不同生物藥劑對(duì)辣椒主要病原菌的抑菌效果研究

摘要：為篩選可兼防辣椒疫病、根腐病及枯萎病的高效生物殺菌劑，采用室內(nèi)抑菌試驗(yàn)，測(cè)定哈茨木霉、枯草芽孢桿菌、熒光假單胞桿菌及醫(yī)植酵素等4種生物殺菌劑和化學(xué)藥劑多菌靈分別在高、中、低3種濃度下對(duì)辣椒疫病、根腐病與枯萎病病原菌的抑制效果。結(jié)果表明，熒光假單胞桿菌與哈茨木霉可兼防辣椒疫病、根腐病及枯萎病；在藥劑推薦濃度下，熒光假單胞桿菌對(duì)辣椒疫病、根腐病、枯萎病抑菌率分別為83.11%、89.81%、78.80%，哈茨木霉分別為88.39%、74.63%、89.68%，這兩種藥劑可作為推薦用藥。

關(guān)鍵詞：辣椒；疫?。桓?；枯萎??；病原菌；生物防治

中圖分類號(hào)：S641.3 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：2097-2172（2024）08-0769-05

doi：10.3969/j.issn.2097-2172.2024.08.013

Study on Bacteriostatic Effect of Different Biological Agents on Major Pathogenic Bacteria in Capsicum

WANG Meili， ZHENG Rong， ZHAO Juan， ZHANG Fuping

（Jiuquan Academy of Agricultural Sciences， Jiuquan Gansu 735000， China）

Abstract： In order to screen effective biocides that can also prevent phytophthora blight， root rot and fusarium wilt in capsicum， the inhibitory effects of Trichoderma harzianum， Bacillus subtilis， Pseudomonas fluorescens， Phytophthora enzymes and the chemical agent Carbendazim on phytophthora blight， root rot and fusarium wilt of capsicum were measured at high， medium and low concentrations in laboratory. The results showed that Pseudomonas fluorescens and Trichoderma harzianum could simultaneously prevent phytophthora blight， root rot and fusarium wilt of capsicum. With the decrease of concentration， the bacteriostatic effect of 5 tested agents showed a decreasing trend. At the recommended concentrations， the inhibitory rates of Pseudomonas fluorescens against phytophthora blight， root rot disease and fusarium wilt were 83.11%， 89.81% and 78.80%， respectively whereas those in Trichoderma harziana were 88.39%， 74.63% and 89.68%， respectively. These two agents can be used as recommended drugs.

Key words： Pepper; Phytophthora blight; Root rot; Wilt disease; Pathogen; Biological control

酒泉市位于河西走廊西端，屬溫帶大陸性氣候，晝夜溫差大，光照足，年降水量低，是甘肅省重要的蔬菜生產(chǎn)基地［1 ］。近年來，酒泉市著力發(fā)展蔬菜產(chǎn)業(yè)集群，尤其重視制干辣椒這一支柱產(chǎn)業(yè)，已形成以肅州區(qū)、金塔縣、瓜州縣為主的制干辣椒產(chǎn)區(qū)，種植面積6 700 hm2以上，干椒產(chǎn)量4.8萬t以上［2 - 3 ］。隨著辣椒種植面積的擴(kuò)大和高密度種植模式的應(yīng)用，在提高土地利用效率的同時(shí)，也加劇了疫病、根腐病和枯萎病等土傳病害的發(fā)生，對(duì)辣椒產(chǎn)量和品質(zhì)構(gòu)成了重大威脅［4 - 5 ］?；瘜W(xué)方式是遏制病害發(fā)生的有效措施，但化學(xué)藥劑的過度使用造成了一系列食品安全和生態(tài)環(huán)境問題［6 - 7 ］。生物殺菌劑是一種利用生物源微生物抑制有害致病菌的制劑，具有無毒、無害、無污染等優(yōu)點(diǎn)［8 - 9 ］。研究發(fā)現(xiàn)，哈茨木霉復(fù)合菌、枯草芽孢桿菌等微生物菌劑能提高辣椒的長(zhǎng)勢(shì)、抗病性及產(chǎn)量等［10 ］。因此，篩選可兼防辣椒疫病、根腐病和枯萎病的生物殺菌劑既可節(jié)約生產(chǎn)成本，又能減少對(duì)生態(tài)環(huán)境的污染。我們以4種生物藥劑和1種化學(xué)殺菌劑進(jìn)行室內(nèi)藥效測(cè)定，以篩選出可兼防辣椒疫病、根腐病及枯萎病的高效生物殺菌劑，為辣椒主要病原菌的防治提供技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試?yán)苯芬卟。ㄒ呙咕鶳hytophthora capsici）、根腐?。ǜょ牭毒鶩usarium solani）及枯萎?。怄哏牭毒鶩usarium oxysporum）病原菌均來自甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所。供試生物藥劑選用哈茨木霉、枯草芽孢桿菌、熒光假單胞桿菌及醫(yī)植酵素，化學(xué)藥劑選用多菌靈，具體參數(shù)見表1。

