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    非洲豬瘟病毒感染的發(fā)病癥狀及預(yù)防措施

    2024-09-11 00:00:00高桂超
    新農(nóng)民 2024年24期

    摘要:本文主要對(duì)非洲豬瘟引起的鼻腔血性分泌物,皮膚表面的藍(lán)黑色出血點(diǎn),豬體免疫抑制和如何進(jìn)行免疫激活進(jìn)行介紹,提出相應(yīng)有效的防控措施。并以圖片為例,展現(xiàn)發(fā)病癥狀,為臨床診斷提供診斷依據(jù),還提供了免疫激活的措施,以期為廣大養(yǎng)豬戶和獸醫(yī)同仁臨床提供該病防控參考。

    關(guān)鍵詞:非洲豬瘟;鼻腔出血;;治療

    非洲豬瘟(ASF)是一種由非洲豬瘟病毒(ASFV)引起的高度傳染性和致死性的動(dòng)物傳染病,對(duì)全球生產(chǎn)大型家畜業(yè)和食品供應(yīng)造成嚴(yán)重威脅。該病最早于1921年在南非發(fā)現(xiàn),隨后逐漸擴(kuò)散到其他地區(qū),之后在亞洲地區(qū)暴發(fā),并導(dǎo)致了極大的農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)損失。雖然這種傳染性動(dòng)物大流行已有多年之久,但仍缺乏有效的治愈方法。

    1 發(fā)病癥狀

    1.1 鼻腔出血

    ASFV感染后通常會(huì)表現(xiàn)為不同程度的鼻腔出血。嚴(yán)重情況下,可能導(dǎo)致口鼻部積液、呼吸困難甚至死亡。實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果顯示,在ASFV感染初期(3~5 d),小鼠被感染后即可觀察到明顯的局限性出血,而在7~10 d時(shí)則有廣泛性出血。筆者曾長(zhǎng)期從事病死動(dòng)物無(wú)害化收集點(diǎn)病死動(dòng)物收集入庫(kù)工作,疫病流行時(shí)發(fā)現(xiàn)80%的病死豬有鼻腔流出血或血樣液體,一部分死豬皮膚有藍(lán)黑色豆粒大至雞蛋大的斑痕。病毒感染后,病毒在鼻腔和鼻竇上皮細(xì)胞內(nèi)繁殖,引起上皮黏膜卡他性、漿液性、黏液性、出血性炎癥[1]。鼻液中紅細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、淋巴液,混合不斷流出,以死后更為顯著(圖1)。滲出性素質(zhì)不僅在呼吸道黏膜,也出現(xiàn)在心包膜和腹膜。表現(xiàn)為積液,積液鏡檢能發(fā)現(xiàn)大量紅細(xì)胞。鼻腔流血是心、肝、脾、肺、腎、腸道、表皮系統(tǒng),各種器官黏膜,包括病理機(jī)制的外在表現(xiàn)。此外,在實(shí)驗(yàn)?zāi)P椭幸材苡^察到類(lèi)似于黃色水泡形成于內(nèi)耳道處。

    1.2 皮膚損傷

    ASFV還可以引起不同程度的皮膚損害,主要是藍(lán)黑色出血點(diǎn)(圖2)。在實(shí)驗(yàn)室內(nèi),病毒試驗(yàn)可以出現(xiàn)紅斑、水皰和壞死等多種類(lèi)型。其中靜脈出血是最常見(jiàn)也是最具代表性的表示,常位于背廓、腹部或四肢等處,并具有強(qiáng)大控制力不形成外部出血。皮膚表面的藍(lán)黑色出血系病毒入侵血管末梢,引起靜脈血管血壓增大,回流變慢,靜脈血滲出皮下組織中,呈現(xiàn)藍(lán)黑色出血點(diǎn)或斑塊。ASFV引起的非洲豬瘟是一種出血性、致死性、高度接觸性傳染病。ASFV是一種大型、復(fù)雜的核質(zhì)雙鏈DNA病毒。病毒基因組長(zhǎng)

    170~194 kb,編碼160多種病毒蛋白。由于對(duì)病毒基因組復(fù)制機(jī)制知之甚少,嚴(yán)重制約了抗病毒策略的研發(fā)。在前期研究中發(fā)現(xiàn),pE301R可拮抗cGAS-STING介導(dǎo)的干擾素信號(hào)通路。然而,在構(gòu)建該基因缺失的突變體病毒過(guò)程中,發(fā)現(xiàn)E301R在基因組中不可缺失。據(jù)此推測(cè),E301R是病毒結(jié)構(gòu)復(fù)制的必需基因,在病毒復(fù)制周期中發(fā)揮關(guān)鍵作用。

