDE-GARCIA P， et al. Selection of Beauveria bassiana isolates for control of the whiteflies Bemisia tabaci and Trialeurodes vaporariorum on the basis of their virulence， thermal requirements， and toxicogenic activity ［J］. Biological Control， 2006， 36（3）： 274287.

［26］ALEXANDRE T M， ALVES L F A， NEVES P， et al. Effect of temperature and poultry litter in Beauveria bassiana （Bals.） Vuill. and Metarhizium anisopliae （Metsch） virulence against the lesser mealworm Alphitobius diaperinus （Panzer） （Coleoptera： Tenebrionidae） ［J］. Neotropical Entomology， 2006， 35（1）： 7582.

［27］HE Yurong， L Lihua， KUANG Zhuobin， et al. Effect of temperature and humidity on the virulence of beetle-derived Beauveria bassiana （Balsamo） Vuillemin （Deuteromycetes： Moniliales） against the daikon leaf beetle， Phaedon brassicae Baly （Coleoptera： Chrysomelidae） ［J］. Acta Entomologica Sinica， 2005， 48（5）： 679686.

［28］彭國(guó)雄， 張淑玲， 夏玉先. 金龜子綠僵菌CQMa421農(nóng)藥及應(yīng)用情況［J］. 中國(guó)生物防治學(xué)報(bào)， 2020， 36（6）： 850867.

［29］謝寧， 王中康， 張建偉， 等. 綠僵菌CQMa128乳粉劑對(duì)蠐螬時(shí)間劑量死亡率模型分析［J］. 中國(guó)生物防治， 2010， 26（4）： 436441.

［30］楊振國(guó)， 張永強(qiáng)， 丁偉， 等. 東莨菪內(nèi)酯與雙脫甲氧基姜黃素對(duì)朱砂葉螨致死效應(yīng)模擬［J］. 應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)， 2013， 24（1）： 197204.

［31］劉振華， 邢雪琨. 微生物農(nóng)藥助劑研究進(jìn)展［J］. 基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)， 2016， 35（8）： 21092113.

［32］彭國(guó)雄， 謝佳沁， 夏玉先. 金龜子綠僵菌CQMa421與殺蟲劑、殺菌劑的兼容性［J］. 中國(guó)生物防治學(xué)報(bào)， 2017， 33（6）： 747751.

（責(zé)任編輯：楊明麗）