1.2 供試培養(yǎng)基

馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（上海博微生物科技有限公司）用于辣椒根腐病和枯萎病病原菌的培養(yǎng)，黑麥培養(yǎng)基（44 g黑麥粉+0.4 g碳酸鈣+100 mL番茄汁+17 g瓊脂）用于辣椒疫病病原菌的培養(yǎng)。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

本試驗(yàn)于2022年5月在酒泉市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院測(cè)試中心進(jìn)行，5種藥劑各設(shè)低（Nd）、中（Nz，市場(chǎng)最大推薦濃度）、高（Ng）3種濃度（表2），以無菌水為對(duì)照。

1.4 試驗(yàn)方法

采用菌絲生長(zhǎng)速率法［11 ］，測(cè)定5種供試藥劑對(duì)辣椒疫病、根腐病和枯萎病病原菌的抑菌率。將培養(yǎng)基滅菌冷卻至45 ℃后倒入培養(yǎng)皿中，待培養(yǎng)基凝固后，吸取200 μL不同濃度藥液滴入平板表面并涂抹均勻，室溫靜置1 h，以滴加無菌水為對(duì)照。在供試病原菌菌落邊緣用打孔器打取菌餅（d=0.7 cm），用接種環(huán)將菌餅置于加藥處理的平板中央，每皿放置菌餅1個(gè)，3次重復(fù)。將各處理平板移入28 ℃培養(yǎng)箱中暗培養(yǎng)，5～7 d后采用十字交叉法用游標(biāo)卡尺測(cè)量菌落直徑，計(jì)算藥劑的抑菌率。

抑菌率=［（對(duì)照菌落直徑－處理菌落直徑）/（對(duì)照菌落直徑－原菌餅直徑）］×100%

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2013進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和作圖，使用SPSS 22.0與DPS軟件進(jìn)行處理分析。所有數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同藥劑對(duì)辣椒疫病病原菌的抑制效果

由表3可以看出，5種供試藥劑對(duì)辣椒疫霉菌均具有一定的抑制作用，其中哈茨木霉在不同濃度下對(duì)辣椒疫霉菌抑菌效果均最好。在Nd與Ng濃度下，哈茨木霉抑菌率分別為81.60%、92.16%，熒光假單胞桿菌的抑菌率分別為80.84%、88.39%，均極顯著高于其他3種試劑（P < 0.01）。在Nz濃度下，哈茨木霉的抑菌率為88.39%，極顯著高于其他4種藥劑（P < 0.01）；熒光假單胞桿菌的抑菌率為83.11%，極顯著高于醫(yī)植酵素、枯草芽孢桿菌、多菌靈（P < 0.01）。

由圖1可以看出，哈茨木霉、枯草芽孢桿菌、熒光假單胞桿菌與醫(yī)植酵素的抑菌率隨著濃度的增加均呈上升趨勢(shì)。其中，哈茨木霉Ng和Nz濃度下抑菌率差異顯著，均極顯著高于Nd濃度（P<0.01）；枯草芽孢桿菌在Ng濃度下抑菌率顯著高于Nz濃度（P<0.05），極顯著高于Nd濃度（P < 0.01）；熒光假單胞桿菌在Ng濃度下抑菌率顯著高于Nd濃度（P < 0.05）；醫(yī)植酵素在Ng和Nz濃度下抑菌率顯著高于Nd濃度（P < 0.05），多菌靈各濃度間抑菌率差異不顯著。