    為了探究pE301R的結(jié)構(gòu)及其在病毒復(fù)制過(guò)程中的具體功能,作者應(yīng)用X射線晶體衍射技術(shù)解析了pE301R高分辨率的晶體結(jié)構(gòu),發(fā)現(xiàn)它在整體結(jié)構(gòu)上與真核生物和古細(xì)菌的滑動(dòng)夾蛋白具有較高的相似性。進(jìn)一步的結(jié)構(gòu)分析發(fā)現(xiàn)pE301R可以組裝成頭尾相連的環(huán)形的四聚體結(jié)構(gòu),并利用分析型超速離心技術(shù)證實(shí)了四聚體的存在。pE301R的這種四元環(huán)與已知的二聚體或三聚體滑動(dòng)夾或真核細(xì)胞的PCNA(即增殖的細(xì)胞核抗原)的結(jié)構(gòu)不同,是一種新型滑動(dòng)夾樣結(jié)構(gòu)?;瑒?dòng)夾和PCNA作為DNA聚合酶的輔助因子,與基因組和DNA聚合酶相結(jié)合,參與DNA聚合酶的持續(xù)合成。為了探究pE301R是否發(fā)揮滑動(dòng)夾或PCNA樣功能,作者進(jìn)一步應(yīng)用染色質(zhì)免疫沉淀試驗(yàn)和免疫共沉淀試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),pE301R與ASFV基因組以及O174L蛋白(DNA聚合酶X)存在相互作用。分別在細(xì)胞和病毒層面進(jìn)行了基因替換或回補(bǔ)試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)pE301R在病毒復(fù)制過(guò)程中發(fā)揮了滑動(dòng)夾或PCNA樣作用,而PCNA的特異性抑制劑T2AA能夠抑制ASFV的基因組復(fù)制。這一機(jī)制對(duì)于皮膚、內(nèi)臟黏膜細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞及免疫系統(tǒng)破壞尤其嚴(yán)重。

    2 預(yù)防措施

    目前尚無(wú)針對(duì)ASF的有效治愈方法,且預(yù)防的藥效都較弱。因此需要通過(guò)提高ASF預(yù)防意識(shí)并加強(qiáng)動(dòng)物檢驗(yàn)等手段來(lái)避免該疾病再次暴發(fā)。

    2.1 免疫學(xué)方法

    2.1.1 免疫抑制

    非洲豬瘟病毒能逃逸豬的免疫系統(tǒng),造成豬嚴(yán)重免疫抑制。ASFV逃避豬的免疫系統(tǒng)的主要方式是感染單核-巨噬細(xì)胞。單核-巨噬細(xì)胞在吞噬、殺滅和清除病原的過(guò)程中起核心作用,但豬受到ASFV感染時(shí),單核-巨噬細(xì)胞反而成為ASFV的繁殖場(chǎng)所,導(dǎo)致其功能障礙,數(shù)量減少,免疫受到抑制。非洲豬瘟病毒感染豬后,調(diào)控其對(duì)干擾素的表達(dá)。干擾素是一類(lèi)多功能細(xì)胞因子,其中INF-γ具有很強(qiáng)的免疫調(diào)節(jié)作用,而INF-α、INF-β具有廣譜抗病毒活性。非洲豬瘟有強(qiáng)毒和弱毒之分,強(qiáng)毒讓豬干擾素產(chǎn)生紊亂,非洲豬瘟強(qiáng)毒先降低干擾素-γ表達(dá),促進(jìn)ASFV在細(xì)胞內(nèi)繁殖,而后干擾素-γ表達(dá)雖略有上升,但此時(shí)已無(wú)法阻止大量病毒給豬造成的致命性打擊。

    除此之外,強(qiáng)、弱毒株感染豬后對(duì)細(xì)胞因子的調(diào)控是截然相反的,ASFV強(qiáng)毒前期抑制細(xì)胞因子表達(dá),而在感染后期能夠誘導(dǎo)細(xì)胞因子大量表達(dá),形成細(xì)胞因子風(fēng)暴,導(dǎo)致感染豬體內(nèi)實(shí)質(zhì)器官的損傷,造成死亡。

    細(xì)胞凋亡是機(jī)體清除不正常細(xì)胞維持自身穩(wěn)定的調(diào)控過(guò)程,病原刺激會(huì)誘發(fā)細(xì)胞凋亡,但ASFV感染巨噬細(xì)胞后能控制其凋亡過(guò)程。ASFV調(diào)控細(xì)胞凋亡的目的是讓ASFV在感染細(xì)胞中有足夠的時(shí)間增殖,順利生存下來(lái)。目前研究表明,主要有3個(gè)ASFV基因參與了對(duì)細(xì)胞凋亡的調(diào)控,除a224l、ep153r、dp71l.d這3種外,EP420R基因編碼的CD2v蛋白也是被人們所熟知的,因?yàn)樗cASFV引起的紅細(xì)胞吸附現(xiàn)象密切相關(guān)。