可見哈茨木霉對(duì)辣椒疫病病原菌的抑菌效果最好，熒光假單胞桿菌次之，醫(yī)植酵素、枯草芽孢桿菌和多菌靈對(duì)該病菌的抑菌效果較低。

2.2 不同藥劑對(duì)辣椒根腐病病原菌的抑制效果

由表4可以看出，5種供試藥劑對(duì)辣椒腐皮鐮刀菌均具有一定的抑制作用。在Nd與Nz濃度下，多菌靈的抑菌率達(dá)100%，極顯著高于其他4種藥劑（P < 0.01）；枯草芽孢桿菌在Nd與Nz濃度下的抑菌率分別為72.59%、84.63%，熒光假單胞桿菌的抑菌率分別為77.41%、89.81%，均極顯著高于哈茨木霉、醫(yī)植酵素（P < 0.01）。在Ng濃度下，多菌靈的抑菌率為100%，顯著高于熒光假單胞桿菌的抑菌率94.44%（P < 0.05），極顯著高于其他藥劑（P < 0.05）；熒光假單胞菌與枯草芽孢桿菌差異顯著（P < 0.05），并極顯著高于哈茨木霉和醫(yī)植酵素（P < 0.01）；枯草芽孢桿菌與哈茨木霉之間差異不顯著，均極顯著高于醫(yī)植酵素（P < 0.01）。哈茨木霉在Nz濃度下抑菌率為74.63%，極顯著高于醫(yī)植酵素（P < 0.01）。在3種濃度下，醫(yī)植酵素的抑菌率均極顯著低于其他4種藥劑（P < 0.01）。

從圖2可知，隨著試劑哈茨木霉、枯草芽孢桿菌、熒光假單胞桿菌與醫(yī)植酵素濃度的增加，對(duì)辣椒根腐病病原菌的抑菌率呈增加趨勢(shì)。其中，哈茨木霉和熒光假單胞桿菌在Ng和Nz濃度下抑菌率極顯著高于Nd濃度（P < 0.01）；枯草芽孢桿菌和醫(yī)植酵素在Ng濃度下抑菌率極顯著高于Nd濃度（P < 0.01），Nz濃度下抑菌率顯著高于Nd濃度（P < 0.05）；多菌靈各濃度間抑菌率差異不顯著。

綜上，多菌靈對(duì)辣椒根腐病病原菌的抑菌效果最好，熒光假單胞桿菌次之，醫(yī)植酵素對(duì)該病菌的抑菌效果最低。

2.3 不同藥劑對(duì)辣椒枯萎病病原菌的抑制效果

由表5可以看出，5種供試藥劑對(duì)辣椒尖孢鐮刀菌均具有一定的抑制作用。在Nd濃度下，多菌靈的抑菌率為81.61%，極顯著高于其他4種藥劑（P < 0.01）；哈茨木霉、熒光假單胞桿菌的抑菌率分別為71.86%、71.48%，均極顯著高于枯草芽孢桿菌、醫(yī)植酵素（P < 0.01）。在Nz、Ng濃度下，多菌靈的抑菌率分別為90.24%、92.50%，哈茨木霉的抑菌率分別為89.68%、91.56%，均極顯著高于其他3種藥劑（P < 0.01）；熒光假單胞桿菌在Nz、Ng濃度下抑菌率分別為78.80%、82.18%，顯著地高于枯草芽孢桿菌、醫(yī)植酵素（P < 0.01）。醫(yī)植酵素在3種濃度下的抑菌率均極顯著低于其他4種藥劑（P < 0.01）。

從圖3可以看出，隨著濃度的增加，5種供試藥劑對(duì)辣椒枯萎病病原菌的抑菌率均呈增加趨勢(shì)。其中，哈茨木霉、枯草芽孢桿菌、熒光假單胞桿菌、多菌靈在Ng和Nz濃度下抑菌率均極顯著高于Nd濃度（P < 0.01）；醫(yī)植酵素在Ng、Nz、Nd濃度下抑菌率差異均達(dá)極顯著水平（P < 0.05）。

可以看出，多菌靈對(duì)辣椒枯萎病病菌的抑菌率最好，哈茨木霉次之，熒光假單胞桿菌位次第3，醫(yī)植酵素最低。

3 討論與結(jié)論

辣椒疫病、根腐病和枯萎病是辣椒生產(chǎn)中嚴(yán)重的土傳病害，可引起辣椒發(fā)育不良、凋萎、根系腐爛等，導(dǎo)致辣椒產(chǎn)量和品質(zhì)下降，嚴(yán)重時(shí)甚至?xí)鸾^收并造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失［12 ］。目前，辣椒病害主要以化學(xué)防治為主，雖然具有高效、便捷、成本低的優(yōu)點(diǎn)，但也造成了農(nóng)藥殘留、環(huán)境污染、土壤硬化、病原菌耐藥性增強(qiáng)等問題［13 ］。因此，辣椒病害的綠色生物防控具有重要意義。

研究表明，對(duì)辣椒疫病有抑制作用的生防菌主要有假單胞菌、芽孢桿菌、木霉菌、黑曲霉等；抑制根腐病的生防菌主要有枯草芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌、黃綠木霉、短綠木霉菌等；對(duì)枯萎病有抑制作用的生防菌有哈茨木霉、淡綠木霉、非致病性尖孢鐮刀菌［14 - 16 ］。劉云龍等［17 ］研究發(fā)現(xiàn)，在田間使用哈茨木霉處理土壤后，提高了辣椒根腐病的防治及其產(chǎn)量。曲春鶴［18 ］通過篩選鑒定了枯草芽孢桿菌可以顯著抑制辣椒根腐病病原菌孢子的萌發(fā)，進(jìn)而抑制其對(duì)辣椒種子的侵害。張俊慶等［19 ］對(duì)辣椒枯萎病致病菌尖孢鐮刀進(jìn)行拮抗試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)枯草芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌、海洋芽孢桿菌等6種芽孢桿菌及哈茨木霉、長(zhǎng)枝木霉2種木霉菌對(duì)該病菌具有明顯的拮抗效果。通過研究5種藥劑對(duì)辣椒疫病、根腐病與枯萎病病原菌的室內(nèi)抑菌效果，發(fā)現(xiàn)對(duì)辣椒疫病的抑菌效果由高到低為哈茨木霉、熒光假單胞桿菌、醫(yī)植酵素、枯草芽孢桿菌、多菌靈；對(duì)辣椒根腐病病菌的抑菌效果由高到低為多菌靈、熒光假單胞桿菌、枯草芽孢桿菌、哈茨木霉、醫(yī)植酵素；對(duì)辣椒枯萎病病菌的抑菌效果由高到低為多菌靈、哈茨木霉、熒光假單胞桿菌、枯草芽孢桿菌、醫(yī)植酵素。熒光假單胞桿菌與哈茨木霉可兼防辣椒疫病、根腐病及枯萎病，且抑菌效果較好。

隨著濃度的降低，5種供試藥劑對(duì)辣椒疫病、根腐病、枯萎病的抑菌效果均呈現(xiàn)減弱趨勢(shì)。在藥劑推薦濃度下，熒光假單胞桿菌對(duì)辣椒疫病、根腐病、枯萎病菌的抑菌率分別為83.11%、89.81%、78.80%，哈茨木霉對(duì)辣椒疫病、根腐病、枯萎病的抑菌率分別為88.39%、74.63%、89.68%?？紤]到藥劑成本及病害以預(yù)防為主的理念，認(rèn)為推薦使用濃度下熒光假單胞桿菌和哈茨木霉對(duì)辣椒疫病、根腐病與枯萎病防治效果最經(jīng)濟(jì)有效。

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