    感染缺失EP420R基因ASFV后,感染滴度下降,因此EP420R基因在病毒入侵機(jī)體及調(diào)控機(jī)體免疫方面起著重要作用。非洲豬瘟具有逃避宿主免疫系統(tǒng)的大量編碼基因組,一旦病毒進(jìn)入豬體內(nèi),就可以侵入宿主的單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng),通過(guò)一系列調(diào)控以利于病毒在體內(nèi)繁殖,給養(yǎng)殖帶來(lái)巨大損失。

    2.1.2 免疫激活

    對(duì)于非洲豬瘟的防控,做好生物安全防控遠(yuǎn)離病毒是首要的,但絕不能忽視豬群自身的免疫力,因?yàn)樗堑挚狗侵挢i瘟弱毒株減少損失的有力武器,也是抵抗豬場(chǎng)其他病原體的法寶?,F(xiàn)在國(guó)際上都尚無(wú)有效疫苗和藥物控制,而且國(guó)家禁抗的政策執(zhí)行等原因,定期添加提高豬群抵抗力的無(wú)抗飼料添加劑,成為目前減少非瘟病毒發(fā)生的最有效措施,其中養(yǎng)殖戶使用最多的就是黃芪多糖。

    黃芪多糖抗非瘟病毒的原理:刺激巨噬細(xì)胞和T細(xì)胞的功能,誘生細(xì)胞因子,促進(jìn)白細(xì)胞介素誘生,而使動(dòng)物機(jī)體產(chǎn)生內(nèi)源性干擾素,從而達(dá)到抗病毒的目的,黃芪多糖作為免疫增強(qiáng)劑和抗病毒藥物應(yīng)用于養(yǎng)豬生產(chǎn)中,有效地提高了豬群的抗病能力和生產(chǎn)性能。

    黃芪多糖本身具有清熱解毒、扶正祛邪、激活機(jī)體器官免疫功能、促進(jìn)抗體生成、提高機(jī)體抵抗力的作用、在治療病毒病時(shí)使用黃芪多糖能明顯提高豬群的采食量、促進(jìn)機(jī)體恢復(fù)、減少發(fā)病率、提高豬群的健康水平。黃芪多糖可以有效地抵抗非洲豬瘟病毒。

    當(dāng)前主要采取預(yù)防非洲豬瘟病毒主要接種方式以達(dá)到保持ASF不暴發(fā)的目標(biāo),例如采用候選滅活苗免疫保護(hù),同時(shí)利用基因組數(shù)據(jù)指導(dǎo)設(shè)計(jì)更好地“馬賽克”化毒株,并開(kāi)展相關(guān)臨床試驗(yàn)。

    2.2 藥物檢測(cè)技術(shù)

    開(kāi)發(fā)新一代分子生物學(xué)技術(shù),如PCR和ELISA或POC(RPA)等技術(shù)能夠提高ASF快速篩查精確度。

    2.3 增加養(yǎng)豬場(chǎng)的安全性

    隨著時(shí)間生豬對(duì)非洲豬瘟病毒的生抗性;選擇有效消毒藥物經(jīng)常消豬場(chǎng),和在飼料中投喂激活免疫的中草藥,能夠大幅度增加養(yǎng)豬場(chǎng)的安全性,這也相對(duì)地增加了對(duì)豬體內(nèi)或豬肉中的免疫增強(qiáng)劑的檢測(cè)的必要性;研究其安全范圍,造福全社會(huì)。

    3 結(jié)論

    總體而言,非洲豬瘟入侵了許多國(guó)家和地區(qū),對(duì)這些國(guó)家和地區(qū)的養(yǎng)豬業(yè)造成巨大損失,需要開(kāi)展相關(guān)預(yù)防和凈化工作以減少病例發(fā)生。同時(shí)開(kāi)展相關(guān)問(wèn)題的研究,可以采取以下措施預(yù)防非洲豬瘟疾病的傳播:(1)加強(qiáng)中草藥對(duì)慢性非洲豬瘟病毒的免疫抑制的免疫激活研究;(2)加快適應(yīng)本地區(qū)毒株滅活疫苗研制推廣預(yù)防接種方案;(3)開(kāi)展藥品檢測(cè)技術(shù)升級(jí);(4)隨著時(shí)間生豬對(duì)非洲豬瘟病毒出現(xiàn)抗性的研究;(5)加強(qiáng)生物工程研究;通過(guò)以上措施可以更好地保證國(guó)家農(nóng)業(yè)安全穩(wěn)定運(yùn)行,并在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域能給予廣泛?jiǎn)⑹九c建議,研究發(fā)現(xiàn)非洲豬瘟病毒抑制的新機(jī)制。

    參考文獻(xiàn)

    [1] 何慶玲,邱良偉,栗耀文,等.非洲豬瘟的癥狀及防控措施[J].畜牧獸醫(yī)科技信息,2021(8):35-36.

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